Сравнительная оценка гидролизатов как основы при конструировании питательной среды для культивирования Listeria monocytogenes | Хаптанова
Аннотация
Цель работы — провести сравнительную оценку панкреатических гидролизатов, полученных из рыбы и кальмаров, для подбора оптимальной питательной среды для культивирования Listeria monocytogenes.
Материалы и методы. В работе использовали следующее сырье: сельдь тихоокеанскую (Clupea pallasii), минтай (Gadus chalcogrammus), плотву сибирскую (Rutilus rutilus lacustris) — сорогу, кальмар европейский (Loligo vulgaris). Сырье подвергали ферментативному гидролизу с помощью поджелудочной железы (по Хоттингеру). Проводили исследование физико-химических свойств панкреатических гидролизатов (аминный азот, кислотность, аминокислотный состав).Специфическую активность питательных сред при культивировании тест-штамма L. monocytogenes 766 оценивали комплексом микробиологических методов.
Результаты и обсуждение. Наибольшее содержание аминного азота в конце ферментативного гидролиза выявлено в панкреатическом гидролизате сороги (6%), кислотность гидролизата сороги оставалась стабильной с 6-х до 13-х суток процесса гидролиза (рН 7,2). Панкреатические гидролизаты содержали ряд аминокислот, которые являются наиболее существенными для роста листерий. При оценке биологических свойств питательных сред, приготовленных на основе полученных гидролизатов, наилучшие результаты отмечены у питательной среды на основе панкреатического гидролизата сороги. При культивировании L. monocytogenes 766 установлено, что тест-штамм сохранял морфологические и культуральные свойства и не проявлял признаков диссоциации.
Заключение. Результаты исследований показали, что панкреатический гидролизат сороги является перспективной белковой основой для конструирования экспериментальной листериозной среды.
Введение
При проведении бактериологических исследований, а также для производства медицинских изделий для диагностики in vitro требуются качественные питательные среды (ПС), обеспечивающие потребности роста Listeria monocytogenes. К наиболее часто применяемым компонентам микробиологических сред относятся питательные основы животного и растительного происхождения [1–3]. В настоящее время мясные основы в большинстве случаев уступили место более рентабельному сырью — рыбе и продуктам ее переработки. Так, в производстве отечественных ПС используют гидролизат рыбной муки, в связи с этим целесообразен поиск альтернативных источников сырья [4–6].
Цель — провести сравнительную оценку панкреатических гидролизатов (ПГ), полученных из рыбы и кальмаров, для подбора оптимальной ПС для культивирования L. monocytogenes.
Материалы и методы
Для получения ПГ в качестве исходного сырья использовали сельдь тихоокеанскую (Clupea pallasii), минтай (Gadus chalcogrammus), плотву сибирскую (Rutilus rutilus lacustris) — сорогу, кальмара европейского (Loligo vulgaris). В качестве фермента — поджелудочную железу крупного рогатого скота. ПГ готовили согласно методике [7]. Содержание аминного азота определяли формольным титрованием, значение рН гидролизатов исследовали потенциометрическим методом по МУК 4.2.2316-08
Определение состава гидролизатов 1–4 проводили методом 1Н, 13С, 15N ЯМР-спектроскопии. Спектры ЯМР 1H (400,1 МГц), 13С (100,6 МГц), 15N (40,5 МГц) записывали на спектрометрах «Bruker DPX400» (13С) и «Bruker AV400» (1Н и 2М) без использования дейтерированных растворителей.
Определение биологических свойств проводили комплексом микробиологических методов в соответствии с МУК 4.2.2316-08. В работе использовали тест-штамм L. monocytogenes 766 из коллекции патогенных бактерий Иркутского научно-исследовательского противочумного института.
Статистическую обработку результатов исследования проводили путем вычисления средней арифметической (М) и средней ошибки средней арифметической (m). При оценке достоверности различий сравниваемых данных за уровень значимости принимали р < 0,05.
Результаты и обсуждение
В процессе приготовления ПГ смешивали фарш из исходного сырья, бульон, добавляли поджелудочную железу крупного рогатого скота и хлороформ. Потеря в массе от исходного сырья составила 56% у кальмаров и 26–38% у рыбы.
Динамику ферментативного процесса определяли по нарастанию аминного азота. Во всех полученных ПГ наблюдали количественное изменение содержания аминного азота в течение 13 сут (в среднем до 5,7 ± 0,2%). Содержание 1,5–6,0% аминного азота в гидролизате говорит о высокой степени расщепления белка до аминокислот и пептидов. Прекращение нарастания аминного азота свидетельствует об окончании ферментативного процесса.
Наибольшее содержание аминного азота в конце гидролиза выявлено в ПГ сороги — 6%. Этот показатель оставался стабильным с 6-х до 13-х суток процесса гидролиза, что свидетельствует о более быстрой фазе гидролиза в этом образце. Наименьшие показания аминного азота отмечены в ПГ минтая (5,4%). Во всех образцах степень гидролиза наиболее интенсивно увеличивалась в течение первых 3 сут и на 7-е сутки (в среднем на 0,9 ± 0,2% и 1,2 ± 0,2% соответственно) по сравнению с 1-ми сутками ферментолиза, а в течение последующих 6 сут отмечалась стабилизация значений степени гидролиза (в среднем увеличение на 0,2%) по сравнению с 7-ми сутками.
Водородный показатель (рН) исследуемых проб в процессе гидролиза на 1-е сутки оставался нейтральным, а затем, на протяжении последующих 13 сут, изменялся в слабощелочную сторону (в среднем от 6,9 ± 0,1 до 7,4 ± 0,2).
Значения рН в гидролизате сороги оставалось стабильным с 6-х до 13-х суток процесса гидролиза (рН 7,2), что согласуется и с показателями аминного азота. В гидролизате сельди значения рН с 7-х по 13-е сутки были также близки к нейтральным значениям, а в гидролизатах кальмара и минтая, напротив, после 3 сут гидролиза стремились в слабощелочную сторону (от 7,4 до 7,7), что, вероятнее всего, связано с особенностями исходного сырья.
Для оценки качественного состава питательных основ был использован метод ЯМР-спектроскопии. Согласно данным [8–10] и спектральной базы органических соединений National Institute of Advanced Industrial Science and Technology2, эти сигналы соответствуют группам СНNH2, СН2СНNH2 аминокислот. В области спектра 124–125 м.д. для всех образцов присутствуют наборы сигналов, характерные для замещённого ароматического кольца.
В области 174–188 м.д. наблюдаются наборы сигналов карбоксильных групп СООН, принадлежащих нескольким аминокислотам. Анализ 2М спектров ЯМР свидетельствует о наличии в образцах свободных аминокислот (аланин, валин, треонин, аргинин, лизин, лейцин, метионин, фенилаланин, глицин). Доля гистидина, тирозина, триптофана составляет 5%. В виде примесей в ПГ сельди присутствует глицерин (73,1 и 63,5 м.д.), а в ПГ минтая и кальмара — диметилкарбамид (3,3 м.д. в
Таким образом, из исследуемых аминокислот в ПГ выявлены 5 (лейцин, аргинин, метионин, валин, гистидин), которые являются наиболее важными для роста листерий и стимулирующими его, а 6 (триптофан, лизин, фенилаланин, глицин, аланин, треонин) также соответствуют питательным потребностям микроорганизма.
Из полученных лиофилизированных гидролизатов сконструировали 4 плотные ПС, в состав которых входили (г/л): NaCl — 3,0; агар микробиологический — 9,0; глюкоза — 10,0; карбонат натрия — 0,7; pH среды 7,3 ± 0,2.
Изучены биологические свойства приготовленных ПС по показателям прорастания микроорганизмов, чувствительности ПС, скорости роста микроорганизмов и стабильности культуры (таблица).
Биологические свойства тест-штамма L. monocytogenes 766, выращенного на плотных ПС с различными вариантами питательных основ
Biological properties of the test strain L. monocytogenes 766 cultured on solid nutrient media with different variants of nutrient bases
Примечание. *Показатель прорастания микробных клеток — отношение среднего числа колоний, образовавшихся на испытуемой среде, к среднему числу колоний на контрольной среде, выраженное в процентах; «–» — подсчет колоний не проводился.
Note. *The index of the emergence of microbial cells is the ratio of the average number of colonies formed on the test medium to the average number of colonies on the control medium, expressed as a percentage; (–) — no colonies were counted.
Отчётливый видимый невооруженным глазом рост культуры L. monocytogenes 766 обнаружен через 18 ч инкубации на ПС на основе ПГ сельди и сороги, у других сред определен только через 24 ч. В ПС на основе сельди и сороги через 24 ч инкубации тест-штамма L. monocytogenes 766 отмечали типичный рост колоний в S-форме, достаточный для визуального подсчета (d = 1,0–1,5 мм). По сравнению с этим ПС на основе минтая и кальмара обеспечивали типичный рост культуры только через 48 ч инкубации.
Данные о количестве, диаметре и морфологии колоний L. monocytogenes 766 через 48 ч инкубации при 37 ± 1°С показывают, что по количеству выросших колоний L. monocytogenes 766 изучаемые ПС отличались между собой незначительно, за исключением ПС, включающей ПГ сороги, которая превосходила ПС на основе сельди, минтая и кальмара (р < 0,05). Также наблюдалось увеличение размера колоний листерий (3–4 мм) по сравнению с другими ПС. При этом тест-штамм L. monocytogenes 766 сохранял типичные культурально-морфологические и биохимические свойства.
Заключение
Таким образом, показано, что ПС на основе ПГ сороги обладает удовлетворительными ростовыми свойствами, достигнутыми за счет сочетанного использования оптимальных концентраций питательной основы и компонентов, стимулирующих рост листерий, что в совокупности обеспечивает в минимальные сроки значительное накопление бактериальной массы листерий.
Благодарность / Acknowledgments
Определение состава гидролизатов проводили с использованием оборудования Байкальского аналитического центра коллективного пользования СО РАН. / The main results were obtained using the equipment of the Baikal Analytical Center for Collective Use of the SB RAS
1. Ковтун Ю.С., Курилова А.А., Таран Т.В., Катунина Л.С., Чурикова Н.В. Сравнительная оценка потенциальных белковых основ микробиологических сред. Проблемы особо опасных инфекций. 2014, (3): 92–5.
2. Шепелин А.П. Современное состояние и тенденции в разработке, производстве и применении питательных сред. Бактериология. 2016, 1(1): 42–7. https://doi.org/10.20953/2500-1027-2016-1-42-47
3. Сизоненко М.Н., Тимченко Л.Д., Ржепаковский И.В., Катунина Л.С. Влияние биологически активных субстанций на основе эмбриональных тканей перепелов на биологические свойства Listeria monocytogenes. Ветеринарная патология. 2017, (1): 34–9.
4. Поляк М.С., Сухаревич В.И., Сухаревич М.Э. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии. СПб.: ЭЛБИ-СПб., 2008.
5. Насыпаева Е.Н., Лещенко А.А. Сравнительный анализ способов приготовления питательных основ из продуктов переработки молока. В кн.: Всероссийская ежегодная научно-практическая конференция «Общество, наука, инновации». Киров, 2014: 154–5.
6. Шепелин А.П., Шолохова Л.П., Марчихина И.И., Полосенко О.В. Панкреатический гидролизат рыбной кормовой муки – полноценная белковая основа питательных сред. В кн.: Материалы IV Национального конгресса бактериологов и Международного симпозиума «Микроорганизмы и биосфера «Microbios-2018″». Омск, 2018: 82–3.
7. Дятлов И.А., Кутырев В.В., Храмов М.В. Питательные среды для выделения, культивирования и идентификации возбудителей особо опасных инфекций бактериальной природы. М., 2012.
8. Кузьмина Н.Е., Моисеев С.В., Крылов В.И., Кутин А.А., Яшкир В.А., Меркулов В.А. Валидация методики определения аминокислотного состава фармацевтической субстанции «Глатирамера ацетат» методом ЯМР спектроскопии. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2017, 7(3): 175–81.
9. Simmler C., Napolitano J.G., McAlpine J.B., Chen S.N., Pauli G.F. Universal quantitative NMR analysis of complex natural samples. Curr. Opin. Biotechnol. 2014, 25: 51–9. https://doi.org/10.1016/j.copbio.2013.08.004
10. Fan T.W., Lane A.N. Applications of NMR spectroscopy to systems biochemistry. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 2016, 92-93: 18–53. https://doi.org/10.1016/j.pnmrs.2016.01.005
Документ или орган, утвердивший санитарные требования | |
| Роспотребнадзор 02.06.2021 |
МР 4.2.0249-21 Методические рекомендации «Серологическая диагностика острых кишечных инфекций методом РПГА (шигеллеза, сальмонеллеза и брюшного тифа)» | Главный государственный санитарный врач РФ 20.05.2021 |
Методические указания «Идентификация видовой принадлежности рыб семейства тресковых методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией» | Роспотребнадзор 14.12.2020 |
Методические рекомендации МР 4.2.0220-20 «Методы санитарно-бактериологического исследования микробной обсемененности объектов внешней среды» | Главный государственный санитарный врач РФ 04.12.2020 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 07.10.2020 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 03.02.2020 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 23.12.2019 |
Методические указания | Роспотребнадзор 18.12.2019 |
Методические указания | Роспотребнадзор 03.07.2020 |
Методические указания | Роспотребнадзор 03.07.2020 |
Методические указания | Роспотребнадзор 03.07.2020 |
Методические указания | Роспотребнадзор 03.07.2020 |
Методические указания | Роспотребнадзор 18.12.2019 |
Методические указания | Роспотребнадзор 05.11.2019 |
Методические указания | Роспотребнадзор 24.10.2019 |
Методические указания | Роспотребнадзор 24.10.2019 |
Методические указания | Роспотребнадзор 25.12.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 15.02.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.02.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.02.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.02.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.02.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.02.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.02.2018 |
Методические указания | Роспотребнадзор 22.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 22.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 22.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 22.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 22.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 22.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.02.2017 |
Методические указания | Роспотребнадзор 03.08.2016 |
Методические указания | Роспотребнадзор 02.11.2015 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 20.10.2016 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 01.02.2016 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.12.2014 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.12.2014 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.12.2014 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.12.2014 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.12.2014 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 22.09.2014 |
Методические указания | Роспотребнадзор 26.11.2013 |
Методические указания | Роспотребнадзор 26.11.2013 |
Методические указания | Роспотребнадзор 21.10.2013 |
Методические указания | Роспотребнадзор 20.07.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 20.07.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 20.07.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 20.07.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 18.06.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 12.05.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.03.2012 |
Методические рекомендации | Главный государственный санитарный врач РФ 14.05.2014 |
Методические рекомендации | Главный государственный санитарный врач РФ 24.04.2014 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 21.10.2013 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 21.10.2013 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.07.2013 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 09.04.2012 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 11.05.2011 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 18.04.2011 |
Методические рекомендации
| Роспотребнадзор 01.12.2010 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 14.10.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.03.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 28.03.2012 |
Методические указания | Роспотребнадзор 19.08.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 15.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 12.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 12.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 12.07.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.06.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.06.2011 |
Методические указания | Письмо Роспотребнадзора от 15.06.2011 N 01/7350-1-32 |
Методические указания МУК 4.2.2870-11 «Порядок организации и проведения лабораторной диагностики холеры для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней» | Главный государственный санитарный врач РФ 25.05.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 07.02.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.01.2011 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.12.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 19.11.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 19.11.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 11.10.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.09.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 13.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.08.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 23.07.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 09.07.2010 |
Методические указания | Роспотребнадзор 21.04.2010 |
Методические | Роспотребнадзор 24.05.2009 N 01/7161-9-34 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.04.2009 |
Методические указания | Роспотребнадзор 01.04.2009 |
Методические | Главный государственный санитарный врач РФ 26.12.2008 N 01/15734-8-34 |
Методические | Роспотребнадзор 09.12.2008 N 01/14633-8-34 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.10.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.10.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.10.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.10.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 29.07.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 28.07.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 04.05.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 24.01.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 18.01.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 18.01.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 18.01.2008 |
Методические указания | Роспотребнадзор 18.01.2008 |
Методические | Роспотребнадзор 29.12.2007 N 0100/13745-07-34 |
Методические указания МУ 4.2.2305-07 «Определение генно-инженерно-модифицированных микроорганизмов и микроорганизмов, имеющих генно-инженерно-модифицированные аналоги, в пищевых продуктах методами полимеразной цепной реакции (пцр) в реальном времени и пцр с электрофоретической детекцией» | Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 30.11.2007 N 80 |
Методические указания МУ 4.2.2304-07 «Методы идентификации и количественного определения генно-инженерно-модифицированных организмов растительного происхождения» | Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 30.11.2007 N 80 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.08.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.08.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.08.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.08.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.08.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.08.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 06.08.2007 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 31.05.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.05.2007 |
Методические указания | Роспотребнадзор 09.11.2006 |
Методические указания | Роспотребнадзор 17.08.2006 |
Методические указания | Роспотребнадзор 30.01.2006 |
Методические рекомендации | Роспотребнадзор 20.09.2006 |
Методические указания МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории» | Главный государственный санитарный врач РФ 23.12.2005 |
Методические указания МУК 4.2.2029-05 «Санитарно-вирусологический контроль водных объектов» | Главный государственный санитарный врач РФ 18.11.2005 |
Методические указания | Роспотребнадзор 17.10.2005 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.07.2005 |
Методические указания | Роспотребнадзор 14.07.2005 |
Методические указания | Роспотребнадзор 22.02.2005 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 06.03.2004 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 04.03.2004 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 04.03.2004 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 03.03.2004 |
Методические указания МУК 4.2.1847-04 «Санитарно-эпидемиологическая оценка обоснования сроков годности и условий хранения пищевых продуктов» | Главный государственный санитарный врач РФ 06.03.2004 |
Методические указания | Минздрав России 02.11.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Минздрав России 24.10.2003 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 29.06.2003 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 29.06.2003 |
Методические указания | Минздрав России 14.11.2002 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 22.04.2002 |
Методические указания | Минздрав России 26.02.2002 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 27.01.2002 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 04.01.2002 |
Методические указания | Минздрав России 20.09.2001 |
Методические указания | Минздрав России 20.09.2001 |
Методические указания | Минздрав России 20.09.2001 |
Методические указания | Минздрав России 20.09.2001 |
Методические указания | Минздрав России 20.09.2001 |
Методические указания | Минздрав России 20.09.2001 |
Методические указания | Минздрав России 06.06.2001 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 28.05.2001 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 23.05.2001 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 09.02.2001 |
Методические указания | Минздрав России 21.12.2000 |
Методические указания | Минздрав России 21.12.2000 |
Методические указания | Минздрав России 20.12.2000 |
Методические указания | Минздрав России 20.12.2000 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 08.11.2000 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 04.11.2000 |
| Минсельхозпрод РФ 27.06.2000 |
Методические указания МУК 4.2.801-99 «Методы микробиологического контроля парфюмерно-косметической продукции» | Главный государственный санитарный врач РФ 27.12.1999 |
Методические указания | Главный государственный санитарный врач РФ 02.07.1999 |
Методические указания | Госкомсанэпиднадзор России 31.10.1996 |
Методические указания | Госкомсанэпиднадзор России 29.10.1996 |
Методические указания | Госкомсанэпиднадзор России 29.10.1996 |
Методические указания Внимание! | Госкомсанэпиднадзор РФ 29.03.1995 |
Методические указания по методам контроля | Госкомсанэпиднадзор РФ 16.09.1994 |
| Госагропром СССР 28.06.1991 |
| Минздрав СССР 22.02.1991 N 5319-91, Минрыбхоз СССР 18.11.1990 |
Методические | Минздрав СССР 11.09.1989 N 143-9/316-17 |
| Минздрав СССР 21.11.1989 N 15-6/28 |
Методические | Минздрав СССР 11.08.1986 |
Микробиологические | Минздрав СССР 08.05.1985 N 3870-85 |
Методические | Минздрав СССР 29.12.1984 N 3182-84 |
Методические | Минздрав СССР 21.02.1984 N 3214-85 |
| Письмо Минздрава РСФСР от 08.04.1980 N 10/11-577 |
Методические | Минздрав СССР 19.10.1979 N 2089-79 |
Методические | Минздрав СССР 17.07.1979 N 2037-79 |
Оценка качества питательных сред для определения чувствительности к антибактериальным препаратам
Оценка качества питательных сред для определения чувствительности к антибактериальным препаратам
© Группа авторов, 2013 УДК 57.08318;615.281.9
*Шепелин А. П., Морозова Т. П., Косилова И. С., Глазкова Г. П., Домотенко Л. В.
ФБУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» Роспотребнадзора, Московская обл., п. Оболенск
Проведена сравнительная оценка качества питательных сред для определения чувствительности к антибиотикам. Установлено, что показатели качества импортных сред Мюллера-Хинтон соответству- ют требованиям, изложенным в методических указаниях МУК 4.12.1890-04. Отечественные питательные среды имеют ограничения по интерпретации результатов в отношении сульфаниламидных препаратов и триметоприма.
The comparative assessment of quality of nutrient media for determination of sensitivity to antibiotics was carried out. It was established that quality indices of imported Muller-Hinton nutrient media meet the requirements of methodological instructive regulations 4.12.1890-04. The domestic nutrient media have restrictions on results interpretation concerning sulfanilamides and trimethoprim.
Диско-диффузионный метод остаётся одним из самых простых полуколиче- ственных методов для определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам, широко используемым в практике бактериологических лабораторий. Результаты тестирования чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом (ДДМ) зависят от многих причин, но к числу наиболее важных относится качество питательных сред [1]. В соответствии с требованиями основного нормативного документа «Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» (МУК 4.12.1890-04), регламентирующего постановку ДДМ для оценки чувствительности, используют только специально предназначенные для этой цели среды, разрешённые к применению в Российской Федерации в установленном порядке, по своим характеристикам удовлетворяющие требованиям раздела 5 [2]. В настоящее время универсальной средой для выполнения ДДМ, рекомендованной Национальным комитетом по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS) США и Европейским комитетом по определению антимикробной чувствительности (EUCAST), является агар Мюллера-Хинтон (МХА), первоначально созданный для выделения бактерий рода Neisseria [3]. Для данной среды разрабатываются и регулярно пересматриваются критерии интерпретации результатов для большого количества современных антибиотиков и значения диаметров зон подавления роста контрольных штаммов.
В Великобритании и некоторых европейских странах для постановки ДДМ используется полусинтетическая питательная среда Изосенси- тест (Oxoid), в которой содержание компонентов неопределённого состава (гидролизатов, пептонов) сведено к минимуму [4]. В России широко применяется среда АГВ (агар Гевинталь- Ведьминой), созданная специально для тестирования чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам [5]. В 2010 г. был зарегистрирован отечественный агар Мюллера- Хинтон (регистрационное удостоверение №ФСР 2010/08257), производимый в Научно-исследовательском центре фармакотерапии (НИЦФ). Вопрос качества питательных сред для ДДМ в последнее время часто обсуждается в литературе [6-10]. Он касается как российской среды АГВ, так и агара Мюллера-Хинтон и даже Изо- сенситеста. В случае агара Мюллера-Хинтон отмечалась высокая вариабельность результатов, полученных на средах разных производителей, а общими недостатками сред являлось нестандартное, а для АГВ — очень высокое, содержание двухвалентных металлов (Ca и Mg), ингибиторов антагонистов фолиевой кислоты — тимина и ти — мидина. В ГНЦ ПМБ (Оболенск) разработана и почти десять лет выпускается сухая питательная среда для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (регистрационное удостоверение № ФСР 2012/13687). Среда является аналогом среды АГВ, но вместо гидролизата кильки в её состав входит панкреатический гидролизат рыбной муки (ПГРМ). До введения в действие МУК 4.12.1890-04, учёт результатов, полученных на среде, проводился по интерпретационным критериям, разработанным для среды АГВ. Затем показатели качества выпускаемой среды были пересмотрены, и для производства питательной среды стали использовать специально обработанный ПГРМ с пониженным содержанием двухвалентных металлов с тем, чтобы она удовлетворяла требованиям новых МУК.
Контакты: [email protected]
Диско-диффузионный метод остаётся одним из самых простых полуколиче- ственных методов для определения чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Результаты тестирования чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом (ДДМ) зависят от многих причин, но к числу наиболее важных относится качество питательных сред.
Цель данной работы — оценить качество питательной среды ГНЦ ПМБ при определении чувствительности тест-штаммов к антимикробным препаратам с использованием диско-диффузи- онного метода и сравнить его с качеством питательных сред аналогичного назначения.
Условия эксперимента
Материалы
В работе исследовали следующие питательные среды: Мюллера-Хинтон агар II (Becton Dickinson), кат. № 211438, лот 9174125, годен до 09.2013; Мюллера-Хинтон агар II (HiMedia) кат. № M 1084, лот 88898, годен до 05.2014; Мюллера-Хинтон агар (НИЦФ), серия 2, годен до 04.2014; среда АГВ (НПО «Микроген»), серия 1, годна до 06.2012; питательная среда для определения чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (ГНЦ ПМБ), серия 37, годна до 11.2013, серия 48, годна до 02.2014, серия 52, годна до 02.2014.
При оценке качества питательных сред руководствовались требованиями как МУК 4.12. 1890-04, так и МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических питательных сред» и определяли pH, прочность студня агаровых сред по Валенту, содержание двухвалентных металлов (Са, Mg, Zn), чувствительность среды, характер и скорость роста тест-штаммов (контроль роста), диаметры зон подавления роста тест-штаммов и пригодность использования питательных сред для определения чувствительности к антимикробным препаратам, в т. ч. сульфаниламидам и триметоприму [2, 11].
Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам проводили диско-диффузионным методом в соответствии с требованиями методических указаний «Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам» (МУК 4.2.1890-04), используя диски производства НИЦФ (Санкт-Петербург), содержащие следующие антибиотики: гентамицин (10 мкг), тобра- мицин (10 мкг), амикацин (30 мкг), имипенем (10 мкг), ципрофлоксацин (5 мкг), цефтази- дим (30 мкг), триметоприм/ сульфаметоксазол (1,25 мкг/ 23,75 мкг), карбенициллин (100 мкг), хлорамфеникол (30 мкг), ампициллин (10 мкг), тетрациклин (30 мкг), неомицин (30 мкг), эритромицин (15 мкг) и доксициклин (30 мкг).
В качестве тест-штаммов использовали штаммы Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Staphylococcus aureus ATCC 25923 и Enterococcus faecalis ATCC 29212,полученные из Американской коллекции типовых культур (АТСС, LGC Standards). Инокулят готовили суспендированием в физиологическом растворе колоний, выросших на кровяном агаре при температуре (37±1) оС в течение 18-20 ч, и доведением мутности суспензии до 0,5 стандарта McFarland (bioMerieux). Полученную суспензию высевали на агаровые среды с помощью тампона или пипетки и инкубировали при 35 оС в течение 18-24 ч. Диаметры зон ингибирования роста тест-штаммов измеряли в отражённом свете с помощью специальной линейки HiAntibiotic Zone Scale (HiMedia) . Интерпретацию результатов проводили с соответствии с Методическими указаниями [2].
Несовпадение результатов при сравнении диаметров зон подавления роста тест-штаммов, полученных на разных сериях питательных сред, расценивали при различии значений более чем на ±3 мм. Содержание двухвалентных металлов в питательных средах определяли методом пламенной атомной абсорбции на атомно-абсорбционном спектрометре Shimadzu AA-6200 с атомизацией в пламени стехиометрической смеси «ацетилен- воздух».
Результаты и обсуждение
Для оценки качества исследуемых питательных сред изучали характер роста тестируемых микроорганизмов. Тест-штаммы E. coli ATCC 25922, P. aeruginosa ATCC 27853, S. aureus ATCC 25923 вырастали на всех питательных средах из разведения 10-7, содержащего примерно 1х10 КОЕ/мл. При этом колонии E. coli ATCC 25922 и S. aureus ATCC 25923 были типичными на всех питательных средах. Различия наблюдались лишь в морфологии колоний P. aeruginosa ATCC 27853.
На отечественных средах колонии выглядели более плоскими, расплывчатыми, нежели на импортных. Кроме того, характерный сине-зелёный или жёлто-зелёный пигмент отсутствовал у колоний псевдомонад, растущих на среде АГВ и агаре Мюллера-Хинтон производства НИЦФ.
Результаты тестирования антибиотикочув- стительности тест-штаммов E. coli ATCC 25922, S. aureus ATCC 25923, полученные на разных средах, незначительно (в пределах 2-3 мм) отличались между собой и находились в допустимых диапазонах значений диаметров зон подавления роста.
Остановимся более подробно на результатах, полученных для тест-штамма P. aeruginosa ATCC 27853, являющегося маркером качества питательной среды. В табл. 1 приведены данные, полученные при определении чувствительности P. aeruginosa к аминогликозидам, фторхиноло- нам, а также результаты тестирования чувствительности E. faecalis ATCC 29212 к триметоприму и сульфаметоксазолу.
Известно, что результаты определения чувствительности микроорганизмов с использованием ДДМ определяются диффузией антимикробного вещества из диска в агар. Скорость диффузии антимикробного препарата зависит от многих параметров, к которым относятся состав среды и её осмотическое давление, толщина агарового слоя, pH и др.
Как видно из табл. 1, результаты тестирования чувствительности P. aeruginosa на разных средах различаются между собой. Диаметры зон ингибирования роста вокруг исследованных дисков на всех трёх сериях среды ГНЦ ПМБ имели значения, которые соответствовали требованиям МУК 4.2.1890-04. На агаре Мюллера-Хинтон (НИЦФ) зоны ингибирования вокруг дисков с аминогликозидами (гентамицином, тобрами- цином и амикацином), имипенемом и ципроф- локсацином имели размеры, превышающие допустимые. На среде АГВ только вокруг дисков, содержащих гентамицин, наблюдалось превышение диаметра зоны подавления роста.
Известно, что результаты определения чувствительности микроорганизмов с использованием ДДМ определяются диффузией антимикробного вещества из диска в агар [11]. Скорость диффузии антимикробного препарата зависит от многих параметров, к которым относятся состав среды и её осмотическое давление, толщина агарового слоя, pH и др.
Состав среды АГВ от среды ГНЦ ПМБ отличается природой и концентрацией белковых гидролизатов. Так, среда АГВ содержит панкреатический гидролизат кильки, а в состав среды ГНЦ ПМБ входят панкреатический гидролизат рыбной муки и пептон.
Как известно, активность некоторых антибактериальных препаратов (аминогликозидов, ма- кролидов, тетрациклинов, фторхинолонов и др.) зависит от величины pH питательных сред. Поэтому величина pH должна быть чётко регламентирована и в соответствии с требованиями МУК 4.12.1890-04 находиться в пределах 7,2-7,4. Анализ pH готовых сред показал, что все исследованные среды имели значение показателя концентрации водородных ионов (pH) в требуемом диапазоне (табл. 2). Как видно из табл. 2, оба импортных агара Мюллера-Хинтон имели pH, равную 7,2; агар Мюллера-Хинтон производства НИЦФ — 7,3; среда АГВ — 7,4; а pH четырёх серий среды ГНЦ ПМБ находились в пределах 7,25-7,3.
Помимо этого, скорость диффузии хорошо коррелирует и с таким показателем, как прочность питательной среды. И как видно из данных, приведённых в табл. 2, её значение различно для разных сред. Импортные агары обладают самой высокой прочностью, которая немного превышает 700 г. Прочность Мюллера-Хинтон агара (НИЦФ) значительно ниже и составляет 313 г. Прочность среды АГВ и сред ГНЦ ПМБ незначительно отличается и составляет 320 г и 400 г, соответственно.
Важным показателем качества питательной среды для определения чувствительности к антибактериальным препаратам (особенно к ами- ногликозидам, фторхинолонам, карбапенемам, тетрациклинам и некоторым другим) является строго стандартизированные концентрации двухвалентных металлов, прежде всего Са2+ и Mg2+. Методическими указаниями нормируется содержание Са2+ в среде на уровне 20-25 мг/л и Mg2+ — 10-12,5 мг/л.
Анализ элементного состава исследованных питательных сред показал, что не все среды удовлетворяют требованиям МУК 4.2.1890-04. Содержание двухвалентных металлов в трёх сериях среды ГНЦ ПМБ находится в требуемом диапазоне. Концентрация Mg в среде АГВ превышает нормативное значение примерно в три раза. Несмотря на значительное превышение концентрации двухвалентных металлов в среде АГВ, значения диаметров зон задержки роста тест-штамма P. aeruginosa вокруг дисков, содержащих аминогликозиды, были больше, чем на среде ГНЦ ПМБ, импортных агарах Мюллера- Хинтон и больше требований МУК 4.2.1890-04.
Возможным объяснением такой ситуации может быть следующее. При определении элементного состава питательной среды методом атомно-абсорбционной спектрометрии навеску сухой питательной среды подвергают минерализации с последующим растворением образовавшейся золы в растворе соляной кислоты. Как правило, в соляной кислоте растворяется вся получаемая зола, и все элементы, находящиеся в сухой среде, переходят в раствор соляной кислоты в виде катионов. Именно концентрацию таких катионов определяют при анализе элементного состава.
Таблица 1: Диаметры зон подавления роста (мм) P. Aeruginosa АТСС 27853 и E. faecalis АТСС 29212
Диски с антимикробными препаратами | Требования МУК | Среда ГНЦ ПМБ | АГВ Махачкала | MXA Bexton Dickinson | MXA HiMedia | MXA НИЦФ |
---|---|---|---|---|---|---|
P. aeruginosa АТСС 27853 | ||||||
Гентамицин 10 мкг | 16-22 | 19-20 19-20 19-21 |
22-25 | 16-20 | 19-23 | 28-30 |
Тобрамицин 10 мкг | 19-25 | 24-25 22-23 22-23 |
24-25 | 20-21 | 22-24 | 26-28 |
Амикацин 30 мкг | 18-26 | 24-25 23-24 24-25 |
23-26 | 21-22 | 22-24 | 29-30 |
Имипемен 10 мкг | 20-28 | 26-28 27-28 25-27 |
25-28 | 27-28 | 27-28 | 30-31 |
Ципрофлоксацин 5 мкг | 25-33 | 29-30 30-32 28-30 |
31-33 | 31-32 | 30-32 | 32-34 |
Цефтазидим 30 мкг | 22-29 | 26-27 25-27 26-29 |
25-27 | 23-24 | 25-26 | 25-27 |
P. faecalis АТСС 29212 | ||||||
Триметоприм/Сульфаметоксазол | > 20 | — | — | 28-30 | 28-30 | — |
Таблица 2: Результаты физико-химического анализа различных питательных сред
Наименование среды | pH | Ca, мг/л | Mg, мг/л | Прочность студня сред по Валенту, г |
---|---|---|---|---|
Требования МУК 4.12.1890-04 | 7,2-7,4 | 20-25 | 10-12,5 | — |
Среда ГНЦ ПМБ Серия 37 | 7,25 | 19,2 | 9,7 | 424 |
Среда ГНЦ ПМБ Серия 48 | 7,3 | 20,9 | 12,4 | 410 |
Среда ГНЦ ПМБ Серия 52 | 7,25 | 20,1 | 10,4 | 400 |
Среда АГВ (Махачкала) | 7,4 | 18,4 | 33,0 | 320 |
Мюллера Хинтон II (BD) | 7,2 | 17,4 | 10,2 | 716 |
Мюллера Хинтон II (HiMedia) | 7,2 | 41,8 | 11,0 | 780 |
Мюллера Хинтон II (НИЦФ) | 7,2 | 6,4 | 2,6 | 313 |
На основе полученного значения концентрации производится перерасчёт концентрации катионов в готовой питательной среде, при этом подразумевается, что все искомые элементы находятся в питательной среде в виде катионов. В отношении двухвалентных металлов такое утверждение не всегда правомерно, поскольку в готовой питательной среде они могут находиться в виде нерастворимых солей, например, фосфатов, которые образуются при взаимодействии катионов двухвалентных металлов с фосфатами в процессе автоклавирования. Такие среды непрозрачны и содержат заметный осадок. Именно такой средой была анализируемая серия среды АГВ.
Снижать проницаемость клеточных стенок псевдомонад и делать микробы резистентными к аминогликозидам и фторхинолонам могут только двухвалентные металлы в виде катионов. Учитывая, что исследованная нами серия среды АГВ после автоклавирования не была прозрачной, можно предположить, что вычисленное значение концентрации Ca и Mg в среде является суммарным, объединяющим содержание как катионов Са2+ и Mg2+, так и Ca и Mg в осадке. Таким образом, в среде АГВ содержание катионов двухвалентных металлов ниже нормируемого уровня. А при низких концентрациях катионов Са2+ и Mg2+ зоны ингибирования роста тест- штамма P. aeruginosa вокруг дисков, содержащих аминогликозиды, превышают критические значения.
Обращает внимание очень низкое содержание Са2+ и Mg2+ в МХА производства НИЦФ. Возможно, поэтому размеры зон ингибиции на данной среде, подобно среде АГВ, вокруг дисков с аминогликозидами и ципрофлоксацином значительно выше, чем на импортных агарах Мюллера-Хинтон.
В заключение хотелось бы остановиться ещё на одной важной характеристике питательных сред для определения чувствительности к антибактериальным препаратам: содержании тимина и тимидина. Наличие в питательной среде свободных тимина и тимидина снижает антимикробную активность in vitro антагонистов фолиевой кислоты — сульфаниламидных препаратов и триметоприма. Поэтому при определении чувствительности к сульфаниламидам и три- метоприму используемые питательные среды должны содержать минимальные концентрации тимидина и тимидина или не содержать их вообще.
Наличие в питательной среде свободных тимина и тимидина снижает антимикробную активность in vitro антагонистов фолиевой кислоты — сульфаниламидных препаратов и триметоприма. Поэтому при определении чувствительности к сульфаниламидам и тримето- приму используемые питательные среды должны содержать минимальные концентрации тимидина и тимидина или не содержать их вообще.
Полученные данные свидетельствуют о том, что питательная среда для определения чувствительности к антибактериальным препаратам производства ГНЦ ПМБ соответствует требованиям МУК 4.12.1890-04, но имеет ограничения в применении.
Ранее в литературе поднимался вопрос о пригодности среды АГВ для определения чувствительности микроорганизмов к антагонистам фолиевой кислоты [9, 12]. Полученные нами данные подтверждают вывод о том, что ни одна из отечественных сред не стандартизована по содержанию тимина и тимидина.
О пригодности питательной среды для определения чувствительности к антифолатам можно косвенно судить по результатам тестирования контрольного штамма E. faecalis ATCC 29212. Согласно требованиям МУК, среда считается удовлетворительной по качеству при диаметре зоны подавления роста E. faecalis ATCC 29212 вокруг диска с триметопримом/сульфаметоксазолом >20 мм. В табл. 1 приведены результаты тестирования чувствительности E. faecalis ATCC 29212 к данному антибактериальному препарату. При тестировании E. faecalis ATCC 29212 на импортных МХА получены зоны подавления роста 2830 мм вокруг диска триметопримом/сульфаме- токсазолом, а на отечественных средах (среда ГНЦМПБ, среда АГВ, среда МХА НИЦФ) подавления роста не наблюдалось.
Заключение
Полученные данные свидетельствуют о том, что питательная среда для определения чувствительности к антибактериальным препаратам производства ГНЦ ПМБ соответствует требованиям МУК 4.12.1890-04, но имеет ограничения в применении. Она не может быть использована для определения чувствительности к антифолатам — сульфаниламидам и тримето- приму.
В настоящее время ни одна из отечественных питательных сред не предназначена для определения чувствительности к сульфаниламидным препаратам и триметоприму.
Литература
- Ericsson H. M. Antibiotic sensitivity testing. Report of an international collaborative study // Acta Pathologica et Microbiologica Scandinavica, 1971, V.17, Suppl. — P. 1-90.
- Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам: Методические указания (МУК 4.12.1890- 04). — М: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. — 91 с.
- Muller J. H. etc. A protein-free medium for isolation of Gonococcus and Meningococcus // Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 1941, V. 48. — P. 330-333.
- Turnidge J. etc. Antimicrobial susceptibility on solid media // Antibiotics in Laboratory Medicine. Ed. : Victor Lorian, 2005. — P. 8-60.
- Гивенталь Н. И. и др. Изучение новой питательной среды АГВ для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам в эксперименте // Антибиотики, 1978, № 1. — C. 53-58.
- Pollock H. M. etc. Effect of different lots of Mueller-Hinton agar on the interpretation of the gentamicin susceptibility of Pseudomonas aeruginosa // Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1978, V. 14. — P. 360-367.
- Andrews J. etc. Evaluation of media available for testing the susceptibility of Pseudomonas aeruginosa by BSAC methodology// Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 2002, V.50. — P. 479-486.
- Potz N. A. C. etc. Reliability of routine disc susceptibility testing by the British Society for Antimicrobial Chemotherapy (BSAC) method// Journal of Antimicrobial Chemotherapy, 2004, V. 53. — P. 729-738.
- Стецюк О. У. и др. Сравнение результатов определения чувствительности к антибиотикам грамотрицательных аэробных бактерий диско-диффузионным методом на среде АГВ и агаре Мюллера-Хинтон // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2004, Т. 6., № 2. — С. 155-167.
- Barry A. L. etc. Susceptibility tests: diffusion test procedures // Manual of Clinical Microbiology. 5th ed. / Balows A., Hausler W. J. Jr., Herrmann K. L., Isenberg H. D., Shadomy H. J., editors. — Washington, D.C: American Society for Microbiology, 1991. — P. 1117-1125.
- Методы контроля бактериологических питательных сред. Методические указания. МУК 4.2.2316-08. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008, C. 67
- Стецюк О. У. и др. Особенности определения чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия, 2001, № 4. — С. 348-354.
Страница не найдена |
Страница не найдена |404. Страница не найдена
Архив за месяц
ПнВтСрЧтПтСбВс
18192021222324
25262728293031
12
12
1
3031
12
15161718192021
25262728293031
123
45678910
12
17181920212223
31
2728293031
1
1234
567891011
12
891011121314
11121314151617
28293031
1234
12
12345
6789101112
567891011
12131415161718
19202122232425
3456789
17181920212223
24252627282930
12345
13141516171819
20212223242526
2728293031
15161718192021
22232425262728
2930
Архивы
Метки
Настройки
для слабовидящих
Лаборатория РКПГ
Лаборатория патогенных грибов была создана в составе НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ГОУ ДПО СПбМАПО Росздрава как «центральная коллекция патогенных грибов Российской Федерации» Приказом Минздрава РФ от 28.01.2004 г. № 19 «О создании Российской коллекции патогенных грибов Минздрава России» (вместе с «Положением о Российской коллекции патогенных грибов (РКПГ)»). В 2014 г. лаборатория переименована в НИЛ «Российская коллекция патогенных грибов» НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И.И. Мечникова Минздрава России.
Задачи РКПГ
1. Сбор, распространение, поддержание культур грибов, относящихся к известным возбудителям заболеваний человека.
2. Научно-методическая работа по систематике, идентификации, длительной консервации грибов и другим вопросам, связанным с деятельностью коллекций.
3. Депонирование отечественных и зарубежных патогенных культур грибов.
4. Координация работ коллекций культур грибов, относящихся к известным возбудителям заболеваний человека.
5. Связь с зарубежными коллекциями; представляет Российскую Федерацию в международных организациях, на конгрессах, конференциях и т.п. по вопросам организации и работы коллекций патогенных грибов.
В настоящее время в музее насчитываются 1400 штаммов патогенных видов грибов – дерматомицеты, дрожжевые и плесневые грибы. Ежегодно РКПГ пополняет «Каталог РКПГ» коллекцию культурами грибов, выделенными от больных микотическими заболеваниями, штаммами грибов, чувствительными и резистентными к наиболее известным антифунгальным средствам, включая антисептики, дезинфектанты; грибов – возбудителей нозокомиальных грибковых инфекций; грибов-контаминантов и деструкторов различных материалов; продуцентов токсинов; и референтными штаммами микромицетов. Также в коллекции хранятся культуры (преимущественно типовые) мицелиальных грибов и дрожжей, поступивших из других коллекций (Всероссийская коллекция микроорганизмов ̶ ВКМ, AmericanTypeCultureCollection ̶ ATCC, NationalCollectionofTypeCultures ̶ NCTC и др.).
«Каталог РКПГ» Коллекционные штаммы микроскопических грибов используются в учебных целях, научных разработках, а также в различных медицинских и фармацевтических учреждениях, в том числе для контроля качества питательных сред, при испытаниях противогрибковой активности и грибостойкости.
Некоторые нормативные правовые акты, содержащие указание на необходимость использования микроскопических грибов:
- «Государственная фармакопея Российской Федерации. XII издание. Часть 1»
- «Методы контроля бактериологических питательных сред. Методические указания. МУК 4.2.2316-08» (утв. Роспотребнадзором 18.01.2008)
- Приказ Минздрава РФ от 14.07.2000 N 263 «О разрешении медицинского применения питательных сред»
- «Методы микробиологического контроля парфюмерно-косметической продукции. Методические указания. МУК 4.2.801-99» (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 27.12.1999)
- «Методы контроля медицинских иммунобиологических препаратов, вводимых людям. Методические указания. МУК 4.1/4.2.588-96» (утв. Госкомсанэпиднадзором РФ 31.10.1996).
История
Наименование коллекции, период |
|
Музей живых культур грибов 1960 – 1987 гг. |
§ Музей живых культур грибов основан профессором П.Н. Кашкиным в 1960 г. § В 1975 г. коллекция была передана в руки хранителя-специалиста – ведущего научного сотрудника, к.б.н. Г.И. Горшковой. § В 1978 г. из Всероссийской коллекции микроорганизмов (ВКМ) поступили на хранение дрожжевые грибы родов Candida, Cryptococcus, Rhodotorula. Музей насчитывал около 1500 штаммов, относящихся к разным видам, родам и семействам. |
Всесоюзная коллекция патогенных грибов (ВКПГ) 1987 – 2004 гг. |
Коллекции придан официальный статус приказом Министерства здравоохранения СССР №855 от 30.06.1987 г. «Об организации Всесоюзной коллекции патогенных грибов (ВКПГ)». На основании этого приказа была организована лаборатория живых культур грибов, имеющая штат сотрудников, занимавшихся сбором, идентификацией и поддержанием в жизнеспособном состоянии культур грибов, относящихся к известным возбудителям заболеваний человека. |
2004 г. – по настоящее время |
Приказ Минздрава РФ от 28.01.2004 №19 «О создании Российской коллекции патогенных грибов Минздрава России» (вместе с «Положением о Российской коллекции патогенных грибов») в целях улучшения координации работы со штаммами грибов, имеющими медицинское значение, определил РКПГ как «центральную коллекцию патогенных грибов Российской Федерации». |
Контакты
Зав. лабораторией Российская коллекция патогенных грибов – Чилина Галина Анастасьевна
тел.: (812) 303-50-00 (доб. 4138, 4137)
e-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.
Фактический и почтовый адрес: 194291, Санкт-Петербург, ул. Сантьяго-де-Куба, д. 1/28, НИИ медицинской микологии им. П.Н. Кашкина ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И.И. Мечникова Минздрава России
Программы обучения
«Питательные среды в микробиологии пищевых производств. Приготовление, хранение и определение рабочих характеристик питательных сред»
с 03 по 04 июня 2021г.
Проводится в формате интерактивной трансляции
«Питательные среды в микробиологии пищевых производств.
Приготовление, хранение и определение рабочих характеристик питательных сред»
19-20 января 2021г.
03-04 июня 2021г.
обучение проходит с участием ФБУН «Государственного научного центра прикладной микробиологии и биотехнологии» г. Оболенск
начало в 10:00 ч. (МСК)
продолжительность интерактивной трансляции 4 часа в день.
В программе семинара:
Питательные среды для культивирования микроорганизмов: классификация, особенности
состава, правила приготовления и стерилизации по ГОСТ ISO 11133-2016. Некоторые возможные ошибки при приготовлении.
Современные питательные среды, используемые в санитарной микробиологии.
Сравнительный анализ современных питательных сред, используемых в санитарной
микробиологии.
Методы контроля питательных сред в соответствии с ГОСТ ISO 11133-2016 и МУК 4.2.2316-08.
Особенности работы с тест- микроорганизмами для контроля качества питательных сред.
По окончании обучения слушатели получают документ
о повышении квалификации установленного образца заказным письмом.
Для участия в семинаре достаточно иметь доступ к интернету на компьютере, телефоне или любом другом электронном устройстве.
Для участия в семинаре необходимо заполнить заявку и направить на [email protected] или в Учебный центр: E-mail: [email protected]. Форма заявки размещена на сайте СПИУПТ www.hlebspb.ru
На основании Вашей заявки заключается договор и направляется счет для оплаты.
Для регистрации направить копию платежного поручения и копию диплома о высшем или среднем профессиональном образовании (без вложения).
После чего Вам поступит письмо с ссылкой на участие в семинаре.
Проверьте техническую готовность Вашего компьютера согласно инструкции, которая будет содержаться в письме подтверждения регистрации на участие в семинаре в дистанционном формате.
Вы будете видеть и слышать лектора, сможете задавать вопросы, наблюдать демонстрацию учебной презентации.
[ все материалы ]
Контроль качества питательных сред | Российский аграрный портал
25 июня 2021 15:47
А вы знаете, что в область аккредитации ФГБУ «Краснодарская МВЛ» включен метод количественного и качественного контроля ростовых свойств питательных сред, который востребован у предприятий, проводящих микробиологические исследования?
Наша лаборатория является одним из первых учреждений, которое получило аккредитацию в этой области: специалисты ФГБУ «Краснодарская МВЛ» качественно и в кратчайшие сроки проводят проверку ростовых свойств питательных сред.
На базе нашего Учебного центра можно пройти курс обучения по теме «Контроль ростовых свойств питательных сред» по ГОСТ Р ИСО 11133-2016 «Микробиология пищевых продуктов, кормов для животных и воды. Приготовление, производство, хранение и определение рабочих характеристик питательных сред» и Методическим указаниям МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических питательных сред».
В отделе бактериологии нашей лаборатории находится музей 44 коллекционных штаммов микроорганизмов, рекомендованных к применению согласно ГОСТ Р ИСО 11133-2016 «Микробиология пищевых продуктов, кормов для животных и воды. Приготовление, производство, хранение и определение рабочих характеристик питательных сред».
Эти музейные штаммы служат для проверки ростовых свойств питательных сред, а также как элемент контроля для подтверждения достоверности результатов исследований согласно ГОСТ ISO/IEC 17025- 2019.
Качество питательных сред – один из важнейших факторов, влияющих на достоверность результата анализа. Строгое соблюдение правил приготовления питательных сред и выполнение комплекса процедур внутреннего контроля качества – неотъемлемая часть обеспечения достоверности, а также воспроизводимости и повторяемости результатов количественных микробиологических анализов.
На конечный результат качества готовой питательной среды может оказать влияние множество различных факторов. Поэтому контроль качества питательных сред должен осуществляться на всех этапах технологического процесса, начиная от момента закупки среды до непосредственного использования в анализе, и включает в себя:
1. Проверку документации и визуальный контроль питательных сред при их получении.
2. Контроль условий и сроков хранения питательных сред.
3. Контроль питательных сред на этапе приготовления.
4. Контроль биологических свойств питательных сред.
5. Контроль питательных сред на этапе использования.
пресс-служба ФГБУ «Краснодарская МВЛ»
Расскажите друзьям: Please enable JavaScript to view the comments powered by Disqus.
Магазин товаров для выпечки Walmart в Норт-Олмстед, Огайо | Горшки для выпечки, формочки для печенья, листы для выпечки | Обслуживание 44070
«,» tooltipToggleOffText «:» Нажмите на переключатель, чтобы получитьБЕСПЛАТНОЙ доставки на следующий день!
«,» tooltipDuration «:» 5 «,» tempUnavailableMessage «:» Скоро вернусь! «,» TempUnavailableTooltipText «:»Мы прилагаем все усилия, чтобы снова начать работу.
- Временно приостановлено в связи с высоким спросом.
- Продолжайте проверять наличие.
0″}, «search»: {«searchUrl»: «/ search /», «enabled»: «false» , «tooltipText»: «
Скажите нам, что вам нужно
«, «tooltipDuration»: 5000, «nudgeTimePeriod»: 10000}}}, «uiConfig»: {«webappPrefix»: «», «artifactId»: «верхний колонтитул -app «,» applicationVersion «:» 20.0,52 «,» applicationSha «:» 2b2fa7ae7cc148e01ffe2ff445132d34fe71577a «,» applicationName «:» верхний колонтитул «,» узел «:» 105de80a-6854-4580-bb69-34d2f0ecd479 «,» облако «:» eus9 «, prod oneOpsEnv «:» prod-a «,» profile «:» PROD «,» basePath «:» / globalnav «,» origin «:» https://www.walmart.com «,» apiPath «:» / header- нижний колонтитул / электрод / api «,» loggerUrl «:» / заголовок-нижний колонтитул / электрод / api / logger «,» storeFinderApi «: {» storeFinderUrl «:» / store / ajax / preferred-flyout «},» searchTypeAheadApi «: { «searchTypeAheadUrl»: «/ search / autocomplete / v1 /», «enableUpdate»: false, «typeaheadApiUrl»: «/ typeahead / v2 / complete», «taSkipProxy»: false}, «emailSignupApi»: {«emailSignupUrl»: » / account / electro / account / api / subscribe «},» feedbackApi «: {» fixedFeedbackSubmitUrl «:» / customer-survey / submit «},» logging «: {» logInterval «: 1000,» isLoggingAPIEnabled «: true,» isQuimbyLoggingFetchEnabled «: true,» isLoggingFetchEnabled «: true,» isLoggingCacheStatsEnabled «: true},» env «:» production «},» envInfo «: {» APP_SHA «:» 2b2fa7ae7cc148e01ffe2ff4451 «APP:0.52-2b2fa7 «},» expoCookies «: {}}роллов Kaiser | Свежий хлеб
РоллыKaiser отлично подходят для пикников, бутербродов и других летних блюд. Самое сложное в их создании — это придать им форму. Если вы хотите, чтобы они были безупречными, закажите себе рулонный штамп кайзера. Или вы можете раскатать тесто и связать его узлом, как предлагает Питер Рейнхарт в «Ученике хлебопекаря». Ниже я покажу вам самый простой способ.
Рецепт, который я использую, представляет собой нечто среднее между рецептами Бернарда Клейтона и Питера Рейнхарта.В рецепте Питера используется предварительная ферментация, а в том, что я перечислил ниже, нет. Вы можете легко настроить этот рецепт для использования предварительного брожения: просто добавьте немного старого теста, если вы хотите использовать ферментатор для паштетов . Или возьмите чашку муки, 1/2 стакана воды и 1/4 чайной ложки дрожжей, смешайте их вместе и дайте им постоять в закрытой миске на ночь, чтобы получилась смесь poolish . Любой метод приведет к получению более ароматного рулета, но если вы собираетесь делать бутерброды, намазанные горчицей или острым сыром, что может нарушить вкус хлеба, дополнительная работа, вероятно, не оправдана.
Kaiser Rolls
Изготавливает 8-12 булочек, в зависимости от их размера
3 1/2-4 стакана (1 фунт) хлеба или небеленой универсальной муки
1 1/2 чайной ложки быстрорастворимых дрожжей
1 чайная ложка соли
1 столовая ложка сахара
1 столовая ложка солодового порошка
1 столовая ложка масла или масла
1 яйцо
1 яичный белок
1 1/4 стакана (10 унций) воды
Смешайте 3 стакана муки и других сухих ингредиентов в миске или чаше миксера.Добавьте воду, яйца и жир. Месите вручную в течение примерно 10 минут или 5-7 минут в миксере, при необходимости добавляя пригоршню муки. Тесто должно быть липким, но не слишком влажным. Поместите тесто в смазанную маслом миску, накройте крышкой и дайте подняться, пока оно не увеличится вдвое, примерно на 1 час. Перед формированием дайте ему подойти второй раз в течение часа. Чтобы придать форму рулетам, разделите тесто на более мелкие кусочки (если у вас есть особенность, используйте весы, чтобы они были одинакового размера).Скатайте кусочки теста в шарики и накройте их влажным кухонным полотенцем, чтобы они могли расслабиться в течение 5 минут.
Чтобы придать им форму, сначала я прессую их в плоские диски на хорошо посыпанной мукой поверхности (Клейтон предлагает использовать ржаную муку, хотя подойдет и любой тип муки). Я дал им отдохнуть, накрывшись, еще 5 минут. Затем снова растягиваю тесто немного тоньше и складываю кусочки в центр.
Наконец, я нажимаю в центре, чтобы плотно закрыть.
Я кладу их лицом вниз на противень, покрытый маком, пока они поднимаются в последний час.
Можно просто дать им подняться лицевой стороной вверх, а затем сбрызнуть их водой и посыпать маком, но это предотвратит раскалывание уплотнений во время подъема.
Разогрейте духовку до 450 во время окончательного подъема.Непосредственно перед тем, как поставить их в духовку, переверните булочки вертикально. Когда вы их запекаете, вам нужен пар в духовке, поэтому используйте любую технику, которую вы предпочитаете: поливайте их водой, поливайте стенки духовки водой, наливайте кипяток в предварительно нагретую чугунную сковороду или противень. Эти булочки выпекаются примерно за 20-25 минут. Я предлагаю перевернуть сковороду через 10 минут, чтобы они равномерно подрумянились.
Родственный рецепт: Рулетики из картофеля и розмарина .
Расшифровка сложностей протеома пшеничной муки с использованием количественного двумерного электрофореза, трех протеаз и тандемной масс-спектроскопии
38. D’Ovidio R, Masci S: низкомолекулярные субъединицы глютенина
глютена пшеницы. J. Cereal Sci 2004, 39: 321-339.
39. Поршень Ф, Дорадо Дж., Мартин А., Барро Ф: Клонирование девяти мРНК гамма-глиадина
(кДНК) из пшеницы и молекулярная характеристика сравнительных
уровней транскриптов подклассов гамма-глиадина.J Cereal Sci 2006, 43: 120-128.
40. DuPont FM, Chan R, Vensel WH, Kasarda DD: Характеристика ω-глиадинов типа 1B-
из сорта Triticum aestivum Butte. Cereal Chem 2000,
77: 607-614.
41. Альтенбах С.Б., Котари К. Гены омега-глиадина, экспрессируемые в Triticum
aestivum cv Butte 86: влияние удобрения после цветения на накопление транскрипта
во время развития зерна. J. Cereal Sci 2007, 46: 169-177.
42. van Herpen TWJM, Goryunova SV, van der Schoot J, Mitreva M, Salentijn E,
Vorst O, Schenk MF, van Veelen PA, Koning F, van Soest LJM, Vosman B,
Bosch D, Hamer RJ, Gilissen LJWJ, Smulders MJM: Гены альфа-глиадина
из геномов A, B и D пшеницы содержат различные наборы эпитопов глютеновой болезни
.BMC Genomics 2006, 7: 1.
43. Кан И, Ван И, Бодуан Ф., Лидер Д.Д., Эдвардс К., Пул Р., Ван Д.,
Митчелл, RAC, Шьюри П.: Анализ транскриптома показывает, что
транскриптов запасного белка по-разному экспрессируются в семенах эгилопса и пшеницы.
J Cereal Sci 2006, 44: 75-85.
44. Андерсон О.Д., Хсиа С.К., Адальштейн Э., Лью Дж.Л., Касарда Д.Д.: Идентификация
нескольких новых классов низкомолекулярных белков, связанных с глиадином, и
генов.Theor Appl Genet 2001, 103: 307-315.
45. Гарг М., Рао Ю.С., Гоял А., Сингх Б.: Вариации запасного протеина семян
тритицина среди диплоидных видов Triticum и Aegilops. Биотехнология 2007,
6: 444-446.
46. Сингх Н.К., Донован Г.Р., Карпентер Х.С., Скерритт Дж. Х., Лангридж П.: Изоляция
и характеристика кДНК тритицина пшеницы, выявляющая уникальный повторяющийся домен, богатый лизином-
. Молекулярная биология растений 1993, 22: 227-237.
47.Шайладжа К., Ратор М., Пури Н., Ядав Д., Сингх Н.К.: ПЦР-амплификация гипервариабельной области
генов тритицина пшеницы. J Cereal Sci 2002, 35: 129-134.
48. Сингх Н.К., Шеперд К.В.: Структура и генетический контроль нового класса
дисульфидно-связанных белков в эндосперме пшеницы. Theor Appl Genet
1983, 71: 79-92.
49. Gu YQ, Wanjugi H, Coleman-Derr D, Kong X, Anderson OD: Консервативный ген глобулина
в восьми геномах травы идентифицирует фундаментальные единицы
локусов, кодирующих запасные белки семян.Funct Integr Genomics 2010,
10: 111-122.
50. Сюй Дж.Х., Мессинг Дж .: Амплификация генов запасного протеина проламина в
различных подсемействах Poaceae. Theor Appl Genet 2009,
119: 1397-1412.
51. Альтенбах С.Б., Танака С.К., Хуркман В.Дж., Вензель WH: Экспрессия глобулина-
2, члена суперсемейства купинов белков с подобием
известных пищевых аллергенов, увеличивается при высоких температурах
во время развитие зерна пшеницы.J Cereal Sci 2009, 49: 47-54.
52. Лойт Э., Мельник К.В., Макфарлейн А.Дж., Скотт Ф.В., Алтозаар I. Идентификация трех генов глобулина пшеницы
путем скрининга геномной библиотеки Triticum aestivum BAC
с кДНК из диабет-ассоциированного глобулина. BMC
Plant Biol 2009, 9:93.
53. Гомес Л., Санчес-Монге Р., Лопес-Отин С., Сальседо Г.: Пшеничные ингибиторы
гетерологичных α-амилаз. Физиология растений 1991, 96: 768-774.
54. Сингх Дж., Скерритт Дж. Хромосомный контроль альбуминов и глобулинов в зерне пшеницы
, оцененный с использованием различных процедур фракционирования.J Cereal
Sci 2001, 33: 163-181.
55. Østergaard H, Rasmussen SK, Roberts TH, Hejgaard J: ингибирующие серпины
из зерна пшеницы с реактивными центрами, напоминающими
богатых глутаминомповторов запасных белков проламина. J Biol Chem 2000, 275: 33272-33279.
56. Хабука Н., Катаока Дж., Мияно М., Цуге Н., Аго Н., Нома М: нуклеотидная последовательность
геномного гена, кодирующего тритин, рибосома, инактивирующая белок
из Triticum aestivum.Завод Мол Биол 1993, 22: 171-176.
57. Craig R, Beavis RC: метод сокращения времени, необходимого для сопоставления последовательностей
белков с тандемными масс-спектрами. Rapid Commun Mass
Spectrometry 2003, 17: 2310-2316.
58. Vensel WH, DuPont FM, Chan R, Hurkman WJ:
идентификации субъединиц LMW глютенина на основе масс-спектрометрии. В белках глютена. Под редакцией:
Lookhart GL, Ng PKW. AACC International, Inc., Миннеаполис; 2007: 347-351.
59.Vensel WH, Dupont FM, Sloane S, Altenbach SB: Влияние фермента расщепления
, алгоритм поиска и база данных приманок на масс-спектрометрическую идентификацию
белков глютена пшеницы. Phytochemistry 2011.
60. Альтенбах С.Б., Дюпон Ф., Котари К., Чан Р., Джонсон Э.Л., Лие Д .:
Температура, вода и удобрения влияют на время ключевых событий
во время развития зерна яровой пшеницы в США. J Cereal Sci 2003,
37: 9-20.
61. Dupont FM, Hurkman WJ, Vensel WH, Chan R, Lopez R, Tanaka CK,
Altenbach SB: Дифференциальное накопление белков пшеничной муки с высоким и низким содержанием серы
зависит от температуры и минерального питания
в процессе развития зерна.J Cereal Sci 2006, 44: 101-112.
62. Программный каркас Proteome: [http://www.proteomesoftware.com/Scaffold].
63. Индекс гена пшеницы DFCI: [http://compbio.dfci.harvard.edu/tgi/cgi-bin/tgi/
gimain.pl?gudb=wheat].
64. Samaroo D, Dickerson F, Kasarda DD, Green PHR, Briani C, Yolken RH,
Alaedini A: Новый иммунный ответ на глютен у людей с шизофренией
. Schizophrenia Res 2010, 118: 248-255.
65. Санчес-Монге Р., Гомес Л., Барбер Д., Лопес-Отин С., Арментия А,
Сальседо Г.: Аллергены пшеницы и ячменя, связанные с астмой пекарей.
Biochemistry Journal 1992, 281: 401-405.
66. Гао Л., Ван А., Ли Х, Донг К., Ван К., Апплс Р., Ма В., Ян Y: Пшеница
дифференциальные выражения альбуминов и глобулинов, связанные с качеством
, выявленные с помощью двумерного разностного гель-электрофореза ( 2-D ЦИФР).
J Proteomics 2009, 73: 279-296.
67. Merlino M, Leroy P, Chambon C, Branlard G: Картирование и протеомный анализ
белков альбумина и глобулина в гексаплоидных зернах пшеницы
(Triticum aestivum).Theor Appl Genet 2009, 118: 1321-1337.
68. Wang LH, Zhao L, He H, Ma W, Appels R, Pena RJ, Xia XC: Характеристика
генов низкомолекулярной субъединицы глютенина Glu-B3 и
развития маркеров STS в мягкой пшенице (Triticum aestivum L).
Theor Appl Genet 2009, 118: 525-539.
69. Wang L, Li G, Pena RJ, Xia X, He Z: Разработка маркеров STS и
установление мультиплексной ПЦР для аллелей Glu-A3 в мягкой пшенице
(Triticum aestivum L.). J Cereal Sci 2010, 51: 305-312.
70. Дагда Р.К., Султана Т., Лайонс-Вейлер Дж .: Оценка консенсуса четырех алгоритмов идентификации пептидов
для тандемной масс-спектрометрии на основе протеомики
. J Proteomics Bioinform 2010, 3: 39-47.
71. Герберт Б., Хопвуд Ф., Оксли Д., Маккарти Дж., Лейвер М., Гриньер Дж., Гудолл А.,
Уильямс К., Кастанья А., Ригетти П.Г.: β-исключение: неожиданный артефакт
в протеомном анализе. Proteomics 2003, 3: 826-831.
72. Görg A, Weiss W: Proteomic Forum ‘03: Международное совещание по анализу протеома
. Протеомика. 2004, 4: 3665-3685.
73. Ригетти П.Г.: Реальные и мнимые артефакты в протеомном анализе с помощью двухмерных карт
. Журнал хроматографии B 2006, 841: 14-22.
74. Sarioglu H, Lottspeich F, Walk T, Jung G, Eckerskorn C: Дезамидирование как широко распространенное явление в двумерном полиакриламидном геле
электрофорез белков плазмы крови человека.Электрофорез 2000,
21: 2209-2218.
75. Kim JY, Lee JH, Park GW, Cho K, Kwon KH, Park YM, Cho SY, Paik YK,
Yoo JS: Применение оценок массы белков, полученных с помощью электрофореза, как
дополнительных ограничений в протеомном анализе человека. сыворотка на основе анализа
MS / MS. Proteomics 2005, 5: 3376-3385.
76. Lutter P, Meyer HE, Langer M, Witthohn K, Dormeyer W., Sickmann A,
Blüggel M: Исследование вариантов заряда rViscumin с помощью двухмерного гель-электрофореза
и масс-спектрометрии.Электрофорез
2001, 22: 2888-2897.
77. Думур Дж., Бранлард Дж., Танги А-М, Дардевет М., Коритон О, Юто В.,
Лемуан Дж., Джайер Дж .: Развитие изогомеоаллельных линий в пределах сорта
пшеницы. Курто для высокомолекулярных субъединиц глютенина: перенос
локуса Glu-D1 на хромосому 1A. Theor Appl Genet 2009,
119: 471-481.
78. Зорб К., Штайнфурт Д., Селинг С., Лангенкампер Г., Келер П., Визер Х.,
Линдхауэр М.Г., Мюлинг К.Х.: Количественный белковый состав и выпечка
Качествоозимой пшеницы в зависимости от позднего внесения серных удобрений.Дж. Сельское хозяйство
Food Chem 2009, 57: 3877-3885.
79. Masci S, D’Ovidio R, Lafiandra D, Kasarda DD: низкомолекулярная субъединица глютенина с кодом 1B —
весом, связанная с качеством твердой пшеницы, демонстрирует
сильное сходство с субъединицей, присутствующей в некоторых сортах мягкой пшеницы. сорта.
Theor Appl Genet 2000, 100: 396-400.
80. Hurkman WJ, Tanaka CK: Экстракция белков эндосперма пшеницы для анализа протеома
. J Chromatography B 2007, 849: 344-350.
81. Херкман В.Дж., Танака К.К.: Усовершенствованные методы разделения белков эндосперма пшеницы
и анализ с помощью двумерного электрофореза в геле
. J. Cereal Sci 2004, 40: 295-299.
82. Лоури О.Н., Роузбро, штат Нью-Джерси, Фарр А.Л., Рэндалл Р.Дж.: Измерение белка с помощью фенольного реагента Folin
. Журнал биологической химии 1951, 193: 265-275.
Дюпон и др. Proteome Science 2011, 9:10
http://www.proteomesci.com/content/9/1/10
Страница 28 из 29
OCR Текст | Показать BUS1NESSDI RECTO R Y.Tlioe wIhimi iirtinoh не найдены в тонком или-lot.-tory могут организовать для tla-ti lusenlou, tfso Ik-nry L. Steed, (Jeneral Hardware и ilupkft. Brisliam Citv Holler Flour Mills, Siul. Smith, Mgr. Bunk nf Briham Oity.JT Rich ami Co., lianktrrt. McMtisler: uil Kosgren, LtitnlxT, Hardware Hardware and Ptlinty. B. C. M. t M. Assn., General Merchandise, Merchan-Dis, AK tfnow, Supt. A. II. Snow, преемник шорно-седельного оборудования hii.I Paint Uepurtnient. Boot lie t 1’eirce. General Merchandise and Drns; L.T. Petrce, ManHgnr. Buclr Print Iiib Si Publ. Co, Все клуды .Все Работают. Представьте себе Bpccialty. K. L. iMj-hlmrn A Sons, General Merchandise Mer-chandise и 1’rodace. Union Pacific K. H. Co. i.ovelaml A Glover, Livery Siables. П. Н. Пирс, «Городской колокол» Дрей Фургон. Победить. Хауден, Диайинан. Уилкс А. Чад фитиль, поверенные, С. Л. С. Бин) и Лоу. Адвокаты. Солт-Лейк-Сити. Т. К. Бейли, поверенный, Солт-Лейк-Сити. L. Bi’itf. Младший, профессиональный Барбср. American Biscuit Mfg. Co., Парусное озеро. 1 Lr.Сноу О.В., стоматолог. j. — Джон (Jht-wtensen, Merchant. Jensen tt Jeppson, Marble Works. JH Bott, Box Klder Marble Works. AW CoinntDii, художественный фотограф. Bowring’s IlamesH Shop. I.arsOlsen, pluinljer. Corinne Mercantile Co., К. П. Джонсон, поверенный-at) -Закон. Магазин обуви Pioneer Boot anil. NC Mortensen A Son. Machinery, и т. Д. Морони Мортенсен, Surveying, BR City CM Squires, подрядчик и строитель. Венская пекарня, хлеб и мороженое. JF h’rdmann A. Co., Meat Рынок. Эдвард Б.Кирк, лицензированный реферат. Knudson Bros., дилеры по производству. Руль Чнвсон, лицензированный реферат. O. Jtppson A Co., Подковы лошадей. Б. Х. Джонс, адвокат. Rich A HiMinan, шерсть, шкуры и т. Д. |
% PDF-1.5 % 5037 0 obj> эндобдж xref 5037 86 0000000016 00000 н. 0000007009 00000 н. 0000002016 00000 н. 0000007117 00000 н. 0000007249 00000 н. 0000007979 00000 н. 0000008048 00000 н. 0000008108 00000 п. 0000008169 00000 н. 0000009666 00000 н. 0000011047 00000 п. 0000011096 00000 п. 0000011145 00000 п. 0000012523 00000 п. 0000013793 00000 п. 0000015170 00000 п. 0000016503 00000 п. 0000017166 00000 п. 0000017307 00000 п. 0000017547 00000 п. 0000017766 00000 п. 0000018108 00000 п. 0000018177 00000 п. 0000019632 00000 п. 0000020308 00000 п. 0000022522 00000 н. 0000023695 00000 п. 0000025893 00000 п. 0000026496 00000 н. 0000027692 00000 п. 0000029914 00000 н. 0000030539 00000 п. 0000031705 00000 п. 0000033882 00000 п. 0000034482 00000 п. 0000035656 00000 п. 0000036266 00000 п. 0000036857 00000 п. 0000037457 00000 п. 0000038064 00000 п. 0000038672 00000 п. 0000039256 00000 п. 0000039849 00000 п. 0000040406 00000 п. 0000040986 00000 п. 0000041582 00000 п. 0000042185 00000 п. 0000042802 00000 п. 0000043415 00000 п. 0000045294 00000 п. 0000048015 00000 п. 0000056721 00000 п. 0000057211 00000 п. 0000065278 00000 п. 0000067950 00000 п. 0000068411 00000 п. 0000068872 00000 п. 0000081799 00000 п. 0000082396 00000 п. 0000085309 00000 п. 0000088111 00000 п. 0000088571 00000 п. 0000089158 00000 п. 0000097983 00000 п. 0000098516 00000 п. 0000098984 00000 п. 0000101946 00000 н. 0000102405 00000 п. 0000111808 00000 н. 0000120223 00000 н. 0000120710 00000 н. 0000121184 00000 н. 0000128068 00000 н. 0000128554 00000 н. 0000131736 00000 н. 0000277979 00000 н. 0000278465 00000 н. 0000278923 00000 н. 0000282735 00000 н. 0000283225 00000 н. 0000288717 00000 н. 0000289208 00000 н. 0000296406 00000 н. 0000301801 00000 н. 0000301932 00000 н. 0000302063 00000 н. трейлер ] >> startxref 0 %% EOF 5039 0 obj> поток xZ8UY _ {; sp-AqKprKV $ lt * $ rI * Q $) * \ +) PFQfEL * zzσmw]
Страница не найдена — ScienceDirect
Пандемия COVID-19 и глобальное изменение окружающей среды: новые потребности в исследованиях
Environment International, том 146, январь 2021 г., 106272
Роберт Баруки, Манолис Кожевинас, […] Паоло Винеис
Исследование количественной оценки риска изменения климата в городском масштабе: обзор последних достижений и перспективы будущего направления
Обзоры возобновляемых и устойчивых источников энергии, Том 135, Январь 2021 г., 110415
Бинь Йеа, Цзинцзин Цзян, Чжунго Лю, И Чжэн, Нань Чжоу
Воздействие изменения климата на экосистемы водно-болотных угодий: критический обзор экспериментальных водно-болотных угодий
Журнал экологического менеджмента, Том 286, 15 мая 2021 г., 112160
Шокуфе Салими, Сухад А.A.A.N. Алмуктар, Миклас Шольц
Обзор воздействия изменения климата на общество в Китае
Достижения в исследованиях изменения климата, Том 12, выпуск 2, апрель 2021 г., страницы 210-223
Юн-Цзянь Дин, Чен-Ю Ли, […] Цзэн-Ру Ван
Общественное мнение об изменении климата и готовности к стихийным бедствиям: данные Филиппин
2020 г.
Винченцо Боллеттино, Тилли Алкайна-Стивенса, Манаси Шарма, Филип Ди, Фуонг Пхама, Патрик Винк
Воздействие бытовой техники на окружающую среду в Европе и сценарии снижения их воздействия
Журнал чистого производства, Том 267, 10 сентября 2020 г., 121952
Роланд Хишье, Франческа Реале, Валентина Кастеллани, Серенелла Сала
Влияние глобального потепления на смертность апрель 2021 г.
Раннее человеческое развитие, Том 155, апрель 2021 г., 105222
Жан Каллея-Агиус, Кэтлин Инглэнд, Невилл Каллеха
Понимание и противодействие мотивированным корням отрицания изменения климата
Текущее мнение об экологической устойчивости, Том 42, февраль 2020 г., страницы 60-64
Габриэль Вонг-Пароди, Ирина Фейгина
Это начинается дома? Климатическая политика, нацеленная на потребление домашних хозяйств и поведенческие решения, является ключом к низкоуглеродному будущему
Энергетические исследования и социальные науки Том 52, июнь 2019, страницы 144-158
Гислен Дюбуа, Бенджамин Совакул, […] Райнер Зауэрборн
Трансформация изменения климата: определение и типология для принятия решений в городской среде
Устойчивые города и общество, Том 70, июль 2021 г., 102890
Анна К. Херлиманн, Саре Мусави, Джеффри Р. Браун
«Глобальное потепление» против «изменения климата»: повторение связи между политической самоидентификацией, формулировкой вопроса и экологическими убеждениями.
Журнал экологической психологии, Том 69, июнь 2020, 101413
Алистер Раймонд Брайс Сауттер, Рене Мыттус
Влияние условий экструзии и включения абрикосового порошка на цветовые параметры рисовых закусок для завтрака
Nazir F, Naik H.Р., Хуссейн С. З. Влияние условий экструзии и включения абрикосового порошка на цветовые параметры рисовых закусок для завтрака. Biotech Res Asia 2016; 13 (3).
Физа Назир, Х. Р. Найк и Сайед Замир Хуссейн
Отделение послеуборочных технологий, Университет сельскохозяйственных наук и технологий Шери-Кашмира, Кашмир Шалимар, Сринагар, Дж. Энд К, Индия-1
.РЕФЕРАТ: Взяв измельченную рисовую муку в качестве основного ингредиента, абрикосовый порошок был использован в этом исследовании для разработки закусок для завтрака с использованием двухшнекового экструдера.Методология поверхности отклика с использованием центральной композитной вращающейся конструкции использовалась для оценки влияния независимых переменных, а именно состава (0-40% абрикоса), температуры бочки (110–190 o ° C), скорости вращения шнека (150–550 об / мин) и влажность (12,5-22,5%) по параметрам цвета продукта (L *, a *, b *, цветность, угол оттенка и ∆E). Были получены уравнения множественной регрессии для описания влияния каждой переменной на реакцию продукта (L *, a *, b *, цветность, угол оттенка и ∆E).На характеристики продукта больше всего влияли изменения в составе, температуре цилиндра и, в меньшей степени, на скорость вращения шнека и содержание влаги. Повышение температуры и добавление абрикоса снизили яркость; при увеличении покраснения и желтизны экструдатов по сравнению с контролем (0% абрикоса).
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: Color; абрикосовый порошок; рис битый; закуски к завтраку; методология поверхности отклика
Введение
Экструзия, представляющая собой комбинацию единичных операций, обеспечивает гибкость с точки зрения контроля температуры, механического сдвига и форм продукта, что лучше всего подходит для производства готовых к употреблению закусок [1].Экструзионное приготовление может изменить функциональность пищевых ингредиентов в дополнение к обычным преимуществам тепловой обработки [2]. Сырье подвергается ряду химических и структурных превращений, таких как клейстеризация крахмала, денатурация белка, образование амилазы и липидных комплексов и реакция разложения витаминов и пигментов [3]. Экструдированные закуски в основном содержат мало витаминов и минералов, поскольку они изготавливаются в основном из богатого крахмалом сырья (злаки / зерна) из-за их хорошего расширения.В последние десятилетия потребители стали более заботиться о своем здоровье. Растет потребительский спрос на продукты питания с добавленной стоимостью, особенно фрукты, овощи и другие функциональные продукты [4]. Обогащение экструдированных закусок питательно ценными ингредиентами все чаще практикуется во многих исследованиях, в которых лидирует добавление ингредиентов, богатых белком и клетчаткой, таких как бобовые или сывороточный белок, а добавление фруктов и овощей изучается в меньшей степени [5]. Цвет пищевого продукта играет жизненно важную роль в его приемлемости для потребителей.Натуральные красители приобретают все большее значение в связи с растущим беспокойством общественности по поводу безопасности синтетических красителей. В абрикосе основным производным каротиноидов является β-каротин. Плод имеет ярко выраженный восхитительный вкус, приятный запах и цвет от желтого до оранжевого. В присутствии β -каротина , в пищевых продуктах можно наблюдать желтовато-оранжевый цвет. Использование натуральных красителей перед экструзией не только повысило бы внешний вид и приемлемость, но также могло бы сформировать подходящую матрицу для доставки функциональных ингредиентов потребителям.
Методология поверхности отклика (RSM) — это эффективный инструмент оптимизации, в котором многие факторы и их взаимодействия, влияющие на отклик, могут быть идентифицированы с помощью меньшего количества экспериментальных испытаний. RSM широко используется в различных областях пищевой промышленности, включая экструзию [6-7], разработку пищевых продуктов, состав сред в биотехнологии, биотехнологию, такую как ферментативный гидролиз и ферментация. В этом исследовании абрикосовый порошок смешивали с рисовой мукой на разных уровнях для получения готовой к употреблению экструдированной закуски для завтрака, и сообщалось о влиянии переменных экструзии и добавления абрикосового порошка на координаты цвета экструдатов на основе риса.
Материалы и методы
Материалы
Рис был закуплен на местном рынке и очищен с помощью рисовой мельницы Satake для получения коричневого риса, который, в свою очередь, был пропущен через рисовую шлифовальную машину. Мелкие рисовые брокколи измельчали в лабораторной мельнице модели 3303 (Пертен, Швеция) до тонкости, которая пропускалась через сито 200 мкм. Сушеный абрикос был приобретен на местном рынке и измельчен в порошок.
Приготовление пробы
Смеси были приготовлены из рисовой муки и абрикосового порошка в определенных соотношениях для проведения 30 прогонов в экструдере.Содержание влаги в рисовой муке и смесях определяли методом сушки в печи [8] и корректировали для различных смесей в соответствии с экспериментами.
Экструзионная обработка
Экструзию выполняли с использованием двухшнекового экструдера, вращающегося в одном направлении, модели BC 21 (Clextral, Фирмини, Франция). Ствол состоял из четырех зон с электрическим обогревом. Распределение температуры внутри ствола варьировалось от низкого в зоне рядом с кормом до высокого в зоне рядом с умирающим.Температура 1-го, 2-го и 3-го каналов поддерживалась на уровне 20, 30 и 40 ℃, соответственно, на протяжении всего исследования; при этом температура в последней зоне (секции сжатия и штампа) варьировалась. Экструдер был оснащен индикатором крутящего момента, который показывал процент крутящего момента, пропорциональный току, потребляемому приводным двигателем. Сырье подавали в экструдер с помощью одношнекового объемного дозатора. Экструдер был тщательно откалиброван в отношении используемых комбинаций скорости подачи и скорости шнека.Скорость подачи варьировалась для оптимального функционирования цилиндра экструдера в соответствии со скоростью шнека. Водяной насос впрыскивает воду непосредственно в цилиндр экструдера для достижения желаемого содержания влаги в загружаемом материале. Для формования экструдатов использовали резак с четырьмя лезвиями и головкой (6 мм) из нержавеющей стали.
Измерение цвета
Цвет экструдатов был измерен с помощью колориметра Hunter Lab в единицах значения Hunter L * (яркость, от 0 до 100, указывающая от черного к белому), значение * (значение + a * указывает на красноту, а значение −a * указывает на зеленоватость) и значение b * (значение + b * указывает на желтизну, а значение -b * указывает на голубизну).Общее изменение цвета (∆E), цветность (CR), угол оттенка (HA) рассчитывались из значений L *, a * и b * в соответствии с приведенными ниже уравнениями.
Цветность
Угол тона
Где ∆L = L * Образец — L Контроль , ∆a = a * Образец — a * Контроль , ∆b = b * Образец — b * Контроль
Экструдированный закусочный дробленый рис использовали в качестве контроля.
Схема эксперимента и статистический анализ
План эксперимента был основан на центральном составном плане для четырех независимых переменных и пяти уровней.Независимыми переменными, рассматриваемыми в этом исследовании, были температура бочки (от 110 ° C до 190 ° C), скорость вращения шнека (от 150 до 550 об / мин), содержание влаги (от 12,5% до 22,5%) и уровень абрикоса (от 0 до 40%). Зависимыми переменными были параметры цвета Хантера (L *, a *, b *), цветность, угол оттенка и ∆E. Методология поверхности отклика применялась для исследования влияния переменных экструзии на параметры цвета продукта. Ответы, полученные в результате предложенного плана эксперимента, подвергали регрессионному анализу, чтобы оценить влияние состава (рис: абрикос), содержания влаги, скорости вращения шнека и температуры цилиндра на характеристики продукта.Модели полиномиальной регрессии второго порядка были созданы для зависимых переменных, чтобы соответствовать экспериментальным данным для каждого ответа, с использованием статистического программного обеспечения Design-Expert 8 (Stat-Ease Inc, Миннеаполис, Миннесота, США).
, где x i (i = 1, 2, 3, 4) — независимые переменные (состав, влажность, скорость шнека и температура цилиндра соответственно), а b 0 , b i , b ii и bij — коэффициент для перехватывающих, линейных, квадратичных и интерактивных эффектов соответственно.Данные были проанализированы с помощью множественного регрессионного анализа, и статистическая значимость условий должна быть изучена с помощью дисперсионного анализа (ANOVA) для каждого ответа.
Результаты и обсуждение
Влияние условий экструзии на Col наши параметры
Согласно результатам регрессии, уровень абрикосового порошка имел доминирующее влияние на параметры цвета L *, a *, b *, цветность, угол оттенка и общее изменение цвета экструдатов. Регрессионный анализ для определения желаемых констант дал коэффициент регрессии (R 2 ), равный 0.9961, 0.9931, 0.9842, 0.9806, 0.9897, 0.9963 для параметров цвета L *, a *, b *, цветности, угла оттенка и ∆E соответственно. Параметр L * отрицательно коррелировал со значениями a * и b *. С другой стороны, значения a * и b * положительно коррелировали друг с другом. Параметры цвета Хантера, цветность, угол оттенка и общее изменение цвета (∆) экструдатов при различных условиях экструзии показаны в таблице 1.
Таблица 1: Влияние экструзии на параметры цвета
Бег | Условия экструдера | Параметры цвета | ||||||||
Состав (R: A) (%) | Влажность (%) | Скорость вращения шнека (об / мин) | Температура (ºC) | л * | а * | б * | цветность | Угол оттенка | ∆E | |
1. | 90:10 | 15 | 250 | 130 | 55,84 | 3,05 | 32,49 | 32,63 | 84,63 | 5,13 |
2. | 70:30 | 15 | 250 | 130 | 53,52 | 5,29 | 34,5 | 34,9 | 81,28 | 8,71 |
3. | 90:10 | 20 | 250 | 130 | 55.98 | 2,89 | 32,01 | 32,14 | 84,84 | 4,66 |
4. | 70:30 | 20 | 250 | 130 | 53,55 | 5,17 | 33,55 | 33,94 | 81,23 | 8,04 |
5. | 90:10 | 15 | 450 | 130 | 57,2 | 2,35 | 31.45 | 31,53 | 85,72 | 3,39 |
6. | 70:30 | 15 | 450 | 130 | 54,02 | 4,18 | 33,32 | 33,53 | 82,84 | 7,2 |
7. | 90:10 | 20 | 450 | 130 | 57,35 | 2,23 | 31,12 | 31,99 | 85.9 | 3,02 |
8. | 70:30 | 20 | 450 | 130 | 54,3 | 4,01 | 32,54 | 32,78 | 82,97 | 6,4 |
9. | 90:10 | 15 | 250 | 170 | 53,81 | 4,86 | 33,05 | 33,4 | 81,63 | 7,44 |
10. | 70:30 | 15 | 250 | 170 | 51,87 | 7,42 | 35,98 | 36,73 | 78,34 | 11,62 |
11. | 90:10 | 20 | 250 | 170 | 53,72 | 4,76 | 34,12 | 34,45 | 82,05 | 8,14 |
12 | 70:30 | 20 | 250 | 170 | 51.39 | 7,38 | 35,43 | 36,19 | 78,23 | 11,58 |
13. | 90:10 | 15 | 450 | 170 | 54,17 | 4,21 | 32,02 | 32,29 | 82,5 | 6,36 |
14. | 70:30 | 15 | 450 | 170 | 51,86 | 5,89 | 34.96 | 35,45 | 80,43 | 10,35 |
15. | 90:10 | 20 | 450 | 170 | 54,32 | 3,79 | 32,98 | 33,19 | 83,44 | 6,69 |
16. | 70:30 | 20 | 450 | 170 | 51,9 | 5,62 | 34,54 | 34,99 | 80.75 | 9,97 |
17. | 100: 0 | 17,5 | 350 | 150 | 59,13 | 2,02 | 28,68 | 28,75 | 85,97 | 0 |
18. | 60:40 | 17,5 | 350 | 150 | 53,76 | 6,42 | 33,54 | 34,14 | 79,16 | 8,47 |
19. | 80:20 | 12,5 | 350 | 150 | 52,58 | 5,12 | 34,72 | 35,09 | 81,61 | 9,43 |
20. | 80:20 | 22,5 | 350 | 150 | 53 | 4,98 | 33,45 | 33,81 | 81,53 | 8,31 |
21. | 80:20 | 17.5 | 150 | 150 | 53,02 | 5,05 | 34,88 | 35,24 | 81,76 | 9,21 |
22. | 80:20 | 17,5 | 550 | 150 | 54,83 | 3,03 | 32,81 | 32,94 | 84,72 | 6,04 |
23. | 80:20 | 17,5 | 350 | 110 | 55.32 | 2,04 | 32,57 | 32,63 | 86,41 | 5,44 |
24. | 80:20 | 17,5 | 350 | 190 | 50,02 | 6,23 | 35,26 | 35,8 | 79,97 | 12 |
25. | 80:20 | 17,5 | 350 | 150 | 52,15 | 4,67 | 34.12 | 34,43 | 82,2 | 9,23 |
26. | 80:20 | 17,5 | 350 | 150 | 52,15 | 4,67 | 34,12 | 34,43 | 82,2 | 9,23 |
27. | 80:20 | 17,5 | 350 | 150 | 52,15 | 4,67 | 34,12 | 34,43 | 82.2 | 9,23 |
28. | 80:20 | 17,5 | 350 | 150 | 52,15 | 4,67 | 34,12 | 34,43 | 82,2 | 9,23 |
29. | 80:20 | 17,5 | 350 | 150 | 52,15 | 4,67 | 34,12 | 34,43 | 82,2 | 9,23 |
30. | 80:20 | 17,5 | 350 | 150 | 52,15 | 4,67 | 34,12 | 34,43 | 82,2 | 9,23 |
R = дробленый рис A = абрикос
Цветовой параметр L * (яркость) изменялся от 50,02 до 59,13, значение яркости уменьшалось при добавлении абрикосовой пудры. Уменьшение светлоты экструдатов при добавлении абрикосового порошка является результатом неферментативного потемнения, вызванного сахаром в добавленном материале и деградации пигмента (9-10).Температура цилиндра оказала значительное влияние на значение L * экструдатов. Значение L * уменьшалось с повышением температуры, поскольку более высокие температуры способствовали неферментативному потемнению и разрушению пигмента. Увеличение скорости вращения шнека привело к увеличению белизны из-за малого времени пребывания в экструдере. Покраснение и желтизна были в диапазоне от 2,02 до 6,2 и от 28,68 до 35,98 соответственно. Добавление абрикосового порошка привело к увеличению значений a * и b * из-за присутствия каротиноидов. Повышение температуры привело к увеличению значений a * и b * из-за потемнения, вызванного разложением пигмента или карамелизацией сахаров при высокой температуре экструзии [11].Увеличение скорости шнека привело к снижению значений a * и b *, поскольку скорость шнека обратно пропорциональна времени пребывания при экструзии и степени заполнения экструдеров [12]. Высокое содержание влаги приводит к более высокому значению L * и более низкому значению * и b * из-за низкой температуры плавления и вязкости, что приводит к минимальному разрушению пигментов, поскольку экструзия менее разрушительна [13-14]. Цветность указывает на насыщенность и прямо пропорциональна интенсивности цвета, а увеличение абрикосового порошка показывает высокие значения цветности из-за присутствия каротиноидов.Угол оттенка используется в качестве параметра качества цвета в обработанных пищевых продуктах, и в цветовом пространстве Hunter значение 0 ° или 360 ° представляет красный цвет, 90 ° представляет желтый цвет, 180 ° представляет зеленый цвет и 270 ° представляет синий цвет. Угол оттенка составлял от 79,16 до 85,97. Общая разница в значениях цвета (ΔE) увеличивалась с температурой и составом, где высокая влажность и скорость шнека приводили к низкому ΔE.
L * = 52,13 — 1,28C + 0,38S — 1,22T — 0,12CS + 0,12CT — 0,16ST + 1,09C 2 +1.8M 2 + 0,46S 2 + 0,15T 2 (1)
a * = 4,67 + 1,07C — 0,52S + 0,96T — 0,16CS — 0,078C 2 + 0,13M 2 — 0,12S 2 — 0,099T 2 (2)
б * = 34.12 + 1.05C — 0.17M — 0.51S + 0.73T — 0.24CM + 0.23MT — 0.73C 2 (3)
CR = 34,43 + 1,15C — 0,14M — 0,55S + 0,82T — 0,29CM + 0,20CT + 0,17MT — 0,71C 2 (4)
Угол цветового тона = 82,20 — 1,59C + 0,76S — 1,46T + 0,22CS — 0,21M 2 + 0,20S 2 + 0,19T 2 (5)
∆E = 9.23 + 1,92C — 0,16M — 0,76S + 1,61T — 0,13CM + 0,18MT — 1,24C 2 — 0,39S 2 — 0,12T 2 (6)
Модели, разработанные для светлоты (L * ), покраснения (a * ), желтизны (b * ), цветности, угла оттенка и общего изменения цвета (∆E) абрикосовых экструдатов рисовой муки в зависимости от независимые переменные показаны в уравнениях с 1 по 6. Модели параметров цвета (уравнение 1-3) демонстрируют квадратичный эффект с композицией.Уровень абрикосового порошка оказывал существенное отрицательное линейное влияние на значение L, тогда как он оказывал значимое положительное влияние на значения a *, b *. Положительные коэффициенты линейных членов состава, температуры цилиндра и отрицательные коэффициенты скорости вращения шнека (уравнения 2-5) показывают, что a * (краснота), b * (желтизна), CR (цветность), угол оттенка и общее изменение цвета увеличиваются с увеличением Увеличение температуры ствола, состава и уменьшалось с уменьшением скорости вращения шнека. Экструдаты, полученные при 190 o ° C с содержанием абрикоса 20%, были наименее яркими, а экструдаты, полученные при 150 o ° C с 0% абрикосового порошка, были наиболее яркими.Модели множественного регрессионного анализа параметров цвета охотника, угла оттенка, цветности и общего изменения цвета были значительными, а отсутствие соответствия моделей параметров цвета не было значимым (Таблица 2). Прогнозируемый R-квадрат и скорректированный R-квадрат находились в разумном согласии друг с другом. Рис.1 (a), Рис.1 (b), Рис.1 (c), Рис.1 (d), Рис.1 (e) и Рис.1 (f) показывают L * , a * , b * , цветность, угол цветового тона и ∆E как функция температуры и состава.
Таблица 2: ANOVA и статистика модели для параметров цвета экструдированных закусок с добавлением рисовых абрикосов
Реакция на модели | ||||||
Срок | л * | * | б * | Цветность | Угол цветового тона ( o ) | ∆E |
Значение F | 275.14 | 154,76 | 66,58 | 54,05 | 103,40 | 286,91 |
P> F | 0,0001 | 0,0001 | 0,0001 | 0,0001 | 0,0001 | 0,0001 |
Среднее | 53,65 | 4,53 | 33,49 | 33,84 | 82,37 | 7,77 |
Стандартное отклонение | 0,17 | 0,16 | 0.26 | 0,31 | 0,30 | 0,23 |
CV | 0,32 | 3,62 | 0,78 | 0,92 | 0,37 | 2,94 |
R-квадрат | 0,9961 | 0,9931 | 0,9842 | 0,9806 | 0,9897 | 0,9963 |
Скорректированный квадрат R | 0,9925 | 0,9867 | 0,9694 | 0,9624 | 0.9802 | 0,9928 |
Прогнозируемый квадрат R | 0,9777 | 0,9604 | 0,9088 | 0,8880 | 0,9409 | 0,9786 |
Достаточная точность | 71,907 | 45,248 | 37,148 | 34,678 | 36,689 | 71,382 |
Отсутствие посадки | NS | NS | NS | NS | NS | NS |
Рисунок 1: Поверхность отклика: (a) L * (b) a * (c) b * (d) хром (e) угол оттенка (f) ∆E как функция температура ствола и состав. Нажмите здесь, чтобы посмотреть рисунок |
Заключение
Результат регрессии показал доминирующее влияние уровня абрикосового порошка на параметры цвета Hunter (L *, a *, b *), цветность, угол оттенка и общее изменение цвета экструдатов с последующим изменением температуры цилиндра. Было обнаружено, что влияние состава, скорости вращения шнека и температуры на все параметры цвета линейно. Содержание влаги влияло на все параметры цвета, кроме угла оттенка, который проявлял квадратичный эффект с содержанием влаги.Высокая скорость вращения шнека, высокое содержание влаги и низкая температура цилиндра привели к более высокому значению L * из-за минимального разложения пигментов.
Список литературы
- Бреннан, М. А., Дербишир, Э., Тивари, Б. К., и Бреннан, С. С. Готовые к употреблению закуски: роль технологии экструзии в разработке приемлемых и питательных закусок. J. Food Sci. Technol. 2013; 48: 893-902
CrossRef - Дин, К.Б., Эйнсворт, П., Планкетт, А., Такер, Г., Марсон, Х. Влияние условий экструзии на функциональные и физические свойства расширенных закусок на основе пшеницы. Еда. Англ. 2006; 73: 142-148.
CrossRef - Cheftel, J.C. Влияние экструзии на питание. Food Chem. 1986; 20: 263-283
CrossRef - Бишарат, Г. И., Ойкономопулу, В. П., Панайоту, Н. М., Крокида, М. К., Марулис, З. Б. Влияние условий экструзии на структурные свойства экструдатов кукурузы, обогащенных обезвоженными овощами. Food Res. Int. 2013; 53: 1–14.
CrossRef - Обрадович, В., Бабич, Ю., Шубарич, Д., Аккар, Д., Йозинович, А. Улучшение питательных и функциональных свойств экструдированных пищевых продуктов. Продукты питания Nutr. Res. 2014; 53: 189–206.
- Алтан, А., Маккарти, К.Л., Маскан, М. 2008. Двухшнековая экструзия смесей ячменя и винограда: характеристики экструдата и определение оптимальных условий обработки. Food Eng. 2008; 89: 24-32.
CrossRef - Хорхе, М., Роберто, Г., Карина, П.Дж.Х., Олива, С.Е., Бенджамин, Р. Куаутемокк, Р. 2006. Оптимизация процесса экструзии при использовании кукурузной муки с модифицированным аминокислотным профилем для приготовления лепешек. J. Food Sci. Technol. 2006; 41: 727-736.
CrossRef - , Утвержденные лабораторные методы, Сент-Пол Миннесота, США, 2000
- Гуй, Ю., Рю, Г. Х. Влияние экструзионной варки на физико-химические свойства белого и красного женьшеня (порошок). Джинс. Res. 2014; 38 (2): 146–153.
CrossRef - Селани, М. М., Канниатти Бразака, С. Г., Сантос Диас, К. Т., Ратнаяке, В. С., Флорес, Р. А., Бьянкини, А. Характеристика и потенциальное применение ананасовых выжимок в экструдированных продуктах для увеличения волокон. Еда Химия . 2014; 163: 23–30.
CrossRef - Хагенимана В., Кэри Э. Э., Гичуки С. Т., Оюнга М. А., Имунги Дж. К. (1999). Содержание каротиноидов в свежих, сушеных и переработанных продуктах из сладкого картофеля. Food Nutr. 1999; 37: 455–473.
- Махасукхонтачат, К., Сопаде, П. А., Гидли, М. Дж. (2010). Кинетика переваривания крахмала и функциональные свойства двухшнекового экструдированного сорго .