Возбудитель клещевого энцефалита: Клещевой энцефалит — Областная детская больница

Разное

Содержание

Клещевой энцефалит — Областная детская больница

Клещевой энцефалит — вирусное заболевание, поражающее головной и спинной мозг. В худших случаях приводит к серьезным психиатрическим и неврологическим осложнениям. Иногда заканчивается смертью заболевшего. Энцефалит входит в число передаваемых клещами инфекций и является одним из самых опасных. В местности, неблагополучной по клещевому энцефалиту, переносчиками этой вирусной инфекции является 6% от всей популяции членистоногих. После их укуса заболевает 2-6% жертв. Теоретически шансы заболеть энцефалитом невелики, но заразившихся вирусом статистические данные вряд ли утешат.

Пути передачи вируса. Возбудитель клещевого энцефалита передается жертве в первые минуты присасывания паразита вместе со слюной. Такое заражение может произойти в местах с богатой растительностью или в доме, если членистоногое «приехало» на животном или свежесрезанных растениях. Вирус также передается при употреблении молока и молочных продуктов. В этом случае виды мероприятий, направленных на профилактику клещевого энцефалита, предусматривают обязательное кипячение молока и исключение из употребления молокопродуктов. Исключить молочные продукты из рациона придется по причине невозможности предварительной тепловой обработки исходного сырья. Укус клеща — третий способ передачи вируса: втирание его в кожу при расчесывании места укуса. Но при укусе клеща обычно уже все равно, есть расчес или нет. Вирус был внесен в кровь значительно раньше.

Признаки энцефалита.  Инкубационный период от 4 до 14 дней. Дальнейшее развитие болезни очень похоже на симптомы гриппа, из-за чего люди часто не обращают внимания на энцефалит. Лихорадку, тошноту и боль в мышцах они принимают за признаки простуды. В зависимости от разновидности клещевого энцефалита далее либо наступает ремиссия на 8 дней, либо энцефалит сразу переходит на вторую стадию развития с поражением нервной системы.

Профилактика.   Ко времени появления признаков заболевания человек уже успевает забыть об укусе клеща, поэтому меры профилактики лучше принимать сразу, не дожидаясь, разовьется энцефалит или нет. Профилактика заболевания делится на 2 вида: специфическая; неспецифическая. Специфическая профилактика включает в себя прививки и меры по предотвращению развития энцефалита, если клещ уже успел укусить. Неспецифическая профилактика клещевого энцефалита предусматривает защиту от укуса паразита: спецодежда при походе в лес; умение выбрать место для отдыха; меры по предотвращению занесения клеща в дом; систематический осмотр тела. Эти меры позволяют защититься не только от клещей, но и от гнуса, который тоже переносит опасные для человека заболевания.

Нужно соблюдать следующие правила: надевать светлую однотонную одежду; рукава длинные на манжетах; воротник рубашки и манжеты плотно прилегают к телу; рубашка заправлена в брюки; брюки заправлены в носки с плотными резинками, в крайнем случае в ботинки; на голову надевают капюшон, пришитый к куртке, или косынку; косынка должна плотно обхватывать волосы; на одежду наносят акарицидные средства или препараты, отпугивающие паразита.

Клещевой вирусный энцефалит

01.04.2019

В мире очень распространены опасные инфекции, переносимые клещами. Они связаны с поражением жизненно важных систем организма, что ведет к длительной потере трудоспособности, тяжелым осложнениям и нередко — к летальным исходам. В России одним из наиболее распространенных, тяжелых и опасных заболеваний из этой группы является клещевой энцефалит.

Почти в 70 субъектах Российской Федерации ежегодно обращаются за медицинской помощью более полумиллиона человек, пострадавших от укуса клещей.

Клещи являются переносчиками ряда болезней человека, возбудителями которых являются вирусы, бактерии и простейшие.

Из этих заболеваний около 5% составляет энцефалит – это приблизительно 2.5 тысячи человек. Летальность составляет около 1.5%.

Что такое клещевой энцефалит?

Клещевой энцефалит – самая опасная из клещевых инфекций.

Клещевой энцефалит – природно-очаговое инфекционное заболевание с поражением центральной нервной системы, вызываемое одноименным вирусом, который переносят несколько видов иксодовых клещей. Распространено данное заболевание в умеренном климатическом поясе Евразии в лесных и лесостепных ландшафтах.

Возбудитель клещевого энцефалита – вирус клещевого энцефалита – открыт отечественными учеными в 1937 году. Иксодовые клещи помимо клещевого вирусного энцефалита могут заражать человека такими болезнями как иксодовый клещевой бореллиоз (болезнь Лайма), крымской геморрагической лихорадкой и др. Таким образом, в результате присасывания одного членистоногого человек может быть инфицирован более чем одним возбудителем.

Сезонность – весенне-летняя. Максимум активности с середины апреля, когда клещи появляются после зимовки из лесной подстилки, по середину июля. Второй пик активности – в начале осени.

Основные места сосредоточения клещей — смешанный лес с высокой травой, вырубки, старые гари, увлажненные, покрытые высокой травой лесные поляны, поросшие мелким кустарником берега ручьев и рек, лесные дороги, линии электропередачи, лесопарковые зоны и дачи, а также свежесрезанные березовые веники, полевые цветы, принесенные домой.

К заражению клещевым энцефалитом восприимчивы все люди, независимо от пола и возраста. Наибольшему риску подвержены лица, деятельность которых связана с пребыванием в лесу (работники леспромхозов, геологоразведочных партий, строители автомобильных и железных дорог, нефте- и газопроводов, линий электропередач, охотники, туристы).

Как происходит заражение вирусом клещевого энцефалита?

Заражение происходит большей частью при присасывании к телу человека инфицированного клеща. Вирус проникает в кровь человека в первые минуты присасывания зараженного вирусом клеща вместе с обезболивающей слюной, и при длительном питании клеща инфицирующая доза существенно возрастает. Заражение может произойти при втирании в кожу вируса при раздавливании клеща или расчесывании места укуса.

Также заражение может произойти при употреблении сырого молока коз, инфицированных вирусом клещевого энцефалита.

Клиническая картина заболевания.

Человеку необходимо знать, какие клинические признаки проявляются после укуса клеща.

Инкубационный период длится от 1 до 30 дней, в среднем — 7-14 дней. Характерно острое начало: повышение температуры тела до 38-39оС, озноб, сильные головные боли, тошнота, рвота, боли в области шеи, спины, конечностей. При развитии заболевания происходит поражение нервной системы человека. Иногда заболевание может приобрести хроническое течение. Осложнения заболевания могут обратиться параличом или летальным исходом.

Чем раньше диагностировано заболевание и чем раньше начато лечение, тем быстрее выздоровление.

Профилактика клещевого вирусного энцефалита.

На первом месте в вопросе профилактики заболеваний, передающихся при укусе клещами, стоит индивидуальная защита:

  • Перед походом в лес необходимо правильно одеться. Желательно в светлую одежду с длинными рукавами, плотными манжетами, брюки заправить в обувь. На голову предпочтительно надевать капюшон, волосы заправить под шапку (косынку).
  • Обрабатывайте одежду акарицидными или репеллентными препаратами
  • Не следует садиться или ложиться на траву
  • Не заносить в помещение свежесорванные растения, верхнюю одежду и другие предметы, на которых могут оказаться клещи.
  • Осматривайте себя и близких через каждые 15-30 минут
  • Сразу после возвращения из леса необходимо тщательно осмотреть свое тело и одежду.
  • Осмотреть собак и других животных после прогулки. В случае обнаружения клеща – удалить его с тела животного.
В лесу:
  • Нельзя садиться или ложиться на траву.
  • Стоянки и ночевки стоит устраивать на местах, лишенных травяной растительности или в сухих сосновых лесах на песчаных почвах.
  • Регулярно осматривайте одежду, тело и волосы.
Вакцинация — самая надежная защита против клещевого энцефалита. Профилактические прививки против клещевого энцефалита проводятся лицам отдельных профессий, работающим в эндемичных очагах или выезжающих в них (командированные, туристы, лица, выезжающие на отдых, на садово-огородные участки). Вакцинироваться против клещевого энцефалита можно круглый год, но планировать вакцинацию нужно таким образом, чтобы с момента второй прививки прошло не менее 2 недель до возможной встречи с клещом. Если вы только планируете начать вакцинацию, то для достижения иммунитета вам потребуется минимум 21-28 дней — при экстренной схеме вакцинации, при стандартной — минимум 45 дней.

Экстренная профилактика клещевого энцефалита – введение противоэнцефалитного иммуноглобулина, нейтрализующего вирус клещевого энцефалита. Введение иммуноглобулина показано пациентам, пострадавшим от укусов клещей. Введение человеческого иммуноглобулина против клещевого энцефалита проводится в течение 96 часов после присасывания клещей.

Прививку от клещевого энцефалита можно сделать в прививочных пунктах на базах поликлиник, медсанчастей после консультаций врача.

Если вы обнаружили присосавшегося клеща у себя на теле.

Во-первых, присосавшегося клеща необходимо как можно скорее удалить. Затягивать с этим нельзя, чем дольше клещ пьет кровь, тем больше инфекции попадает в организм. Для этого рекомендуется завязать нитку между клещом и кожей, и плавным движением «вывинтить» клеща из кожи.

Маслом мазать клеща не рекомендуется. Вопреки известному мифу – он еще долго не задохнется, а передать большое количество возбудителей у него будет шанс.

Сдавливать клеща пинцетом также не рекомендуется. Сдавливая тело клеща, мы способствуем еще большему притоку слюны и, тем самым, увеличивается число введенных в ранку возбудителей. При использовании пинцета, можно случайно раздавить клеща, тогда его содержимое также попадет в ранку.

Если при удалении клеща оторвалась головка, ее необходимо обязательно удалить. Для этого место присасывания клеща протирают ватой, смоченной в спирте, а затем удаляют из под кожи остатки клеща стерильной иглой, также как вы удаляете, например, занозу.

По вопросам удаления клеща лучше всего обратиться в травматологический пункт.

Категорически запрещено удалять клещей с животных руками, особенно при наличии порезов и трещин.

Сохраните клеща для проведения исследования.

Клеща необходимо сохранить в максимально неповрежденном состоянии. Если клещ живой – поместите его в герметично закрывающуюся емкость с несколькими травинками и смоченным водой куском ваты. Если клещ мертвый, также положите его в емкость и закройте ее. Образец необходимо доставить в лабораторию как можно скорее. Доставка и хранение клещей возможна только в течение 2-х суток.

Снятого клеща необходимо доставить на исследование в микробиологическую лабораторию «ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах РФ или иные лаборатории, проводящие такие исследования.

Если результат анализа клеща показывает, что в клеще присутствует возбудитель инфекции необходимо обратиться к врачу – инфекционисту. Он назначает экстренную серопрофилактику – введение иммуноглобулина человека против клещевого энцефалита (не позднее четвертого дня после присасывания клеща). В течение нескольких месяцев необходимо следить за состоянием своего здоровья. При первых симптомах заболевания – обратиться к врачу.

Самый надежный способ определить наличие заболевания – сдать анализ крови. Но делать это стоит не ранее 10 дня после укуса.

Укусил клещ – отнесите его на анализ! Даже если укусивший вас клещ был заражен, всегда есть возможность принять меры, которые не дадут болезни развиться.





Клещевой энцефалит

Клещевой энцефалит (КЭ) — вирусная природно-очаговая инфекция, передающаяся клещами, протекающая слихорадкой, интоксикацией, поражением нервной системы, принимающая иногда хроническое течение.

Этиология -Клещевой энцефалит. Возбудителем Клещевого энцефалита является представителем экологической группы арбовирусов и относится к роду флавивирусов семейства тогавирусов. Это РНК-содержащий вирус, способный выживать в организме клещей при низких температурах. Он нестоек к высоким температурам (при кипячении погибает через 2-3 мин) и к дезинфицирующим средствам.

Эпидемиология -Клещевой энцефалит. Клещевой энцефалит-трансмиссивная инфекция с природной очаговостью. Основным резервуаром и источником вируса в природе являются иксодовые клещи: Ixodes persulcatus, распространенные в восточных регионах страны, и Ixodes ricinus — в западных. Клещи проходят несколько стадий развития — яйцо, личинка, нимфа, имаго (взрослый клещ). Для того, чтобы происходило превращение клеща из одной стадии в другую, необходима кровь теплокровных животных. Начиная со стадии личинки, клещи активно ищут себе прокормителя, как правило, это мелкие лесные животные (зайцы, мыши и др.), птицы.

Однако клещи могут нападать и на крупных животных, в том числе домашний скот (козы, овцы, коровы). Во время кровососания клещ инокулирует вирус животным, вследствие чего развивается вирусемия и они становятся дополнительными резервуарами инфекции. Таким образом, происходит циркуляция вируса: клещ — животное — клещ. Клещи могут передавать вирус потомству. Заражение человека происходит трансмиссивным путем через укусы клеща. Возможна алиментарная передача инфекции при употреблении в пищу сырого молока коз и коров.

Заболеваемость Клещевой энцефалит имеет сезонный характер, соответствующий активности клещей. Максимальный ее подъем наблюдается в мае- июне. Второй, менее выраженный подъем заболеваемости, регистрируется в конце лета — начале осени.

Патогенез -Клещевой энцефалит. Возбудитель при укусе клеща внедряется в организм человека через кожу, репродуцируется в месте внедрения и проникает в кровь. Гематогенно и лимфогенно он попадает в различные внутренние органы, в том числе и в центральную нервную систему, вызывая поражение двигательных нейронов спинного и ствола головного мозга или развитие диффузного менингоэнцефалита.

При алиментарном заражении патологический процесс носит двухфазный характер. Первая фаза характеризуется начальной вирусемией и последующей репликацией вируса в клетках печени, селезенки и других органов. Вторая фаза включает вторичную вирусемию и поражение ЦНС. В клинике этому соответствует течение двухволнового менингоэнцефалита.

В процессе болезни формируется иммунитет, и вирус удаляется из организма человека. У некоторых людей вирус сохраняется в нервной системе в течение всей жизни, обусловливая хронические формы болезни.

Клиника -Клещевой энцефалит. Инкубационный период имеет продолжительность от 1 до 30 дней (чаще 7-14 дней). В подавляющем большинстве случаев у лиц, подвергшихся укусам вирусофорных клещей, развивается инаппарантная форма КЭ и лишь у 2% — клинически выраженная. Клещевой энцефалит начинается внезапно с лихорадки, интоксикации. Температура тел а быстро повышается до 38-39 «С. Больных беспокоят сильная головная боль, слабость, тошнота, иногда рвота, нарушается сон.

Характерен внешний вид больного — кожа лица, шеи, верхней половины грудной клетки, конъюнктивы гиперемированы, склеры инъецированы. Заболевание может завершиться в 3-5 дней. Такая форма болезни называется лихорадочной, является одной из самых частых, но редко диагностируется. Поражение нервной системы при этой форме отсутствует. При прогрессировании болезни с 3-5-го дня развиваются признаки поражения нервной системы. В зависимости от локализации поражения различают следующие формы клещевого энцефалита: менингеальную, менингоэнцефалитическую, полиомиелитическую, пол и радикулоневритическую.

Менинзеальная форма Клещевого энцефалита характеризуется общемозговым синдромом, появлением ригидности мышц затылка, симптомов Кернига, Брудзинского. Изменения цереброспинальной жидкости свидетельствуют о серозном менингите. Заболевание имеет благоприятное течение. Лихорадка длится 10-14 дней, санация ликвора несколько отстает от клинического выздоровления.

Менинзоэнцефалитическая форма протекает значительно тяжелее. Больные становятся вялыми, заторможенными, сонливыми. Усиливаются головная боль, тошнота, рвота. Нередко наблюдаются бред, галлюцинации, психомоторное возбуждение, нарушение сознания. У некоторых больных могут быть судороги, эпилептиформные припадки. Поражаются нервы, иннервирующие лицевую, глазодвигательную мускулатуру, и другие черепные нервы. Могут развиваться нарушения глотания, дыхания. Типичной для клещевого энцефалита является полиомиелитическая форма, проявляющаяся парезами и параличами верхних конечностей и шейно-плечевой мускулатуры. В конце 2-3-й недели возникает атрофия пораженных мышц. Парезы и параличи нижних конечностей встречаются редко.

Полирадикулоневритическая форма протекает с поражением периферических нервов и корешков, с болями по ходу нервных стволов, нарушением чувствительности.

Двухволновый менинзоэнцефалит (двухволновая молочная лихорадка). Первая лихорадочная волна продолжается 3-7 дней, затем период благополучия 7-14 дней и новое повышение температуры тела, сопровождающееся нарастающей интоксикацией, менингеальными и общемозговыми симптомами.

Прозредиентные формы возникают в случаях, когда вирус сохраняется в центральной нервной системе. Инфекционный процесс не завершается и переходит в хроническое течение сразу после острого периода болезни или после длительного латентного периода. Клинически такая форма проявляется чаще эпилептиформными припадками, гипер кинетическими судорогами.

Диагностика -Клещевой энцефалит. Диагноз основывается на эпидемиологических и клинических признаках и подтверждается результатами серологического исследования. РСК, РПГА, РН проводят с парными сыворотками, диагностическим является нарастание титра антител в 4 раза и более. Антитела к вирусу КЭ появляются поздно, поэтому для повторного исследования кровь берут через 3-4 нед, а иногда через 2-3 мес от начала болезни.

Используют ИФА, который позволяет обнаружить антитела к вирусу Клещевого энцефалита в более ранние сроки.

Лечение -Клещевой энцефалит. Больные клещевым энцефалитом с признаками поражения центральной нервной системы нуждаются в тщательном уходе и наблюдении. Проводят профилактику пролежней, следят за мочеиспусканием и дефекацией. Выявляют начальные симптомы расстройства дыхания. В течение первых Здней лечения ежедневно вводят по 6-9 мл донорского иммуноглобулина против клещевого энцефалита.

Используют противовирусные средства — препараты интерферона, рибонуклеазу и другие. Назначают дезинтоксикационную и дегидратационную терапию. При возбуждении, эпилептических припадках используют аминазин, димедрол, фенобарбитал. бензонал. При полиомиелитической форме рано начинают восстановительную терапию. Выздоровление происходит медленно. Все переболевшие клещевым энцефалитом с поражением нервной системы состоят на диспансерном учете у невропатолога.

Профилактика -Клещевой энцефалит. Необходимо соблюдать индивидуальные меры защиты от клещей во время пребывания в лесу, на садовых участках, расположенных вблизи лесных массивов. После их посещения следует проводить само- и взаимоосмотры. Козье и коровье молоко в очагах клещевого энцефалита должно кипятиться. Обнаруженный клещ должен быть немедленно удален в асептических условиях, возможно исследование клеща на наличие в нем антигена вируса Клещевого энцефалита.

Экстренная профилактика проводится иммуноглобулином против клещевого энцефалита. При титре антител в препарате 1:80 и выше иммуноглобулин вводят внутримышечно однократно детям до 12 лет — 1 мл, от 12 до 16 лет- 2 мл и от 16 лет и старше — 3 мл. Лица, отправляющиеся на работу в природные очаги клещевого энцефалита, подвергаются вакцинации.


Возбудители клещевых инфекций (вирус клещевого энцефалита, возбудители клещевых боррелиозов, гранулоцитарного анаплазмоза, моноцитарного эрлихиоза, определение ДНК/РНК в клеще

Группа иксодовых клещевых инфекций, возбудители которых передаются клещами рода Ixodes, включает в себя клещевой энцефалит (вирус клещевого энцефалита), иксодовые клещевые боррелиозы (Borrelia burgdorferi sensu lato), гранулоцитарный анаплазмоз человека (Anaplasma phagocytophilum), моноцитарный эрлихиоз человека (Ehrlihia chaffeensis, Ehrlihia muris) и др. Сезон активности иксодовых клещей начинается в последней декаде апреля и продолжается в средней полосе России до октября, а в Приморье – до ноября. Исследование позволяет экстренно провести диагностику наличия опасных возбудителей в клеще и при получении положительного результата обратиться в специализированные учреждения.

Клещевой энцефалит. Возбудитель — Tick-borne encephalitis Virus, TBEV. Около 70% всех случаев клещевого энцефалита в РФ приходится на Урал и Сибирь. В преобладающей части случаев клещевой энцефалит протекает в инаппарантной форме, в остальных случаях развиваются различные по степени тяжести варианты течения заболевания: лихорадка, вирусные менингит и энцефалит. В большинстве случаев после очаговой энцефалитической формы развиваются стойкие нарушения деятельности ЦНС.

Лайм-боррелиоз, болезнь Лайма или иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) – трансмиссивное полисистемное заболевание, приводящее к поражению опорно-двигательного аппарата, нервной и сердечно-сосудистой систем, кожи. Занимает по широте распространения и уровню заболеваемости одно из ведущих мест среди природно-очаговых заболеваний. В группу иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) входят заболевания, вызываемые в большинстве случаев тремя представителями комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato: B.burgdorferi, B.garinii и B.afzelii. В результате попадания боррелий в кожу у больных отмечается местное кожное воспаление – клещевая мигрирующая эритема. Но почти у 50% пациентов эритема отсутствует в начале заболевания, это так называемая безэритемная форма.

Гранулоцитарный анаплазмоз человека относится к острым лихорадочным заболеваниям. Возбудителем заболевания является Anaplasma phagocytophillum. Размножение анаплазм в нейтрофилах приводит к ослаблению иммунных защитных реакций организма. Для данного заболевания характерно острое начало с высокой лихорадкой, слабостью, головной и мышечными болями.

Моноцитарный эрлихиоз человека вызывается микроорганизмами рода Ehrlichia: E.chaffeensis, E.muris. Эрлихии поражают кожу, печень, ЦНС (центральную нервную систему) и костный мозг, образуя в этих органах инфекционные гранулемы. Клинически выраженное заболевание чаще регистрируется у детей и в группе пациентов старше 40 лет. Для моноцитарного эрлихиоза человека характерно развитие выраженного общеинтоксикационного синдрома в острый период заболевания: высокая лихорадка, сопровождающаяся ознобом, головной и мышечной болью, артралгиями, абдоминальной болью.

Клещевой энцефалит — Кабинет инфекционных заболеваний — Отделения

Клещевой энцефалит (КЭ) — вирусная природно-очаговая инфекция, передающаяся клещами, протекающая слихорадкой, интоксикацией, поражением нервной системы, принимающая иногда хроническое течение.

Этиология. Возбудитель КЭ является представителем экологической группы арбовирусов и относится к роду флавивирусов семейства тогавирусов. Это РНК-содержащий вирус, способный выживать в организме клещей при низких температурах. Он нестоек к высоким температурам (при кипячении погибает через 2-3 мин) и к дезинфицирующим средствам.
Эпидемиология. Клещевой энцефалит-трансмиссивная инфекция с природной очаговостью. Основным резервуаром и источником вируса в природе являются иксодовые клещи: Ixodes persulcatus, распространенные в восточных регионах страны, и Ixodes ricinus — в западных. Клещи проходят несколько стадий развития — яйцо, личинка, нимфа, имаго (взрослый клещ). Для того, чтобы происходило превращение клеща из одной стадии в другую, необходима кровь теплокровных животных. Начиная со стадии личинки, клещи активно ищут себе прокормителя, как правило, это мелкие лесные животные (зайцы, мыши и др.), птицы.
Однако клещи могут нападать и на крупных животных, в том числе домашний скот (козы, овцы, коровы). Во время кровососания клещ инокулирует вирус животным, вследствие чего развивается вирусемия и они становятся дополнительными резервуарами инфекции. Таким образом, происходит циркуляция вируса: клещ — животное — клещ. Клещи могут передавать вирус потомству. Заражение человека происходит трансмиссивным путем через укусы клеща. Возможна алиментарная передача инфекции при употреблении в пищу сырого молока коз и коров.
Заболеваемость КЭ имеет сезонный характер, соответствующий активности клещей. Максимальный ее подъем наблюдается в мае- июне. Второй, менее выраженный подъем заболеваемости, регистрируется в конце лета — начале осени.

Патогенез. Возбудитель при укусе клеща внедряется в организм человека через кожу, репродуцируется в месте внедрения и проникает в кровь. Гематогенно и лимфогенно он попадает в различные внутренние органы, в том числе и в центральную нервную систему, вызывая поражение двигательных нейронов спинного и ствола головного мозга или развитие диффузного менингоэнцефалита.
При алиментарном заражении патологический процесс носит двухфазный характер. Первая фаза характеризуется начальной вирусемией и последующей репликацией вируса в клетках печени, селезенки и других органов. Вторая фаза включает вторичную вирусемию и поражение ЦНС. В клинике этому соответствует течение двухволнового менингоэнцефалита.
В процессе болезни формируется иммунитет, и вирус удаляется из организма человека. У некоторых людей вирус сохраняется в нервной системе в течение всей жизни, обусловливая хронические формы болезни.
Клиника. Инкубационный период имеет продолжительность от 1 до 30 дней (чаще 7-14 дней). В подавляющем большинстве случаев у лиц, подвергшихся укусам вирусофорных клещей, развивается инаппарантная форма КЭ и лишь у 2% — клинически выраженная. Клещевой энцефалит начинается внезапно с лихорадки, интоксикации. Температура тел а быстро повышается до 38-39 «С. Больных беспокоят сильная головная боль, слабость, тошнота, иногда рвота, нарушается сон.
Характерен внешний вид больного — кожа лица, шеи, верхней половины грудной клетки, конъюнктивы гиперемированы, склеры инъецированы. Заболевание может завершиться в 3-5 дней. Такая форма болезни называется лихорадочной, является одной из самых частых, но редко диагностируется. Поражение нервной системы при этой форме отсутствует. При прогрессировании болезни с 3-5-го дня развиваются признаки поражения нервной системы. В зависимости от локализации поражения различают следующие формы клещевого энцефалита: менингеальную, менингоэнцефалитическую, полиомиелитическую, пол и ради кулон ев-ритическую.

Менинзеалъная форма характеризуется общемозговым синдромом, появлением ригидности мышц затылка, симптомов Кернига, Брудзинского. Изменения цереброспинальной жидкости свидетельствуют о серозном менингите. Заболевание имеет благоприятное течение. Лихорадка длится 10-14 дней, санация ликвора несколько отстает от клинического выздоровления.
Менинзоэнцефалитическая форма протекает значительно тяжелее. Больные становятся вялыми, заторможенными, сонливыми. Усиливаются головная боль, тошнота, рвота. Нередко наблюдаются бред, галлюцинации, психомоторное возбуждение, нарушение сознания. У некоторых больных могут быть судороги, эпилептиформные припадки. Поражаются нервы, иннервирующие лицевую, глазодвигательную мускулатуру, и другие черепные нервы. Могут развиваться нарушения глотания, дыхания. Типичной для клещевого энцефалита является полиомиелитическая форма, проявляющаяся парезами и параличами верхних конечностей и шейно-плечевой мускулатуры. В конце 2-3-й недели возникает атрофия пораженных мышц. Парезы и параличи нижних конечностей встречаются редко.
Полирадикулоневритическая форма протекает с поражением периферических нервов и корешков, с болями по ходу нервных стволов, нарушением чувствительности.
Двухволновый менинзоэнцефалит (двухволновая молочная лихорадка). Первая лихорадочная волна продолжается 3-7 дней, затем период благополучия 7-14 дней и новое повышение температуры тела, сопровождающееся нарастающей интоксикацией, менингеальными и общемозговыми симптомами.
Прозредиентные формы возникают в случаях, когда вирус сохраняется в центральной нервной системе. Инфекционный процесс не завершается и переходит в хроническое течение сразу после острого периода болезни или после длительного латентного периода. Клинически такая форма проявляется чаще эпилептиформными припадками, ги пер кинетически ми судорогами.
Диагностика Диагноз основывается на эпидемиологических и клинических признаках и подтверждается результатами серологического исследования. РСК, РПГА, РН проводят с парными сыворотками, диагностическим является нарастание титра антител в 4 раза и более. Антитела к вирусу КЭ появляются поздно, поэтому для повторного исследования кровь берут через 3-4 нед, а иногда через 2-3 мес от начала болезни.
Используют ИФА, который позволяет обнаружить антитела к вирусу КЭ в более ранние сроки.
Лечение. Больные клещевым энцефалитом с признаками поражения центральной нервной системы нуждаются в тщательном уходе и наблюдении. Проводят профилактику пролежней, следят за мочеиспусканием и дефекацией. Выявляют начальные симптомы расстройства дыхания. В течение первых 3-х дней лечения ежедневно вводят по 6-9 мл донорского иммуноглобулина против клещевого энцефалита.

Используют противовирусные средства — препараты интерферона, рибонуклеазу и другие. Назначают дезинтоксикационную и дегидратационную терапию. При возбуждении, эпилептических припадках используют аминазин, димедрол, фенобарбитал. бензонал. При полиомиелитической форме рано начинают восстановительную терапию. Выздоровление происходит медленно. Все переболевшие клещевым энцефалитом с поражением нервной системы состоят на диспансерном учете у невропатолога.
Профилактика. Необходимо соблюдать индивидуальные меры защиты от клещей во время пребывания в лесу, на садовых участках, расположенных вблизи лесных массивов.

После их посещения следует проводить само- и взаимоосмотры. Козье и коровье молоко в очагах клещевого энцефалита должно кипятиться. Обнаруженный клещ должен быть немедленно удален в асептических условиях, возможно исследование клеща на наличие в нем антигена вируса КЭ.
Экстренная профилактика проводится иммуноглобулином против клещевого энцефалита. При титре антител в препарате 1:80 и выше иммуноглобулин вводят внутримышечно однократно детям до 12 лет — 1 мл, от 12 до 16 лет- 2 мл и от 16 лет и старше — 3 мл. Лица, отправляющиеся на работу в природные очаги клещевого энцефалита, подвергаются вакцинации.

Лечение клещевого энцефалита в Екатеринбурге



Это тяжелое вирусное поражение центральной нервной системы. Возбудитель попадает в организм человека при укусе иксодового клеща. Заболевание встречается преимущественно в теплое время года на Дальнем Востоке, в Сибири, Монголии, Китае. Но в последние годы вспышки регистрируются и в других регионах.

Вирус вызывает тяжелые нарушения, возможен летальный исход. Пациентам, перенесшим заболевания, нужна длительная комплексная реабилитация. Иногда последствия клещевого энцефалита приводят к инвалидности.


Причины
Возбудитель клещевого энцефалита — относится флавивирусам. Он имеет очень маленькие размеры, поэтому способен преодолеть гематоэнцефалический барьер. Возбудитель быстро погибает в окружающей среде, но способен долго сохраняться в термически необработанных молочных продуктах. При их употреблении можно заболеть. В тело клеща возбудитель попадает при укусе больного человека или животного. Кусая следующую жертву, насекомое заносит вирус в кровеносное русло. Известны случаи заражения и при раздавливании клеща.

Встречаются и вторичные энцефалиты, вызванные вирусами кори, гриппа и другими. Эти состояния развиваются как осложнение основного заболевания, не связаны с укусом насекомого.

Симптомы
Обычно с момента укуса клеща до первых симптомов проходит 1-2 недели. Но бывает молниеносная форма, манифестирующая в течение суток. В редких случаях инкубационный период длится месяц.

Выделяют три формы заболевания:

  • лихорадочная;
  • очаговая;
  • менингеальная.

Лихорадочная форма

При этой форме ведущий симптом — волнообразное повышение температуры тела. После временного улучшения состояния лихорадка начинается снова. Длится острая фаза до 7-10 дней. После выздоровления сохраняется слабость, утомляемость. Реабилитация длится не больше месяца

После одного из эпизодов лихорадки может развиться очаговая симптоматика.

Очаговая форма

Это самое тяжелое течение энцефалита. Поражается вещество головного мозга, вследствие этого развивается очаговая симптоматика. Возможны галлюцинации, нарушение сознания, тремор, потеря равновесия, параличи. При поражении ствола мозга нарушаются жизненно важные функции: дыхание, работа сердца.

Менингеальная форма


Манифестирует в виде симптомов менингита: ригидность затылочных мышц, симптомы Кернига, Брудзинского, тошнота, рвота центрального генеза. Вирус поражает оболочки головного и спинного мозга. Заболевание длится около 14 дней, а реабилитация занимает не менее двух месяцев.

Отдельно выделяют прогредиентную форму, которая может развиться в любой момент и характеризуется стойкими неврологическими нарушениями, сохраняющимися месяцы и годы.

Методы диагностики энцефалита


Укус клеща в анамнезе — повод для обследования на энцефалит при появлении вялости, лихорадки у пациента. Необходимо выяснить, находился ли больной в последнее время в регионах, в которых часто встречаются энцефалитные клещи. Обязателен осмотр невролога.

Подтвердить диагноз позволяет лабораторная диагностика. Проводится исследование крови и ликвора методом ПЦР. Также определяют титры антител к вирусу клещевого энцефалита.

Лечение и реабилитация


Больной с подозрением на клещевой энцефалит срочно госпитализируется в неврологический стационар. При отсутствии ранее проведенной у пациента вакцинации – в первые сутки назначается иммуноглобулин противоклещевой.

Основные направления лечения энцефалита:

  • дегидратация для предупреждения отека мозга;
  • противовоспалительная терапия;
  • борьба с гипоксией;
  • десенсибилизация;
  • ангиопротекторы;
  • восстановление метаболизма в центральной нервной системе;
  • стабилизация водно-электролитного баланса.

После выхода из острого периода могут остаться такие симптомы, как тремор, параличи, гиперкинезы, нейроэндокринные нарушения.

Для полной реабилитации (при отсутствии противопоказаний) назначают курсы физиотерапии, ЛФК, миорелаксанты, массажи, нейролептики, противосудорожные препараты, холинолитики, антиоксиданты, ноотропы, средства для улучшения метаболизма. <

Также добавляют коррекционную психотерапию, социальную адаптацию. Длительность реабилитации после энцефалита зависит от тяжести заболевания и может длиться от нескольких месяцев до нескольких лет.


Стоимость услуг Способы оплаты: оплата наличными средствами; оплата пластиковыми банковскими картами МИР, VISA, MastercardWorldwide

25 лет

успешной работы

> 20

медицинских направлений

1400

ежедневно оказываемых услуг



Профилактика клещевых инфекций

С наступлением теплабольшинство людей устремляется на отдых в лесные массивы и парки. Но c наступлением весеннего тепла и до поздней осени осложняется и эпидемиологическая ситуация по клещевым инфекциям, возбудители которых передаются иксодовыми клещами.

Как отличить клеща от других насекомых. Тело у клеща плоское, брюшко – красно-коричневого цвета. На переднем конце тела находится хоботок, которым он прокалывает кожу и присасывается. У всех насекомых три пары ног, у клеща – четыре.

У самок половина брюшка закрыта темным щитком. Размеры голодного клеща — несколько миллиметров, насосавшись крови, он достигает размеров небольшой виноградины, приобретая сизую окраску.

Местами обитания клещей чаще являются смешанные леса. Встречаются клещи на просеках, на старых вырубках, там, где высокая трава, хорошо развит кустарник, вдоль лесных тропинок, где есть хворост, валежник. В последние годы клещи чаще стали встречаться в лесопарковых зонах крупных городов, на дачных и огородных участках. Период наибольшей активности клещей – первая половина лета. Второй пик – конец лета – начало осени.

Возбудитель передается человеку в основном через присасывание зараженного вирусом клеща, а также при раздавливании клеща, расчесывании места укуса.

На территории Республики Беларусь из клещевых инфекций регистрируются болезнь Лайма (клещевой боррелиоз) и клещевой энцефалит.

Болезнь Лайма встречается на всей территории республики значительно чаще, чем клещевой энцефалит, поэтому клещей в основном исследуют на зараженность ее возбудителями. Возбудитель – бактерия рода боррелий. От момента укуса клеща до появления первых клинических симптомов проходит до 30 дней. Чаще всего на месте укуса у 75 % заболевших появляется пятно розового цвета (мигрирующая эритема). Могут отмечаться (не всегда) общее недомогание, повышение температуры, головные, мышечные и суставные боли. Заболевание может также возникнуть и без вышеуказанных симптомов, сразу с хронических проявлений со стороны суставов, сердца, кожи и нервной системы, спустя несколько месяцев, и даже лет после присасывания инфицированного клеща.

Клещевой энцефалит в Республике Беларусь регистрируется в виде единичных случаев. Заражение клещевым энцефалитом, возможно не только через присасывание клещей, но и в результате употребления некипяченого молока от коз, подвергшихся укусам инфицированных клещей. Возбудитель – вирус клещевого энцефалита. На территории Республики Беларусь отмечается так называемый западный двухволновой тип течения клещевого энцефалита. От момента укуса клеща обычно проходит от 8 до 30 дней. Первая волна заболевания характеризуется легким течением и начинается с озноба, повышения температуры, появления головной боли, тошноты, рвоты, головокружения, болей в конечностях, которые длятся около недели. Далее после 1- 2 недель мнимого выздоровления наступает вторая волна заболевания, которая всегда протекает тяжелее и начинается, резким подъёмом температуры, головной болью, тошнотой, рвотой, нарушением сна, далее присоединяются различные неврологические расстройства.

В случае присасывания клеща следует как можно быстрее его удалить. Чем дольше клещ находится в присосавшемся состоянии, тем больше вероятность заражения человека. Сделать это лучше в медицинском учреждении – в травматологическом или хирургическом кабинете. Но если такой возможности нет, удалить его можно самостоятельно одним из следующих способов:

  1. При помощи хлопчатобумажной ниткиЕе завязывают в узел, как можно ближе к хоботку. Закручивая концы нити при помощи кругового движения, извлекают клеща, потихоньку подтягивая его вверх. Резкие движения недопустимы.
  2. При помощи стерильной (прокаленной) иглы – как занозу.
  3. Пинцетом. Клеща нужно захватить как можно ближе к хоботку. Затем его аккуратно вытаскивают, вращая вокруг своей оси в удобную сторону. Обычно через 1-3 оборота клещ извлекается целиком вместе с хоботком. Если же клеща попытаться выдернуть – велика вероятность его разрыва. Нельзя надавливать на брюшко, при этом возможно выдавливание его содержимого вместе с возбудителями в ранку.

После удаления клеща кожу в месте его присасывания обрабатывают настойкой йода или спиртом.

Следует помнить, что при удалении клеща нельзя использовать масла, жирные кремы, которые закупоривают дыхательные отверстия клеща и провоцируют дополнительный выброс возбудителей в кровь человека. После удаления клеща необходимо обязательно обратиться в поликлинику по месту жительства к врачу инфекционисту (терапевту, педиатру) для назначения профилактического лечения и организации медицинского наблюдения.

При появлении признаков заболевания необходимо немедленно обратиться в поликлинику по месту жительства и сообщить врачу о присасывании клеща в течение последнего месяца.

Меры профилактики

От клещевого энцефалита можно защититься с помощью прививки. Вакцинация осуществляется в два этапа. Вакцина действует в течение трех лет. Против болезни Лайма прививка не разработана.

В период нахождения в лесу:

  1. Максимально прикрывайте тело: одевайте светлую одежду (на ней лучше видно клещей) с длинными рукавами и капюшоном, брюки заправьте в носки, на ноги лучше обуть сапоги.
  2. Осматривайте свою одежду каждые 2-3 часа, периодически проводите тщательную проверку, обращая особое внимание на следующие части тела: шея, подмышки, паховая область, ушные раковины – в этих местах кожа особенно нежная и тонкая, клещи чаще всего присасываются именно там.
  3. Используйте противоклещевые репелленты, продающиеся в аптеках в соответствии с инструкцией по их применению.
  4. Осматривайте букеты из лесных и домашних полевых цветов, привезенных из леса.
  5. Во избежание заражения клещевым энцефалитом алиментарным путем передачи (через пищеварительный тракт), употребляйте молоко (особенно козье) только после кипячения.
  6. Важное значение в предупреждении укусов клещей имеет уменьшение их численности в городской и пригородной зонах отдыха населения, на садово – огородных участках. Это уборка сухостоя и валежников, вырубка и удаление кустарников, выкашивание травы и удаление сорняков, привлекающих клещей, высевание растительных антогонистов (чабрец, шалфей).

Помните!

Выполняя довольно простые правила,

Вы защитите себя от укусов клещей и тяжелых заболеваний.

Врач-эпидемиолог Татьяна Липницкая

Экспериментальное заражение ягнят вирусом клещевого энцефалита и коинфекция Anaplasma phagocytophilum

Реферат

Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ) — это зоонозный патоген, который может вызывать клещевой энцефалит (КЭ) у людей и животных. Ежегодно в Европе и Азии регистрируется более 10 000 случаев КЭ. Однако знания о КЭ у животных ограничены. Было обнаружено, что совместное инфицирование овец Anaplasma phagocytophilum и вирусом лупингиблеза (LIV), близким родственником ВКЭ, вызывает более тяжелое заболевание, чем одиночный LIV или A . phagocytophilum инфекция. Целью этого исследования было изучение инфекции ВКЭ и сочетанной инфекции ВКЭ и A . phagocytophilum у ягнят. Всего было использовано 30 ягнят в возрасте от пяти до шести месяцев. Эксперимент разделили на две части. В первой части: до и после инфицирования ВКЭ и A . Было исследовано phagocytophilum (группы с 1 по 4), а во второй части — коинфекция ВКЭ и A . phagocytophilum (группы 5 и 6).Были взяты образцы крови и ежедневно измерялась ректальная температура. Ягнята, инокулированные ВКЭ, не проявляли клинических симптомов, но имели короткую или необнаруживаемую виремию с помощью ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени. У всех ягнят, инокулированных ВКЭ, вырабатывались нейтрализующие антитела против ВКЭ. Наше исследование согласуется с предыдущими исследованиями и указывает на то, что ВКЭ редко вызывает симптоматическое заболевание у жвачных животных. Все ягнята инокулировали А . phagocytophilum развил лихорадку и клинические симптомы клещевой лихорадки, а A . phagocytophilum присутствовал в образцах крови всех инфицированных ягнят, как показывает количественная ПЦР. Значительно более высокий средний титр ВКЭ был обнаружен в группе, коинфицированной ВКЭ и A . phagocytophilum , по сравнению с группами до или после инфицирования A . phagocytophilum . Эти результаты показывают, что коинфекция TBEV и A . phagocytophilum у овец стимулирует усиленный ответ антител против вируса клещевого энцефалита.

Образец цитирования: Paulsen KM, Granquist EG, Okstad W., Vikse R, Stiasny K, Andreassen ÅK, et al.(2019) Экспериментальное заражение ягнят вирусом клещевого энцефалита и коинфекция Anaplasma phagocytophilum . PLoS ONE 14 (12): e0226836. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0226836

Редактор: Gualtiero Alvisi, University of Padua, ITALY

Поступила: 10 октября 2019 г .; Одобрена: 5 декабря 2019 г .; Опубликован: 19 декабря 2019 г.

Авторские права: © 2019 Paulsen et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в рукописи и ее файлах вспомогательной информации.

Финансирование: Исследование проводилось в рамках программы ScandTick Innovation (номер гранта 20200422) при поддержке программы EU Interreg V-A.Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Заболевание клещевым энцефалитом (КЭ) у людей и животных вызывается вирусом клещевого энцефалита (ВКЭ). ВКЭ является представителем рода flavivirus в семействе flaviviridae и в основном передается людям и животным через укусы инфицированных ВКЭ клещами Ixodes ricinus или Ixodes persulcatus [1].Кроме того, ВКЭ был обнаружен в непастеризованном молоке домашних жвачных животных, и есть сообщения о случаях пищевого клещевого энцефалита у людей в результате потребления непастеризованного молока и других молочных продуктов [2–9].

У людей КЭ может варьироваться от бессимптомной до тяжелой инфекции центральной нервной системы, и число ежегодно регистрируемых случаев КЭ у людей увеличивается в Европе и Азии [10, 11]. У большинства животных при заражении вирусом клещевого энцефалита не развиваются симптомы заболевания. Однако знания о КЭ у животных ограничены.Был описан КЭ с неврологическими симптомами у собак, лошадей и в одном случае обезьяны ( Macaca sylvanus ) [12–16]. КЭ у мелких жвачных, по-видимому, встречается редко, зарегистрировано лишь несколько случаев [17, 18]. Известно, что крупные и мелкие млекопитающие, а также перелетные птицы играют важную роль в распространении и передаче вируса [19–26].

Anaplasma phagocytophilum является возбудителем клещевой лихорадки у жвачных животных и передается теми же видами клещей, что и TBEV в Европе, а именно I . ricinus [27]. Известно, что внутриклеточная бактерия поражает домашних жвачных, человека и диких животных [27, 28]. А . phagocytophilum оказывает большое негативное влияние на овцеводство, и, по оценкам, более 300 000 ягнят заражены A . phagocytophilum ежегодно в Норвегии [29]. Заражение A . phagocytophilum приводит к подавлению иммунитета, и наиболее типичные симптомы у домашних жвачных включают высокую температуру, депрессию, снижение аппетита и внезапное падение надоев [30, 31].Наблюдается также снижение прибавки в весе инфицированных ягнят [32, 33].

Поскольку несколько клещевых патогенов часто циркулируют в одной и той же местности, люди и животные могут быть инфицированы несколькими патогенами от укусов клещей [34]. Недавнее исследование, проведенное в Норвегии Kjelland et al. (2018) сообщили о коинфицированных клещах Borrelia afzelii и Neoehrlichia mikurensis . В том же исследовании было обнаружено несколько клещевых патогенов, включая ВКЭ и A . phagocytophilum , там же [35].Совместное заражение с A . phagocytophilum и другие патогены у овец, как было установлено, вызывают более тяжелое заболевание по сравнению с инфицированием одним патогеном [36, 37]. Предыдущие исследования показали, что коинфекция A . phagocytophilum и вирус лупингиблеза (LIV) у овец могут привести к летальному исходу [36, 38]. ВКЭ и LIV тесно связаны, и было высказано предположение, что подобные клинические исходы могут возникнуть в результате сочетанной инфекции с A . phagocytophilum и ВКЭ. Недавно опубликованное экспериментальное исследование иммунных ответов на TBEV и LIV у овец показало, что инфицированные овцы вырабатывают нейтрализующие антитела к обоим вирусам, которые, по-видимому, ограничивают инфекцию, вызванную TBEV, но не инфекцию, вызванную LIV [39]. Кроме того, предварительная инокуляция ВКЭ, по-видимому, уменьшала тяжесть заболевания и виремию, вызванную LIV, но не предотвращала инфицирование LIV [39]. Целью этого исследования было изучить влияние инфекции ВКЭ и сочетанной инфекции ВКЭ и A . phagocytophilum у ягнят.

Материалы и методы

Заявление об этике

Исследование было санкционировано Норвежским управлением по исследованиям животных (Norwegian Food Safety Authority, FOTS ID 8632, FOTS ID 8135). Образцы крови собирали обученные ветеринары, и всех ягнят наблюдали ежедневно.

Схема эксперимента и забор крови

Это исследование проводилось в Норвежском университете естественных наук (NMBU) в Санднесе, Норвегия.Исследование было разделено на две части. Всего было использовано 30 ягнят в возрасте от пяти до шести месяцев породы «Норвежская белая овца». Первая часть включала только баранов и проводилась осенью 2017 года. Вторая часть состояла полностью из овец и проводилась осенью 2018 года (Таблица 1).

Таблица 1. Обзор групп исследования и экспериментальный план первой и второй части экспериментального исследования с инфекцией вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) и Anaplasma phagocytophilum у ягнят.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0226836.t001

Основной причиной различия пола между частями первой и второй было ограниченное количество доступных животных. Ранее при экспериментальном заражении A различий между полами не наблюдалось. phagocytophilum у овец [40]. Основная причина разделения ягнят на две отдельные группы заключалась в том, чтобы избежать неудобств из-за гона молодых самцов.Ягнят использовали перед началом эксперимента. Седативные средства не применялись.

В первой части животные были разделены на четыре группы по пять баранов-ягнят (группа 1–4, таблица 1). В день 0 ягнят в группе 1 инокулировали 1 мл штамма TBEV Hochosterwitz (европейский подтип, приблизительно 6,5х10 6 фокусообразующих единиц на мл (FFU / мл)), а ягнят в группах 2 и 3 инокулировали. с 1 мл A . phagocytophilum (0,4 мл гепаринизированной овечьей крови, стабилизированной 10% деметилсульфоксидом (ДМСО), приблизительно 10 6 инфицированных клеток, номер доступа GenBank M73220).Ягнята в группе 4 были отрицательным контролем и были инокулированы средой для неинфицированных клеток после культивирования вируса. На 21 день ягнят в группе 1 инокулировали тем же штаммом A . phagocytophilum , и ягнят в группе 3 с тем же штаммом ВКЭ, как описано выше. Ягнята в группе 2 служили A . phagocytophilum контролей.

TBEV и среду отрицательного контроля инокулировали подкожно, а A . phagocytophilum внутривенно.Модель экспериментальной инфекции с внутривенным введением A . phagocytophilum уже несколько лет используется в NMBU в Санднесе [40]. Кроме того, ранее не наблюдалось различий в клинических проявлениях после подкожной, внутрикожной или внутривенной инокуляции, за исключением задержки инкубационного периода после подкожной / внутрикожной инокуляции. TBEV был привит подкожно, чтобы имитировать укусы клещей, и потому, что TBEV был привит подкожно на мышиных моделях и ранее в исследованиях на овцах.По практическим причинам и во избежание какой-либо смеси с подкожной инокуляцией TBEV, Anaplasma phagocytophilum был инокулирован внутривенно.

Образцы крови были взяты из Vena jugularis с использованием вакуумных пробирок от всех ягнят на 0, 2, 4, 6, 8, 10, 14, 18, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 35, 39 и 42 (две пробирки с ЭДТА по 2 мл и одна пробирка с сывороткой с активатором свертывания крови объемом 9 мл, Vacuette ® Greiner Bio-One GmbH, Кремсмюнстер, Австрия). Экспериментальный период в первой части закончился на 42-й день (таблица 1).Все ягнята из первой части исследования были умерщвлены, а образцы головного мозга были взяты для ПЦР-анализа. Животных умерщвляли внутривенной инъекцией пентобарбитала натрия 400 мг / мл (Euthasol vet, Le Vet B.V., Oudewater, Нидерланды) в дозе 140 мг / кг).

Вторая часть исследования была разработана аналогично с двумя группами по пять ягнят в каждой (группы 5 и 6, таблица 1). Экспериментальный период во второй части закончился на 21 день. Те же штаммы и партии TBEV и A . phagocytophilum , как указано выше, инокулировали в группу 5 в день 0, тогда как физиологический солевой раствор использовали в качестве отрицательного контроля и инокулировали в группу 6 в тот же день.Образцы крови были взяты из Vena jugularis с использованием вакуумных пробирок у всех животных на 0, 2, 4, 6, 8, 10, 14, 18 и 21 день (две 2-мл пробирки с ЭДТА и одна 4-мл пробирка для сыворотки со сгустком. активатор Vacuette ® Greiner Bio-One GmbH, Кремсмюнстер, Австрия).

Все пробирки с сывороткой отделяли центрифугированием в течение двух часов после отбора проб и хранили при -80 o ° C до анализа. Одну пробирку с ЭДТА хранили при -20 o ° C для A . phagocytophilum ПЦР, а вторая пробирка использовалась для гематологии.

Гематология

Гематологические анализы были выполнены на приборе ADVIA 120 (Siemens healthcare, Эрланген, Германия) с ветеринарным программным обеспечением для овечьей крови.

Обнаружение вируса клещевого энцефалита

РНК

из образцов сыворотки экстрагировали на QIAcube с помощью мини-набора для вирусной РНК QIAamp ® (QIAGEN GmbH, Хильден, Германия) в соответствии с рекомендациями производителя. РНК из образцов мозга экстрагировали с помощью мини-набора RNeasy (QIAGEN GmbH, Хильден, Германия) в соответствии с рекомендациями производителя.Сразу после процесса экстракции РНК была обратно транскрибирована в кДНК с помощью случайных праймеров (High-Capacity cDNA Reverse Transcription Kit, Applied Biosystems, Foster city, CA, USA). Для обнаружения РНК TBEV была проведена собственная ПЦР с обратной транскриптазой (RT) в реальном времени в соответствии с Andreassen et al. (2012). ПЦР в реальном времени амплифицирует фрагмент из 54 пар оснований (п.н.), расположенный на гене оболочки TBEV. Положительный РНК-контроль («Соукуп») использовали в ПЦР в реальном времени [41]. В качестве отрицательного контроля использовали воду, свободную от нуклеаз.

Обнаружение антител к вирусу клещевого энцефалита

Образцы сыворотки ягнят были проанализированы на IgG ВКЭ с помощью коммерческого иммуноферментного анализа (ELISA, Enzygnost ® Anti-TBE virus IgG, Siemens Healthcare, GmbH, Марбург, Германия) в соответствии с протоколом производителя с одной модификацией: конъюгат заменяли на меченное пероксидазой антитело против овечьих IgG (KPL, Гейтерсбург, США). Конъюгат IgG разводили 1: 50 000. Сыворотка овец, вакцинированных против ВКЭ вакциной TicoVac (Pfizer Ltd, Ramsgate Road, Sandwich, Kent, CT13 9NJ, UK), использовалась в качестве положительного контроля, а сыворотка овец, которые никогда не контактировали с клещами, использовалась в качестве отрицательного контроля [ 8].Все положительные и пограничные образцы из ELISA были дополнительно протестированы в тесте на нейтрализацию сыворотки (SNT), специфичном для TBEV, в Центре вирусологии Венского медицинского университета, как описано ранее [42].

Обнаружение

Anaplasma phagocytophilum ДНК

из образцов крови с ЭДТА экстрагировали на MagNA Pure 96 с помощью набора для ДНК MagNA Pure 96 и вирусного NA большого объема (Roche Molecular Systems, Inc. Базель, Швейцария) в соответствии с рекомендациями производителя.Для обнаружения A . phagocytophilum ДНК, метод количественной ПЦР в реальном времени проводили согласно Henningsson et al. 2015. Этот метод амплифицирует фрагмент гена gltA бактерии размером 64 п.н. [43]. Положительный А . phagocytophilum контроль и синтетическая плазмида (pAP-GltA, клонированная в pUC57, GenScript сотрудничества, Scotch plains, штат Нью-Джерси) были использованы в qPCR. В качестве отрицательного контроля использовали воду, свободную от нуклеаз.

Статистика

Все клинические и лабораторные данные были собраны в таблицах Microsoft Excel (2016) и переданы в Stata 14.2 для Windows (StataCorp, 4905 Lakeway Drive. College Station, Texas 77845) для статистического анализа. Качество данных и распределений было проанализировано с использованием таблиц и гистограмм. Первоначальный анализ включал многоуровневое моделирование линейной регрессии каждой из переменных непрерывного результата; ректальная температура, количество нейтрофилов, количество лимфоцитов, количество моноцитов, количественная ПЦР A . phagocytophilum и титр ВКЭ. Предикторами были «Группа» (воздействие) и «День» заражения, а переменной случайных эффектов — «Отдельные ягнята».Статистический анализ выполняли с 0 по 21 день после инокуляции TBEV и A . phagocytophilum . Остатки оценивались и визуализировались на квантильных графиках. p <0,05 считалось значимым. Дополнительные описательные статистические анализы были выполнены в Excel и GraphPad Prism версии 8.0.0 для Windows (GraphPad Software, Сан-Диего, Калифорния, США).

Результаты

Часть первая: до и после инфицирования ВКЭ и

A . фагоцитофил

Ягнята в группах 1 и 3, которые были инокулированы ВКЭ, не имели клинических симптомов или лихорадки, а также имели кратковременную или необнаруживаемую вирусемию с помощью ОТ-ПЦР в реальном времени на образцах сыворотки. На второй день после инфицирования ВКЭ четыре из пяти ягнят в группе 1 дали положительный результат на ВКЭ в сыворотке, тогда как в группе 3 у двух из пяти ягнят были положительные результаты. Один из пяти ягнят в группе 3 дал положительный результат на ВКЭ на четвертый день после инфицирования ВКЭ. Все образцы были отрицательными на шестой день и в течение всего эксперимента (таблица S1).Все образцы мозга, собранные у ягнят в конце эксперимента (42-й день), оказались отрицательными по ВКЭ с помощью ОТ-ПЦР в реальном времени (данные не показаны).

Результаты теста на нейтрализацию сыворотки показали, что ягнята, инокулированные ВКЭ (группы 1 и 3), вырабатывали нейтрализующие антитела к вирусу (рис. 1, таблица S1). У ягнят обнаруживались нейтрализующие антитела в сыворотке крови с шестого дня после инфицирования ВКЭ и на протяжении всего эксперимента. Не было обнаружено существенной разницы в среднем титре ВКЭ между группами 1 и 3 (p> 0.05).

Рис. 1. Средний реципрокный титр антител против TBEV у ягнят после инфицирования TBEV.

Титры

ВКЭ (ось Y) измеряли с помощью теста нейтрализации сыворотки в группах 1, 3 и 5 в дни от 0 до 21 после инокуляции TBEV (ось X). Группа 5 имела значительно более высокие средние значения титра ВКЭ, чем группы 1 и 3, обозначенные *. Стандартные отклонения (SD) показаны с помощью планок погрешностей. Группы, которые не были инокулированы вирусом клещевого энцефалита, не показаны на рисунке, и в них не вырабатывались нейтрализующие антитела к вирусу.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0226836.g001

Все ягнята заражены A . phagocytophilum (группы 1, 2 и 3) развились лихорадка и клинические симптомы A . phagocytophilum (рис.2, таблица S1). У одной из ягнят была диагностирована пневмония, и она была умерщвлена ​​до окончания исследования в соответствии со стандартами защиты животных. А . phagocytophilum был обнаружен с помощью кПЦР во всех образцах крови со 2-го дня после инфицирования и на протяжении всего эксперимента (рис. 2, таблица S1).Нет существенной разницы в среднем A . Была обнаружена концентрация phagocytophilum между 1, 2 и 3 группами (p> 0,05). Кроме того, нет значительной разницы в средней ректальной температуре по сравнению с A . Обнаружена инфекция phagocytophilum между 1, 2 и 3 группами (p> 0,05).

Рис. 2. Средняя ректальная температура и средняя концентрация Anaplasma phagocytophilum у ягнят.

Средняя ректальная температура (ось Y) и средняя концентрация A . phagocytophilum в крови, измеренное с помощью кПЦР (количество копий на мкл (логарифмический), ось Y) каждой группы с 0 по 42 день после инокуляции (ось X). Пунктирная линия при 40 градусах Цельсия указывает на лихорадку. Вертикальная пунктирная линия на графике от A до D указывает на второй день контрольного заражения на 21 день. Вторая часть эксперимента (график E и F) завершилась на 21 день. Стандартные отклонения (SD) проиллюстрированы полосами ошибок.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0226836.g002

Для гематологического анализа группа 2 имела значительно более высокое среднее количество моноцитов по сравнению с группами 1 и 3 (p <0.05). Не было обнаружено значительной разницы в среднем количестве нейтрофилов и лимфоцитов между группами 1, 2 и 3 (p> 0,05, рис. 3, таблица S1).

Рис. 3. Среднее количество нейтрофилов и моноцитов у ягнят в экспериментальном исследовании.

Среднее количество (ось Y) нейтрофилов (кружки) и моноцитов (квадраты) в эксперименте. Нормальное количество у овец составляет 0,8–5,0 (10 9 клеток на литр) для нейтрофилов и <0,75 (10 9 клеток на литр) для моноцитов.Вертикальная пунктирная линия на графике от A до D указывает на вторую контрольную пробу на 21 день. Стандартные отклонения (SD) проиллюстрированы полосами ошибок. Отсутствие конечных точек на некоторых планках ошибок на графике A связано с выбросами.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0226836.g003

Часть вторая: Коинфекция ВКЭ и

A . фагоцитофил

Ягнята группы 5, коинфицированные ВКЭ и A . phagocytophilum , клинических симптомов клещевого энцефалита не наблюдалось, а виремия была либо не обнаруживаемой, либо непродолжительной.У двух из пяти ягнят обнаруживалась РНК ВКЭ в сыворотке на второй день, а у одной из пяти — на четвертый и шестой день. Все образцы сыворотки дали отрицательный результат на РНК ВКЭ на восьмой день и в течение всего эксперимента. Как и в первой части настоящего исследования, у всех ягнят, инокулированных вирусом клещевого энцефалита, выработались нейтрализующие антитела против вируса клещевого энцефалита на 4-й и 8-й день после инокуляции (рис. 1, таблица S1).

У ягнят в группе 5 развились лихорадка и клинические признаки клещевой лихорадки, и бактерия была обнаружена с помощью количественной ПЦР со 2-го дня после заражения и на протяжении всего эксперимента (рис. 2, таблица S1).

Статистическое сравнение первой и второй части исследования

Значительно более высокий средний титр ВКЭ был обнаружен в группе 5, где ягнята были коинфицированы ВКЭ и A . phagocytophilum , по сравнению с группой 1, которая получила инфекцию ВКЭ в день 0, и A . phagocytophilum на 21-е сутки (р <0,05). Аналогичным образом, группа 5 имела значительно более высокий средний титр ВКЭ по сравнению с группой 3, которая была инфицирована A . phagocytophilum на 0 день и ВКЭ на 21 день (p <0,05). Нет различий в отношении вирусемии между пре-, пост- и коинфекцией ВКЭ и A . Обнаружено phagocytophilum .

Не было обнаружено существенной разницы в средней ректальной температуре по сравнению с A . phagocytophilum или средняя концентрация A . phagocytophilum в образцах крови между группами 1, 2, 3 и 5 (p> 0,05).

Для гематологического анализа было обнаружено значительно более высокое среднее количество моноцитов после инокуляции A . phagocytophilum в группе 1 (21–42 сутки) и 3 (сутки 0–21) по сравнению с группой 5 (сутки 0–21). Аналогично, после прививки ВКЭ в группе 1 (0–21 день) было обнаружено значительно большее среднее количество моноцитов, чем в группе 5 (день 0–21). Не было обнаружено значительной разницы в среднем количестве нейтрофилов и лимфоцитов между A . phagocytophilum инфицированных групп в части 1 и части 2, однако в группе 1 было обнаружено значительно более высокое среднее количество нейтрофилов по сравнению с группой 5 в дни от 0 до 21 после инокуляции TBEV (p <0,05, таблица S1).

Обсуждение

Отсутствует информация о ветеринарных аспектах ВКЭ. Это исследование было направлено на изучение инфекции ВКЭ и сочетанной инфекции ВКЭ и A . phagocytophilum у ягнят. Все ягнята, инфицированные ВКЭ, вырабатывали нейтрализующие антитела против вируса клещевого энцефалита, не проявляя никаких клинических симптомов клещевого энцефалита, и имели очень короткую виремию.Значительно более высокий средний титр ВКЭ был обнаружен в группе, коинфицированной ВКЭ и A . phagocytophilum по сравнению с другими группами. Эти результаты указывают на то, что коинфекция ВКЭ и A . phagocytophilum у ягнят может стимулировать более высокий ответ антител против TBEV по сравнению с однократным инфицированием TBEV или предшествующим инфицированием A . phagocytophilum . Однако причина этого неизвестна.

На значительную разницу в титре антител против TBEV могло повлиять различие пола ягнят в первой части (бараны) и второй части (овцы).Предыдущее исследование A . phagocytophilum у лабораторных мышей обнаружило, что инфицированные самцы мышей увеличили A . phagocytophilum ДНК-нагрузка и количество инфицированных нейтрофилов [44]. В настоящем исследовании не было обнаружено значительных различий в среднем A . phagocytophilum ДНК-нагрузка, но значительно более высокое среднее количество нейтрофилов было обнаружено в группе 1 по сравнению с группой 5 после инфицирования TBEV. Хотя виремия ВКЭ была низкой или не выявлялась, различия по полу могли повлиять на титры ВКЭ и количество нейтрофилов.Однако инфицирование ВКЭ ягнят разного пола и возраста не выявило каких-либо различий в клинических симптомах (неопубликованные данные).

В нашем исследовании было обнаружено, что среднее количество моноцитов в группе 2 было значительно выше, чем во всех других группах, инфицированных A . phagocytophilum . Кроме того, в группах 1 и 3 было значительно более высокое среднее количество моноцитов по сравнению с группой 5. Было обнаружено, что моноциты играют важную роль в борьбе с A . phagocytophilum [45], а также способствовать клеточному иммунному ответу на TBEV [46, 47]. Значительно более высокое среднее количество моноцитов было обнаружено в группе 1 (дни от 0 до 21), чем в группе 5 (дни от 0 до 21) после инфицирования TBEV. Эти результаты могут указывать на то, что при однократном заражении A . phagocytophilum или TBEV (группы 1 и 3), развивается более высокий клеточно-опосредованный иммунный ответ по сравнению с коинфекцией TBEV и A . phagocytophilum (группа 5).Однако не было обнаружено значительных различий в средней бактериальной нагрузке A . phagocytophilum , ни клинические симптомы ягнят.

Результаты нашего исследования согласуются с предыдущими исследованиями и вместе они указывают на то, что ВКЭ редко приводит к симптоматическому заболеванию овец [17, 18, 39]. Коинфекция LIV и A . phagocytophilum , как известно, вызывает тяжелые заболевания у овец [36]. В нашем исследовании коинфекция A . phagocytophilum и ВКЭ, по-видимому, не влияли на клинические симптомы у ягнят, хотя LIV генетически тесно связан с ВКЭ [48]. Отсутствие клинических случаев КЭ у овец может быть связано с плохой репликацией вируса в клетках овцы [39].

Недавнее экспериментальное исследование ВКЭ и LIV у овец, проведенное Mansfield et al. (2016), не обнаружили клинических симптомов инфекции ВКЭ, хотя был установлен нейтрализующий ответ антител [39]. Аналогичные результаты были получены в текущем исследовании.Исследование Mansfield et al. (2016), обнаружили, что низкий титр антител после инфицирования ВКЭ, вероятно, является отражением низкой вирусной нагрузки у овец, инфицированных ВКЭ. Сопоставимые результаты были получены в этом исследовании, в котором у некоторых ягнят была обнаружена низкая виремия через несколько дней после инокуляции вируса клещевого энцефалита. Хотя была обнаружена низкая и непродолжительная виремия, существует известная возможность передачи вируса клещевого энцефалита через пищевые продукты, что показывает, что у жвачных животных вирусная инфекция развивается после инфицирования ВКЭ [2–5, 49–52]. Кроме того, экспериментальное исследование на козах выявило виремию ВКЭ продолжительностью до 19 дней [53].Причина длительного периода виремии, обнаруженного у коз по сравнению с овцами, неизвестна, но это может указывать на то, что козы более восприимчивы к инфекции ВКЭ, чем овцы, или что существуют различия в патогенности вирусных штаммов.

Таким образом, настоящее исследование показывает, что все ягнята, инфицированные вирусом клещевого энцефалита, вырабатывали нейтрализующие антитела против вируса клещевого энцефалита без проявления каких-либо клинических симптомов клещевого энцефалита. Значительно более высокий средний титр ВКЭ был обнаружен в группе, коинфицированной ВКЭ и A . phagocytophilum по сравнению с другими группами. В будущих экспериментальных исследованиях на домашних жвачных животных следует рассмотреть другие и, возможно, более вирулентные штаммы ВКЭ, чтобы подтвердить эффекты коинфекции с использованием животных того же пола.

Вспомогательная информация

S1 Таблица. Данные о ректальной температуре, гематологических переменных, результатах ПЦР вируса клещевого энцефалита и

Anaplasma phagocytophilum , иммуноферментном анализе и титрах клещевого энцефалита.

Сокращения в таблице S1:

ПЦР ВКЭ: полимеразная цепная реакция в режиме реального времени на вирус клещевого энцефалита (0 = отрицательный, 1 = положительный)

TBEV ELISA: иммуноферментный анализ клещевого энцефалита (0 = отрицательный, 1 = положительный)

Титр ВКЭ: титр клещевого энцефалита по тесту нейтрализации сыворотки

Wbc: лейкоциты

руб .: эритроциты

Hgb: Гемоглобин

Hct: гематокрит

MCV: средний объем ячейки

MCH: средний клеточный гемоглобин

RDV: Ширина распределения эритроцитов

HDW: ширина распределения гемоглобина

Нейтрофилы:

Лимп: лимфоциты

Моно: Моноциты

Eos: эозинофилы

Baso: Базофилы

LUC: большие неокрашенные клетки.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0226836.s001

(XLSX)

Благодарности

Авторы благодарны сотрудникам Норвежского университета естественных наук в Санднесе за всю помощь во время исследования. Искренняя благодарность Камилле Элм и Анне Ангел за любезно предоставленные метод количественной ПЦР, положительный контроль и плазмиду для обнаружения Anaplasma phagocytophilum , доктору Кристиану Бёре за предоставление положительной контрольной РНК ВКЭ («Soukup»), профессору Ф.X. Heinze за любезно предоставленный штамм Hochosterwitz, Benedikte N. Pedersen за участие в культивировании вируса и за критическое прочтение и предложения к рукописи, Alaka Lamsal за помощь во время подготовки этого исследования и Sveinung Eskeland за помощь во время подготовки этого исследования и для изготовления фигур.

Ссылки

  1. 1. Линдквист Л., Вапалахти О. Клещевой энцефалит. Ланцет. 2008. 371 (9627): 1861–71.
  2. 2.Balogh Z, Ferenczi E, Szeles K, Stefanoff P, Gut W., Szomor KN, et al. Вспышка клещевого энцефалита в Венгрии из-за потребления сырого козьего молока. Журнал вирусологических методов. 2010. 163 (2): 481–5. pmid: 19836419
  3. 3. Caini S, Szomor K, Ferenczi E, Szekelyne Gaspar A, Csohan A, Krisztalovics K и др. Клещевой энцефалит, передающийся через непастеризованное коровье молоко в западной Венгрии, сентябрь — октябрь 2011 г. Европейский надзор: бюллетень Europeen sur les maladies transmissies = Европейский бюллетень инфекционных болезней.2012; 17 (12).
  4. 4. Гресикова М., Секеева М., Ступалова С., Нечас С. Эпидемия клещевого энцефалита, передаваемого из овечьего молока, в Словакии. Интервирология. 1975. 5 (1–2): 57–61. pmid: 1237478
  5. 5. Хольцманн Х., Аберле С.В., Стиасны К., Вернер П., Мишак А., Зайнер Б. и др. Клещевой энцефалит от употребления козьего сыра в горном регионе Австрии. Возникающие инфекционные заболевания. 2009. 15 (10): 1671–3. pmid: 19861072
  6. 6. Худописк Н., Корва М., Джанет Э., Симетингер М., Гргич-Витек М., Губенсек Дж. И др.Клещевой энцефалит, связанный с потреблением сырого козьего молока, Словения, 2012 г. Новые инфекционные заболевания. 2013. 19 (5): 806–8. pmid: 23697658
  7. 7. Марковинович Л., Косанович Личина М.Л., Тешич В., Воеводич Д., Владусич Лючич I, Книвальд Т. и др. Вспышка клещевого энцефалита, связанная с потреблением сырого козьего молока и сыра, Хорватия, 2015 г. Инфекция. 2016; 44 (5): 661–5. pmid: 27364148
  8. 8. Полсен К.М., Стуен С., дас Невес К.Г., Сухель Ф., Гурунг Д., Соленг А. и др.Вирус клещевого энцефалита коров и непастеризованное коровье молоко из Норвегии. Зоонозы и общественное здоровье. 2019; 66 (2): 216–22. pmid: 30593734
  9. 9. Cisak E, Wojcik-Fatla A, Zajac V, Sroka J, Buczek A, Dutkiewicz J. Распространенность вируса клещевого энцефалита (TBEV) в образцах сырого молока, взятых случайным образом от коров, коз и овец в восточной Польше. Анналы аграрной и экологической медицины: ААЭМ. 2010. 17 (2): 283–6. pmid: 21186771
  10. 10. Кайзер Р. Клещевой энцефалит: клинические проявления и прогноз у взрослых.Wiener medizinische Wochenschrift (1946). 2012. 162 (11–12): 239–43. pmid: 22695809
  11. 11. Рузек Д., Авшич Зупанк Т., Борд Дж., Чрдл А., Эйер Л., Карганова Г. и др. Клещевой энцефалит в Европе и России: обзор патогенеза, клиники, терапии и вакцин. Antiviral Res. 2019; 164: 23–51. pmid: 30710567
  12. 12. Klimes J, Juricova Z, Literak I, Schanilec P, Trachta e Silva E. Распространенность антител к клещевому энцефалиту и флавивирусам Западного Нила и клинические признаки клещевого энцефалита у собак в Чешской Республике.Ветеринарная карта. 2001. 148 (1): 17–20. pmid: 11200400
  13. 13. Лешник MW, Кирц GC, Thalhammer JG. Клещевой энцефалит (КЭ) у собак. Международный журнал медицинской микробиологии: IJMM. 2002; 291 Прил. 33: 66–9.
  14. 14. Райнер Б., Фишер А., Годде Т., Мюллер В. Клиническая диагностика собачьего клещевого энцефалита (КЭ): вклад анализа спинномозговой жидкости (ЦСЖ) и титров антител ЦСЖ. Zentralblatt Fur Bakteriologie — Международный журнал медицинской микробиологии, вирусологии, паразитологии и инфекционных заболеваний.1999. 289 (5–7): 605–9. https://doi.org/10.1016/S0934-8840(99)80016-4
  15. 15. Клаус С., Хоругель У., Хоффманн Б., Бир М. Инфекция, вызванная вирусом клещевого энцефалита (ВКЭ) у лошадей: клинические и лабораторные данные и эпидемиологические исследования. Ветеринарная микробиология. 2013. 163 (3–4): 368–72. pmid: 23395291
  16. 16. Сусс Дж., Гелпи Е., Клаус С., Багон А., Либлер-Тенорио Е. М., Будка Х и др. Клещевой энцефалит у обезьян, подвергшихся естественному воздействию (Macaca sylvanus). Возникающие инфекционные заболевания.2007. 13 (6): 905–7. pmid: 17553233
  17. 17. Бом Б., Шаде Б., Бауэр Б., Хоффманн Б., Хоффманн Д., Циглер Ю. и др. Клещевой энцефалит у естественно инфицированной овцы. BMC ветеринарные исследования. 2017; 13 (1): 267. pmid: 28830430
  18. 18. Баго З., Баудер Б., Колодзейек Дж., Новотны Н., Вайссенбок Х. Клещевой энцефалит у муфлона (Ovis AMMUSIMON). Ветеринарная карта. 2002. 150 (7): 218–20. pmid: 11878442
  19. 19. Randolph SE. Передача клещевых патогенов от клещей к совместному кормлению: устойчивая парадигма Милана Лабуды.Клещи и клещевые болезни. 2011. 2 (4): 179–82. pmid: 22108009
  20. 20. Jaenson TG, Hjertqvist M, Bergstrom T., Lundkvist A. Почему увеличивается число случаев клещевого энцефалита? Обзор ключевых факторов, вызывающих рост заболеваемости КЭ у людей в Швеции. Паразиты и векторы. 2012; 5: 184. pmid: 22937961
  21. 21. Вальденстром Дж., Лундквист А., Фальк К.И., Гарпмо Ю., Бергстром С., Линдегрен Г. и др. Мигрирующие птицы и вирус клещевого энцефалита. Возникающие инфекционные заболевания.2007. 13 (8): 1215–8. pmid: 17953095
  22. 22. Hasle G, Bjune G, Edvardsen E, Jakobsen C, Linnehol B, Roer JE, et al. Перенос клещей перелетными воробьиными птицами в Норвегию. J Parasitol. 2009. 95 (6): 1342–51. pmid: 19658452
  23. 23. Тонтери Э., Йокелайнен П., Матала Дж., Пусениус Дж., Вапалахти О. Серологические доказательства заражения вирусом клещевого энцефалита лосей и оленей в Финляндии: дозорные для циркуляции вируса. Паразиты и векторы. 2016; 9: 54. pmid: 26825371
  24. 24.Randolph SE, Miklisova D, Lysy J, Rogers DJ, Labuda M. Случайность совпадений: характер заражения клещами на грызунах способствует передаче вируса клещевого энцефалита. Паразитология. 1999. 118 (Pt 2): 177–86.
  25. 25. Лабуда М., Наттолл П.А., Козуч О., Елецкова Е., Уильямс Т., Зуффова Е. и др. Невиремическая передача вируса клещевого энцефалита: механизм выживания арбовирусов в природе. Experientia. 1993. 49 (9): 802–5. pmid: 8405306
  26. 26.Лабуда М., Козуч О., Зуффова Е., Елецкова Е., Привет Р.С., Наттолл П.А. Передача вируса клещевого энцефалита между клещами, питающимися специфическими иммунными естественными хозяевами-грызунами. Вирусология. 1997. 235 (1): 138–43. pmid: 9300045
  27. 27. Фогги А. Исследования возбудителя клещевой лихорадки овец. Журнал патологии и бактериологии. 1951; 63 (1): 1–15. pmid: 14832686
  28. 28. Фоли Дж. Э., Фоли П., Джеккер М., Свифт П. К., Мэдиган Дж. Э. Гранулоцитарный эрлихиоз и заражение клещами горных львов в Калифорнии.Журнал болезней дикой природы. 1999. 35 (4): 703–9. pmid: 10574529
  29. 29. Стуен С., Бергстрём К. Серологическое исследование инфекции гранулоцитарной эрлихией у овец в Норвегии. Acta veterinaria Scandinavica. 2001; 42 (3): 331. pmid: 11887393
  30. 30. Туоми Дж. Экспериментальные исследования бычьей клещевой лихорадки. 1. Клинические и гематологические данные, некоторые свойства возбудителя и гомологичный иммунитет. Acta patologica et microbiologica Scandinavica. 1967. 70 (3): 429–45.pmid: 5625578
  31. 31. Woldehiwet Z. Уклонение от иммунитета и подавление иммунитета, вызываемые Anaplasma phagocytophilum, возбудителем клещевой лихорадки жвачных животных и гранулоцитарного анаплазмоза человека. Ветеринарный журнал (Лондон, Англия: 1997). 2008. 175 (1): 37–44. pmid: 17275372
  32. 32. Стуен С., Харденг Ф., Ларсен Х.Дж. Устойчивость молодых ягнят к клещевой лихорадке. Исследования в области ветеринарии. 1992. 52 (2): 211–6. pmid: 1585079
  33. 33. Grova L, Olesen I, Steinshamn H, Stuen S.Распространенность инфекции Anaplasma phagocytophilum и влияние на рост ягненка. Acta veterinaria Scandinavica. 2011; 53: 30. pmid: 21569524
  34. 34. Diuk-Wasser MA, Vannier E, Krause PJ. Коинфекция клещевыми возбудителями Ixodes: экологические, эпидемиологические и клинические последствия. Тенденции паразитологии. 2016; 32 (1): 30–42. pmid: 26613664
  35. 35. Кьелланд В., Полсен К.М., Роллум Р., Дженкинс А., Стуен С., Соленг А. и др. Вирус клещевого энцефалита, Borrelia burgdorferi sensu lato, Borrelia miyamotoi, Anaplasma phagocytophilum и Candidatus Neoehrlichia mikurensis у клещей Ixodes ricinus, собранных с рекреационных островов на юге Норвегии.Клещи и клещевые болезни. 2018; 9 (5): 1098–102. pmid: 29678403
  36. 36. Рид HW, Бакстон Д., Пау I, Броди Т.А., Холмс PH, Уркхарт GM. Ответ овец на экспериментальную сопутствующую инфекцию клещевой лихорадкой (Cytoecetes phagocytophila) и вирусом лупингвина. Исследования в области ветеринарии. 1986. 41 (1): 56–62. pmid: 3764102
  37. 37. Томас В., Ангуита Дж., Бартольд С.В., Фикриг Э. Коинфекция Borrelia burgdorferi и возбудителя гранулоцитарного эрлихиоза человека изменяет иммунные реакции мышей, патогенную нагрузку и тяжесть артрита Лайма.Инфекция и иммунитет. 2001. 69 (5): 3359–71. pmid: 11292759
  38. 38. Гордон В.С., Браунли А., Уилсон Р., Маклауд Дж. Исследования в Лупинг-Иллинойсе. (Энцефаломиелит овец.) Журнал сравнительной патологии и терапии. 1932; 45: 106-40.
  39. 39. Мэнсфилд К.Л., Джонсон Н., Баньярд А.С., Нуньес А., Бейлис М., Соломон Т. и др. Врожденный и адаптивный иммунный ответ на клещевую флавивирусную инфекцию у овец. Ветеринарная микробиология. 2016; 185: 20–8. pmid: 26931387
  40. 40.Стюен С., Бергстром К., Петровец М., Ван де Поль I, Шульс Л. М.. Различия в клинических проявлениях, гематологических и серологических ответах после экспериментального заражения генетическими вариантами Anaplasma phagocytophilum у овец. Клинико-диагностическая лабораторная иммунология. 2003. 10 (4): 692–5. pmid: 12853406
  41. 41. Андреассен А., Джоре С., Кубер П., Дудман С., Тенгс Т., Исаксен К. и др. Распространенность вируса клещевого энцефалита у нимф клещей в зависимости от климатических факторов на южном побережье Норвегии.Паразиты и векторы. 2012; 5: 177. pmid: 22

    7
  42. 42. Stiasny K, Holzmann H, Heinz FX. Характеристики ответов антител при прорыве в вакцинацию против клещевого энцефалита. Вакцина. 2009. 27 (50): 7021–6. pmid: 19789092
  43. 43. Henningsson AJ, Hvidsten D, Kristiansen BE, Matussek A, Stuen S, Jenkins A. Обнаружение Anaplasma phagocytophilum у клещей Ixodes ricinus из Норвегии с использованием анализа ПЦР в реальном времени, нацеленного на ген цитратсинтазы анаплазмы gltA.BMC микробиология. 2015; 15: 153. pmid: 26231851
  44. 44. Naimi WA, Green RS, Cockburn CL, Carlyon JA. Дифференциальная восприимчивость самцов и самок лабораторных мышей к инфекции Anaplasma phagocytophilum. Тропическая медицина и инфекционные болезни. 2018; 3 (3). pmid: 30274474
  45. 45. Блом К., Куапио А., Сандберг Дж. Т., Варнайте Р., Михаэльссон Дж., Бьоркстрем Н. К. и др. Клеточно-опосредованные иммунные ответы и иммунопатогенез вирусной инфекции клещевого энцефалита человека.Границы иммунологии. 2018; 9: 2174. pmid: 30319632
  46. 46. Северо М.С., Стивенс К.Д., Коцифакис М., Педра Дж. Х. Anaplasma phagocytophilum: обманчиво простая или просто обманчивая? Будущая микробиология. 2012; 7 (6): 719–31. pmid: 22702526
  47. 47. Цой К.С., Скорпион Д.Г., Дамлер Дж. С.. Связывание Anaplasma phagocytophilum с toll-подобным рецептором (TLR) 2, но не с TLR4, активирует макрофаги для ядерной транслокации ядерный фактор-каппа B. Журнал инфекционных болезней.2004. 189 (10): 1921–5. pmid: 15122530
  48. 48. Грицун Т.С., Лашкевич В.А., Гулд Э.А. Клещевой энцефалит. Противовирусные исследования. 2003. 57 (1-2): 129–46. pmid: 12615309
  49. 49. Коль И., Козуч О., Елецкова Е., Лабуда М., Залудко Ю. Семейная вспышка алиментарного клещевого энцефалита в Словакии, связанная с естественным очагом инфекции. Европейский журнал эпидемиологии. 1996. 12 (4): 373–5. pmid: 88

  50. 50. Ригер М.А., Нублинг М., Кайзер Р., Тиллер Ф.В., Хофманн Ф.[Клещевой энцефалит, передающийся через сырое молоко — каково значение этого пути заражения? Исследования в эпидемическом регионе Юго-Западной Германии. Gesundheitswesen. 1998. 60 (6): 348–56. pmid: 9697358
  51. 51. Кербо Н., Донченко И., Куцарь К., Василенко В. Вспышка клещевого энцефалита в Эстонии связана с сырым козьим молоком, май-июнь 2005 г. Европейский надзор: бюллетень Europeen sur les maladies transventions = Европейский бюллетень инфекционных болезней. 2005; 10 (6): E050623 2. pmid: 16783104
  52. 52.Kriz B, Benes C, Daniel M. Пищевая передача клещевого энцефалита в Чешской Республике (1997–2008 гг.). Эпидемиология, микробиология, иммунология: casopis Spolecnosti pro epidemiologii and mikrobiologii Ceske lekarske spolecnosti JE Purkyne. 2009. 58 (2): 98–103.
  53. 53. Балог З., Эгид Л., Ференци Э., Бан Э, Сомор К. Н., Такач М. и др. Экспериментальное заражение коз вирусом клещевого энцефалита и возможности предотвращения передачи вируса через сырое козье молоко.Интервирология. 2012; 55 (3): 194–200. pmid: 21325791

Вирус клещевого энцефалита — обзор

Клещевой энцефалит

Вирус клещевого энцефалита классифицируется как один вид в группе клещевых флавивирусов млекопитающих и далее подразделяется на три подтипа: дальневосточный (ранее RSSE), сибирский ( ранее западно-сибирский) и европейский (ранее ЦВЕ). Есть свидетельства того, что эти три подтипа вируса имеют перекрывающиеся географические области.

Три подтипа вируса клещевого энцефалита, а также другие родственные клещевые комплексные вирусы млекопитающих передаются через Голарктику, с некоторыми доказательствами их распространения из азиатского источника. 70,161 Дальневосточный подтип передается на востоке России, в Корее, Китае и некоторых частях Японии и странах Балтии; европейский подтип и родственные ему вирусные штаммы обнаружены в Скандинавии, Европе и восточных государствах бывшего Советского Союза; а сибирский подтип встречается во всех эндемичных по КЭ районах России (см.рис.155-1D). Географические распределения совпадают в Восточной Европе, где могут быть изолированы как сибирский, так и дальневосточный подтипы. 50 Вирус Лупинг Болл обнаружен на Британских островах, а вирус Повассан обнаружен в Северной Америке и Северной Азии. Близкородственные клещевые флавивирусы включают вирусы энцефалита турецких и испанских овец, обнаруженные в южной Европе, и три вируса, вызывающих геморрагическую лихорадку — KFDV в Индии, вирус Alkhurma (который является подтипом KFDV) в Саудовской Аравии и Египте и Омский вирус геморрагической лихорадки в Сибири. 54,162

КЭ был признан во всей Европе, за исключением Португалии и стран Бенилюкса, но эндемичная передача наиболее интенсивна в Австрии, регионах Швеции, Швейцарии, Словении, Чешской Республики, Эстонии, Литвы, Латвии и России. В этих странах уровень заболеваемости среди невакцинированного населения приближается к 20 на 100 000 человек, но риск очень очаговый. В Австрии национальные программы вакцинации снизили заболеваемость до менее 1 на 1 миллион. 163 Спорадические случаи зарегистрированы из Франции, Лихтенштейна, Швеции, Швейцарии, Италии и Греции. На Дальнем Востоке случаи клещевого энцефалита чаще всего возникают среди людей, работающих или проживающих в лесных районах России, Кореи, северного Китая и острова Хоккайдо, Япония. Новые модели, основанные на факторах окружающей среды и спутниковых данных, предполагают, что изменение климата частично является причиной увеличения заболеваемости в Европе. 164 Продольные исследования показывают, что вирус сейчас циркулирует на больших высотах в Чешской Республике и Швейцарии.

Вирусы передаются горизонтально между клещами и позвоночными, а зимой — вертикально через клещи и латентными инфекциями у животных, находящихся в спячке. Вирус передается трансовариально и трансстадиально, от яйца к личинке, нимфе и взрослой особи, поэтому клещи на всех стадиях, а также самцы и самки передают инфекции животным и людям. Кроме того, похоже, что вирус может передаваться между клещами, когда они питаются кожей одного и того же хозяина, через инфицированные ретикулоэндотелиальные и воспалительные клетки хозяина без необходимости в виремии хозяина. 165 Личинки и нимфальные клещи питаются в основном птицами и мелкими млекопитающими, а взрослые клещи питаются более крупными млекопитающими, такими как косуля, олени, домашние козы, овцы, коровы, собаки, кошки и люди. Человеческие инфекции являются случайными в цикле передачи. Движение животных может распространять клещей и вирус в новые очаги.

В пределах ареалов Ixodes ricinus и Ixodes persulcatus, основных переносчиков клещей европейских и дальневосточных плюс сибирских подтипов, соответственно, и дополнительно Ixodes ovatus и Haemaphysalis spp., которые являются переносчиками в Японии и Корее, соответственно, клещи локально распространены в защищенных микроместообитаниях с высокой влажностью и умеренными температурами и могут быть найдены на высоте до 2100 м. Исследования ландшафтной экологии охарактеризовали экотоны лесов для полей или лугов, невысоких лиственных деревьев и кустарников с толстым пологом как биотопы с высоким риском, которые коррелируют с очагами заболеваний человека. 166 Очаги передачи обычно очень стабильны, но подвержены изменениям в окружающей среде человека и, возможно, изменению климата. 167 В Центральной Европе случаи заболевания происходят с апреля по ноябрь, пик приходится на июнь и июль, а в октябре — вторичный рост. Изменение климата привело к резким изменениям в распределении видов Ixodes . клещевые векторы и передача КЭ. 168-171

Случаи заболевания возникают в основном среди взрослых в возрасте от 20 до 50 лет, с преобладанием мужчин, что отражает профессиональное воздействие в лесном хозяйстве и сельском хозяйстве. Тем не менее, дети, играющие на открытом воздухе, и люди с профессиональным опытом во время пеших прогулок, сбора ягод или грибов также могут подвергаться риску, в зависимости от местоположения и сезона.Однако риск для большинства людей с краткосрочным воздействием невелик. Среди американских солдат, дислоцированных в Центральной Европе, не было зарегистрировано ни одного случая заболевания, а уровень сероконверсии был низким (от 0,1% до 0,4%). 172 Болезнь Лупинг — это в основном редкое профессиональное заболевание ветеринаров, пастухов и мясников. 173

Вирус клещевого энцефалита устойчив при кислом pH, и потребление непастеризованного молока или молочных продуктов от инфицированных коз, овец или коров ранее составляло от 10% до 20% случаев в некоторых частях Центральной Европы.Было высказано предположение о том, что вирус Повассан может передаваться через сырые молочные продукты в Соединенных Штатах. 174 Убой или разделка инфицированных животных или мяса является основным путем передачи вируса людям, вызывающим заражение вирусом клещевого энцефалита, а также при вспышках вируса Alkhurma. 175 Инфекция также была передана от инфицированных клещей, перенесенных в домохозяйства на фомитах.

Помимо вируса клещевого энцефалита, I. ricinus также передает несколько видов Borrelia spp.ответственны за болезнь Лайма (а также Anaplasma phagocytophilum, Babesia microti, и несколько видов Rickettsia ), а также наблюдаются двойные инфекции клещей и людей. Однако в зонах повышенного риска болезнь Лайма встречается гораздо чаще, чем другие болезни. Это различие отражает низкую долю инфицированных вирусом клещей (от 0,1% до 5%) и 10-кратный более высокий уровень заражения клещами боррелиями в одном и том же месте. Это различие может быть результатом кратковременности виремии у животных-хозяев, которая дает возможность заражения клещами всего в течение нескольких дней; Напротив, стойкие боррелиозные инфекции грызунов повышают вероятность заражения клещами во время кормления.Аналогичная ситуация имеет место в Соединенных Штатах, где Ixodes scapularis передает болезнь Лайма, бабезиоз, анаплазмоз человека и генотип вируса Повассан, представленный вирусом оленьего клеща. 176 Однако клещи Ixodes cookei (основной переносчик вируса Повассан) и I. scapularis несколько различаются по диапазону хозяев, что может дополнительно ограничивать возможности пересечения циклов передачи вируса и боррели.

Наличие антител против вируса клещевого энцефалита у овец в Тунисе, Северная Африка | BMC Veterinary Research

  • 1.

    Куно Дж., Чанг Дж. Дж., Цучия КР, Карабацос Н., Кропп CB. Филогения рода Flavivirus. J Virol. 1998. 72: 73–83. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9420202.

  • 2.

    Süss J. Клещевой энцефалит 2010: Эпидемиология, зоны риска и штаммы вирусов в Европе и Азии — обзор. Клещи Tick Borne Dis. 2011; 2: 2–15. https://doi.org/10.1016/j.ttbdis.2010.10.007.

  • 3.

    Шаррель Р.Н., Аттуи Х., Бутенко А.М., Клегг Дж. С., Деубель В., Фролова Т.В. и др. Клещевые вирусные болезни, представляющие интерес для человека в Европе.Clin Microbiol Infect. 2004; 10: 1040–55. https://doi.org/10.1111/j.1469-0691.2004.01022.x.

  • 4.

    Beauté J, Spiteri G, Warns-Petit E, Zeller H, Клещевой энцефалит в Европе, 2012–2016 гг. Eur J Надзор за инфекциями, эпидемиологический контроль. 2012; 2018 (23): 1800201. https://doi.org/10.2807/1560-7917.ES.2018.23.45.1800201. .

  • 5.

    Süss J. Клещевой энцефалит в Европе и за ее пределами: эпидемиологическая ситуация по состоянию на 2007 г. Euro Surveill Eur Commun Dis Bull.2008; 13. 18916.

  • 6.

    Randolph SE. В какой степени изменение климата повлияло на недавнюю эпидемиологию клещевых болезней? Vet Parasitol. 2010; 167: 92–4. https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2009.09.011.

  • 7.

    Velay A, Solis M, Kack-Kack W., Gantner P, Maquart M, Martinot M, et al. Новая горячая точка клещевого энцефалита (КЭ): заметный рост случаев клещевого энцефалита во Франции в 2016 г. Клещи Tick Borne Dis. 2018; 9: 120–5.

    Артикул Google ученый

  • 8.

    de Graaf JA, Reimerink JHJ, Voorn GP, ​​bij de Vaate EA, de Vries A, Rockx B и др. Первый случай инфицирования человека вирусом клещевого энцефалита в Нидерландах, июль 2016 г. Евронадзор. 2016; 21. https://doi.org/10.2807/1560-7917.ES.2016.21.33.30318.

  • 9.

    Клаус К., Зиглер У., Калтофф Д., Хоффманн Б., Бир М. Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ) — данные о перекрестной реактивности и продолжительности жизни антител против вируса клещей в сыворотке крови животных. BMC Vet Res. 2014; 10: 78. https: // doi.org / 10.1186 / 1746-6148-10-78.

  • 10.

    Клаус К., Хёрюгель У., Хоффманн Б., Бир М. Инфекция, вызванная вирусом клещевого энцефалита (ВКЭ) у лошадей: клинические и лабораторные данные и эпидемиологические исследования. Vet Microbiol. 2013; 163: 368–72.

    CAS Статья Google ученый

  • 11.

    Имхофф М., Хагедорн П., Шульце И., Хелленбранд В., Пфеффер М., Нидриг М. Обзор. Стражи риска клещевого энцефалита. Клещи Tick Borne Dis.2015; 6: 592–600. https://doi.org/10.1016/j.ttbdis.2015.05.001.

  • 12.

    Кайзер Р. Клинико-эпидемиологический профиль клещевого энцефалита в южной Германии в 1994–1998 гг. Головной мозг. 1999; 122: 2067–78. https://doi.org/10.1093/brain/122.11.2067.

  • 13.

    Кайзер Р. Клещевой энцефалит. Заражение Dis Clin North Am. 2008; 22: 561–75. https://doi.org/10.1016/j.idc.2008.03.013.

  • 14.

    Пулккинен Л., Мясник С., Анастасина М. Вирус клещевого энцефалита: структурный вид.Вирусы. 2018; 10: 350. https://doi.org/10.3390/v10070350.

  • 15.

    Колларич Х. Справочный документ по вакцинам и вакцинации против клещевого энцефалита. Швейцария, позиционный документ Всемирной организации здравоохранения; 13 -е, март 2011 г. http://www.who.int/immunization/documents/positionpapers/en/index.html.

  • 16.

    Пфеффер М., Доблер Г. Вирус клещевого энцефалита у собак — это проблема? Векторы паразитов. 2011; 4:59. https://doi.org/10.1186/1756-3305-4-59.

  • 17.

    Rushton JO, Lecollinet S, Hubálek Z, Svobodová P, Lussy H, Nowotny N. Вирус клещевого энцефалита у лошадей, Австрия, 2011. Emerg Infect Dis. 2013; 19: 635–7. https://doi.org/10.3201/eid1904.121450.

  • 18.

    Клаус С., Циглер Ю., Хоффманн Д., Пресс Ф, Фаст С, Бир М. Антитела к вирусу клещевого энцефалита (ВКЭ) в сыворотках животных — встречаемость в козьих стадах в Германии, продолжительность жизни и способность вспоминать иммунологические информация по прошествии более шести лет.BMC Vet Res. 2019; 15: 399. https://doi.org/10.1186/s12917-019-2157-5.

  • 19.

    Шикутова С., Хорнок С., Хубалек З, Долежалкова И., Юржикова З, Рудольф И. Серологическое обследование домашних животных на вирусы клещевого энцефалита и бханья на северо-востоке Венгрии. Vet Microbiol. 2009; 135: 267–71. https://doi.org/10.1016/j.vetmic.2008.09.082.

  • 20.

    Клаус С., Бир М., Сайер Р., Шау Ю., Муг Ю., Хоффманн Б. и др. Козы и овцы как дозорные для вируса клещевого энцефалита (КЭ) — Эпидемиологические исследования в эндемичных и неэндемичных для вируса клещах районах Германии.Клещи Tick Borne Dis. 2012; 3: 27–37. https://doi.org/10.1016/j.ttbdis.2011.09.011.

  • 21.

    Салат Дж., Михалка А.Д., Михаю М., Модри Д., Рузек Д. Клещевой энцефалит у овец, Румыния. Emerg Infect Dis. 2017; 23: 2065–7. https://doi.org/10.3201/eid2312.170166.

  • 22.

    Ruzek D, Avšič upanc T., Borde J, Chrdle A, Eyer L, Karganova G, et al. Клещевой энцефалит в Европе и России: обзор патогенеза, клиники, терапии и вакцин. Antiviral Res.2019; 164: 23–51. https://doi.org/10.1016/j.antiviral.2019.01.014.

  • 23.

    Balogh Z, Ferenczi E, Szeles K, Stefanoff P, Gut W., Szomor KN, et al. Вспышка клещевого энцефалита в Венгрии из-за потребления сырого козьего молока. J Virol Methods. 2010; 163: 481–5. https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2009.10.003.

  • 24.

    Vene S, Haglund M, Vapalahti O, Lundkvist Å. Быстрый тест ингибирования флюоресцентного фокуса для обнаружения нейтрализующих антител к вирусу клещевого энцефалита.J Virol Methods. 1998. 73: 71–5. https://doi.org/10.1016/S0166-0934(98)00041-X.

  • 25.

    Zhioua E, Bouattour A, Hu CM, Gharbi M, Aeschliman A, Ginsberg HS, et al. Заражение Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae) Borrelia burgdorferi sensu lato в Северной Африке. J Med Entomol. 1999; 36: 216–8. https://doi.org/10.1093/jmedent/36.2.216.

  • 26.

    Younsi H, Postic D, Baranton G, Bouattour A. Высокая распространенность Borrelia lusitaniae среди клещей Ixodes ricinus в Тунисе.Eur J Epidemiol. 2001; 17: 53–6. https://doi.org/10.1023/A:1010928731281.

  • 27.

    Dsouli N, Younsi-Kabachii H, Postic D, Nouira S, Gern L, Bouattour A. Резервуарная роль ящерицы Psammodromus algirus в цикле передачи Borrelia burgdorferi sensu lato (Spirochaetia lato). J Med Entomol. 2006; 43: 737–42. https://doi.org/10.1603/0022-2585(2006)43[737:rrolpa visible2.0.co;2.

  • 28.

    M’ghirbi Y, Hurtado A, Brandika J, Khlif K, Ketata Z, Bouattour A.Молекулярное исследование паразитов Theileria и Babesia у крупного рогатого скота с примечанием о распространении клещей в Тунисе. Parasitol Res. 2008. 103: 435–42. https://doi.org/10.1007/s00436-008-0995-3.

  • 29.

    Sfar N, M’Ghirbi Y, Letaïef A, Parola P, Bouattour A, Raoult D. Первое сообщение о Rickettsia monacensis и Rickettsia helvetica из Туниса. Ann Trop Med Parasitol. 2008. 102: 561–4. https://doi.org/10.1179/136485908X311795.

  • 30.

    Zhioua E, Gern L., Aeschlimann A. Isolement d’un spirochète à partir d ’ Ixodes ricinus de Tunisie. Bull la Société Française Parasitol. 1989; 7: 107–10.

  • 31.

    Younsi H, Sarih M, Jouda F, Godfroid E, Gern L, Bouattour A, et al. Характеристика изолятов Borrelia lusitaniae , собранных в Тунисе и Марокко. J Clin Microbiol. 2005; 43: 1587–93. https://doi.org/10.1128/JCM.43.4.1587-1593.2005.

  • 32.

    Юнси Х., Фарес В., Черни С., Дахрауи К., Бархуми В., Наджар С. и др. Ixodes inopinatus и Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae) — симпатрические клещи в Северной Африке. J Med Entomol. 2019; 1–5. https://doi.org/10.1093/jme/tjz216.

  • 33.

    Бен Хассин Т., Де Массис Ф, Калистри П., Савини Дж., БелХадж Мохамед Б., Ранен А. и др. Первое обнаружение совместной циркуляции вирусов Западного Нила и Усуту у непарнокопытных на юго-западе Туниса. Transbound Emerg Dis. 2014; 61: 385–9. https://doi.org/10.1111/tbed.12259.

  • 34.

    Бен Хассин Т., Хаммами С., Эльгхул Х., Грам А., Бен Хассин Т., Хаммами С. и др.Обнаружение циркуляции вируса Западного Нила с помощью équidés dans le nord-ouest de la Tunisie. Bull la Soc Pathol Exot. 2011; 104: 266–71. https://doi.org/10.1007/s13149-011-0173-1.

  • 35.

    Rouatbi M, Gharbi M, Rjeibi MR, Ben Salem I, Akkari H, Lassoued N, et al. Влияние инфекции нематодой Haemonchus contortus (Strongylida: Trichostrongylidae) на гематологические, биохимические, клинические и репродуктивные признаки барана. Onderstepoort J Vet Res.2016; 83. https://doi.org/10.4102/ojvr.v83i1.1129.

  • 36.

    Ржеиби М.Р., Даргоут М.А., Рекик М., Амор Б., Сасси Л., Гарби М. Первая молекулярная идентификация и генетическая характеристика Theileria lestoquardi у овец в регионе Магриба. Transbound Emerg Dis. 2016; 63: 278–84. https://doi.org/10.1111/tbed.12271.

  • 37.

    Khamassi Khbou M, Romdhane R, Sassi L, Amami A, Rekik M, Benzarti M. Распространенность анти- Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis антитела у самок овец в Тунисе. Vet Med Sci. 2020. https://doi.org/10.1002/vms3.243.

  • 38.

    Sghaier S, Lorusso A, Portanti O, Marcacci M, Orsini M, Barbria ME, et al. Новый штамм вируса синего языка серотипа 3 в Тунисе, ноябрь 2016 г. Transbound Emerg Dis. 2017; 64: 709–15. https://doi.org/10.1111/tbed.12640.

  • 39.

    Rieille N, Klaus C, Hoffmann D, Péter O, Voordouw MJ. Козы как дозорные хозяева для выявления зон риска клещевого энцефалита в кантоне Вале, Швейцария.BMC Vet Res. 2017; 13: 217. https://doi.org/10.1186/s12917-017-1136-y.

  • 40.

    Клаус К., Хоффманн Б., Бир М., Мюллер В., Старк Б., Бадер В. и др. Распространенность клещевого энцефалита (КЭ) у животных, подвергшихся естественному воздействию ( Macaca sylvanus ) и овец, и распространенность вируса клещевого энцефалита у клещей в эндемичной зоне КЭ в Германии. Клещи Tick Borne Dis. 2010; 1: 141–4. https://doi.org/10.1016/j.ttbdis.2010.06.001.

  • 41.

    Gharbi M. Клещи пересекают Mare Nostrum, какие риски? Bull Acad Vet Fr.2020. https://doi.org/10.4267/2042/70868.

  • 42.

    Bouattour A, Darghouth MA, Daoud A. Распространение и экология клещей (Acari: Ixodidae), поражающих домашний скот в Тунисе: обзор полевых сборов за восьмой год. Parassitologia. 1999; 41 (Дополнение 1): 5–10. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/11071534.

  • 43.

    Jaenson TGT, Hjertqvist M, Bergström T, Lundkvist Å. Почему увеличивается число случаев клещевого энцефалита? Обзор ключевых факторов, вызывающих рост заболеваемости КЭ у людей в Швеции.Векторы паразитов. 2012; 5: 184. https://doi.org/10.1186/1756-3305-5-184.

  • 44.

    Клаус К., Гетманн Дж., Хоффманн Б., Циглер Ю., Хеллер М., Бир М. Заражение клещами среди птиц и распространенность патогенов среди клещей, собранных в разных местах Германии. Parasitol Res. 2016; 115: 2729–40. https://doi.org/10.1007/s00436-016-5022-5.

  • 45.

    Gao GF, Jiang WR, Hussain MH, Venugopal K, Gritsun TS, Reid HW, et al. Секвенирование и антигенные исследования норвежского вируса, изолированного от энцефаломиелитной овцы, подтверждают существование вируса лупингиблеза за пределами Великобритании и Ирландии.J Gen Virol. 1993; 74: 109–14. https://doi.org/10.1099/0022-1317-74-1-109.

  • 46.

    Dörrbecker B, Dobler G, Spiegel M, Hufert FT. Вирус клещевого энцефалита и иммунный ответ млекопитающего-хозяина. Travel Med Infect Dis. 2010; 8: 213–22. https://doi.org/10.1016/j.tmaid.2010.05.010.

  • 47.

    Hubálek Z, Rudolf I. Клещевые вирусы в Европе. Parasitol Res. 2012; 111: 9–36. https://doi.org/10.1007/s00436-012-2910-1.

  • 48.

    Randolph SE.Экология клещей: процессы и закономерности, лежащие в основе эпидемиологического риска, создаваемого иксодовыми клещами как переносчиками. Паразитология. 2004; 129 (Дополнение): S37-65. https://doi.org/10.1017/s0031182004004925.

  • 49.

    Лабуда М., Джонс Л.Д., Уильямс Т., Даниелова В., Наттолл П.А. Эффективная передача вируса клещевого энцефалита между клещами, питающимися совместно. J Med Entomol. 1993; 30: 295–9. https://doi.org/10.1093/jmedent/30.1.295.

  • 50.

    Ministère du commerce. Импорт овец из Румынии в Тунис в 2012 году.2012;: 1. http://www.commerce.gov.tn/Fr/actualites_7_55_D138. По состоянию на 28 сентября 2019 г.

  • 51.

    Брахми Р., Халди А. Анализ цепочки создания стоимости овечьего молока в Тунисе. Опции Méditerranéennes Ser A Mediterr Semin. 2016; 76: 71–6. http://om.ciheam.org/om/pdf/a115/00007256.pdf.

  • 52.

    Роландт С., Суин В., Риокре Ф., Ламорал С., Ван дер Хейден С., Ван дер Стеде Й и др. Автохтонный серопозитивный к вирусу клещевого энцефалита крупный рогатый скот в Бельгии: целевое серологическое обследование, основанное на оценке риска.Переносимые переносчиками зоонозы. 2014; 14: 640–7. https://doi.org/10.1089/vbz.2014.1576.

  • 53.

    Рид Л.Дж., Мюнч Х. Простой метод оценки пятидесятипроцентных конечных точек. Am J Epidemiol. 1938; 27: 493–7. https://doi.org/10.1093/oxfordjournals.aje.a118408.

  • 54.

    Walker AR, Bouattour A, Camicas J, Estrada-Pena A, Horac I, Latif AA, et al. Клещи домашних животных Африки: руководство по определению видов. Великобритания: отчеты Bioscience Эдинбург; 2003 г.

  • 55.

    QGIS DT. Система географической информации. Проект Фонда геопространственных данных с открытым исходным кодом. 2018; 3: 10.

  • 56.

    Шварц Д. Статистические методы использования медицинских и биологов. 4-е издание. Франция: Фламмарион; 1993.

  • Вирус клещевого энцефалита у собак — это проблема? | Паразиты и переносчики

  • 1.

    Чаррел Р.Н., Аттуи Х., Бутенко А.М., Клегг Дж. К., Дойбель В., Фролова Т.В.: Клещевые вирусные болезни, представляющие интерес для человека в Европе.Clin Microbiol Infect. 2004, 10 (12): 1040-1055. 10.1111 / j.1469-0691.2004.01022.x.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 2.

    Линдквист Л., Вапалахти О: Клещевой энцефалит. Ланцет. 2008, 371 (9627): 1861-1871. 10.1016 / S0140-6736 (08) 60800-4.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 3.

    Mansfield KL, Johnson N, Phipps LP, Stephenson JR, Fooks AR, Solomon T: вирус клещевого энцефалита — обзор зарождающегося зооноза.J Gen Virol. 2009, 90 (Pt 8): 1781-1794. 10.1099 / vir.0.011437-0.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 4.

    Heyman P, Cochez C, Hofhuis A, van der Giessen J, Sprong H, Porter SR: Очевидная и реальная опасность: клещевые болезни в Европе. Эксперт Rev Anti Infect Ther. 2010, 8 (1): 33-50. 10.1586 / eri.09.118.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 5.

    Süss J, Kahl O, Aspöck H, Hartelt K, Vaheri A, Oehme R, Hasle G, Dautel H, Kunz C, Kupreviciene N, Zimmermann HP, Atkinson B, Dobler G, Kutsar K, Heinz FX: клещевой энцефалит в эпоху всеобщей мобильности. Wien Med Wochenschr. 2010, 160 (3-4): 94-100.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 6.

    Тиль Х.Дж., Коллетт М.С., Гулд Э.А., Хайнц Ф.Х., Хоутон М., Мейерс G: Flaviviridae. Таксономия вирусов: классификация и номенклатура, Восьмой отчет Международного комитета по таксономии вирусов.Под редакцией: Fauquet CM, Mayo MA, Maniloff J, Desselberger U, Ball, LA. 2005, Elsevier Academic Press, Амстердам, Нидерланды, 981-998.

    Google ученый

  • 7.

    Ecker M, Allison SL, Meixner T, Heinz FX: Анализ последовательности и генетическая классификация вирусов клещевого энцефалита из Европы и Азии. J Gen Virol. 1999, 80 (Pt 1): 179-185.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 8.

    Грицун Т.С., Лашкевич В.А., Гулд Е.А.: Клещевой энцефалит. Antiviral Res. 2003, 57 (1-2): 129-146. 10.1016 / S0166-3542 (02) 00206-1.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 9.

    Gunther G, Haglund M: Клещевые энцефалопатии: эпидемиология, диагностика, лечение и профилактика. Препараты ЦНС. 2005, 19 (12): 1009-1032. 10.2165 / 00023210-200519120-00004.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 10.

    Pugliese A, Beltramo T, Torre D: Новые и вновь возникающие вирусные инфекции в Европе. Cell Biochem Funct. 2007, 25 (1): 1-13. 10.1002 / cbf.1342.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 11.

    Погодина В.В., Бочкова Н.Г., Карань Л.С., Фролова М.П., ​​Трухина А.Г., Маленко Г.В.: Сравнительный анализ вирулентности сибирского и дальневосточного подтипов вируса клещевого энцефалита. Vopr Virusol. 2004, 49 (6): 24-30.

    CAS PubMed Google ученый

  • 12.

    Грицун Т.С., Фролова Т.В., Жанков А.И., Арместо М., Тернер С.Л., Фролова М.П. Характеристика сибирского вируса, выделенного от пациента с прогрессирующим хроническим клещевым энцефалитом. J Virol. 2003, 77 (1): 25-36. 10.1128 / JVI.77.1.25-36.2003.

    PubMed Central CAS Статья PubMed Google ученый

  • 13.

    Попонникова Т.В.: Специфика клинико-эпидемиологических особенностей клещевого энцефалита в Западной Сибири.Int J Med Microbiol. 2006, 296 (Дополнение 40): 59-62. 10.1016 / j.ijmm.2006.01.023.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 14.

    Holzmann H: Диагностика клещевого энцефалита. Вакцина. 2003, 21 (Приложение 1): S36-40. 10.1016 / S0264-410X (02) 00819-8.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 15.

    Мошкин М.П., ​​Новиков Е.А., Ткачев С.Е., Власов В.В.: Эпидемиология клещевой вирусной инфекции: теоретические выводы и практическое значение для общественного здравоохранения.BioEssay. 2009, 31: 620-628. 10.1002 / bies.200800196.

    Артикул Google ученый

  • 16.

    Лабуда М., Козуч О., Зуффова Е., Елецкова Е., Хайлс Р.С., Наттолл П.А.: Передача вируса клещевого энцефалита между клещами, питающимися определенными иммунными естественными хозяевами-грызунами. Вирусология. 1997, 235 (1): 138-143. 10.1006 / viro.1997.8622.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 17.

    Лабуда М., Рэндольф С.Е.: Стратегия выживания вируса клещевого энцефалита: клеточная основа и детерминанты окружающей среды. Zentralbl Bakteriol. 1999, 289 (5-7): 513-524.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 18.

    Пфеффер М., Доблер Г.: Появление зоонозных арбовирусов в результате торговли животными и миграции. Векторы паразитов. 2010, 3: 35-10.1186 / 1756-3305-3-35.

    PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 19.

    Гресикова М., Секейова М., Ступалова С., Некас С. Эпидемия клещевого энцефалита, передаваемого из овечьего молока, в Словакии. Интервирология. 1975, 5 (1-2): 57-61.

    CAS PubMed Google ученый

  • 20.

    Верета Л.А., Скоробреха В.З., Николаева С.П., Александров В.И., Толстоногова В.И., Захарычева Т.А.: Передача вируса клещевого энцефалита через коровье молоко. Мед Паразитол (Москва). 1991, 3: 54-56.

    Google ученый

  • 21.

    Кербо Н., Донченко И., Куцарь К., Василенко В.: Вспышка клещевого энцефалита в Эстонии связана с сырым козьим молоком, май-июнь 2005 г. EuroSurveill. 2005, 10 (6): E0506232-

    Google ученый

  • 22.

    Holzmann H, Aberle SW, Stiasny K, Werner P, Mischak A, Zainer B: Клещевой энцефалит от употребления козьего сыра в горном регионе Австрии. Emerg Infect Dis. 2009, 15 (10): 1671-1673.

    PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 23.

    Криз Б., Бенеш С., Даниэль М.: Пищевая передача клещевого энцефалита в Чешской Республике (1997-2008 гг.). Epidemiol Microbiol Immunol. 2009, 58 (2): 98-103.

    CAS Google ученый

  • 24.

    Балог З., Ференци Э., Селес К., Стефанофф П., Гут В., Сомор К.Н.: Вспышка клещевого энцефалита в Венгрии из-за потребления сырого козьего молока. J Virol Methods. 2010, 163 (2): 481-485. 10.1016 / j.jviromet.2009.10.003.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 25.

    Randolph SE: Экология клещей: процессы и закономерности, лежащие в основе эпидемиологического риска, создаваемого иксодовыми клещами как переносчиками. Паразитология. 2004, 129 (Дополнение): S37-65. 10.1017 / S0031182004004925.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 26.

    Jääskeläinen AE, Tonteri E, Sironen T., Pakarinen L, Vaheri A, Vapalahti O: вирус клещевого энцефалита европейского подтипа у клещей Ixodes persulcatus. Emerg Infect Dis. 2011, 17 (2): 323-325.

    PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 27.

    Гресикова М., Калузова М. Биология вируса клещевого энцефалита. Acta Virol. 1997, 41 (2): 115-124.

    CAS PubMed Google ученый

  • 28.

    Криванец К., Копецки Дж., Томкова Е., Грубхоффер Л.: Выделение вируса клещевого энцефалита от клеща Ixodes hexagonus. Folia Parasitol (Прага). 1988, 35 (3): 273-276.

    CAS Google ученый

  • 29.

    Süss J: Эпидемиология и экология клещевого энцефалита, имеющие отношение к производству эффективных вакцин. Вакцина. 2003, 21 (Дополнение 1): С19-35.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 30.

    Коренберг Е.И., Ковалевский Ю.В.: Основные особенности экоэпидемиологии клещевого энцефалита в России. Zentralbl Bakteriol. 1999, 289 (5-7): 525-539.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 31.

    Süss J: Клещевой энцефалит в Европе и за ее пределами — эпидемиологическая ситуация по состоянию на 2007 год. EuroSurveill. 2008, 13 (26): pii: 18916-

    Google ученый

  • 32.

    Доносо Мантке О., Шадлер Р., Нидриг М.: Обследование случаев клещевого энцефалита в европейских странах. EuroSurveill. 2008, 13 (17): pii: 18848-

    Google ученый

  • 33.

    Фомсгаард А., Кристиансен С., Бодкер Р. Первое выявление клещевого энцефалита в Дании за пределами Борнхольма, август 2009 г. EuroSurveill. 2009, 14 (36): pii: 19325-

    Google ученый

  • 34.

    Herpe B, Schuffenecker I, Pillot J, Malvy D, Clouzeau B, Bui N: клещевой энцефалит, юго-запад Франции. Emerg Infect Dis. 2007, 13 (7): 1114-1116.

    PubMed Central PubMed Google ученый

  • 35.

    Павлиду В., Герой С., Диза Е., Антониадис А., Папа А.: Эпидемиологическое исследование вируса клещевого энцефалита в северной Греции. Vector Borne Zoonotic Dis. 2007, 7 (4): 611-615. 10.1089 / vbz.2007.0107.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 36.

    Д’Агаро П., Мартинелли Е., Бургнич П., Нацци Ф., Дель Фаббро С., Иоб А. Распространенность вируса клещевого энцефалита у Ixodes ricinus из нового эндемичного района Северо-Восточной Италии.Med Virol. 2009, 81 (2): 309-316.

    Артикул Google ученый

  • 37.

    Skarpaas T, Ljøstad U, Sundøy A: Первые случаи клещевого энцефалита у людей, Норвегия. Emerg Infect Dis. 2004, 10 (12): 2241-2243.

    PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 38.

    Кунц C: вакцинация против клещевого энцефалита и опыт Австрии. Вакцина. 2003, 21 (Дополнение 1): С50-55.10.1016 / S0264-410X (02) 00813-7.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 39.

    Lindhe KE, Meldgaard DS, Jensen PM, Houser GA, Berendt M: Распространенность антител к вирусу клещевого энцефалита у собак из Дании. Acta Vet Scand. 2009, 51: 56-10.1186 / 1751-0147-51-56.

    PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 40.

    Sikutova S, Hornok S, Hubalek Z, Dolezalkova I, Juricova Z, Rudolf I. Серологическое обследование домашних животных на вирусы клещевого энцефалита и Bhanja на северо-востоке Венгрии.Vet Microbiol. 2009, 135 (3-4): 267-271. 10.1016 / j.vetmic.2008.09.082.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 41.

    Beugnet F, Marie JL: Новые передаваемые членистоногими болезни домашних животных в Европе. Vet Parasitol. 2009, 163 (4): 298-305. 10.1016 / j.vetpar.2009.03.028.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 42.

    Leschnik MW, Kirzt GC, Thalhammer JG: Клещевой энцефалит (КЭ) у собак.Internatl J Med Microbiol. 2002, 291 (Дополнение 33): 66-69. 10.1016 / S1438-4221 (02) 80014-5.

    Артикул Google ученый

  • 43.

    Guglielmone AA, Robbins RG, Apanaskevich DA, Petney TN, Estrada-Pena A, Horak IG, Shao R, Barker SC: Argasidae, Ixodidae и Nuttalliellidae (Acari: Ixodida) мира: список действительные названия видов. Zootaxa. 2010, 2528: 1-28.

    Google ученый

  • 44.

    Драйден М.В., Пейн, Пенсильвания: Биология и борьба с клещами, поражающими собак и кошек в Северной Америке. Vet Ther. 2004, 5 (2): 139-154.

    PubMed Google ученый

  • 45.

    Беррада З.Л., Телфорд С.Р .: Бремя клещевых инфекций среди американских домашних животных. Темы Compan Animal Med. 2009, 24 (4): 175-181. 10.1053 / j.tcam.2009.06.005.

    Артикул Google ученый

  • 46.

    Szabó MPJ, Cunha TM, Pinter A, Vicentini F: Клещи (Acari: Ixodidae), связанные с домашними собаками в регионе Франка, Сан-Паулу, Бразилия. Exp Appl Acarol. 2001, 25: 909-916.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 47.

    Дантас-Торрес F. Клещи на домашних животных в Пернамбуку, северо-восток Бразилии. Rev Bras Parasitol Vet Jaboticabl. 2009, 18 (3): 22-28.

    Артикул Google ученый

  • 48.

    Brackney DE, Nofchissey RA, Fitzpatrick KA, Brown I.K, Ebel GD: Стабильная распространенность вируса Повассан в Ixodes scapularis в центре Северного Висконсина. Am J Trop Med Hyg. 2008, 79 (6): 971-973.

    PubMed Google ученый

  • 49.

    Main AJ, Carey AB, Downs WG: вирус Powassan у Ixodes cookei и Mustelidae в Новой Англии. J Wildl Dis. 1979, 15 (4): 585-591.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 50.

    Такашима I, Морита К., Чиба М., Хаясака Д., Сато Т., Такедзава С., Игараси А., Карива Х., Йошимацу К., Арикава Дж., Хашимото Н.: случай клещевого энцефалита в Японии и выделение вируса. J Clin Microbiol. 1997, 35 (8): 1943-1947.

    PubMed Central CAS PubMed Google ученый

  • 51.

    Аноним: Собачьи трансмиссивные болезни. (CVBD, по состоянию на 10 декабря th 2010, [http://www.cvbd.org/4187.0.html]

  • 52.

    Bröker M, Gniel D: Новые очаги вируса клещевого энцефалита в Европе: последствия для путешественников из-за границы. Travel Med Infect Dis. 2003, 1 (3): 181-184.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 53.

    Петри Э, Гниель Д., Зент О: Тенденции клещевого энцефалита (КЭ) в эпидемиологии и текущем и будущем лечении. Travel Med Infect Dis. 2010, 8 (4): 233-245. 10.1016 / j.tmaid.2010.08.001.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 54.

    Кунце У .: Нужна ли туристическая вакцинация против клещевого энцефалита ?. Travel Med Infect Dis. 2008, 6 (6): 380-383. 10.1016 / j.tmaid.2008.06.004.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 55.

    Грейсикова М., Вайднерова К., Носек Дж., Райчани Дж .: Экспериментальная патогенность вируса клещевого энцефалита для собак. Acta Virol (Прага). 1972, 16: 336-340.

    Google ученый

  • 56.

    Wandeler A, Steck F, Fankhauser R, Kammermann B, Gresikova M, Blascovic D: Isolierung des Virus der zentraleuropäischen Zeckenenzephalitis in der Schweiz. Path Microbiol. 1972, 38: 258-270. [на немецком языке]

    CAS Google ученый

  • 57.

    Kritz G, Leschnik M, Leidinger E: Ixodes ricinus: Gemeingefährlich für Hundes !. Kleintierpraxis. 2001, 46: 151-160. [на немецком языке]

    Google ученый

  • 58.

    Reiner B, Fischer A: Frühsommer-Meningoenzephalitis (FSME) beim Hund в Германии: Zwei Fallberichte. Kleintierpraxis. 1998, 43: 255-269. [на немецком языке]

    Google ученый

  • 59.

    Klimes J, Juricova Z, Literak I, Schanilec P, Trachta E, Silva E: Распространенность антител к клещевому энцефалиту и флавивирусам Западного Нила и клинические признаки клещевого энцефалита у собак в Чешской Республике. Vet Rec. 2001, 148: 17-20.10.1136 / vr.148.1.17.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 60.

    Tipold A, Fatzer R, Holzmann H: Zentraleuropäische Zeckenenzephalitis beim Hund. Kleintierpraxis. 1993, 38: 619-628. [на немецком языке]

    Google ученый

  • 61.

    Stadtbäumer K, Leschnik MW, Nell B: Клещевой энцефалит как возможная причина неврита зрительного нерва у собак. Вет офтальмол.2004, 7 (4): 271-277.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 62.

    Schwaiger M, Cassinotti P: Разработка количественного анализа RT-PCR в реальном времени с внутренним контролем для лабораторного обнаружения РНК вируса клещевого энцефалита (TBEV). J Clin Virol. 2003, 27 (2): 136-45. 10.1016 / S1386-6532 (02) 00168-3.

    CAS Статья PubMed Google ученый

  • 63.

    Weissenböck H, Сухи A, Holzmann H: Клещевой энцефалит у собак: невропатологические находки и распределение антигена. Acta Neuropathol. 1998, 95: 361-366.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 64.

    Müller W: FSME Seroprävalenz beim Hund в Германии. Тезисы на 9-й конференции InnLab в Мюнхене 6-8 апреля 2000 2000 г. (доступ 10 декабря 2010 г. [на немецком языке], [http://www.alomed.de/DI_innlab.htm]

  • 65.

    Weissenböck H, Holzman H: Immunhistologischer Nachweis der Frühsommer-Meningoencephalitis beim Hund in Österreich. Wien Tierärztl Mschr. 1997, 84: 34-38. [на немецком языке]

    Google ученый

  • 66.

    Kritz G: FSME-Infektion in einer österreichischen Hundepopulation. Дисс. Вет. Med. 1999, Вена, [на немецком языке]

    Google ученый

  • 67.

    Драйден М.В.: Борьба с блохами и клещами в 21 веке: проблемы и возможности.Vet Dermatol. 2009, 20: 435-440. 10.1111 / j.1365-3164.2009.00838.x.

    Артикул PubMed Google ученый

  • 68.

    Беррада З.Л., Телфорд С.Р .: Бремя клещевых инфекций среди американских домашних животных. Темы Companion Animal Med. 2009, 24 (4): 175-181. 10.1053 / j.tcam.2009.06.005.

    Артикул Google ученый

  • 69.

    Клаус К., Хоффманн Б., Муг Ю., Шау Ю., Бир М., Зюсс Дж .: Можно ли использовать коз в качестве дозорных для клещевого энцефалита (КЭ) в неэндемичных районах? Экспериментальные исследования и эпизоотологические наблюдения.Berl Münch Tierärztl Wochenschr. 2010, 123 (11-12): 441-5.

    PubMed Google ученый

  • 70.

    Зильбер Л.А., Соловьев В.Д .: Дальневосточный клещевой весенне-летний (весенний) энцефалит. Am Rev Sov Med. 1946, 5 (Spec Suppl): 1-80.

    Google ученый

  • 71.

    Libiková H: Энцефалиты природного очага в Чехословакии. 1956 г., диссертация, Институт вирусологии, Братислава, цитируется по Грейсиковой, 1972 г.,

    Google ученый

  • 72.

    Эрнек Э., Шкода Р. Экспериментальная патогенность вируса клещевого энцефалита для золотых хомяков (Mesocricetus auratus Waterhouse 1839) и лисиц (Vulpes vulpes, Linné 1758). Vet Cas. 1958, 4: 334- [на словацком языке]

    Google ученый

  • 73.

    Альбрехт П. Сравнительная морфология и экспериментальный патогенез инфекций, вызванных клещевым энцефалитом и вирусом восточного энцефаломиелита лошадей (EEE). 1959, диссертация, Институт вирусологии, Братислава, цитируется по Gresikova 1972

    Google ученый

  • 74.

    Radda A, Hoffmann H, Kunz C: Виремия у некоторых европейских плотоядных животных после заражения вирусом клещевого энцефалита (КЭ) клещами. Zbl Bakt I Orig. 1969, 209 (4): 464-469.

    CAS Google ученый

  • 75.

    Lindblad G: Случай клещевого энцефалита у собаки. Medlemsblad for Sveriges veterinärforbund. 1960, 12: 416-7. [на шведском языке]

    Google ученый

  • 76.

    Грейсикова М., Секеева М., Вайднерова К., Бласкович Д., Стек Ф., Ванделер А. Выделение вируса клещевого энцефалита из мозга больной собаки в Швейцарии. Acta Virol (Прага). 1972 г., 16: 88-

    Google ученый

  • 77.

    Ytterberg U, Bjöersdorff A: TBE hos hund — en fallbeskriving. Свенск Вет Тидн. 2002, 54 (1): 5-7. [на шведском языке]

    Google ученый

  • 78.

    Åblad B: TBE hos entvåårig hund i Västra Gätaland. Свенск Вет Тидн. 2007, 59 (13): 21-23. [на шведском языке]

    Google ученый

  • 79.

    Джеймс К.: Fästingburen encefalit (TBE) hos hund. 2008, Bla Stjärnans Djursjukhus, Göteborg, 1-20. [на шведском языке]

    Google ученый

  • 80.

    Zanoni M, Ortolani DB, Bonilauri P, Gelmetti D, Fabbi M, Cordioli P, Alborali LG: Encefalite da zecche in un cane.2009, XI Национальный конгресс S.I.Di.L.V. Парма, 52-53. [на итальянском языке]

    Google ученый

  • 81.

    Уоттл O: Клещевой энцефалит, вирусная инфекция hos hund. Fördjupninsarbete, Vet. Med. Fakulteten, SLU. 1992, [на шведском языке]

    Google ученый

  • 82.

    Csángó PA, Blakstad E, Kirtz GC, Pedersen JE, Czettel B: Клещевой энцефалит на юге Норвегии. Emerg Infect Dis.2004, 10 (3): 533-534.

    PubMed Central Статья PubMed Google ученый

  • 83.

    Райнер Б., Грасмюк С., Штеффен Ф, Джурик Н., Шиндлер Т., Мюллер В., Фишер А. Распространенность КЭ в сыворотке и спинномозговой жидкости собак с воспалительными и невоспалительными заболеваниями ЦНС. Int J Med Microbiol. 2002, 291 (Дополнение 33): 234-10.1016 / S1438-4221 (02) 80069-8.

    Артикул Google ученый

  • 84.

    Roelandt S: CODA / CERVA / VAR, Groeselenberg 99, B-1180. 2010 г., Брюссель, Бельгия. Личное общение

    Google ученый

  • Границы | Обнаружение антител против вируса клещевого энцефалита и других флавивирусов в зоологической коллекции в Словении

    Введение

    Зоопарки — это районы, где различные экзотические виды животных обитают в непосредственной близости, обычно в контакте с дикими животными, а также с людьми (смотрители зоопарка и посетители).Мониторинг инфекционных заболеваний — одна из важнейших частей ветеринарной помощи в зоологических коллекциях, позволяющая обнаруживать возможные новые патогены и обеспечивать безопасность животных и посетителей. Смесь различных хозяев, резервуаров и патогенов может использоваться как дозорный для скрининга возникающих инфекционных заболеваний (1–3). Клещевой энцефалит (КЭ) — одно из самых серьезных флавивирусных заболеваний человека в Европе и Азии. Возбудитель вируса клещевого энцефалита (ВКЭ) имеет положительный геном одноцепочечной РНК и является членом группы клещевых флавивирусов (род Flavivirus , семейство Flaviviridae ) (4, 5).ВКЭ передается при укусе инфицированного клеща или, в редких случаях, через сырые молочные продукты от инфицированных млекопитающих (6). Вирус циркулирует между клещами-переносчиками и некоторыми их хозяевами, в основном оленями и мелкими млекопитающими, такими как грызуны и насекомоядные, в то время как только мелкие млекопитающие считаются компетентными резервуарами вируса (5). В Европе КЭ — одна из самых распространенных флавивирусных инфекций центральной нервной системы, эндемичная для нескольких стран. Словения входит в число европейских стран с самыми высокими показателями заболеваемости КЭ (8.1–18,6 случаев на 100 000 населения за последнее десятилетие) (7). Накопленные данные подчеркивают растущий потенциал ВКЭ, способы отбора вариантов вируса, адаптации к клещевым переносчикам и грызунам-хозяевам с возможными серьезными последствиями для клинического заболевания. TBEV имеет огромное географическое распространение, включая как минимум 34 страны (8). ВКЭ — самый важный возбудитель арбовирусной инфекции в Европе, вызывающий неврологические симптомы. Заболеваемость этой болезнью значительно возросла за последние десятилетия, и тем временем наблюдаются некоторые изменения в пространственном распределении случаев КЭ.Поэтому важно распознавать распространение эндемичных территорий, применять профилактические меры. Молекулярные результаты показывают, что вирус может обнаруживаться в органах грызунов в течение более длительного периода времени, что указывает на длительное заражение вирусом грызунов-хозяев. Таким образом, грызунов можно использовать в качестве полезного индикатора циркуляции ВКЭ в районе (9). Некоторые арбовирусы из семейства Flaviviridae — , например, TBEV — присутствуют в Словении в течение многих лет (10). Другие вирусы, такие как вирус Западного Нила (WNV) и вирус Усуту (USUV), были представлены только недавно (11).Целью этого исследования был скрининг антител против вируса клещевого энцефалита у животных зоопарка и на основе его перекрестной реактивности выявление некоторых других возможных флавивирусов (WNV, USUV).

    Материалы и методы

    Забор крови и серологическое исследование

    Исследование проводилось в зоопарке Любляны, который является единственной крупной коллекцией животных зоопарка в Словении. С 2006 по 2018 год здесь проживало от 480 до 560 животных, принадлежащих к 130–160 видам. В те годы все образцы, полученные в результате обычных клинических исследований, хранились и замораживались.Все клинические процедуры выполнялись в соответствии со стандартными операционными протоколами (СОП) с учетом безопасности человека и животных. В общей сложности 874 образца сыворотки 96 видов животных были протестированы на антитела к TBEV с помощью иммуноферментных анализов (ELISA, EIA TBEV Ig, TestLine Clinical Diagnostic, Брно, Чешская Республика). Обследование проводилось в соответствии с инструкциями производителя. Все ELISA-положительные образцы были подтверждены тестом на нейтрализацию вируса (VNT) при микромодификации с витальным окрашиванием по методу, описанному ранее (12).Вкратце, 100 мкл рабочего разведения вируса смешивали и инкубировали с равной частью тестируемой сыворотки и добавляли к той же части суспензии клеточной культуры. Планшеты инкубировали в 5% CO 2 при 37 ° C. VNT выполняли с TBEV (штамм Hypr) и одновременно с WNV (WNV Strain Line 2) и USUV (австрийский штамм). Вирусы выращивали на мозге сосущих лабораторных мышей в возрасте 1-3 дней. Суспензию линии клеток почек свиньи (PS) использовали в качестве клеточного субстрата для TBEV VNT.Суспензию клеточной линии почки обезьяны (CV-1) использовали в качестве клеточного субстрата для WNV VNT и USUV VNT. Рабочее разведение для обеих клеточных линий составляло 600000 клеток / мл. В тесты был включен контроль токсичности сыворотки, а также специфические положительные и отрицательные контрольные сыворотки. Результатом VNT является титр нейтрализации вируса (VN), который является обратной величиной самого высокого разведения образца, которое все еще способно нейтрализовать цитопатический эффект более чем на 50% (TCID50). Пробы были отмечены как положительные, если титр VN> 4 (12).

    Результаты

    Антитела к ВКЭ были обнаружены с помощью ELISA у 3,9% (34/874) животных зоопарка, 4% (30/753) у млекопитающих, 5% (4/86) у птиц и 0% у рептилий ( n ). = 34) и земноводных ( n = 1). Антитела к ВКЭ были обнаружены методом VNT в 10 образцах сыворотки (один горный козел, четыре домашних овцы, четыре муфлона и одна рыжая лисица). Антитела к WNV и USUV были обнаружены с помощью VNT у сипухи ( Tyto alba ) с титром 128, положительным для обоих вирусов.Остальные образцы были отрицательными. Результаты представлены в таблице 1.

    Таблица 1 . Результаты серологического исследования животных зоопарка на наличие антител к вирусу клещевого энцефалита (ВКЭ), проверенных с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) с подтверждением положительных проб тестом нейтрализации вируса (ВНТ).

    Обсуждение

    Флавивирусы становятся все более важными патогенами в Европе за последние несколько десятилетий. ВКЭ, вызывающий инфекции центральной нервной системы у людей, вызывает проблемы со здоровьем в Европе и Азии.Этот вирус в основном передается через укусы клещей, однако сырые молочные продукты также могут быть источником инфекции (13, 14). В 2018 г. в странах ЕС было зарегистрировано 3092 случая КЭ (15). В последние годы КЭ возник в ранее не пораженных регионах (например, в Нидерландах), а количество случаев увеличилось вдвое в Словакии, Литве и Хорватии (15). Из-за отсутствия эффективного лечения клещевого энцефалита иммунизация против клещевого энцефалита и предотвращение укусов клещей имеют ключевое значение для предотвращения этой инфекции (16).

    Заболеваемость ВКЭ в Словении отслеживалась с помощью ОТ-ПЦР в период с 2005 по 2006 год у клещей и людей (9). Общая распространенность ВКЭ среди 4777 клещей, собранных за эти 2 года, составила 0,47%. В аналогичном исследовании, проведенном в соседней Хорватии, частота ВКЭ составила 1,1% у клещей и 1,6% — в образцах селезенки дикой лисы ( Vulpes vulpes ) и благородного оленя ( Cervus elpahus ) (17). Кроме того, частота инфицирования клещей, обнаруженная с помощью ОТ-ПЦР, достоверно коррелировала с заболеваемостью клещами в отдельных районах.Метод секвенирования подтвердил генетическую корреляцию между ВКЭ у собранных клещей и словенскими пациентами, инфицированными ВКЭ. Исследование, проведенное на грызунах в тот же период, показало, что в различных регионах Словении с помощью иммунофлуоресцентного анализа обнаруживается в среднем 5,9% антител против вируса клещевого энцефалита (9). Результаты варьировались в зависимости от вида грызунов и региона отлова. Общая распространенность была сопоставима с результатами нашего исследования (3,9%). Удивительно, но распространенность 0% была обнаружена в 82 образцах от трех видов грызунов ( Myodes glareolus, A.flavicollis и A. sylvaticus ) в нашем исследовании. Это можно объяснить высокой корреляцией заболеваемости в зависимости от выбранных территорий, упомянутых в исследованиях выше. Это может также свидетельствовать о том, что высокая изменчивость видов-дозорных увеличивает возможность идентификации целевого патогена. В аналогичном исследовании на грызунах, проведенном в Швейцарии в 2006 и 2007 годах, сыворотки 333 грызунов были исследованы с очень похожей общей распространенностью 3,9%. В некоторых регионах распространенность достигла 9.9%, тогда как у других распространенность была 0%, как и в нашем исследовании. Образцы сыворотки от 1014 кабанов и 758 косуль были проверены на антитела к флавивирусу с использованием метода конкурентного ELISA (cELISA) в период с 2009 по 2014 год во Франции (18). Значительно более высокая заболеваемость флавивирусами была обнаружена у кабанов (5,6%), чем у косуль (2,1%). Распределение также было выше, чем ожидалось, по сравнению с человеческими случаями. Это открытие подтвердило потенциальную пользу дикой природы для мониторинга инфекционных заболеваний.В Чешской Республике образцы сыворотки 133 животных 69 различных видов животных из пяти зоологических коллекций, расположенных в разных регионах, были оценены на предмет выявления антител к ВКЭ (19). Два копытных из одного зоопарка оказались серопозитивными в районе, эндемичном по ВКЭ. Это говорит о том, что мониторинг инфекционных заболеваний, эндемичных в проверенных районах, играет решающую роль в выборе надлежащей горячей точки для размещения дозорных животных, чтобы повысить вероятность перехвата патогенов. Этот момент также был подчеркнут в другом исследовании (1).Результаты нашего исследования также показали, что 9 из 10 TBEV-положительных образцов сыворотки в анализе VNT были обнаружены у альпийских горных козлов, домашних овец и муфлонов, которые тесно связаны между собой. Скрининг инфекционных болезней с зоонозным потенциалом является важным мероприятием для профилактики здоровья людей и животных. Вирус клещевого энцефалита является эндемическим заболеванием в Словении, тогда как вирус Западного Нила и вирус Усуту являются патогенами, которые только совсем недавно были занесены в словенский регион (11).В нашем исследовании образцы только одного животного, сипухи ( Tyto alba ), были положительными на антитела к ВЗН, а также к УННВ. Похоже, что обоими вирусами было одновременное заражение, потому что у обоих вирусов был высокий титр VNT (128). Более того, положительный образец был собран осенью 2018 года, когда оба вируса (WNV и USUV) были завезены в Словению, причем первые подтвержденные случаи были зарегистрированы у людей и животных. Хотя известно, что USUV, в частности, вызывает клинические заболевания и смерть у чувствительных птиц, таких как совы, положительная сипуха не показала клинических признаков и была все еще жива через 26 месяцев после сбора положительного образца.Кроме того, при рассмотрении динамики серологической распространенности образцы в нашем исследовании были собраны с 2006 по 2018 год, при этом 33 из 34 положительных образцов на КЭ были обнаружены с 2014 по 2018 год. За последние 2 года нашего исследования 24 образца дали положительный результат. , что может свидетельствовать о распространении эндемической инфекции в районы, ранее не подвергавшиеся воздействию вируса клещевого энцефалита. Последующее сравнительное исследование грызунов и животных зоопарка в ближайшем будущем могло бы подчеркнуть полезность и важность различных дозорных животных для мониторинга зоонозных заболеваний.Расхождение между некоторыми нашими результатами ELISA на TBEV и результатами VNT на TBEV может быть результатом небольшого объема образца, что является распространенной проблемой при получении образцов во время рутинных клинических процедур. Присутствие WNV в Европе известно на протяжении десятилетий. Передача вируса связана с орнитофильными комарами. Дикие птицы — важный естественный усиливающий хозяин для вируса, тогда как люди, лошади и некоторые другие млекопитающие считаются тупиковыми хозяевами. Серологические исследования певчих птиц в Словении показали 3.7% -ная распространенность антител к ВЗН в отобранных образцах, обнаруженных с помощью методов непрямой иммунофлуоресценции (20–22). В ходе ПЦР-исследования образцов хищных птиц и сов из Словении, собранных в период с 1995 по 2013 год, не было обнаружено ни одной положительной птицы (22). В недавнем исследовании из Словении пул Culex sp. В 2018 г. была обнаружена положительная реакция на комаров с помощью ОТ-ПЦР, а в 2017 и 2019 гг. — отрицательная. Дозорное исследование образцов сыворотки собак подтвердило наличие антител к ВЗН с помощью непрямого иммунофлуоресцентного исследования в 1.8 и 4,3% проб, собранных в 2017 и 2018 годах соответственно (23).

    Принимая во внимание зоонозный потенциал вышеупомянутых вирусов, регулярный надзор и регулярный скрининг зоологических коллекций могут быть вариантом для улучшения видов животных, находящихся в ведении дозорного эпиднадзора. Пригодность зоологических коллекций в качестве эпидемиологических станций обсуждалась в прошлом (1–3). Виды животных-дозорных будут восприимчивы к болезням, с быстрой сероконверсией, и будут по-прежнему находиться под наблюдением контролирующих органов (1).Животные зоопарка охватывают широкий спектр различных видов с различной восприимчивостью к болезням. В случае WNV и USUV главными хозяевами являются дикие птицы, а главными переносчиками — комары. Однако WNV также был изолирован от других млекопитающих; например, Apodemus flavicollis, Clethrionomys glaerolis , сторожевые мыши и хомяки, Lepus europaeus , верблюды, лошади, собаки и люди в энзоотических очагах (24). Это говорит о том, что выбор подходящей горячей точки для размещения животных-дозорных имеет решающее значение для увеличения вероятности перехвата патогенов (1).

    Скрининг USUV у птиц из четырех различных зоологических коллекций в Швейцарии, Австрии и Венгрии показал разные результаты в зависимости от географического положения и связанной с этим смертности. В Швейцарии и Вене в трех разных зоопарках была выявлена ​​распространенность 5–9% антител к USUV, тогда как все животные, протестированные в венгерском зоопарке, были серологически отрицательными (25). Несмотря на то, что возбудители КЭ, ЛЗН и УЗНВ очень близки, их динамика и, следовательно, дежурный целевой скрининг сильно различаются.Клещи являются переносчиками ВКЭ. Типичны их региональная распространенность, а также устойчивая эпидемиологическая ситуация в определенных локусах. USUV и WNV, передаваемые комарами, вызвали периодические вспышки с беспрецедентной динамикой, вероятно, связанные с изменением климата и другими факторами, и медленным внедрением в такие страны, как Словения, где обе болезни не были эндемичными. Эти особые условия создают уникальные условия, такие как зоопарки с различными животными с известными историями, хорошее ветеринарное обслуживание и установленный мониторинг инфекционных заболеваний во всех таксонах, подходящие эпидемиологические станции для скрининга появляющихся патогенов.В недавнем исследовании 120 различных видов млекопитающих из 10 различных зоологических коллекций Испании были оценены на предмет воздействия флавивирусов в период с 2002 по 2019 год. При использовании аналогичных методов присутствие флавивируса было обнаружено в 3,3% исследованных образцов (3).

    Наше исследование было основано на простом серологическом исследовании наличия ВКЭ у животных зоопарка. Однако, учитывая наши результаты и представленные литературные данные, следует рассмотреть дальнейшие возможные выводы и будущие исследования, влияющие на здоровье человека и животных, в частности роль зоопарков как возможных эпидемиологических станций.

    Заявление о доступности данных

    Оригинальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью / дополнительные материалы, дальнейшие запросы можно направлять соответствующим авторам.

    Заявление об этике

    Исследование на животных было рассмотрено и одобрено. Все образцы были собраны в качестве вторичного интереса сотрудниками зоопарка во время клинических процедур, операций и ежегодных медицинских осмотров или у грызунов, включенных в программу борьбы с вредителями. Не было выдано никакого этического одобрения.Все процедуры с животными были одобрены Национальным этическим комитетом и Администрацией Республики Словения по безопасности пищевых продуктов, ветеринарии и защите растений (номер разрешения 34401-7-2016-5, 31 января 2017 г.). Уход и лечение животных проводились в соответствии с институциональными руководящими принципами и международными законами и политиками (Директива 2010/63 / ЕС о защите животных, используемых в научных целях).

    Авторские взносы

    PK отвечал за концептуализацию, исследование, обработку данных, подготовку первоначального черновика, а также за написание-рецензирование и редактирование.JR отвечал за концептуализацию, подготовку первоначального черновика, проверку и редактирование, расследование и надзор. МК занималась программным обеспечением, администрированием проектов и визуализацией. PP отвечал за методологию, исследования и обработку данных. TA-Z занималась концептуализацией, проверкой, разработкой программного обеспечения, а также написанием, рецензированием и редактированием. Е.Б. отвечал за концептуализацию, методологию, программное обеспечение, ресурсы, подготовку первоначального проекта, проверку и редактирование, надзор и привлечение финансирования.KS участвовал в методологии, валидации, формальном анализе, а также в написании-рецензировании и редактировании. Все авторы прочитали и одобрили окончательную версию рукописи.

    Финансирование

    Это исследование было поддержано внутренним грантом Университета ветеринарных наук Брно (FVHE / Literák / ITA2020).

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Благодарности

    Мы благодарны руководству и смотрителям зоопарка Любляны за их поддержку этого исследования и их помощь в сборе образцов. Мы также хотели бы выразить нашу благодарность Хане Зелена, которая отвечала за тест на нейтрализацию вируса, который проводился в Национальной справочной лаборатории по арбовирусам Института общественного здравоохранения Остравы, Чешская Республика. Мы хотели бы поблагодарить Словенское исследовательское агентство (P4-0092 на факультете ветеринарной медицины) за их помощь.

    Сокращения

    с. s, малая выборка; ТС, токсичная сыворотка.

    Список литературы

    1. Комар Н. Эпиднадзор за вирусом Западного Нила с использованием сторожевых птиц. Ann N Y Acad Sci. (2001) 951: 58–73. DOI: 10.1111 / j.1749-6632.2001.tb02685.x

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    3. Кабальеро-Гомес Дж., Кано-Терриза Д., Леколлине С., Карбонелл М.Д., Мартинес-Вальверде Р., Мартинес-Невадо Е. и др. Доказательства воздействия зоонозных флавирусов на млекопитающих в зоопарках Испании и их потенциальную роль в качестве дозорных видов. Vet Microbiol. (2020) 247: 108763. DOI: 10.1016 / j.vetmic.2020.108763

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    4. Grard G, Moureau G, Charrel RN, Lemasson JJ, Gonzalez JP, Gallian P, et al. Генетическая характеристика клещевых флавивирусов: новый взгляд на эволюцию, патогенетические детерминанты и таксономию. Вирусология. (2007) 361: 80–92. DOI: 10.1016 / j.virol.2006.09.015

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    5.Мэнсфилд К.Л., Джонсон Н., Фиппс Л.П., Стивенсон Дж. Р., Фукс А.Р., Соломон Т. Вирус клещевого энцефалита — обзор зарождающегося зооноза. J Gen Virol. (2009) 90: 1781–94. DOI: 10.1099 / vir.0.011437-0

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    6. Хольцманн Х., Аберле С.В., Стиасны К., Вернер П., Миссчак А., Зайнер Б., Нетцер М. и др. Клещевой энцефалит от употребления козьего сыра в горном регионе Австрии. Emerg Infect Dis. (2009) 15: 1671–3.DOI: 10.3201 / eid1510.0

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    9. Кнап Н., Корва М., Долиншек В., Секирник М., Трилар Т., Авшич-Люпанц Т. Особенности инфицирования вирусом клещевого энцефалита у грызунов в Словении. Vector Borne Zoonotic Dis. (2012) 12: 236–42. DOI: 10.1089 / vbz.2011.0728

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    10. Дурмиши Э., Кнап Н., Саксида А., Трилар Т., Дух Д., Авшич-Люпанц Т. Распространенность и молекулярная характеристика вируса клещевого энцефалита у клещей Ixodes ricinus , собранных в Словении. Vector Borne Zoonotic Dis. (2011) 11: 659–64. DOI: 10.1089 / vbz.2010.0054

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    11. Рачник Я., Славец Б., Довч А., Жлабравец З., Задравец М., Сернел Т. и др. Detekcija virusa Zahodnega Nila pri sivi vrani ( Corvus cornix ) против Словении. Обнаружение Западного Нила у свободноживущей падальщика ( Corvus Cornix ) в Словении. Slov Vet Res. (2019) 56: 160–1.

    12. Zelená H, Januska J, Raszka J.Микромодификация теста нейтрализации вируса с витальным окрашиванием в 96-луночном планшете и его использование в диагностике вирусных инфекций Tahyna. Epidemiol Mikrobiol Imunol. (2008) 57: 106–10.

    PubMed Аннотация | Google Scholar

    13. Худописк Н., Корва М., Джанет Э., Симетингер М., Гргич-Витек М., Губеншек Я. и др. Клещевой энцефалит, связанный с потреблением сырого козьего молока, Словения, 2012 г. Emerg Infect Dis. (2013) 19: 806. DOI: 10.3201 / eid1905.121442

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    14. Марковинович Л., Личина М.К., Тешич В., Войводич Д., Лучич И.В., Книвальд Т. и др. Вспышка клещевого энцефалита, связанная с употреблением сырого козьего молока и сыра, Хорватия, 2015 г. Инфекция. (2016) 44: 661–5. DOI: 10.1007 / s15010-016-0917-8

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    15. Бойкевич Э., Точиловски К., Сулик А. Клещевой энцефалит — обзор современной эпидемиологии, клинических симптомов, ведения и профилактики. Przeg Epidemiol. (2020) 74: 316–25. DOI: 10.32394 / pe.74.24

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    16. Ruzek D, upanc TA, Borde J, Chrdle A, Eyer L, Karganova G, et al. Клещевой энцефалит в Европе и России: обзор патогенеза, клиники, терапии и вакцин. Antiviral Res. (2019) 164: 23–51. DOI: 10.1016 / j.antiviral.2019.01.014

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    17.Емершич Л., Дедек Д., Брнич Д., Прпич Дж., Яницки З., Керос Т. и др. Обнаружение и генетическая характеристика вируса клещевого энцефалита (ВКЭ), полученного от клещей, удаленных от красных лисиц ( Vulpes vulpes ) и выделенных из образцов селезенки благородного оленя ( Cervus elaphus ) в Хорватии. Ticks Tick Borne Dis. (2014) 5: 7–13. DOI: 10.1016 / j.ttbdis.2012.11.016

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    18. Bournez L, Umhang G, Faure E, Boucher JM, Boué F, Jourdain E, et al.Воздействие вирусов Усуту и ​​клещевого энцефалита на диких копытных во Франции в 2009–2014 годах: свидетельства невыявленной циркуляции флавивирусов десять лет назад. Вирусов. (2020) 12:10. DOI: 10.3390 / v12010010

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    19. Ширмарова Дж., Тиха Л., Головченко М., Салат Дж., Грубхоффер Л., Руденко Н. и др. Распространенность Borrelia burgdorferi вируса чувствительности и клещевого энцефалита среди животных зоопарков в Чешской Республике. Ticks Tick Borne Dis. (2014) 5: 523–7. DOI: 10.1016 / j.ttbdis.2014.03.008

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    20. Рачник Ю. Эпидемиологическое исследование птичьего гриппа и вируса Западного Нила у птиц в Словении (докторская диссертация). Любляна: Университет Любляны (2008 г.).

    Google Scholar

    21. Рачник Й., Зорман-Ройс О., Трилар Т., Еловшек М., Дух Д., Довч А. и др. Демонстрация антител к вирусу Западного Нила у диких птиц в Словении.In: VIII Симпозиум дней птицы 2009. Пореч, Хорватия, 25-28 марта 2009 г. . Загреб: Hrvatski Veterinarski Institut, Centar za Peradarstvo (2009). п. 69–71.

    22. Рачник Дж., Славец Б., Задравец М., Зорман Ройс О. Мониторинг вируса Западного Нила у диких птиц в Словении. Rad HAZU Med Sci. (2013) 39: 89–93.

    Google Scholar

    23. Кнап Н., Корва М., Ивович В., Калан К., Еловшек М., Сагадин М. и др. Вирус Западного Нила в Словении. Вирусов. (2020) 12: 720. DOI: 10.3390 / v12070720

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    25. Бучебнер Н., Ценкер В., Венкер С., Стейнмец Х.В., Сос Э., Люсси Н. и др. Низкая распространенность вируса Усуту в четырех зоологических садах в Центральной Европе. BMC Vet Res. (2013) 9: 1–7. DOI: 10.1186 / 1746-6148-9-153

    PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ) — AnimaLabs ©

    Описание продукта

    Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ)

    Вирус клещевого энцефалита (ВКЭ) является возбудителем клещевого энцефалита (КЭ), потенциально смертельной неврологической инфекции, поражающей людей и животных.ВКЭ является представителем рода Flavivirus в семействе Flaviviridae. Выделяют три основных подтипа вируса: европейский, сибирский и дальневосточный. Переносчиками ВКЭ являются клещи Ixodes ricinus и Ixodes persiculatus.

    Проба: ЦСЖ, 0,5 мл ЭДТА-кровь

    Режимы трансмиссии

    Вирус клещевого энцефалита передается через укусы клещей и при употреблении непастеризованного козьего молока.

    Клинические признаки

    Известно, что вирус клещевого энцефалита сначала реплицируется в месте заражения, а затем в лимфатических узлах, дренирующих место заражения.Репликация вируса в дренирующих лимфатических узлах сопровождается развитием плазменной виремии. Гематогенное распространение позволяет инфицировать различные органы, особенно ретикуло-эндотелиальную систему (селезенка, печень и костный мозг), и именно во время этой фазы вирус также проникает через гематоэнцефалический барьер и проникает в центральную нервную систему (ЦНС). где вирусная репликация вызывает воспаление, лизис и клеточную дисфункцию. Инкубационный период обычно составляет 7–14 дней. Симптомы во время начального короткого лихорадочного периода могут включать усталость, головную боль и боль в шее, плечах и пояснице, сопровождающиеся высокой температурой и рвотой.За этим часто следует бессимптомный период продолжительностью 2–10 дней, и если болезнь прогрессирует до неврологического поражения, это приводит ко второй фазе, характеризующейся острыми симптомами со стороны ЦНС с высокой температурой. Инфекция ЦНС может проявляться в мозговых оболочках (воспаление вызывает менингит), паренхиме головного мозга (вызывая энцефалит), спинном мозге (миелит), нервных корешках (радикулит) или любой их комбинации. По сравнению с людьми, домашние животные, инфицированные ВКЭ, обычно протекают бессимптомно.

    Профилактика

    Активная вакцинация — наиболее эффективный метод профилактики вируса клещевого энцефалита, поскольку современные вакцины доказали свою безопасность и эффективность от 95 до 99%.

    Прогноз

    Прогноз зависит от возраста пациента, но выздоровление, как правило, затруднено. Смертность для европейского, дальневосточного и сибирского подтипов составляет 1-2%, 20-40% и 2-3% соответственно.

    Распространенность

    Наблюдался рост заболеваемости КЭ, в среднем 8755 зарегистрированных случаев КЭ в год в Европе и России.

    Список литературы

    Мэнсфилд, К.Л., Джонсон, Н., Фиппс, Л.П., Стивенсон, Дж. Р., Фукс, А. Р., Соломон, Т. (2009). Вирус клещевого энцефалита — обзор зарождающегося зооноза. J Gen Virol 90, 1781–1794.

    Wicki, R., Sauter, P., Mettler, C., Natsch, A., Enzler, T., Pusterla, N., Kuhnert, P., Egli, G., Bernasconi, M., Lienhard, R. , и другие. (2000). Исследование швейцарской армии в Швейцарии для определения распространенности Francisella tularensis, представителей геногруппы Ehrlichia phagocytophila, Borrelia burgdorferi sensu lato и вируса клещевого энцефалита у клещей.Европейский журнал клинической микробиологии и инфекционных заболеваний 19, 427–432.

    Сравнение полных геномов вируса клещевого энцефалита из горных альпийских регионов и регионов с меньшей высотой

    Для всех штаммов TBEV-EU, включенных в исследование, были сгенерированы полные геномные последовательности. Филогенетическое древо, основанное на нуклеотидных последовательностях, не показало доказательств общего происхождения горных штаммов (рис. 1). Штаммы вирусов D15_33, K2 и HB171_11 имели самое близкое филогенетическое родство друг с другом, несмотря на то, что происходили с разных высот и мест сбора, удаленных друг от друга на 200 км.

    Рис. 1

    Филогенетическое дерево полных геномов нескольких штаммов TBEV-Eu. Полные геномы были амплифицированы в три ампликона ДНК, покрывающих весь геном [15]. Для секвенирования использовалась платформа Illumina MiSeq и набор реагентов MiSeq V3 (Illumina, Inc., Сан-Диего, США) в соответствии с инструкциями производителя. Сборка производилась с помощью программы Spades v.3.12. Для филогенетического сравнения были выбраны доступные полногеномные последовательности TBEV-Eu, опубликованные в базе данных NCBI GenBank.Дерево было сгенерировано с использованием метода максимального правдоподобия, и для статистической поддержки было реализовано 1000 бутстрапов [16,17,18,19]. Штаммы, использованные в этом исследовании, выделены красным (альпийские регионы) и синим (более низкие высоты). b Таблица, содержащая метаданные для штаммов ВКЭ, использованных в анализе.

    В таблице 1 сравнивались различные штаммы в отношении нуклеотидных изменений / аминокислотных различий. Этот анализ показывает, что штамм K2 больше всего отличается от штамма NE_1 / 7 (Neudoerfl) с 219 нуклеотидными изменениями (показаны курсивом ), тогда как штаммы D15_569 и D17_1044 показывают наименьшие различия (показаны жирным шрифтом ).Что касается замен аминокислот, наибольшая разница в 40 замен аминокислот наблюдается между штаммами K2 и D17_1989 (выделено курсивом , ), а наименьшая разница в аминокислотах наблюдается между штаммами HB171_11 и BaWa16_303 только с 19 заменами аминокислот (указано в ). Жирный ).

    Таблица 1 Сравнение нуклеотидных изменений с результирующими аминокислотными изменениями всех девяти вирусных штаммов

    Все десять аминокислотных последовательностей выровняли и проанализировали на предмет замен.Не было обнаружено общих аминокислотных замен, отличающих альпийский штамм от низинного. Все вирусные белки анализировали отдельно. Капсидный белок показал до двух индивидуальных изменений в аминокислотной последовательности. Белок prM / M показал до двух индивидуальных изменений в последовательности, причем только штамм HB171_11 имел несинонимичное изменение T141I. Штамм D14_97 показал четыре аминокислотных изменения в последовательности Е-гена, два из которых были гетерологичными и могли влиять на поверхностный заряд вирусной мембраны.Другие несинонимичные изменения были обнаружены в штамме D15_569 с L459S, штамме D17_1989 с Y130H и K2 с A83T. Y130H уже коррелировал с повышенной нейроинвазивностью у мышей с иммунодефицитом [20].

    Белок NS1 показал до двух индивидуальных аминокислотных изменений. Штамм D17_1044 показал несинонимичную замену неполярного I127T, K2 на один из P103S и HB171_11 A41T. По сравнению с его длиной наиболее изменчивым белком был NS2A. Три штамма D15_33, K2 и HB171_11 показали одинаковую синонимичную замену V41I, а штаммы D17_1044 и D17_1989 имели замену I53M.Последнее примечательно, поскольку оба принадлежат к двум разным генетическим кластерам и имеют другую замену в своем белке NS3.

    В аминокислотном выравнивании NS2B могут быть идентифицированы два несинонимичных изменения для штаммов D15_569 и HB171_11. Для NS3 было обнаружено до трех индивидуальных замен, и три штамма (D15_33, D18_1133 и K2) показали несинонимичные изменения. NS4A показал одну замену в трех вирусах, при этом только замена Gly100 на серин в штамме D17_1044 не была синонимична.Три штамма (D17_1989, K2 и HB171_11) имели до двух индивидуальных замен в белке NS4B.

    NS5 показал до четырнадцати аминокислотных замен в диапазоне от одного до семи индивидуальных изменений. Вирус с наибольшим количеством индивидуальных изменений — штамм D17_1044, за которым следует штамм D17_1989.

    Штаммом вируса с наименьшим количеством индивидуальных аминокислотных изменений был штамм D18_1133 с 23% изменениями в их аминокислотной последовательности. За ним последовал штамм D14_97 с 33,3% индивидуальных изменений.Штамм вируса с наибольшими индивидуальными изменениями был HB171_11 с 48%.

    Следовательно, филогенетический анализ часто приводит к плохой статистической поддержке и требует очень осторожной интерпретации. Сравнение наших штаммов ВКЭ подтверждает это наблюдение, поскольку генетическое различие десяти штаммов ВКЭ в нашем исследовании составляло всего 0,028 замен на сайт. За последние два десятилетия наблюдается явный сдвиг в распространении вируса клещевого энцефалита с более низких высот на более высокие. Пока неясно возможное влияние на геномные характеристики ВКЭ.Одна из рабочих гипотез заключалась в том, что репликация вируса должна адаптироваться к суровым условиям окружающей среды. Следовательно, эти штаммы могут демонстрировать определенные специфические изменения в своих геномах в ответ на условия, в которых они находились в регионах с большей высотой. Другое объяснение состоит в том, что каждый штамм из горной местности произошел от общего предка, адаптированного к условиям гор. После дальнейшего распространения они могли образовывать новые природные очаги. Кроме того, изменение климатических и, следовательно, эко-эпидемиологических условий на больших высотах может привести к улучшению условий для репликации ВКЭ у клещей.

    Нам не удалось найти общий специфический генетический признак, присущий всем штаммам из районов на высоте более 500 м над уровнем моря. Согласно филогенетическому анализу, каждый штамм вируса, вероятно, был занесен индивидуально в свое местоположение и обнаружил благоприятные условия окружающей среды (возможно, из-за изменений климата). Мы наблюдали некоторые аминокислотные изменения, описанные в статье Formanová et al. [21] во всех восьми штаммах вируса (а именно Ile167V, E127D, V201I и G206R).Кроме того, T33S был обнаружен в HB171_11 и D17_1989, а I53M — в D17_1044 и D17_1989. Кроме того, мы не смогли определить тесную филогенетическую связь между горными разновидностями. Фактически, штамм D15_33 был генетически наиболее близок к штаммам нижних высот HB171_11 и K2 в нашем анализе. Это еще один показатель того, что вновь появившиеся штаммы случайно попадают в новые районы.

    NS2A, как утверждается, участвует в сдвиге между упаковкой РНК и репликацией РНК [22, 23], его высокая вариабельность может быть причиной разной скорости репликации и инфекционности разных штаммов ВКЭ.То же самое может относиться к высокой вариабельности NS2B, белка, который предположительно участвует в модуляции проницаемости мембраны во время инфекции [24]. Чтобы подтвердить или опровергнуть эту гипотезу, необходимо провести дальнейшие эксперименты.

    Поскольку мы не смогли найти никаких намеков, указывающих на конкретные генетические характеристики штаммов ВКЭ, обитающих на больших высотах, мы предполагаем, что другие причины новой модели распределения ответственны за появление альпийского распространения ВКЭ.

    Как показано Rubel et al.в [25] Альпы претерпели серьезный климатический сдвиг с 1876 года. Можно предположить, что этот сдвиг способствует трансформации альпийской среды и, следовательно, может измениться распределение видов переносчиков и животных-хозяев.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.