Исследование крови на малярию: Анализ крови на малярию: цена в Москве

Разное

Содержание

Сдать анализ крови на малярийный плазмодий (малярию) в г.Сочи (Адлер) в медицинской лаборатории Оптимум

У здоровых людей не обнаруживается малярийный плазмодий в крови. В организме человека происходит бесполое размножение этого паразита. В процессе развития они питаются гемоглобином крови, разрушая эритроциты. Все проявления малярии связанны именно с развитием плазмодия в красных кровяных тельцах.

Исследование крови на малярийный плазмодий делается для точной диагностики болезни. Диагноз малярии подтверждается, когда в крови обнаруживаются любые стадии развития паразита в эритроцитах.

Точность проводимой диагностики зависит от профессиональных качеств лаборанта, а также от того, как соблюдается методика проведения исследования.


Что такое малярия?

Развитие данного инфекционного заболевания, характеризующегося повторяющимися приступами лихорадки, вызывает укус анофелеса – малярийного комара, который встречается в регионах с жарким климатом. В человеческий организм вместе со слюной насекомого проникают спорозоиты (промежуточные формы возбудителей инфекции – простейших рода Plasmodium), их размножение происходит в гепатоцитах. Достигнув периода созревания, паразиты покидают печеночные клетки и поражают красные тельца, активируя инфекционно-воспалительный процесс. Каждые 2-3 суток плазмодии вызывают разрыв эритроцитраный оболочки и выходят в жидкую часть крови – плазму. Это явление провоцирует возникновение лихорадочного состояния. Затем паразиты атакуют новые эритроциты и цикл повторяется. 

Малярия может вызывать различные осложнения, ассоциированные с летальным исходом:

  • дыхательную недостаточность, обусловленную скоплением в легких внутриклеточной жидкости;
  • церебральную малярию – следствие закупорки сосудов головного мозга зараженными эритроцитами;
  • повреждение селезенки;
  • почечную и печеночную недостаточность;
  • тяжелую анемию, вызванную уменьшением численности здоровых красных кровяных телец;
  • гипогликемию – снижение концентрации глюкозы в крови.

Кто составляет группу риска?

Инфицированию подвержено население и гости жарких стран – африканских государств, Соломоновых островов, Индии, Гаити, Новой Гвинеи, Таиланда, Латинской Америки.  В Российской Федерации неблагоприятная эпидемиологическая обстановка сохраняется на Северном Кавказе. Более тяжело малярия протекает у беременных женщин, новорожденных младенцев и детей младшего дошкольного возраста, туристов из северных регионов, пациентов с иммуно-дефицитными состояниями, лиц бедных слоев общества, которые не имеют доступ к квалифицированной медицинской помощи.

Диагностика малярии

В большинстве случаев инкубационный период длится несколько недель с момента укуса инфицированного комара, однако очень часто паразиты могут пребывать в организме человека в течение нескольких лет, не вызывая никаких клинических проявлений. Заподозрить наличие инфекции возможно по повторяющимся приступам озноба и жара. Пациенты предъявляют жалобы на:

  • дрожь в теле;
  • лихорадку;
  • сильную головную боль;
  • тошноту с рвотой;
  • судороги;
  • расстройство стула;
  • чрезмерное потоотделение;
  • последующую нормализацию температуры с ощущением полной разбитости. 

Тяжелое течение малярии сопровождается ознобом, нарушением сознания, сильной слабостью, множественными судорогами, дыхательной недостаточностью, желтухой, патологической кровоточивостью, изменением функциональной деятельности жизненно важных органов. Отсутствие своевременной специфической терапии приводит к летальному исходу. 

Диагностирование инфекционного процесса основано на обнаружении малярийного плазмодия в мазках крови.

Микроскопическое исследование мазков

Чтобы обнаружить плазмодий и определить его видовые характеристики из крови изготавливают два препарата:

  1. Тонкий мазок – чистое и обезжиренное предметное стекло кладут на твердую поверхность, наносят каплю крови и с помощью шлифованного стекла, держа его под углом 45̊ проводят по всей поверхности. Образец высушивают и маркируют тонким карандашом.
  2. Толстую каплю – на предметное стекло наносят каплю крови, углом другого стекла делают круглый мазок диаметром около 1 см. Оставляют образец в горизонтальном положении до полного высыхания, предварительно защитив его от перегревания, пыли и мух. 

Приготовленные препараты подвергаются окрашиванию по методике Романовского-Гимзе. Сначала осуществляется микроскопия (с использованием объектива с масляной иммерсией) толстой капли – это позволяет быстро обнаружить паразитов. Интенсивность их циркуляции в крови определяют по количеству плазмодиев в поле зрения – результат:

  • «+» указывает на наличие в 10 полях зрения от 1 до 100 паразитов;
  • «++» — от 10 до 100 в 10 полях зрения;
  • «+++» — от 1 до 10 в 1 поле зрения;
  • «++++» — от 10 до 100 в 1 поле зрения;
  • «+++++» — свыше 100 в 1 поле зрения.

Для уточнения их вида и выявления морфологических особенностей пораженных клеток изучают мазок крови – в эритроцитах присутствуют включения плазмодий, которые имею вид пятен. Результаты микроскопического исследования, в ходе которой могут быть выявлены лейко- и тромбоцитопения (уменьшение численности белых кровяных телец и красных кровяных пластинок), ретикулоцитоз, анизоцитоз и пойкилоцитоз (признаки анемии), лимфо- и моно-цитоз (повышение процентного соотношения разновидностей лейкоцитов), позволяют определить тип паразита и стадию текущего инфекционного процесса.

Правила подготовки пациента


Анализ крови на малярийный плазмодий сдается утром натощак. Пациенту рекомендуется исключить физические и эмоциональные перегрузки, прием алкоголя накануне и курение в течение 1 часа. Диагностические и лечебные процедуры производят до взятия крови.

Допускается сдача крови в течение дня. В этом случае последний прием пищи должен быть не позднее, чем за 3 часа до сдачи крови.

Как производится анализ


Для того, чтобы обнаружить в крови возбудителя малярии, необходимо брать мазок. Его берут, несмотря на то, что вероятность обнаружения паразита в капле крови в несколько десятков раз выше. Кровь берется независимо от того, какая температура у пациента.

ВОЗ рекомендует, чтобы лаборант просмотрел не менее ста капель крови в каждом поле зрения. Просмотр каждого препарата крови не прекращается до тех пор, когда не будут исследованы все подготовленные препараты в рекомендуемом количестве.

Для анализа используется капиллярная кровь. Ее берут из пальца. Допускается исследование венозной крови. Препараты крови окрашиваются по методу Романовского- Гимза (Giemsa). Используется иммерсионная система, при окуляре 7, объективе – 90.

Какие результаты дает анализ на малярию


Интенсивность заражения определяется по количеству плазмодиев. При наличии от одного до ста плазмодиев в 10 полях зрения показатель соответствует 5 – 50 паразитов в одном мкл крови.
Соответственно, если в поле зрения видно более ста паразитов, то в одном мкл крови содержится свыше 50 тыс. плазмодиев.

Интенсивность заражения также определяется количеством паразитов на 100 красных телец. Так, при поражении 10 процентов эритроцитов является неблагоприятным.

Особые случаи диагностики


В неэндемических регионах применяют серологическую диагностику малярии. Применяют методы иммунофлуоресценции, иммуноферментный анализ, реакцию непрямой гемагглютинации.

Кроме того, необходимо проводить дифференциальный анализ – с гриппом, ОРВИ, желтой лихорадкой, бруцеллезом, общим заражением крови, инфекциями органов выделения. Это делается для более точного определения диагноза малярии.

Исследование крови на малярию (толстая капля, тонкий мазок) 

ОписаниеПодготовкаПоказанияИнтерпретация результатов

Малярия относится к одним из наиболее опасных и заразных заболеваний, передающихся трансмиссивным путем (через укусы насекомых – комаров рода Anofeles). Заболевание сопровождается характерной клинической картиной – триада симптомов «озноб-жар-пот» и четкой цикличностью (приступы лихорадки могут возникать каждые 48 или 72 часа, в зависимости от возбудителя).

Наиболее восприимчивы к малярии – дети до 5 лет, беременные женщины, люди со сниженным иммунитетом (в состоянии иммунодефицита), а также, туристы, посещающие страны, эндемичные по данному заболеванию.

Важна быстрая и точная диагностика, которая позволяет своевременно назначить лечение. Препараты от малярии доступны и дают положительный эффект уже через небольшой промежуток времени после их приема.

Виды возбудителей.

Такое заболевание. Как малярия, вызывает малярийный плазмодий, это простейшее, часть жизненного цикла которого проходит в желудочно-кишечном тракте комара, откуда он и попадает в организм человека через укус.

Существует несколько видов малярийных плазмодиев:

  • Plasmodium falciparum – возбудитель тропической лихорадки (одной из наиболее тяжело протекающих)
  • Plasmodium vivax – возбудитель трехдневной малярии
  • Plasmodium malariae – возбудитель четырехдневной лихорадки
  • Plasmodium ovale- вызывает малярию, по клинической картине сходную с трехдневной

При обнаружении характерных для малярии клинических симптомов, а также, соответствующего эпидемиологического анамнеза (нахождение в тропических странах, «аэропортная малярия», нахождение в других зонах, эндемичных по малярии) необходима срочная диагностика.

Специфическая диагностика малярии заключается в микроскопии препаратов крови по типу «тонкий мазок» или «толстая капля». При использовании только общеклинических анализов, информации может быть недостаточно.

Клинические проявления, лечение и диагностика болезни малярия

Малярия на губах у человека – клиника и лечение

Малярия – инфекционное заболевание, характерной особенностью которого является приступообразное рецидивирующее течение. Борьба с симптомами малярии должна начинаться при первых проявлениях. В противном случае не исключены тяжелые осложнения, к которым относятся отек легких, острая почечная недостаточность, тяжелая анемия, малярийная кома. Заболевание широко распространено на юго-востоке Азии, в Африке и странах Океании.

Пути заражения: трансмиссивный, парентеральный и трансплацентарный. Возбудителем малярии являются простейшие паразиты – плазмодии. Это сезонное заболевание осенне-летнего периода.

Формы малярии:

  • трехдневная;
  • четырехдневная;
  • овале-малярия;
  • тропическая инфекционная.

Каждая имеет свои особенности и требует индивидуального подхода в лечении.

Формы и развитие признаков малярии

Трехдневная. Инкубационный период – от двух до восьми месяцев. Основными проявлениями является периодическая лихорадка, увеличение печени и селезенки, а также анемия. В целом прогноз благоприятный. Однако без должного лечения малярия грозит такими осложнениями, как нефрит и малярийный гепатит.

Четырехдневная малярия. Инкубационный период – от трех до пяти недель. К вышеописанным симптомам можно добавить ежедневное небольшое повышение температуры. Лечение этой формы заболевания во многом идентично терапии трехдневной малярии. О том, чем лечить трехдневную малярию, читайте дальше.

Тропическая инфекционная форма протекает, как правило, тяжело. Без своевременного медикаментозного лечения может наступить летальный исход. Инкубационный период – до 7 дней. Заболевание отличается более длительными приступами лихорадки. На фоне выраженной интоксикации у больного могут возникнуть судороги, головная боль, бессонница, спутанность сознания. Возможно развитие почечной патологии и токсического гепатита.

Овале-малярия. Симптоматика схожа с трехдневной формой. Инкубационный период – 7-11 дней. Основным лекарством для лечения малярии являются препараты на основе хинина.

Периоды развития заболевания:

  • инкубационный;
  • первичный острый;
  • вторичный;
  • рецидив.

Последовательность возникновения малярии у детей

Заболевание у детей протекает тяжело и специфично. Характерна атипичная лихорадка без озноба и потливости. В начале заболевания температура достигает максимальных показателей, после чего в течение нескольких дней стабилизируется на субфебрильных. На фоне интоксикации у ребенка могут развиться судороги, возникнуть рвота, цианоз, понос. В отдельных случаях появляется геморрагическая сыпь. Без своевременного лечения велика вероятность развития стойкой анемии и гепатоспленомегалии. Более подробно о последовательности возникновения малярии в детском возрасте вам расскажет врач на личном приеме. Записаться на консультацию можно на нашем сайте Добробут.ком или по телефону. Врач ответит на вопросы и расскажет, почему до сих пор не существует прививки от малярии у детей.

Клиника заболевания

Инкубационный период, как правило, никак не проявляется. По мере развития признаков малярии больной может жаловаться на повышенное потоотделение, учащение пульса, повышение артериального давления и резкую смену чувства жара ознобом. Для тропической инфекционной формы болезни характерны частичный цианоз конечностей и тяжелое дыхание.

После окончания приступа температура у больного может подняться до 39-40 градусов. Кожа при этом становится сухой и красной. В некоторых случаях возможны судороги, наблюдается нарушение психического состояния. Необходимо отметить, что каждый приступ заболевания сопровождается обильным потоотделением.

Малярия на губах у человека

Проявиться на губах заболевание может в силу различных причин:

  • ослабленный иммунитет;
  • общее истощение организма;
  • пищевое отравление;
  • постоянные стрессы.

Клинические проявления малярии на губах у человека: краснота и зуд в области носогубного треугольника, мелкие пузырьки в уголках губ.

Диагностические мероприятия

Диагностика болезни малярия включает в себя анализ крови, анализ мочи, дополнительно серологические методы – РИФ, РФА, РНГА.

Микроскопическое исследование крови помогает определить род, вид и количество микробов. С этой целью используют два типа мазка – тонкий и толстый.

В общем анализе мочи у больного гемоглобинурия и гематурия.

Лечение малярии

Наиболее эффективным является медикаментозная терапия в условиях стационара. Больному назначается хингамин, хинин, хлоридин или хлорохин. В некоторых случаях оправдано применение сульфаниламидов и антибиотиков. В качестве дополнительного лечения рекомендована дезинтоксикационная терапия (реополиглюкин, гемодез, физраствор), препараты, восстанавливающие микроциркуляцию, и противоотечные средства. В тяжелых случаях используют гормоны, переливание плазмы и эритроцитарной массы.

Профилактика болезни

Основные профилактические меры – это выявление носителей малярийного плазмодия и уже заболевших людей, проведение эпиднадзора, уничтожение комаров и профилактический прием специальных препаратов до поездки в зону риска. В последнем случае речь идет о специфической профилактике заболевания малярией. Принимать таблетки рекомендовано за 2 недели до выезда и в течение двух недель после него. Назначать таблетки может лишь врач-инфекционист.

При раннем выявлении и квалифицированном лечении прогноз благоприятный. К осложнениям болезни доктора относят отек легких, острый нефрит, почечную недостаточность, анемию, малярийную кому.

В нашем медицинском центре вы сможете пройти полное обследование организма. Записаться на прием к специалистам можно прямо на сайте. Во время консультации врач расшифрует результаты обследования и расскажет о путях заражение тропической малярией. Запись в круглосуточном режиме

Малярия:Симптомы,Диагностика,Симптомы | doc.ua

В общем случае малярия включает в себя несколько форм в зависимости от вызываемых возбудителей. А это значит, что она может быть трехдневной – возбудитель малярии типа Plasmodium vivax, четырехдневной – Plasmodium malariae, тропической – Plasmodium falciparum, ovale-малярией – Plasmodium ovale.

Жизнеспособность малярийных паразитов включает в себя две стадии: половую, протекающую в организме самки рода Anopheles и бесполую, образовывающуюся в организме человека.

Виды

Паразиты малярии могут развиваться в организме человека последовательно – в несколько фаз: тканевую шизогонию и эритроцитарную шизогонию, проходящую в эритроцитах.

Тканевая шизогония

На этом этапе заражение осуществляется путем укуса заразной самки комара. Слюна комара образовывает в организме человека спорозоиты, которые представляют собой веретенообразные организмы длиной 14–15 мкм, а шириной около 1–1,5 мкм. Заражение происходит буквально за полчаса, так как спорозоиты моментально проникают в кровь и лимфу, и, таким образом, разносятся по всему организму. Спорозоит делится на десятки тысяч мелких образований, которые развиваются в эритроцитах.

Продолжительность шизогонии во время 3-дневной малярии составляет примерно около 6-ти суток, при тропической – 8 суток, при четырехдневной – 14–15 суток, при овале-малярии – 9 суток. Малярийные плазмодии могут присутствовать в организме человека бессимптомно в зависимости от инкубационного периода.

Эритроцитарная шизогония

Когда в эритроциты проникают тканевые мерозоиты, они превращаются в бесполые формы (трофозоиты). Непосредственно в самих эритроцитах эти делящиеся клетки образуют эритроцитарные мерозоиты, количество которых зависит от вида возбудителя. Это приводит эритроциты к гибели и общему распаду. Мерозоиты могут внедряться в новые тела эритроцитов и шизогония повторяет свой цикл.

Длительность взаимодействия такого цикла шизогонии при малярии четырехдневного типа может составлять порядка 72-х часов, при трехдневной, тропической и овале-малярии – около 48-ми часов.

Процесс эритроцитарной шизогонии характеризуется образованием половых клеток под названием гамонты или гаметоциты, мужского или женского разделения. Особых симптомов при присутствии в организме гаментов не наблюдается, но человек может быть источником заражения малярийных комаров.

Спорогония

Самки Anopheles могут заражаться от больного человека через кровь, из-за которой в желудок насекомого попадают различные малярийные плазмодии. Незрелые гамонты и бесполые формы обрабатываются в желудке комара. А вот зрелые гаметоциты в желудке насекомого развивают свой цикл – спорогонию.

Симптомы

В большинстве стран заболевание малярии является антропонозом, потому как источником на самом деле есть человек. В некоторых тропических местностях наблюдается и обмен малярийными паразитами от обезьян.

Итак, человек носящий малярию в организме, является паразитоносителем, так как в его крови есть гаметоциты. Распространение малярии связано также и с сезонностью.

Восприимчивость у людей к этому заразителю практически одинакова. Только новорожденные из-за пассивного иммунитета могут легко переносить заболевание, то есть инфекция у них обычно протекает легко.

При болезни малярии наблюдаются приступы лихорадки, которые связаны с тем, что в кровь транспортировались инородные организмы – носители чужеродного белка. Наблюдается также повышение температуры, появление озноба, жара или аллергического эффекта. Может наблюдаться и анемия.

Паразиты нарушают в организме нормальное функционирование головного мозга, почек, печени, кишечника и остальных органов. То есть, малярия, кроме аллергических реакций, может сопровождаться еще и нефритом, некрозом внутренних органов, малярийной пурпурой и остальными злокачественными проявлениями.

Латентный период имеет продолжительность от одного до трех месяцев, после которых наблюдается раннее развитие болезни.

Характеристика форм заболевания

Известно несколько форм заболевания: трехдневная малярия, овале-малярия, четырехдневная и тропическая, а также малярия-микст (сочетает в себе несколько видов). От интенсивности развития может встречаться легкая, среднетяжелая и тяжелая формы.

Болезнь может развиваться в несколько периодов:

  • первичная малярия сопровождается серией первичных приступов;
  • ранние рецидивы – наблюдаются во всех формах малярии и выявляются они в течение двух или трех месяцев. Далее наблюдается размножение паразитов из-за оживления эритроцитарной шизогонии;
  • межприступный период имеет продолжительность 7–11 месяцев при овале-малярии или трехдневной. Наступает последовательно после ранних рецидивов и характеризуется наличием в организме дремлющих паразитов и бессимптомным течением болезни;
  • поздние рецидивы характеризуются активацией гипнозоитов.

Тропическая малярия отличается инкубационным периодом в 7–16 дней, трехдневная от 10-ти до 20-ти дней или же до 14-ти месяцев – длительная инкубация. Овале-малярия имеет латентный период в 11–16 дней, а четырехдневная – 25–42 дня. Инкубационный период может увеличиваться из-за неадекватной химиопрофилактики.

Первые проявления могут длиться около нескольких месяцев и характеризуются недомоганием, головной болью.

Если имеет место заражение малярией, то со временем проявится наиболее характерный симптом – лихорадка, которая может иметь периодический или постоянный характер. Начальная лихорадка присутствует только при свежем проявлении малярии, так как через некоторое время приступы лихорадки имеют характерное чередование с повышением и нормализированием температуры тела.

Малярийный приступ характеризируется несколькими стадиями: озноб, лсат, пот. Изначально приступ начинается с озноба различной силы, может быть и такой, когда «зуб на зуб» не попадает, при этом кожа становится «гусиной». Озноб может длиться по-разному, начиная от получаса до четырех часов. Далее он сменяется жаром, при котором больной становится красным, мечется в кровати, его мучает жажда. Эта стадия длится до 12-ти часов.

Далее следует проливной пот и снижение температуры обычно до 35 градусов. Состояние временно улучшается и больной успокаивается.

Малярийные приступы иногда могут длиться и более суток. Характернее проявляют себя в первой половине дня, а высокий подъем температуры наблюдается утром. Приступы обычно повторяются в одни и те же часы.

При четырехдневной малярии приступы наступают, в основном, через два дня. А при овале-малярии, тропической, трехдневной – через день. Естественно, в те дни, когда нет приступов, больной чувствует себя удовлетворительно, повышается аппетит и возможна работоспособность. Но если количество приступов сильно истощает организм, то состояние остается тяжелым – такое может быть при ежедневных приступах, часто наблюдаемое при тропической форме малярии.

Признаком малярии может быть и увеличение селезенки и печени, их болезненность. А затяжная малярия может привести к функциональному нарушению и угнетению костного мозга.

Но все же можно сказать, что трехдневная и четырехдневная малярия обычно могут протекать благоприятно.

Тропическая малярия

Тропический вид малярии может сопровождаться симптомами интоксикации: головная боль, рвота, суставные боли, бессонница и прочее. Общая длительность такой формы малярии составляет около года, а при заражении другими штаммами – и более года. К тому же тропическая малярия может сопровождаться поражением сердечно-сосудистой системы, сосудистой недостаточностью, поражением печени, отеками почек и прочим.

Осложнения

Последствия малярии могут проявляться в виде поражения нервной системы, что приводит к коматозному состоянию. Но истинная кома случается только при тропической форме. То есть, несмотря на остальные виды малярии, именно тропическая является наиболее опасной.

В общем случае наблюдается три периода малярийной комы: сомноленция (сонливость и состояние оглушенности), сопора или спячка (сознание периодически возвращается), полная кома. При таких состояниях, если отсутствует борьба с малярией и соответственное лечение, больной может погибнуть через 3–5 дней.

Может наблюдаться и малярийный алгид при тропической форме, который сопровождается присутствием сознания, но больной безучастен, его черты заострены, температура понижена, пульс нитевидный, могут быть поносы. Прогноз при таком состоянии не столь благоприятный, так как вывести из этого состояния не совсем легко.

Наиболее тяжелым осложнением при тропической малярии является гемоглобинурийная лихорадка, которая проявляется острым гемолизом эритроцитов и выделением гемоглобина с мочой. Нередко могут наблюдаться и кровоизлияния в сетчатку глаз, профузные кровотечения, почечная недостаточность – из-за чего возможен летальный исход.

Диагностика

Обычно установить наличие заболевания можно с помощью общей клинической картины и обнаружения в крови самих паразитов. Чередующиеся лихорадочные приступы, увеличение печени или селезенки, гипохромная анемия может быть следствием болезни, хотя признаки малярии бывают разными. Необходимо уточнить, каким образом могло произойти заражение – определить источник малярии. Если же подозрения подтверждаются, то берут кровь для обследования. При этом при первых приступах лихорадки трудно обнаружить паразитов, поэтому микроскопическое исследование необходимо проводить через несколько суток.

Лечение

Лечение необходимо начинать после конкретного установления диагноза с помощью анализа крови. Не стоит забывать о том, что не только часы, но и минуты могут быть важны для спасения жизни больному.

Противомалярийные препараты могут быть шизотропного, гамотропного (примахин, хиноцид), гематошизотропного (резохин, хлорохин, бигумаль, акрихин, хинин), гистошизотропного (хиноцид, хлоридин, примахин) действия.

Трехдневная малярия может сопровождаться назначением хлорохина фосфата и примахина фосфата. Тропическую форму малярии также лечат при помощи хлорохина фосфата, хинина, клиндамицина. Если имеет место развитие малярийной комы, то необходима определенная доза хинина.

В некоторых случаях могут назначать и стероидные гормоны, растворы глюкозы или декстрозы, димедрол, супрастин, аминазин и прочее.

Профилактика

В общем случае важно вовремя осуществлять профилактические меры. Сегодня многосторонне осуществляют борьбу с малярийными комарами: истребляют личинок и куколок в районе водоемов, ликвидируют места выплода комаров, истребляют окрыленных комаров. Все это не зря, так как даже прививка от малярии не всегда может помощь при заражении. Поэтому важно проводить и собственную химиопрофилактику, которая может быть основана на приеме препаратов из группы аминохинолинов. Особенно рационально использовать их, когда в ближайших районах известны случаи возникновения малярии. Прием препаратов необходимо начинать заранее, тем более, если вы собираетесь направиться в места, где возможно заражение. Помните о том, что и своевременная химиопрофилактика не гарантирует и не исключает возможности заражения.

Роспотребнадзор сообщил о регистрации ПЦР-теста на малярию :: Общество :: РБК

Фото: Marijan Murat / dpa / Global Look Press

В России зарегистрировали первый ПЦР-тест для диагностики малярии. Об этом сообщает пресс-служба Роспотребнадзора.

«Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора разработал и зарегистрировал первый в Российской Федерации ПЦР-тест для диагностики малярии», — говорится в сообщении ведомства.

Соответствующий тест обладает высокой аналитической чувствительностью, позволяя выявлять инфекцию при низком уровне инфицирования, а также в инкубационном и начальном периодах заболевания, отметили в ведомстве.

В России зарегистрировали тест для выявления «британского» штамма COVID

Также в Ропотребнадзоре указывают, что тестирование позволяет избежать ложноположительных результатов, если анализ препаратов крови плохого качества или его взял специалист с недостаточной квалификацией.

Выписка из Методических указаний по забору и исследованию крови на малярию

                                                                                  ПРИЛОЖЕНИЕ№2

              Выписка из Методических указаний по забору  и исследованию  крови  на малярию

               Приказа №3\4 от 06.01.98г.»Об усилении мероприятий по профилактике завоза

                 Малярии в С.Петербурге».

           Подтвердить диагноз малярии  можно  только исследовав кровь под микроско-

пом .Кровь для исследования  берут при первом же   подрзрении  на малярию вне

зависимости от наличия  или отсутствия  лихорадки в этот момент.

         Кровь на малярию исследуют  методом  толстой  капли  и тонкого мазка.

основной метод исследования –изучение толстой  капли.

         Процедура   исследования   крови с целью обнаружения  малярийных

паразитов включает три  этапа:

   1.приготовление препаратов крови.

   2. их окраска

   3.микроскопия

Толстая капля и тонкий  мазок   должны  быть   приготовлены на обезжиренных предметных  стеклах  с неповрежденной  поверхностью.

                     Подготовка предметных стекол

Предметные стекла ,не бывшие в употреблении, подвергают  предстерилизационной обработке согласно  ОСТ42-21-2-85 от 10.07.85.г. после чего  помещают  в  сосуд  с

водопроводной  водой , которую  меняют  6-7  раз, затем прополасктвают  дистилли-

рованной   водой ,вытирают   чистой хлопчатобумажной  тканью  и помещают   в  смесь

 Никифорова ( для приготовления смеси Никифорова  берут равные  количества  этилового

спирта-ректификата эфира  из расчета 1мл.спирта на одно стекло)  Через сутки  обезжиренные стекла извлечь из спирто-эфирной   смеси,высушить  хлопчатобумажной тканью, завернуть в чистую бумагу  не более 10 штук в упаковке  и подвергнуть  стерилиззации  в сухожа-

ровом шкафу  при   180 – 1час. Стекла, бывшие в употреблении,требуют более тщательной обработки.  Если на стеклах имеется иммерсионное   масло, его следует   удалить

бензолом  или  другим растворителем жира (ксилол, толуол), вату и ветошь, применяемые

для снятия  иммерсионного масла, подвергают   обеззараживанию с последующей  утилизацией. Стекла  замачивают  в 3% растворе  хлорамина на 60 минут или любом другом

дезинфектанте. Дальнейшая  предстерилизационная  обработка  и стерилизация сходны 

с обработкой  и стерилизацией   стекол,  не бывших  в употреблении.

     Во время всех манипуляций  с предметными  стеклами  их  нужно брать так, чтобы

Не касаться пальцами поверхности стекла.

       При работе с препаратами крови   медработник  должен соблюдать  правила  по про-

филактике профессионального  заражения:

·  работать в резиновых перчатках;

·  не допускать приема пищи   и курения  в помещенях для проведения забора  корви

·  иметь в наличии антисептики

·  поверхности рабочих столов и использованные емкости в конце рабочего дня или в случае загрязнения кровью обеззараживать 3% раствором хлорамина.

                                    Приготовление препарата крови.

           Приготовление препаратов крови складывается из следующих зтапов:

·  очистка кожи;

·  прокол кожи;

·  распределение крови по стеклу;

·  высушивание препарата;

·  маркировка препарата

                                        Очистка кожи

Обычно кровь берут из третьего или четвертого  пальца левой руки  (можно брать из мочки уха, а  у   грудных

детей – из большого пальца ноги или пятки ). Очень важно , чтобы кожа в месте прокола  была чистоой ,  так

как попавшие в препарат   микроорганизмы  могут привести   к диагностическим ошибкам .Грязные руки  моют мылом.  Кожу в месте  укола  тщательно   протирают  70%  этиловым спиртом. Первую каплю крови ,

выделившуюся  после  прокола , удаляют  стерильной ватой . При этом  удаляют   остатки алкоголя , которые

могут  способствовать фиксации  крови   в препарате.

     Необходимо пользоваться  иглами –копьями  разового пользования.

Стерильные иглы-копья  берутся стерильным пинцетом.  В процессе  работы   не должна  допускаться

расстерилизация  пинцета, нельзя выкладвать пинцет  на нестерильную поверхность стола. Для этого

используют стерильную прбирку или стерилизатор,  в которых пинцет  стерилизовался.  Вата  должна стерилизоваться  в виде  отдельных  шариков , помещенных в пакет из крафтбумаги. Должна  быть  поставлена дата стерилизации. Нельзя допускать  расстерилизацию ваты путем перекладывания из пакета в нестерильную емкость.

При заборе крови  укладка  должна  быть условно разделена на чистую половину,  где установлены  емкости

со стерильными  материалами,  инструментами,  и грязную половину  (отработанные копья,стекла с мазками,

вата ).

На стерильном  материале  и инструментарии должна  быть   указана  дата стерилизации, наименование

инструментария и количество

                             Приготовление тонкого мазка

На предметное стекло  с правой  стороны, отступив от края  на 1-1,5 см наносят  маленькую капельку

крови.Стекло кладут на горизонтальную поверхность  и фиксируют  его  левой рукой. В правую  руку

берут  шлифованное стекло , опускают  его в каплю крови   таким образом , чтобы  кровь распределилась

 ровной полоской  между краем шлифованного стекла  и поверхностью предметного. Затем  легким

равномерным движением   вдоль стекла  распределяют   кровь  по предметному  стеклу.  Правильно

сделанный  мазок  должен  быть  равномерно  тонким  с бахромкой  на конце , через него можно

прочитать  печатный текст.

 При приготовлении  мазка  большое  значение   имеет   угол наклона  шлифованного стекла.

Нормальной толщины мазок получается  при  наклоне стекла  под углом 30-35. Если угол наклона

больше 45, мазок будет коротким и толстым. Если  шлифованное  стекло наклонить до 20-25, то получится

очень длинный мазок  до самого края предметного  стекла. Исследование таких мазков затруднено.

Тонкий мазок  высыхает очень   быстро. После высыхания его маркируют, с этой целью  лучше  использовать

простой карандаш.

                        ПРИГОТОВЛЕНИЕ  ТОЛСТОЙ КАПЛИ

 Исследуемая толстая капля должна  быть  определенной величины.Она должна быть не слишком толстой,

но и не слишком  тонкой. Диаметр  толстой капли должен быть около 20мм. Рекомендуется делать две

капли на одном стекле  на случай , если  одна из них окажется  испорченной . Существует несколько

способов   приготовления  толстой  капли .

1.  К выступившей  из прокола  капле  крови диаметром 3-4мм прикасаются  предметным  стеклом,

избегая касания поверхности кожи, и распределяют  кровь по стеклу в кружок  одним движением.

2.    На предметном  стекле сначала готовят  мазок  немного толще обычного, затем, пока он еще   не высох,

        на него наносят   две капли крови, которые   по влажному мазку  растекаются  правильными  дисками.

        Второй способ  является  наилучшим  для  приготовления толстой капли. Необходимо соблюдать

        правила  высушивания  толстых  капель: высыхать они  должны  постепенно, их нужно держать

         вдали от нагревательных приборов  или прямых солнечных лучей .

Недопустимо  делать   надписи   на поверхности  толстой  капли. Для маркировки нужно провести дополнительную полоску кровью , расположив   ее  между толстыми   каплями  или ближе к концу

стекла .Капли, приготовленные  на мазке,  маркируют, используя свободную  поверхность  мазка.

маркировку делают  простым  карандашом  после высушивания   препарата . Неокрашенные толстые

капли не подлежат  длительному  хранению.

На препаратах крови указывать фамилию обследуемого, как  было указано выше (между толстыми

каплями  на штрихе крови и на тонком  мазке  простым  карандашом).

                        Направление для исследования крови  на малярию

Малярия

Малярия ранее известная как «болотная лихорадка») — группа трансмиссивных инфекционных заболеваний, передаваемых человеку при укусах комаров рода Anopheles («малярийных комаров») и сопровождающихся лихорадкой, ознобами, спленомегалией (увеличением размеров селезёнки), гепатомегалией (увеличением размеров печени), анемией. Характеризуется хроническим рецидивирующим течением. Вызывается паразитическими протистами рода Plasmodium (80-90 % случаев — Plasmodiumfalciparum).

Ежегодно фиксируется 350—500 миллионов случаев заражения людей малярией, из них 1,3-3 миллиона заканчиваются смертью. 85-90% случаев заражения приходится на районы Африки южнее Сахары, в подавляющем большинстве инфицируются дети в возрасте до 5 лет. Смертность, как ожидается, вырастет вдвое на протяжении следующих 20 лет.

Одной из опаснейших болезней человека является МАЛЯРИЯ. В районах ее распространения проживают 2,4 миллиарда человек, или 40% населения мира. Ежегодно малярией заражается от 300 до 500 миллионов человек и от 1,5 до 3 миллионов умирает. 90 процентов случаев малярии регистрируется в Африке, из остальных – около 70% случаев приходится на Индию, Бразилию, Шри-Ланки, Вьетнам, Колумбию и Соломоновы Острова. Малярия встречается также на побережье Красного и Средиземного морей, на Балканах и Украине, в Азербайджане, Таджикистане и Узбекистане. И хотя в Беларуси бывают единичные случаи, главным образом завезенные из перечисленных стран и континентов, а в последние годы на первое место по числу завозных случаев из дальнего зарубежья вышла Индия, но в нашей стране остался потенциальный переносчик в прошлом широко распространенной инфекции – малярийные комары и благоприятные для развития комаров климатические условия. Поэтому, в настоящее время для возобновления местной передачи малярии не хватает только источника инфекции, то есть больного человека.

Что такое малярия?

Малярия — это острое паразитарное заболевание, характеризующееся периодическими приступами лихорадки, увеличением печени и селезенки, анемией и рецидивирующим течением.

Источник инфекции: больной человек.

Пути передачи инфекции:

  • от больного человека здоровому через укусы комаров, в слюне которых имеются возбудители;
  • через зараженную кровь от паразитоносителей при переливании и шприцевых инъекциях.

Нельзя заразиться малярией: при любых бытовых контактах с больным человеком.

Известны четыре формы малярии:

  • тропическая;
  • трехдневная;
  • четырехдневная;

Наиболее тяжелая форма малярии – тропическая.

Симптомы и течение тропической малярии

Многие люди, побывавшие в «малярийных» странах и заболевшие ею, порой длительное время и не догадываются об этом.У некоторых больных могут появляться предвестники заболевания: недомогание, повышенная потливость, неустойчивый стул, повышение температуры тела до 38°С в течении 2-3 дней. У большинства пациентов малярия начинается внезапно и протекает тяжело. После скрытого периода, в среднем 7 дней ( возможна длительная инкубация до 30 дней, а также 6-14 месяцев, в зависимости от вида малярии), болезнь начинает прогрессировать. Для нее характерно приступообразное течение. У заболевшего человека внезапно начинаются приступы, продолжающиеся до 8 часов и состоящие из трех фаз:

  • В первой фазе – сильнейший озноб, длительностью 3-4 часа, сменяется чувством жара.
  • Во второй – жар, резко повышается температура, сопровождающаяся сильной головной болью, болью в мышцах, суставах, тошнотой, рвотой.
  • В третьей – приступ заканчивается обильным потоотделением и падением температуры.

Такие приступы могут быть ежедневными или через 2-3 дня в зависимости от возбудителя малярии. В период между приступами больной чувствует себя вполне удовлетворительно, сохраняется работоспособность.

Через 2-3 недели, как правило, наступает постепенное выздоровление.

При неправильном или несвоевременном лечении, а также при преждевременном прекращении приема лекарств возникают нарушения жизнедеятельности внутренних органов, и болезнь возвращается. Повторные атаки малярийной лихорадки могут наблюдаться в течение трех и более лет.

Диагностика и лечение

Диагноз малярии устанавливают на основании клинической картины (появление характерных малярийных приступов) и данных эпидемиологического анамнеза (например, пребывание в местности, неблагополучной по малярии в последние 3 года).

Лечение малярии проводится в стационаре. Больных госпитализируют в палаты, защищенные от комаров, и с учетом вида возбудителя, его чувствительности к химиопрепаратам, а также состояния больного, назначают курс лечения. При своевременном начале лечения прогноз благоприятный. При осложненных формах тропической малярии возможны летальные исходы, особенно у детей и беременных. Переболевшие малярией в течение трех лет находятся под диспансерным наблюдением, которое включает клиническое наблюдение и обследование на носительство плазмодиев.

Меры профилактики и защиты

Профилактика заболеваний от всех видов малярий направлена на:

  • Ранее выявление и радикальное лечение больных и паразитоносителей. Для раннего выявления больных и паразитоносителей обязательно исследование крови у всех лихорадящих больных, прибывших из неблагоприятных по малярии местностей.
  • Борьбу с комарами – переносчиками возбудителя малярии. В этих местностях необходимо пользоваться репеллентами, которые наносят на открытые части тела;, предохранять жилища от залета комаров с помощью защитных сеток на окнах и дверях; применять защитные пологи над постелями.
  • Ликвидацию мест выплода комаров, благоустройство хозяйственно-полевых водоемов.
  • Тщательную обработку всех медицинских инструментов.
  • Индивидуальную профилактику у лиц, находящихся в эпидемических очагах, соблюдение всех мер безопасности.

Несколько «золотых правил» для лиц, намеревающихся посетить маляриеопасные районы Обратитесь к своему врачу или в учреждение, где можно получить компетентный совет. Выясните, есть ли опасность заражения малярией там, куда вы собираетесь поехать. Если да, то какой противомалярийный препарат вам лучше взять с собой в профилактических целях, как его принимать и какие побочные реакции могут возникнуть. Принимайте лекарство в назначенных вам врачом дозах и продолжайте это делать в течение 4 недель после выезда из опасной зоны. Предохраняйте себя от укусов комаров. Необходимо иметь средства, отпугивающие комаров, а также препараты для их уничтожения. С сумерек до рассвета одевайтесь так, чтобы не оставлять открытыми руки и ноги. Открытые участки тела обработайте репеллентом, продолжительность действия которого с среднем 3-4 часа. Там, где распространена малярия, спать следует в комнате, окна и двери которой затянуты сеткой или под сетчатым пологом, желательно пропитанным отпугивающим средством, края которого заправлены под матрац.

Помните о симптомах заболевания. Если у вас внезапно начинаются лихорадка, головная боль, боль в мышцах, тошнота или понос, немедленно обратитесь за медицинской помощью. Обязательно скажите врачу, где вы побывали. Малярия может развиться спустя 3 года после возвращения из путешествия, даже если вы принимали противомалярийные препараты. Не забывайте, что малярия способна привести к смерти менее чем за 48 часов после появления первых симптомов. Знайте, что профилактических прививок от малярии нет, а относительный иммунитет у перенесших малярию – недолговечен и возможно повторное заражение.

Помните! Соблюдение рекомендаций и правил личной гигиены, а также своевременное обращение за медицинской помощью сохранит Вам здоровье и жизнь.

 

УЗ «18 ГОРОДСКАЯ ПОЛИКЛИНИКА»

Малярия: симптомы и типы

Что такое малярия?

Малярия — серьезное и иногда опасное для жизни тропическое заболевание, которое вызывается паразитами и распространяется через комаров. Он убивает более 445 000 человек в год, многие из них дети в Африке.

Хотя малярия почти полностью уничтожена в Соединенных Штатах, вы все равно можете заразиться этой болезнью, путешествуя в другие части мира. В Соединенных Штатах ежегодно регистрируется около 1700 случаев малярии от иммигрантов и путешественников, возвращающихся из стран, где малярия более распространена.

Климат этих стран достаточно жаркий для размножения малярийных паразитов и комаров, которые их переносят. Перед поездкой проверьте веб-сайт CDC, чтобы узнать, является ли ваш пункт назначения горячим местом для малярии. Возможно, вам придется принимать таблетки до, во время и после поездки, чтобы снизить шансы на их получение.

Причины и факторы риска малярии

Малярия вызывается паразитами плазмодиев, переносчиками которых являются комары anopheles .

Только самки комаров являются переносчиками малярийных паразитов.Когда комар кусает человека, больного малярией, он пьет кровь этого человека, в которой содержатся паразиты. Когда комар кусает другого человека, он вводит в него паразитов. Так распространяется болезнь.

Попав в ваш организм, паразиты попадают в печень, где размножаются. Они вторгаются в ваши красные кровяные тельца, которые переносят кислород. Паразиты проникают в них, откладывают яйца и размножаются, пока не лопнут красные кровяные тельца. Это выпускает больше паразитов в ваш кровоток.Поскольку они атакуют все больше ваших здоровых эритроцитов, эта инфекция может вызвать у вас сильное заболевание.

Малярия не заразна, что означает, что она не может передаваться от человека к человеку. Но она может передаваться следующими способами:

  • От беременной матери к ее будущему ребенку
  • Совместное использование игл
  • Переливание крови
  • Пересадка органов

Малярия наиболее распространена в странах с жарким климатом. Чаще всего встречается в:

  • Африке
  • Южной и Юго-Восточной Азии
  • Ближнем Востоке
  • Центральной и Южной Америке
  • Океании

Типы малярии

Существует пять видов паразитов плазмодиев , поражающих людей.Два из них считаются наиболее опасными:

P. falciparum. Это самый распространенный малярийный паразит в Африке, который является причиной большинства смертей, связанных с малярией, в мире. P. falciparum очень быстро размножается, вызывая серьезную кровопотерю и закупоривая кровеносные сосуды.

P. vivax . Это малярийный паразит, наиболее часто встречающийся за пределами Африки к югу от Сахары, особенно в Азии и Латинской Америке.Этот вид может бездействовать, а затем восстать и заразить вашу кровь через месяцы или годы после укуса комара.

Симптомы

Симптомы малярии обычно появляются примерно через 10-15 дней после укуса инфицированного комара. Наряду с высокой температурой, ознобом и потоотделением, они могут включать:

Рвота или ощущение, что вы собираетесь к

Вот некоторые вещи, о которых следует помнить:

  • Потому что симптомы очень похожи на простуду или симптомы гриппа, сначала может быть трудно сказать, что у вас есть.
  • Симптомы малярии не всегда проявляются в течение 2 недель, особенно если это инфекция P. vivax .
  • Люди, живущие в районах с большим количеством случаев заболевания малярией, могут стать частично невосприимчивыми после контакта с ней на протяжении всей своей жизни. Но это может измениться, если они переедут в место, где их нет рядом с паразитом.

Когда обращаться к врачу по поводу малярии

Учитывая, насколько быстро малярия может стать опасной для жизни, важно как можно быстрее получить медицинскую помощь.У маленьких детей, младенцев и беременных женщин особенно высока вероятность тяжелых случаев малярии.

Обратитесь за помощью, если у вас поднялась температура, когда вы живете или путешествуете в районе, где высок риск заражения малярией. Вам все равно следует обратиться за медицинской помощью, даже если вы заметите симптомы через много недель, месяцев или года после поездки.

Диагностика малярии

Ваш врач спросит вас о вашей истории болезни и недавних поездках, а также проведет медицинский осмотр.

Вы также получите анализ крови, который сообщит вашему врачу:

  • Если паразит в вашей крови
  • Если определенные лекарства будут работать против паразита
  • Если ваше тело когда-либо вырабатывало антитела для борьбы с малярией

Типы анализов крови на малярию включают:

Толстые и жидкие мазки крови. Это наиболее распространенные и точные тесты на малярию. Лаборант, врач или медсестра возьмут часть вашей крови и отправят ее в лабораторию для окрашивания, чтобы четко обозначить паразитов. Техник раскладывает его на предметном стекле и рассматривает в микроскоп. Тонкий мазок крови, также называемый мазком крови, представляет собой одну каплю крови, покрывающую большую часть предметного стекла. Густым мазком кровь капает на небольшой участок. Обычный тест выполняет по два из каждого.

Количество малярийных паразитов в вашей крови может меняться каждый день.Таким образом, ваш тест может сказать, что у вас нет малярии, даже если вы болеете. По этой причине для достижения наилучших результатов вам может потребоваться сдать кровь несколько раз в течение 2 или 3 дней.

Экспресс-диагностический тест. Также называется ДЭТ или тестом на антиген, это быстрый вариант, когда забор крови и мазок недоступны. Кровь, взятая из укола на пальце, наносится на тест-полоску, которая меняет цвет, чтобы показать, есть ли у вас малярия.

Этот тест обычно не может определить, какой из четырех распространенных видов малярийных паразитов вызвал вашу инфекцию.Он также не может сказать, является ли инфекция незначительной или серьезной. Ваш врач должен контролировать все результаты с помощью мазков крови.

Молекулярный тест. Также известный как тест полимеразной цепной реакции, он может определить тип паразита, что поможет вашему врачу решить, какие лекарства прописать. Этот тест — хороший выбор, если в вашей крови мало паразитов или если результаты мазка крови нечеткие.

Тест на антитела. Врачи используют это, чтобы узнать, болели ли вы раньше малярией.Он ищет антитела, которые обнаруживаются в крови после инфекции.

Тест на лекарственную устойчивость. Некоторые паразиты малярии устойчивы к лекарствам. Но врачи могут проверить вашу кровь, чтобы узнать, подействуют ли определенные лекарства.

Другие анализы крови. У вас также могут быть взяты кровь для анализа крови и химического анализа. Это может сказать вашему врачу, насколько серьезна ваша инфекция и вызывает ли она другие проблемы, например анемию или почечную недостаточность.

Лечение малярии

Лечение, которое рекомендует ваш врач, будет зависеть от таких факторов, как:

  • Тип паразита, который у вас есть
  • Насколько серьезны ваши симптомы
  • Географическая область, где вы заразились
  • Ваш возраст
  • От вашего возраста
  • Беременны

Лекарства, которые врачи используют для лечения малярии, включают:

  • Хлорохин или гидроксихлорохин. Ваш врач может порекомендовать одно из этих лекарств, если ваши симптомы не являются серьезными и вы находитесь в зоне, где паразит не приобрел устойчивости к хлорохину.
  • Комбинированная терапия на основе артемизинина (АКТ). Это комбинация двух лекарств, которые действуют по-разному. Они используются для лечения более легких случаев малярии или как часть плана лечения более серьезных случаев.
  • Атоваквон-прогуанил, артеметер-люмефантрин. Эти комбинации — другие варианты в тех областях, где паразит стал устойчивым к хлорохину.Их также можно давать детям.
  • Мефлохин. Это лекарство — еще один вариант, если нельзя использовать хлорохин, но он связан с редкими, но серьезными побочными эффектами, связанными с вашим мозгом, и используется только в крайнем случае.
  • Артесунат. Если у вас тяжелые симптомы, ваш врач может порекомендовать этот препарат в качестве лечения в течение первых 24 часов, а затем продолжить 3 дня комбинированной терапии на основе артемизинина.

Некоторые паразиты, вызывающие малярию, приобрели устойчивость почти ко всем лекарствам, используемым для лечения болезни, поэтому исследователи всегда ищут новые эффективные лекарства.

Осложнения малярии

У некоторых людей более вероятно возникновение серьезных проблем со здоровьем, если они заболеют малярией, в том числе:

  • Маленькие дети и младенцы
  • Пожилые люди
  • Люди, которые путешествуют из мест, где нет вакцины
  • Беременные женщины и их нерожденные дети

Эти проблемы со здоровьем могут включать:

Быстрые диагностические тесты на малярийных паразитов

Clin Microbiol Rev. 2002, январь; 15 (1): 66–78.

* Почтовый адрес: Отдел клинической паразитологии, Больница тропических болезней, Больница Университетского колледжа, Мортимер Маркет, Кэппер-стрит, Лондон, WC1E 6AU, Соединенное Королевство. Телефон: 0207 387 9300, доб. 5411. Факс: 0207 383 0041. Электронная почта: [email protected] Авторское право © 2002, Американское общество микробиологии. Эта статья цитировалась в других статьях в PMC.

ВВЕДЕНИЕ

Малярия представляет собой диагностическую проблему для лабораторий большинства стран. В этой статье сделана попытка пересмотреть существующую методологию и подход к диагностике малярии в практической и полезной форме для лаборатории и лечащего врача врача.Срочность и важность быстрого получения результатов исследования образцов крови пациентов с подозрением на острую малярию делают некоторые из наиболее чувствительных методов диагностики малярии непрактичными для рутинного лабораторного использования. Для целей настоящего обзора лабораторные методы, требующие более 1 часа для точного диагноза малярии, не считаются экспресс-тестами, хотя их можно рассматривать как эталонные процедуры.

Эндемическая малярия, перемещение населения и зарубежные поездки — все это вносит свой вклад в диагностические проблемы малярии, с которыми сталкивается лаборатория, которая может не располагать соответствующими знаниями в области микроскопии.Изменение моделей общепринятых морфологических проявлений видов малярии, возможно, из-за давления лекарств, вариации штаммов или подходов к сбору крови, создало диагностические проблемы, которые нельзя легко решить, просто обратившись к атласу паразитологии. К счастью, новая технология предоставляет дополнительные возможности диагностики, которые можно просмотреть и сравнить с более традиционными методами. Одновременно Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) начала диалог с учеными, клиницистами и производителями устройств для диагностики малярии относительно реальных возможностей разработки точных, чувствительных и экономичных экспресс-тестов для диагностики малярии.Условия для этих экспресс-тестов включают способность обнаруживать 100 паразитов / мкл всех видов Plasmodium spp. и возможность выполнять полуколичественные измерения для мониторинга результатов лечения наркозависимости. Кроме того, эти новые технологии необходимо сравнивать с общепринятыми методами «золотого стандарта».

Большинство случаев малярии регистрируется в странах, где рентабельность является важным фактором, а простота проведения диагностических тестов и обучение персонала также являются важными факторами.Большинство новых технологий диагностики малярии включают процедуры иммунохроматографического улавливания, когда конъюгированные моноклональные антитела служат индикатором инфекции. Предпочтительными целевыми антигенами являются те, которые присутствуют в большом количестве на всех бесполых и половых стадиях паразита; В настоящее время интерес сосредоточен на обнаружении богатого гистидином белка 2 (HRP-2) из ​​ Plasmodium falciparum и паразит-специфической лактатдегидрогеназы (pLDH) или альдолазы Plasmodium из паразитарного гликолитического пути, обнаруженного у всех видов.Клинические исследования обеспечивают эффективное сравнение между различными форматами тестов, а также разъясняют возможность и клиническую значимость использования немикроскопических методов.

ОБЫЧНАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Окрашенные пленки крови

Общепринятой лабораторной практикой для диагностики малярии является подготовка и микроскопическое исследование мазков крови, окрашенных пятнами Гимзы, Райта или Филда (69). Кровь, полученная путем прокалывания пальца или мочки уха, является идеальным образцом, поскольку плотность развитых трофозоитов или шизонтов выше в крови из этой богатой капиллярами области (17).Кровь, полученная при венепункции, собранная в пробирки, покрытые антикоагулянтом с гепарином или секвестрином (ЭДТА), приемлема, если ее использовать вскоре после взятия крови, чтобы предотвратить изменение морфологии лейкоцитов (WBC) и паразитов малярии. Должны быть приготовлены как толстые, так и тонкие мазки крови.

Плотный мазок крови.

Толстая пленка крови концентрирует слои красных кровяных телец (эритроцитов) на небольшой поверхности в 20–30 раз и окрашивается как незафиксированный препарат с использованием красителя Филда или разбавленного красителя Райта или Гимзы.Толстый мазок крови обеспечивает повышенную чувствительность метода мазка крови и намного лучше тонкой пленки для обнаружения низких уровней паразитемии и повторного появления циркулирующих паразитов во время рецидива или рецидива инфекции. Лизис эритроцитов в процессе окрашивания может затруднить сканирование на паразитов до тех пор, пока не будет накоплен опыт обнаружения паразитов среди лейкоцитов и тромбоцитов.

Тонкий мазок крови.

Тонкая пленка крови фиксируется метанолом и окрашивается разбавленным красителем Гимзы или Райта с использованием забуференной воды при pH 7.2, чтобы подчеркнуть включения паразитов в эритроцитах. Благодаря фиксированному монослою эритроцитов, доступному в этой процедуре, морфологическая идентификация паразита на уровне вида намного проще и обеспечивает большую специфичность, чем исследование толстой пленки. Тонкий мазок крови часто предпочтительнее для рутинной оценки паразитемии, потому что микроорганизмы легче увидеть и подсчитать. Возможность подсчета паразитов в последовательных мазках крови позволяет отслеживать реакцию на терапию, особенно для P.falciparum инфекции.

Чувствительность толстого мазка крови.

Ожидаемая чувствительность, которую может достичь опытный микроскопист для исследования процедуры толстого мазка крови, составляет около 50 паразитов / мкл крови (при условии, что общее количество эритроцитов составляет 5 × 10 6 / мкл крови), что эквивалентно 0,001% инфицированных эритроцитов. Milne et al. (48) обнаружили, что большинство стандартных диагностических лабораторий обычно достигают более низкой чувствительности обнаружения (в среднем 0,01% инфицированных эритроцитов, 500 паразитов / мкл) при изучении результатов британских лабораторий, представленных в Референс-лабораторию по малярии.

Техника мазка крови претерпела очень небольшие улучшения с момента ее разработки в начале 1900-х годов. Хотя сейчас доступны более стойкие пятна, процесс окрашивания может занять до 60 минут времени подготовки для получения окрашенной тонкой или толстой пленки и является трудоемким. Интерпретация требует значительного опыта, особенно при низких уровнях паразитемии (69). Кроме того, у пациентов с малярией, вызванной P. falciparum , паразиты могут быть секвестрированы в глубоких капиллярах (селезенка, печень, костный мозг), и микроорганизмы могут не обнаруживаться в эквивалентном количестве в циркулирующей периферической крови, взятой при венепункции или уколе пальца.Таким образом, инфекцию, вызванную P. falciparum , можно легко пропустить, поскольку количество паразитов недостаточное для обнаружения в мазках крови. Исследование мазков крови после лечения может привести к обнаружению ряда циркулирующих паразитов; однако организмы могут быть мертвыми и еще не уничтожены хозяином, что продлевает предполагаемую позитивность пациента и лечение (65).

Оценка паразитемии с помощью пленок крови

Одним из наиболее важных аспектов сообщения о малярийных инфекциях с помощью лабораторных диагностических методов является информация, полученная при оценке уровня паразитемии, присутствующей в мазке крови.Морфологическая оценка паразитов также имеет решающее значение для точной интерпретации, особенно с учетом стадий развития и присутствия бесполых паразитов, содержащих гемозоиновый пигмент, при сообщении об инфекциях P. falciparum . Эта информация может указывать на возможность более тяжелой клинической ситуации, в частности поражения головного мозга, из-за выброса в периферическое кровообращение паразитов на развивающихся стадиях шизонта, секвестрированных в капиллярах.В этих обстоятельствах может потребоваться изменение способа введения лекарственного средства с перорального на внутривенный.

Было описано несколько методов оценки паразитемии ( Учебное пособие ВОЗ по основной микроскопии малярии, , ВОЗ, Женева, Швейцария) с использованием тонкого или толстого мазка крови. Важно оценивать каждый положительный мазок крови и сообщать о паразитемии в образцах после лечения точно так же, как и в исходном образце пациента.

Исследование толстых мазков крови.

Общепризнанным способом оценки количества паразитов, присутствующих в 1 мкл крови, является использование стандартного значения количества лейкоцитов (8000 лейкоцитов / мкл). Подсчет количества присутствующих паразитов до тех пор, пока не будет обнаружено 200 лейкоцитов, а затем умножение количества паразитов на 40 даст количество паразитов на микролитр крови. Если известно точное количество лейкоцитов, его можно использовать для получения более точного числа с соответствующей корректировкой коэффициента умножения.

Наиболее точный подсчет достигается путем подсчета общего количества паразитов, обнаруженных в измеренном объеме крови. Объем крови должен быть не менее 2 мкл и распределен на площади 1 см 2 . Однако этот метод требует много времени, и подсчет паразитов против 200 лейкоцитов в толстой пленке, если известен точный общий подсчет белого, дает удовлетворительную точность для большинства клинических целей.

Основным недостатком толстой пленки крови является лизис эритроцитов в процессе окрашивания, что затрудняет чтение слайда из-за отсутствия признаков эритроцитов и неровностей по толщине пленки.Используя толстую пленку для оценки интенсивности паразитарной инфекции, исследователь должен, теоретически, подсчитывать паразитов только в толстопленочных полях, содержащих не более 20 лейкоцитов / 100 × поле иммерсии в масле. На самом деле поля, содержащие 20 лейкоцитов, часто слишком толстые для подсчета, тогда как легче всего читать те поля, которые содержат только 5 или 6 лейкоцитов. Было высказано предположение, что перед окрашиванием микроскопист должен быть в состоянии прочитать отпечаток через хорошо подготовленную толстую пленку крови. Перенос паразитов с положительных слайдов на отрицательные — явная возможность, и следует соблюдать осторожность при массовом окрашивании толстых слайдов крови.Использование масляных иммерсионных объективов 50х или 60х может оказаться недостаточным для идентификации некоторых более мелких кольцевых форм, видимых на толстой пленке, и в этих обстоятельствах необходимы 10-кратные окуляры для микроскопа.

Warhurst и Williams (69) сообщили, что исследование тонких пленок крови только 1/10 чувствительности для количественного определения малярийных паразитов, чем исследование толстых пленок крови, хотя морфологическая идентификация присутствующих видов Plasmodium намного проще с использованием тонких фильмы.Поэтому большинство лабораторий, занимающихся количественной оценкой и идентификацией малярийных паразитов с помощью микроскопии, производят как толстые, так и тонкие мазки крови. Настоятельно рекомендуется готовить и исследовать как толстые, так и тонкие пленки каждый раз, когда требуется исследование мазка крови на паразитов.

Исследование тонких мазков крови.

Паразитемия может быть определена путем исследования хорошо окрашенного тонкого мазка крови. Обычно это достигается путем учета количества паразитированных эритроцитов (не отдельных паразитов), наблюдаемых в 10000 эритроцитов (что равно примерно 40 полям монослойных клеток стандартного микроскопа с использованием 100-кратного масляного иммерсионного объектива; тем не менее, микроскопистам рекомендуется рассчитать среднее количество клеток на поле зрения микроскопа для их собственных микроскопов) и выражают количество паразитированных клеток в процентах.Приблизительное количество паразитов, присутствующих в 1 мкл крови, можно рассчитать, если предположить, что 1 мкл крови содержит 5 × 10 6 эритроцитов; следовательно, 1% паразитемии будет содержать 1 паразита на 100 эритроцитов или 50 000 паразитов на мкл крови. Точно так же паразитемия 0,1% будет содержать 5000 паразитов / мкл крови. Это можно скорректировать для точного подсчета, если известно общее количество эритроцитов на микролитр.

Этот метод выражения паразитемии в процентах от инфицирования эритроцитов является методом выбора для рутинной практики в областях, где инфекция не является эндемической и где паразитемия обычно низка.Подсчет паразитов в ограниченной области толстой пленки (10 полей) приемлем, когда большее количество паразитов встречается в районах эндемической инфекции.

Микроскопическое исследование мазков крови признано универсальным «золотым стандартом» диагностики малярии; однако не существует единого общепринятого стандартного метода, используемого в настоящее время всеми исследователями для количественного определения паразитов. Hanscheid (19) обсудил проблемы, которые могут возникнуть при сравнении различных методов диагностики малярии и при отсутствии согласованного формата для оценки паразитемии, с которым можно было бы сравнить чувствительность для обнаружения паразитов.Тем не менее, мазок крови по-прежнему является единственным широко доступным результатом, с которым можно сравнивать новые методы диагностики малярии, хотя для сравнения следует также использовать последовательный метод подсчета паразитов по толстым или тонким мазкам крови.

ДИАГНОСТИКА С ПОМОЩЬЮ ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ МИКРОСКОПИИ

В попытке улучшить обнаружение малярийных паразитов в мазках крови были внедрены альтернативные методы. Некоторые флуоресцентные красители имеют сродство к нуклеиновой кислоте в ядре паразита и прикрепляются к ядрам.При возбуждении УФ-светом соответствующей длины волны ядро ​​будет сильно флуоресцировать. Для этой цели часто используются два флуорохромы: акридиновый оранжевый (АО) и бензотиокарбоксипурин (BCP), оба возбуждаются при 490 нм и демонстрируют флуоресценцию яблочно-зеленого или желтого цветов. Родамин-123 также полезен для оценки жизнеспособного состояния паразитов, поскольку его поглощение зависит от неповрежденной, работающей паразитарной мембраны.

Было опубликовано несколько методов, в которых АО используется либо как метод прямого окрашивания, либо в сочетании с методом концентрации, таким как толстый мазок крови (10, 15).Центрифужная количественная лейкоцитная пленка или QBC II (QBC) (Becton Dickinson, Franklin Lakes, N.J.) объединяет капиллярную трубку с АО-покрытием и внутренний поплавок для разделения слоев лейкоцитов и тромбоцитов с помощью центрифугирования. Паразиты концентрируются под этим слоем клеток, появляясь в верхнем слое эритроцитов, но иногда также появляясь в слоях тромбоцитов и лейкоцитов. Паразитов можно увидеть через капиллярную трубку с помощью специального длиннофокусного объектива (параленсов) с флуоресцентным микроскопом (рис.) (1, 6, 9, 16). В более простом методе Кавамото используется фильтр возбуждения, установленный на пути проходящего светового луча, который позволяет длине волны возбуждения АО (от 470 до 490 нм) проходить к окрашенной пленке. Второй фильтр (510 нм) помещают в окуляр для просмотра флуоресцирующих паразитов, окрашенных АО. Этот метод может использовать сильный солнечный свет (если используется экран, окружающий глаза наблюдателя) или кварцевый галогенный источник в качестве источника возбуждающей длины волны (20, 21, 32, 33).

Трофозоиты P.falciparum , окрашенный АО методом УФ-флуоресценции QBC.

Клинические испытания с использованием методов АО (1, 4, 5, 6, 9, 15, 37, 39, 74) были проведены в лабораторных и полевых условиях. Метод флуоресценции QBC является более сложным с технической точки зрения и требует специального оборудования для разделения слоев клеток центрифугированием и хорошего флуоресцентного микроскопа с высокоинтенсивной ртутной или кварцевой галогенной лампой для обеспечения длины волны возбуждения.

Хотя АО является очень интенсивным флуоресцентным красителем, он неспецифичен и окрашивает нуклеиновые кислоты всех типов клеток.Следовательно, микроскопист, использующий АО, должен научиться отличать окрашенных флуоресценцией паразитов от других клеток и клеточного мусора, содержащего нуклеиновые кислоты (10). Особая осторожность требуется, если в крови пациентов с гемолитической анемией обнаруживаются тельца Хауэл-Джолли в полевых условиях. Сообщалось, что чувствительность окрашивания АО для выявления малярийных паразитов при инфекциях с уровнем паразитов <100 паразитов / мкл (0,002% паразитемии) составляет от 41 до 93% (73). Специфичность для инфекций P.falciparum — отличный (> 93%) (16), при этом большинство наблюдателей распознают маленькие кольцевые формы. Кольцевые формы или ранние трофозоиты других видов могут привести к ошибочному диагнозу, особенно на ранней фазе бесполого цикла, когда могут присутствовать только кольцевые формы. Для P. vivax и других инфекций P. falciparum , отличных от , особенно на более поздних стадиях развития, было обнаружено, что специфичность при использовании окрашивания АО ниже (52%), особенно для центробежного метода QBC, где более плотные паразиты поздней стадии могут скрываться в отделенном слое мононуклеарных клеток.

В альтернативной методике флуорохромов используется раствор BCP (7, 8, 40). BCP можно наносить непосредственно на суспензию лизированной крови или на незакрепленную, но сухую толстую пленку крови и интенсивно окрашивает нуклеиновую кислоту жизнеспособных паразитов P. falciparum . Напротив, включения эритроцитов и ядра лейкоцитов плохо окрашиваются (рис.). Этот метод устраняет некоторые проблемы, присущие некоторым флуоресцентным системам, такие как необходимость быстрого исследования для предотвращения выцветания или осаждения красителя.Несколько отчетов об использовании этого соединения показали, что это чувствительный и быстрый диагностический метод, сравнимый с окрашиванием по Гимзе, с зарегистрированной чувствительностью и специфичностью> 95% для P. falciparum . Паразитов P. falciparum , отличных от , легче отличить в толстопленочном препарате, чем в лейкоцитной пленке QBC.

Трофозоиты P. falciparum , окрашенные БЦП флуоресцентным методом.

Обладая опытом, работники, использующие методы с использованием соединений флюорохромов, могут быстро и точно обнаруживать паразитов.Однако важным ограничением методов, включающих как АО, так и BCP, является их неспособность легко дифференцировать Plasmodium spp. Имея опыт, различные стадии малярии, наблюдаемые в периферической крови, могут быть локализованы в определенных областях центрифугированной лейкоцитарной пленки (QBC), но конкретная идентификация видов остается сложной без изучения морфологии эритроцитов и включений паразитов. Несмотря на некоторые оговорки относительно использования флуоресцентных методов для обнаружения малярии (10), включая требования к специальной подготовке и дорогостоящему оборудованию и расходным материалам, флуоресцентная микроскопия остается жизнеспособной и быстрой альтернативой окрашиванию по Романовскому.В некоторых регионах мира, где флуоресцентные микроскопы или адекватное обучение их использованию, все еще будет существовать проблема. В этих областях потенциальную пользу могут принести альтернативные немикроскопические тесты для диагностики малярии (41).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНКРЕТНЫХ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ ЯДЕРНОЙ КИСЛОТЫ

ПЦР нельзя строго рассматривать как быстрый метод для первоначальной диагностики малярии. Его ценность заключается в его чувствительности, с возможностью обнаруживать пять или менее паразитов / мкл крови (64).Методы вложенной и мультиплексной ПЦР могут дать ценную информацию, когда возникают сложные морфологические проблемы при попытках идентифицировать паразитов на уровне вида. Для выявления ДНК малярии в цельной крови был разработан ряд ПЦР-анализов как одиночных, так и множественных методов (2, 27, 34, 61, 62, 64, 70, 71). Эти анализы использовались для первоначального диагноза после реакции на лечение и в качестве чувствительных стандартов, по которым оценивались другие немолекулярные методы.

Гены малых субъединиц 18S рРНК и циркумспорозоитов (CS) были использованы в качестве мишеней для дифференцировки Plasmodium spp. Методы с использованием вложенной ПЦР и обратной транскрипции-ПЦР позволяют идентифицировать все четыре вида (2, 34, 54, 63, 64, 69, 70, 71). Ген большой субъединицы РНК широко консервативен среди Plasmodium spp. и также подходит в качестве области-мишени ДНК, специфичной для определенного рода (29), при этом амплифицированная целевая последовательность обнаруживается внутренними зондами или анализируется с помощью гель-электрофореза.

Другие ДНК-мишени, такие как ген CS, использовались для видоспецифичных областей и были связаны со специфическим флуоресцеином или радиоактивно меченными зондами для обнаружения P. vivax . Sethabutr et al. (62), используя две системы амплификации, K1-14 (ДНК) и CS, использовали ПЦР для мониторинга ответа на терапию у 33 пациентов с инфекциями P. falciparum . В 103 исследованных образцах системы K1-14 и CS выявили 95 и 93% микроскопически положительных случаев соответственно.На 1-й день после лечения обнаружение ПЦР упало до 50% (K1-14) и 20% (CS) случаев, а на 4-й день после лечения только 3 и 0% были обнаружены с помощью ПЦР. Использование двух независимых систем ПЦР продемонстрировало, что ДНК P. falciparum временно присутствует в крови инфицированных пациентов в то время, когда паразитов уже нельзя было обнаружить под микроскопом.

Основными преимуществами использования метода на основе ПЦР являются способность обнаруживать малярийных паразитов у пациентов с низким уровнем паразитемии и идентифицировать их на уровне видов.Заражение пятью паразитами или менее на мкл может быть обнаружено со 100% чувствительностью и одинаковой специфичностью (34, 64). Дополнительная чувствительность, полученная с помощью ПЦР, может обеспечить положительные результаты при субпатентных инфекциях. Хотя многие организмы могут оставаться изолированными в капиллярном русле, эти паразиты могут попадать в кровоток, но в недостаточном количестве, чтобы их можно было обнаружить только с помощью микроскопии периферической крови.

Несколько рабочих исследовали сохранение ДНК в крови после лечения.Kain et al. (30) исследовали исчезновение паразитов P. falciparum во время лечения и обнаружили, что результаты ПЦР оставались положительными в среднем 144 часа по сравнению с 66 часами при микроскопии. Авторы также сообщили, что если ПЦР дала положительные результаты в течение 5-8 дней после лечения, можно было предсказать терапевтический отказ, возможно, из-за лекарственной устойчивости. Однако Srinavasan et al. (65) отметили, что ПЦР выявляла ДНК циркулирующих нежизнеспособных паразитов после успешной терапии, что могло привести к клинической путанице.

Различия в результатах ПЦР, полученных в ряде различных исследований, могут отражать различия в методах сбора и хранения образцов, методах выделения ДНК и выбора праймеров, условиях амплификации и анализе амплифицированного продукта. Дальнейшие достижения в технологии ПЦР могут позволить отличить ДНК от жизнеспособных или нежизнеспособных паразитов и, таким образом, облегчить использование процедур на основе ПЦР в полевых условиях (69). Методы на основе ПЦР особенно полезны для исследований вариабельности штаммов, мутаций и изучения генов паразитов, участвующих в устойчивости к лекарствам.Способность обнаруживать все виды Plasmodium во вложенных или мультиплексных анализах и повышенная чувствительность делают их идеальными процедурами для диагностики малярии. Прогресс в методах быстрой экстракции ДНК и разработке термоциклеров, возможно, с использованием недавно разработанных световых циклов, может позволить выполнить амплификацию ДНК малярийного паразита в сроки, которые клинически актуальны для острой диагностики как в полевых, так и в лабораторных условиях. Это не текущая ситуация, и микроскопия остается основой диагностики для большинства клинико-диагностических центров.

НЕМИКРОСКОПИЧЕСКИЕ БЫСТРЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ

Недавний конгресс ВОЗ выпустил документ под названием Новые перспективы в диагностике малярии (WHO / MAL / 2000.1091) (74). Были представлены определенные рекомендации относительно того, что должны обеспечивать немикроскопические быстрые диагностические тесты (БДТ). В документе делается вывод, что результаты этих тестовых устройств должны быть по крайней мере такими же точными, как результаты микроскопии, выполненной средним техническим специалистом в обычных полевых условиях. Другие критерии включали чувствительность, которая должна быть выше 95% по сравнению с микроскопией, и обнаружение паразитемии, такое, что уровни 100 паразитов / мкл (0.002% паразитемии) следует надежно выявлять с чувствительностью 100%. Количественная или полуколичественная информация о плотности паразитов в циркулирующей крови считалась важной. Другими предложенными важными критериями были способность отличать жизнеспособных паразитов от продуктов паразитов, таких как антигены или нуклеиновые кислоты, не связанные с жизнеспособными организмами, а также указывать на прогноз результатов лечения или устойчивости к обычным противомалярийным препаратам.

Эти цели предъявляют одинаковые требования как к ученым, так и к производителям, и степень, в которой они были или могут быть достигнуты, наряду с экономическими соображениями, поставит перед учеными, участвующими в разработке этих ТЭР для лечения малярии, ряд интересных задач.

Хотя альтернативные методы окрашивания мазков крови для диагностики малярии существуют уже довольно давно (65), ранние методы, основанные на обнаружении флуоресцирующих малярийных паразитов или использовании меченных флуоресцеином антител к P. falciparum , были ограничены необходимость в сложном аппарате, отсутствие чувствительности и неспособность отличить активную инфекцию от предшествующей. Новые иммунохроматографические тесты захвата антигена способны обнаруживать> 100 паразитов / мкл (0.002% паразитемии) и дает быстрые результаты (от 15 до 20 мин). Они коммерчески доступны в наборе со всеми необходимыми реагентами, и простота выполнения процедур не требует обширного обучения или оборудования для выполнения или интерпретации результатов (53, 63).

ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ИСПЫТАНИЯ

Принцип

Иммунохроматография основана на миграции жидкости по поверхности нитроцеллюлозной мембраны. Иммунохроматографические тесты основаны на захвате паразитарного антигена из периферической крови с использованием моноклональных антител, полученных против мишени малярийного антигена и конъюгированных либо с липосомой, содержащей селеновый краситель, либо с частицами золота в подвижной фазе.Второе или третье захватывающее моноклональное антитело, нанесенное на полоску нитроцеллюлозы, действует как неподвижная фаза. Миграция комплекса антиген-антитело в подвижной фазе вдоль полоски позволяет меченному антигену захватываться моноклональным антителом неподвижной фазы, таким образом образуя видимую окрашенную линию. Включение меченых козьих антимышиных антител обеспечивает контроль миграции системы (56). Миграция зависит от нескольких физических характеристик составляющих реагентов, в первую очередь от пористости мембраны, контролирующей скорость потока, и компонентов буферного раствора, используемого для транспортировки меченого комплекса антиген-антитело в лизированном образце крови (рис.).

Принцип иммунохроматографического БДТ при малярии.

Антигены малярии, подходящие в качестве мишеней для быстрых диагностических тестов

Антигены малярии, на которые в настоящее время воздействует RDT, — это HRP-2, pLDH и альдолаза Plasmodium .

HRP.

Rock et al. (59) описали, как эритроциты, инфицированные P. falciparum (IRBC), синтезируют три богатых гистидином белка, HRP-1 (HRP-ассоциированный HRP), HRP-2 и HRP-3. HRP-1 ( M, r от 80000 до 115000) был идентифицирован у всех положительных на узелок P.falciparum , но лишь в небольших количествах присутствовали в гамбийских изолятах и ​​в нескольких адаптированных к культуре штаммах. HRP-2 ( M r от 60 000 до 105 000) была идентифицирована у всех паразитов P. falciparum независимо от фенотипа выступов и была выделена из культуральных супернатантов как секретируемый водорастворимый белок. Было показано, что HRP-2 представляет собой открытый на поверхности белковый комплекс из нескольких близких полос. HRP-3 ( M r от 40 000 до 55 000) присутствовал с наименьшей численностью по сравнению с HRP-1 и HRP-2.Ни HRP-1, ни HRP-2 не были обнаружены в ряде других положительных и отрицательных штаммов малярии P. falciparum , отличной от .

HRP-2 — водорастворимый белок, продуцируемый бесполыми стадиями и молодыми гаметоцитами P. falciparum (59). Он экспрессируется на поверхности мембраны эритроцитов, и из-за его обилия в P. falciparum , это был первый антиген, который был использован для разработки RDT для его обнаружения.

pLDH и альдолаза.

pLDH, фермент, обнаруженный в гликолитическом пути малярийного паразита, продуцируется половым и бесполым этапами паразита (44).Различные изомеры pLDH для каждого из четырех Plasmodium spp. заражение людей существует, и их обнаружение составляет второй подход к разработке RDT. Несколько других ферментов гликолитического пути малярийных паразитов, в частности альдолаза (45), были предложены в качестве антигенов-мишеней для RDT для других видов, кроме P. falciparum .

ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ АНАЛИЗЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ

Наборы тест-полосок RDT для обнаружения малярийных антигенов теперь коммерчески доступны.Было проведено множество полевых и лабораторных исследований, в которых иммунохроматографические методы сравниваются с результатами, полученными с помощью традиционной микроскопии, флуоресцентной микроскопии и ПЦР (5a, 9, 14a, 16, 21, 22, 23, 23a, 54, 65, 71a, 72).

Анализы для обнаружения HRP-2

Обширные испытания трех коммерческих форматов щупов для определения HRP-2 (ParaSight F [Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ], ICT Pf или Pf / Pv [Amrad ICT, Сидней, Австралия] и тест PATH Falciparum Malaria IC [PATH, Сиэтл, Вашингтон.]) были выполнены, хотя в настоящее время существует несколько других производителей тестов для HRP-2, по которым опубликованные данные отсутствуют.

ParaSight F.

Лабораторные испытания иммунохроматографического теста ParaSight F для HRP-2 для обнаружения P. falciparum в образцах крови показали общую среднюю чувствительность от 77 до 98% при наличии> 100 паразитов / мкл (0,002% паразитемии) со специфичностью от 83 до 98% для P. falciparum по сравнению с микроскопией толстого мазка крови (3, 5a, 11, 35, 36, 57, 64).Более низкий диапазон чувствительности, полученный в различных исследованиях, вероятно, отражает неспособность наблюдателя обнаруживать паразитов при плотности всего 200 паразитов / мкл с помощью микроскопии (многие лаборатории обычно исследуют только 10 полей толстой пленки) или неспособность читать слабые положительные линии от тест-полоски. Низкий уровень или отсутствие секреции HRP-2 половыми формами может в некоторых случаях объяснять отрицательные результаты (5а).

Исследования Humar et al. (22) и Pieroni et al. (54) исследовали чувствительность и специфичность теста захвата антигена ParaSight F для P.falciparum по сравнению с ПЦР. Они продемонстрировали чувствительность и специфичность теста ParaSight F 88 и 97% соответственно. Пониженная чувствительность свидетельствовала о большей способности ПЦР обнаруживать низкие уровни паразитемии.

ICT
Pf и PATH Falciparum Malaria IC.

Опыт использования тест-полосок AMRAD ICT Pf и PATH Falciparum Malaria аналогичен опыту с тестом ParaSight F (16). Mills et al. (47) сравнили результаты анализов крови 148 зарубежных путешественников с использованием полосы PATH Falciparum Malaria IC, пропитанной моноклональным анти-HRP-2 иммуноглобулина M (IgM), с результатами, полученными с помощью микроскопии и ПЦР.Они получили чувствительность и специфичность 96 и 99% с обнаружением HRP-2 для P. falciparum , с противоречивыми результатами, имеющими <100 паразитов / мкл (0,002% паразитемии).

Wongsrichanalai et al. (73) оценили тест ICT Pf для выявления бесполой паразитемии P. falciparum у 551 субъекта в трех группах в Таиланде: (i) пациенты с симптомами, самостоятельно обращающиеся за диагностикой, (ii) сельские жители в рамках скринингового обследования и (iii) пациенты, недавно пролеченные от P.falciparum малярия. Экспертная световая микроскопия была эталоном. Они обнаружили, что характеристики теста ИКТ были одинаковыми для режимов диагностики и скрининга. Было выявлено четыре вывода: (i) чувствительность теста напрямую коррелировала с плотностью паразитов, (ii) интенсивность тестовой полосы напрямую коррелировала с плотностью паразита, (iii) стойкая положительность теста после очищения от паразитов препятствовала его использованию для мониторинга ранних терапевтических реакций и (iv) ложноотрицательный тест при 18 000 паразитов / мкл не объяснил.Они пришли к выводу, что сильный положительный результат теста ICT является высокопрогнозирующим фактором асексуальной паразитемии P. falciparum для диагностики новых случаев малярии P. falciparum в Таиланде, но что отрицательный результат теста неадекватен для исключения паразитемии <300 паразитов / мкл (0,006% паразитемии) и, в некоторых случаях, даже более сильная паразитемия.

Самодиагностика.

Наборы для самодиагностики путешественниками в отдаленные районы были рекомендованы. Пациенты с симптомами в возрасте от 16 до 60 лет, которые обратились в Больницу тропических болезней в Лондоне, Соединенное Королевство, в период с сентября 1997 года по июль 1999 года с просьбой пройти тестирование на малярию, были приглашены принять участие в исследовании самодиагностики малярии; Всего в исследовании приняли участие 153 пациента.Использовались карты малярии ICT Pf . Whitty et al. сообщили, что результаты тестов пациентов сравнивались с результатами микроскопии (толстые и тонкие мазки крови) (71a). 115 (75%) пациентов указали, что инструкциям легко следовать, а 128 (84%) заявили, что тесты легко читаются. Из 16 неудачных попыток, приведших к недействительным тестам, 4 пациента не смогли использовать ланцет, у 3 было недостаточно крови, 4 не смогли прочитать карту, 1 забыли добавить реагент, а остальные указали различные причины неудач.По сравнению с микроскопией специфичность и чувствительность для самотестирования составляли 97 и 95% соответственно. Хотя эти результаты обнадеживают, технические проблемы и чувствительность теста необходимо решать путем дополнительных полевых испытаний. В настоящее время эта технология не может заменить максимально быстрое обращение за надлежащей медицинской помощью при подозрении на малярию (71a).

Применение формата карты ICT Pf и Pf / Pv (рис.) В целом оказалось более удобным для пользователя, чем тесты, требующие нескольких этапов или использующие лунку, содержащую конъюгированные антитела, в которую помещается полоска. .Совсем недавно использование кассетного формата предоставило более удовлетворительное устройство для безопасности и манипулирования.

Amrad ICT Pf иммунохроматографическое тестовое устройство для обнаружения P. falciparum HRP-2.

Ограничения.

Хотя иммунохроматографические тесты на основе HRP-2 позволяют быстро диагностировать малярию P. falciparum , их клиническая полезность для диагностики других видов Plasmodium spp. и мониторинг терапевтического ответа ограничен.Поскольку HPR-2 экспрессируется только P. falciparum , эти тесты дадут отрицательные результаты с образцами, содержащими только P. vivax, P. ovale или P. malariae ; поэтому многие случаи малярии, отличной от falciparum , могут быть ошибочно признаны малярийно-отрицательными. Увеличение числа географических районов, где P. falciparum является доминирующим или единственным существующим видом, особенно с его опасным для жизни потенциалом, имеет большое значение и делает разработку тестов на этого паразита наиболее важной.Однако осознание экономической важности других видов для стран, где они эндемичны, и других последствий, таких как завоз малярии в районы, где инфекция не является эндемической, являются важными вопросами, которые требуют включения этих паразитов в диагностические исследования.

Персистенция HRP-2

Было показано, что HRP-2 сохраняется и обнаруживается после исчезновения клинических симптомов малярии и исчезновения паразитов от хозяина (38, 46).Humar et al. (22) обнаружили циркулирующий антиген HRP-2 у 68% пролеченных пациентов на 7-й день, и у 27% он все еще присутствовал на 28-й день. Причина персистенции антигена HRP-2 не совсем понятна и может отражать наличие скрытых жизнеспособных паразитов (возможно, в результате неэффективности лечения или циркулирующих комплексов антиген-антитело) (68). Действие противомалярийной терапии на паразита может влиять на устойчивость HRP-2. Schiff et al. (60) отметили, что 10% пациентов, получавших Фансидар, имели обнаруживаемый антиген HRP-2 на 14 день.Karbwang et al. (31) также обнаружили стойкий антиген HRP-2 во время и после терапии артеметером, признав, что сигнал HRP-2 не имел значения в течение первой недели лечения, но оказался точным индикатором неэффективности лечения в полевых условиях, когда он был обнаружен на 14 день после лечения.

Паразитемии низкого уровня, наблюдаемые в районах эндемической инфекции из-за постоянного контакта с малярийными паразитами, могут привести к положительным результатам с сомнительной клинической значимостью (67).Кроме того, есть свидетельства того, что у некоторых людей действительно может быть делеция гена, вырабатывающая HRP-2, и поэтому эти тесты никогда не дадут положительный результат.

Другие ограничения тестов на этот антиген относятся конкретно к техническим аспектам тест-системы HRP-2. Было сделано несколько сообщений о том, что моноклональные антитела IgG, используемые в ParaSight F, перекрестно реагируют с сывороточным ревматоидным фактором, вызывая ложноположительные результаты (25, 38). В тестах Amrad ICT Pf и PATH Falciparum Malaria используются моноклональные антитела IgM, и сообщения о ложноположительных реакциях, возникающих при ревматоидном факторе, встречаются реже (26).

Анализы для обнаружения pLDH

pLDH — растворимый гликолитический фермент, экспрессирующийся в высоких уровнях на бесполых стадиях малярийных паразитов. Он был обнаружен у всех четырех видов малярии человека (55, 56). Активность pLDH коррелирует с уровнем паразитемии, обнаруживаемой в культурах малярии in vitro и в плазме инфицированных пациентов, как определено с помощью микроскопии (42, 43, 49, 56).

Специфическое измерение pLDH из Plasmodium spp. в присутствии человеческого хозяина ЛДГ можно измерить с помощью субстрата 3-ацетилпиридинадениндинуклеотида (APAD), аналога NAD, в анализе иммунного захвата (анализ IC) (55).Хотя константы Михаэлиса-Ментен схожи, число оборотов pLDH в присутствии APAD намного больше, чем у человеческого фермента с тем же кофактором (19). Эта характеристика частично связана с конформационными изменениями, происходящими в ферменте, который участвует в лимитирующей стадии процесса окисления-восстановления (13, 18). Пайпер и др. (55) первоначально сравнили использование двух диагностических тестов, основанных на специфическом обнаружении активности pLDH. Анализ ICpLDH обнаружил фермент в крови влажным анализом с использованием APAD в качестве субстрата.Авторы подчеркнули важность результатов, показывающих, что активность pLDH была обнаружена у жизнеспособных половых и бесполых паразитов инфекций, вызванных P. falciparum и P. vivax .

OptiMAL.

Панель моноклональных антител, которые могут связываться с активной pLDH, была разработана из эритроцитов, инфицированных P. falciparum . Три из этих моноклональных антител используются в иммунохроматографическом тесте на индикаторных полосках RDT (OptiMAL; Flow Inc., Портленд, Орегон). Два моноклональных антитела являются панспецифичными и распознают все четыре вида малярии; третье моноклональное антитело специфично только для P.falciparum ЛДГ. Одно панспецифическое антитело (6C9), конъюгированное с частицами золота в качестве индикатора, используется для захвата всего антигена pLDH малярии, присутствующего в образце крови. Два других моноклональных антитела действуют как отдельные иммобилизованные участки захвата на иммунохроматографической индикаторной полоске. Одно из моноклональных антител (17E4) специфично для захвата pLDH P. falciparum , а другое (19G7) представляет собой панспецифическое антитело к pLDH. Комплекс малярийный антиген / меченое антитело будет захвачен одним или обоими иммобилизованными линии захвата ( стр.falciparum spp.) или только панспецифической линией (не P. falciparum spp.). Комплекс антиген-антитело, конъюгированный с золотом, выстраивается в виде пурпурной линии на полосе захвата. Наличие контрольной линии захвата козьих антимышиных моноклональных антител указывает на успешный тест. При наличии смешанных инфекций, вызванных P. falciparum и nonfalciparum, результаты будут указывать на P. falciparum (рис.). Моноклональные антитела, используемые в тесте OptiMAL, были тщательно протестированы на перекрестную реактивность с ЛДГ из других простейших в крови, таких как Leishmania, Babesia и патогенных бактерий или грибов; доказательств такой перекрестной реактивности обнаружено не было (42)

Иммунохроматографическое тест-устройство OptiMAL для обнаружения pLDH.

Клинические испытания OptiMAL были проведены во многих центрах (14a, 23, 23a, 24, 27, 41, 49, 50, 51, 52, 56, 58). Следует отметить, что в нескольких исследованиях было показано, что снижение активности pLDH параллельно сокращению количества жизнеспособных паразитов во время терапии (42, 49, 50, 56). Следовательно, этот анализ может использоваться для мониторинга прогресса пациента во время терапии и служит индикатором рецидива и возможных лекарственно-устойчивых инфекций, предполагая, что уровни pLDH сохраняются в этих условиях.

Palmer et al. (51) исследовали способность OptiMAL обнаруживать P. vivax и P. falciparum во время вспышки малярии в Гондурасе. Результаты, полученные с помощью тестов OptiMAL, сравнивали с результатами, полученными с окрашенными по Гимзе густыми мазками крови из того же образца. Образцы цельной крови были взяты у 202 пациентов с подозрением на малярию; 96 (48%) образцов были положительными при микроскопическом исследовании, а 91 (45%) образцов были положительными при тесте OptiMAL.Из пленок, положительных при микроскопии, 82% содержали паразитов P. vivax и 18% содержали паразитов P. falciparum . OptiMAL обнаружил P. vivax и P. falciparum в 81 и 19% положительных случаев соответственно. Общая чувствительность, полученная с помощью теста OptiMAL для P. falciparum и P. vivax в этой серии, составила 94 и 88% соответственно со специфичностью 100 и 99% соответственно. Образцы, обнаруженные при микроскопии положительными, но отрицательными при использовании OptiMAL (3%), содержали <100 паразитов / мкл крови (0.002% паразитемия).

В другом полевом исследовании пациентов больниц с симптомами и бессимптомных добровольцев, проведенном Quitana et al. (58) для госпитализированных пациентов с помощью толстопленочной микроскопии и ПЦР были обнаружены паразитов P. falciparum и P. vivax со средней плотностью паразитов 590 / мм 3 . Когда результаты теста OptiMAL для тех же образцов сравнивались с результатами, полученными с помощью микроскопии и ПЦР, OptiMAL имел чувствительность 100% и специфичность 95% для образцов, содержащих P.falciparum . Хотя чувствительность и специфичность индикаторной полоски в этом исследовании были аналогичны чувствительности и специфичности толстопленочной микроскопии для P. vivax , по сравнению с ПЦР тест-полоска не смогла правильно идентифицировать смешанные инфекции из-за общего улавливания, полученного с помощью панспецифического теста. полоса антител.

Дальнейшие исследования в Индии John et al. (28) и в Гамбии Hunt-Cooke et al. (23) с P. falciparum и P. vivax -положительными образцами из когорты полуиммунных людей, подвергшихся воздействию малярии, подтвердили чувствительность и специфичность OptiMAL, обнаруженные другими специалистами.Iqbal et al. (24) сравнили обнаружение pLDH с микроскопией и ПЦР у 550 иммигрантов из эндемичных по малярии районов, которые въезжали в Кувейт, где малярия не является эндемичной. Они пришли к выводу, что для уровней паразитов> 100 паразитов / мкл (0,002% паразитемия) чувствительность, полученная для OptiMAL, составила 97%. Однако, поскольку половина образцов с содержанием <50 паразитов / мкл (0,001% паразитемии), обнаруженных с помощью микроскопии, не была обнаружена, авторы рекомендовали использовать этот тест с большой осторожностью и не заменять обычную микроскопию при диагностике малярии.В другом исследовании, проведенном Iqbal et al., Эффективность анализа pLDH была сопоставима с производительностью микроскопии для выявления инфекции P. falciparum при паразитемии> 100 / мкл. Анализ pLDH предлагает преимущество перед анализом ICT Pf для HRP-2, поскольку образцы, инфицированные P. vivax , легко отличить от образцов, инфицированных P. falciparum ; также могут быть обнаружены смешанные инфекции, вызванные как P. falciparum , так и P. vivax (23a).Тем не менее, исследование мазка крови остается стандартным методом диагностики малярии, поскольку оно обнаруживает все виды Plasmodium spp. и позволяет визуализировать стадии роста паразитов, что важно для принятия терапевтических решений.

Jelinek et al. (27) в многоцентровом исследовании 231 пациента, обследованного на малярию с использованием тест-полосок для определения HRP-2 и pLDH, обнаружили, что 53 пациента дали положительные результаты на инфекции P. falciparum . Основываясь на полученной специфичности и чувствительности, они пришли к выводу, что индикаторные полоски могут повысить точность диагностики P.falciparum , малярия, если задействованы неспециализированные лаборатории. Moody et al. (49), исследуя возможность замены микроскопического исследования обычных мазков крови на малярийных паразитов на OptiMAL в исследовании с группой пациентов с историей путешествий по всему миру, получили гораздо более низкую чувствительность к малярии, отличной от P. falciparum , кроме . P. vivax (таблица). Таблица 1.образцов и видов, представленных под микроскопом No. OptiMAL положительный Чувствительность (%) Plasmodium falciparum 54 с паразитемией> 1% (50 000) 54 100 103 с паразитемией 0,1–1% (5000 паразитов / мкл) 103 100 72 с паразитемией 0.01–0,09% (500 паразитов / мкл) 72 100 32 с паразитемией 0,001–0,009% (50 паразитов / мкл) 23 72 11 с паразитемией 0,0001–0,009% (50 паразитов / мкл) 0,0009% (5 паразитов / мкл) 8 73 5 только с гаметоцитами 4 80 Plasmodium vivax 110613 906 105 96 Plasmodium malariae 17 (поздние трофозоиты) 8 47 9014 9014 906 906 906 9014 9014 906 906 906 паразитов) 0 100

В исследовании теста OptiMAL для обнаружения и идентификации малярии инфекций у бессимптомных жителей Индонезии, Fryauff et al (14a) обнаружили чувствительность от 88 до 92% для выявления инфекций от 500 до 1000 паразитов / мкл, диапазон, охватывающий среднюю паразитемию первичной симптоматической P.falciparum , у индонезийских трансмигрантов, ранее не инфицированных малярией. Однако эта система была заметно менее чувствительной, чем экспертная микроскопия для различения видов малярии.

Некоторые исследователи отметили, что во время терапии очищение мазков крови от паразитов и снижение уровней pLDH идут параллельно друг другу (49, 50, 65). Moody et al. (49) наблюдали за этим явлением у 60 пациентов, проходящих лечение от P. falciparum в Больнице тропических болезней, Лондон, Соединенное Королевство, и отметили, что положительные образцы OptiMAL соответствовали ежедневному снижению паразитемии, как видно под микроскопом (таблица).

ТАБЛИЦА 2.

Результаты, полученные с помощью микроскопии и OptiMAL на последовательных пробах крови от 60 пациентов, получающих терапию от P. falciparum малярии a

906.43 ) 906 906
Время сбора образца Число пациентов с положительным результатом микроскопическая паразитемия Средняя паразитемия (%) Нет (%) OptiMAL положительный Чувствительность (%) OptiMAL при этой паразитемии из исходных образцов
День диагностики (предварительная обработка) 60 58 (98) 100
1-й день после лечения 51 1,96 39 (76) 100
2-й день после лечения 44 27 ) 100
День 3 после лечения 29 0,11 18 (62) 100
День 4 после лечения 16 0,031 11 (
День 5 после лечения 8 0.0022 3 (38) 72

Srinivasan et al. (65) наблюдали за течением 17 пациентов с P. falciparum , которые проходили лечение хинином, противомалярийным препаратом, который атакует мембрану паразита, с использованием родамин-123 (R123), красителя, ранее использовавшегося для демонстрации жизнеспособности паразита в vitro (26, 66). R123 представляет собой катионный проникающий краситель, который избирательно накапливается внутри малярийного паразита из-за его высокого мембранного потенциала (внутренний отрицательный), который поддерживается электрогенным насосом H + -АТФазы, расположенным в мембране.Таким образом, R123 является жизненно важным красителем, окрашивающим только жизнеспособных паразитов. Они смогли продемонстрировать постоянное присутствие циркулирующих, но нежизнеспособных паразитов и пришли к выводу, что эти паразиты могут вносить вклад в длительные микроскопические паразитемии, не поддающиеся очевидному клиническому излечению. Это поддерживает возможное использование тестов для измерения уровня pLDH в качестве ценных инструментов для мониторинга противомалярийной терапии (14a, 49, 50, 56), особенно в тех областях, где микроскопическое исследование может быть недоступно.

ДРУГИЕ ФЕРМЕНТЫ-КАНДИДАТЫ, ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНДИКАТОРОВ ИНФЕКЦИИ

Альдолаза

Другие ферменты гликолитического пути малярийного паразита были признаны и считаются мишенями для экспресс-диагностики малярии.В энергетическом метаболизме крови на стадиях малярии человека отсутствует функциональный цикл лимонной кислоты, а выработка АТФ полностью зависит от гликолитического цикла. Альдолаза — ключевой фермент в этом пути. В эксперименте по изучению стадийно-специфической экспрессии изоферментов альдолазы у малярийного паразита грызунов Plasmodium berghei Meier et al. (45) клонировали два гена, кодирующих гликолитический фермент альдолазу (альдо-1 и альдо-2). Было обнаружено, что альдо-1 практически идентичен альдолазе P. falciparum , тогда как альдо-2 имел 13% разнообразия последовательностей.Зонды со специфическими антителами были способны обнаруживать альдо-1 на стадии спорозоитов и альдо-2 на бесполой стадии малярийных паразитов, обнаруженных в крови.

Моноклональные антитела, продуцируемые против альдолазы Plasmodium , являются панспецифичными в своей реакции и были использованы в комбинированном тесте с HRP-2 для обнаружения P. vivax , а также P. falciparum в крови. Tjitra et al. (67) оценили комбинированный иммунохроматографический тест Pf / Pv (ICT Pf / Pv ), отформатированный с полосами захвата как для HRP-2, так и для альдолазы.Они сообщили, что специфичность и отрицательная прогностическая ценность для диагностики P. vivax составили 94,8 и 98,2% соответственно. Общая чувствительность 75% и положительная прогностическая ценность 50% для малярии P. vivax были менее желательными в их ситуации. Чувствительность, полученная для> 500 паразитов / мкл (0,01% паразитемии), составила 96%, но для значений ниже этого уровня — только 29%.

В исследовании 13 пациентов с малярией в Брисбене, Австралия, с использованием теста ICT Pf / Pv , Эйзен и Саул (14) также отметили низкую чувствительность для обнаружения P.vivax , когда количество паразитов было ниже 500 паразитов / мкл (0,01% паразитемии). Они продемонстрировали снижение интенсивности панспецифической линии с инфекцией P. falciparum или P. vivax во время лечения, в отличие от линии HRP-2, которая оставалась положительной в течение значительных периодов времени после того, как микроскопия стала отрицательной. Авторы предполагают возможность использования панспецифической линии для контроля ответа на терапию. Однако было представлено мало доказательств чувствительности панспецифических антител ICT Pf / Pv к P.falciparum , поскольку эта серия показала обнаружение> 100 паразитов (0,002% паразитемии) в трех образцах, но не в пяти других с более высоким числом паразитов.

ОБСУЖДЕНИЕ

Рекомендуемый метод и текущий золотой стандарт, используемый для рутинной лабораторной диагностики малярии, — это микроскопическое исследование окрашенных тонких и толстых мазков крови, особенно с дополнительной чувствительностью, обеспечиваемой исследованием толстых мазков крови. В самых умелых руках этот метод может обнаружить 50 паразитов / мкл (0.001% паразитемии) и идентифицировать до видового уровня 98% всех наблюдаемых паразитов. Эта процедура признана сложной и трудоемкой, требующей значительного обучения для получения необходимых навыков. В последние несколько лет попытки заменить традиционное, но утомительное чтение мазков крови привели к появлению методов обнаружения малярийных паразитов, чувствительность которых эквивалентна или лучше, чем у микроскопии. Методы с использованием флуоресцентной микроскопии помогли улучшить чувствительность, но не специфичность.ПЦР оказалась чувствительным методом диагностики всех четырех видов малярийных паразитов человека, и можно ожидать, что она превосходит чувствительность микроскопического исследования. Обнаружение <5 паразитов / мкл и идентификация на уровне вида делают этот метод отличным для сравнения чувствительности и специфичности других немикроскопических методов. Однако ПЦР является непрактичным стандартом для измерения рутинной диагностики острой малярии из-за затрат времени и необходимого технического опыта.Обнаружение ДНК в образцах, взятых в то время, когда они хорошо удалены от инфекции (28), может дать сбивающие с толку свидетельства рецидива или лекарственной устойчивости.

Иммунохроматографические тест-полоски позволяют использовать более быстрые немикроскопические методы диагностики малярии, что позволяет сэкономить на обучении и времени. Эти тесты просты в выполнении и требуют небольшого обучения для интерпретации результатов. Однако есть ряд вопросов, на которые в документе ВОЗ «Новые перспективы диагностики малярии » обращает внимание при рассмотрении текущего состояния разработки БДТ для лечения малярии.Это обсуждается ниже.

Чувствительность к БДТ остается проблемой, особенно для неиммунных групп населения. Плотность паразитов выше 100 паразитов / мкл (0,002% паразитемии) должна быть определена с уверенностью (средняя паразитемия, наблюдаемая у пациентов, посещающих Больницу тропических болезней, составляет от 5000 паразитов / мкл [0,1% паразитемии] до 50 паразитов / мкл [0,001% паразитемии]. ]). Хотя эта чувствительность является разумным целевым показателем, которого можно ожидать от измерительных щупов для диагностики P. falciparum , она находится на нижнем пределе возможностей большинства устройств, использующих методы захвата для HRP-2 или pLDH.Доступные тестовые устройства для диагностики малярии, отличной от P. falciparum (ICT Pf / Pv и OptiMAL), имеют чувствительность для диагностики P. vivax от 90 до 96% (OptiMAL) и от 75 до 95% (ICT). Pf / Pv ). Уровень паразитемии, встречающийся для этого паразита, редко превышает 1%, и обычно встречается гораздо более низкий показатель.

Сообщения об обнаружении антигена P. ovale и P. malariae (49) указывают на то, что панспецифические моноклональные антитела возникли из P.falciparum в OptiMAL имеют более низкое сродство к этим антигенам, с дополнительной проблемой, заключающейся в том, что встречается меньше паразитов, чем для P. vivax . Возможно, существует несколько изомеров этих паразитов, из-за чего обнаружение некоторых из них невозможно. Можно предвидеть, что более чувствительное моноклональное антитело захвата для P. ovale может быть доступно для улучшения обнаружения (M. T. Makler, Flow Inc., личное сообщение). Дайер и др. (12) сообщают о неспособности иммунохроматографического теста ICT Pf / Pv к панмалярийным антителам выявить симптоматические P.malariae в Восточном Тиморе и Папуа-Новой Гвинее, даже при паразитемии 4080 паразитов / мкл. Нет сообщений об опыте использования этого формата испытаний для P. ovale .

Клиническое и эпидемиологическое значение тест-полосок, распознающих гаметоциты Plasmodium , имеет большое значение. В районах, где нет передачи малярии, тот факт, что тест не обнаружит все гаметоциты, имеет меньшее значение, чем в районах с высоким уровнем передачи. HRP-2 от половых стадий P.falciparum обнаруживается легче, чем pLDH, которая, по-видимому, активна в молодых формах, но не так легко в более поздних.

Отрицательный результат RDT в настоящее время не может быть принят за чистую монету и должен быть подтвержден микроскопическим исследованием. Была постулирована возможность изолятов с делецией генов, которые не экспрессируют HRP-2, хотя такие же доказательства для pLDH еще не обнаружены. Следует рассмотреть возможность дальнейшего исследования этих и других неэкспрессированных антигенов.

Некоторые исследователи сообщают о полезности ДДТ как средства наблюдения за течением паразитемии во время терапии (49, 50).Srinivasan et al. (65) исследовали значение паразитов, которые остаются в периферической крови после нескольких дней терапии, как это было обнаружено с помощью микроскопии. Когда используется R123, катионный краситель, требующий неповрежденной мембраны, обнаруживаемый у жизнеспособных паразитов, краситель проникает через мембрану и окрашивает паразита. Это исследование пришло к выводу, что наблюдаемые под микроскопом паразиты, оставшиеся в конце курса терапии, являются нежизнеспособными паразитами, лишенными активности фермента pLDH, но еще не выведенными из крови.Это может повлиять на интерпретацию различных характеристик различных методов ДЭТ в сравнении с микроскопией как золотым стандартом при последовательном отборе образцов во время лечения. Сохранение антигенемии HRP-2 после устранения периферической паразитемии в некоторых случаях снижает полезность этих анализов для мониторинга ответа на терапию.

Хотя некоторые исследователи сообщают количественные или полуколичественные данные от форматированных в настоящее время БДТ, в настоящее время невозможно получить на глаз показания, линейные для паразитемии, без какой-либо формы считывающего устройства для захваченных конъюгированных с золотом антител.Количественное измерение позволит сделать прогнозную оценку и предоставит информацию, указывающую на лекарственную устойчивость. RDT, представленные в настоящее время на рынке, просты в использовании; большинство из них в кассетном формате с областями для однократного нанесения образца крови и очищающим буфером. Большинство оценочных испытаний включали температурную и временную стабильность в течение как минимум 1 года при 40 ° C. В настоящее время ни один из коммерческих форматов не имеет одобрения Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) в США, поскольку наиболее острой потребностью при их разработке было использование в странах с ограниченными ресурсами.Однако, особенно с версиями, выявляющими малярию, отличную от P. falciparum (ICT Pf / Pv и OptiMAL), военные США провели испытания на одобрение FDA из-за возможного использования этих устройств в полевых условиях. Окончательная организация производства в Соединенных Штатах может быть возможна в будущем. Коммерческий интерес к производству индикаторных щупов по цене, которую могут себе позволить многие из более бедных стран, является предметом постоянных дебатов, и даже при дифференцированном ценообразовании для разных стран добиться более низких затрат будет трудно.Производство RDT в настоящее время рассматривается более крупными компаниями (AMRAD ICT и Becton Dickinson), и в ближайшем будущем можно ожидать возможных коммерческих изменений.

Новое поколение RDT предлагает реальную практическую возможность перенести диагностику малярии из лаборатории и ближе к пациенту. Чувствительность> 100 паразитов / мкл (0,002% паразитемии), достижимая для диагностики P. falciparum как для HRP-2, так и для ферментативных анализов, настолько хороша, насколько большинство клинических лабораторных сотрудников в неспециализированных лабораториях могут рассчитывать на микроскопические результаты при ограниченном воздействии. к случаям малярии (47).Дополнительная уверенность в том, что опасная для жизни паразитемия, вызванная P. falciparum , не будет пропущена, приветствуется, особенно для неопытного лабораторного персонала во время ночных звонков. Способность обнаруживать большинство случаев малярии, отличной от falciparum , также делает эти тесты идеально подходящими в качестве основных вспомогательных процедур для диагностики малярии.

При рассмотрении методов лабораторной диагностики малярии необходимо учитывать множество факторов (таблица), не в последнюю очередь из которых важны их доступность и стоимость.Приветствуется нынешняя дискуссия о введении тестов, основанных на новой технологии. Тем не менее, это не исключает необходимости проверки правильно окрашенных толстых и тонких мазков крови в качестве стандартной рабочей процедуры при подозрении на малярию или замены существующей программы обучения для идентификации видов Plasmodium и для обнаружения паразитемии ниже существующей. порог обнаружения РДТ.

ТАБЛИЦА 3.

Сравнение методов диагностики Инфекция Plasmodium в крови

плотность паразитов или паразитемия 9 0610 Умеренный
Параметр Микроскопия ПЦР Флуоресценция Dipstick Dipstick HRP-2 Dipstick
Чувствительность паразитов / мкл) 50 5 50 > 100 > 100
Специфичность Все виды Все виды Все виды Все виды Все виды falciparum хорошо, другие затруднены P. falciparum только P. falciparum и P. vivax хорошо и P. ovale и P. malariae только с pLDH
Да Нет Нет Грубая оценка Грубая оценка
Время на результат 30–60 мин 24 ч 30–60 мин 2010 мин 2010 мин 2010 мин
Уровень квалификации Высокий Высокий Умеренный Низкий Низкий
Оборудование Микроскоп Аппарат для ПЦР Аппарат 906 только для флуоресценции 906 906
Стоимость / тест Низкий Высокий Средний / низкий Средний

ССЫЛКИ

1. Бэрд, Дж. К., Пурномо и Т. Р. Джонс. 1992. Диагностика малярии в полевых условиях с помощью флуоресцентной микроскопии капиллярных трубок QBC. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 86 : 3–5. [PubMed] [Google Scholar] 2. Баркер Р. Х., Н. Т. Банчонгаксорм, М. М. Курваль, В. Сувонкерд, К. Римвунгтрагун и Д. Р. Вирт. 1992. Простой метод обнаружения инфекции Plasmodium falciparum у людей: сравнение метода ДНК-зонда с микроскопической диагностикой.Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 41 : 266–272. [PubMed] [Google Scholar] 3. Beadle, C., G. W. Long, W. R. Weiss, P. D. Meelroy, S.M. Maret, A.J. Oloo и S.L. Hoffman. 1994. Диагностика малярии путем обнаружения Plasmodium falciparum HRP-2 антигена с помощью быстрого анализа с помощью тест-полоски. Lancet, i : 564–568. [PubMed] [Google Scholar] 4. Бенито А., Дж. Рош, Р. А. Молина, К. Амела и Дж. Алтар. 1994. Применение и оценка диагностики малярии QBC® в голоэндемичной зоне.Прил. Паразитол. 35 : 266–272. [PubMed] [Google Scholar] 5. Bosch, I., C. Bracho, and H.A. Perez. 1996. Диагностика малярии с помощью флуоресцентной микроскопии с акридиновым апельсином в эндемичной зоне Венесуэлы. Mem. Inst. Освальдо Круз 91 : 83–86. [PubMed] [Google Scholar] 5a. Brenier-Pinchart, M. P., C. Pinel, A. Croisonnier, J. P. Brion, O. Faure, D. Ponard и P. Ambroise-Thomas. 2000. Диагностика малярии в неэндемичных странах с помощью теста Parasight-F.Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 63 : 150–152. [PubMed] [Google Scholar] 6. Clendeman, T. E., G. W. Long, and J. K. Baird. 1995. Толстые мазки крови, окрашенные QBC® и Гимза: диагностические возможности лабораторных технологов. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 86 : 378. [PubMed] [Google Scholar] 7. Кук, А. Х., А. Х. Муди, К. Лемон, П. Л. Чиодини и Дж. Хортон. 1992. Использование флуорохрома бензотиокарбоксипурина в диагностике малярии. Пер. R. Soc. Троп. Med.Hyg. 87 : 549. [PubMed] [Google Scholar] 8. Кук, А. Х., С. Моррис-Джонс, Дж. Хортон, Б. М. Гринвуд, А. Х. Муди и П. Л. Чиодини. 1993. Оценка бензотиокарбоксипурина для диагностики малярии в эндемичной зоне. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 87 : 549. [PubMed] [Google Scholar] 9. Craig, M., and B. L. Sharp. 1997. Сравнительная оценка четырех методов диагностики инфекций Plasmodium . Пер. R. Soc. Троп. Med.Hyg. 91 : 279–282. [PubMed] [Google Scholar] 10. Delacollett, D., and P. Van der Stuyft. 1994. Прямое окрашивание акридиновым апельсином — не «чудо» решение проблем диагностики малярии в полевых условиях. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 88 : 187–188. [PubMed] [Google Scholar] 11. Р. Дитц, М. Перкинс, М. Булос, Ф. Луз, Б. Реллер и К. Р. Кори. 1995. Диагностика Plasmodium с использованием новой системы обнаружения антигенов. Являюсь. J. Trop. Med.Hyg. 52 : 45–59. [PubMed] [Google Scholar] 12. Дайер, М., Э., Э. Тджитра, Б. Дж. Карри и Н. М. Ансти. 2000. Неспособность иммунохроматографического теста ICT® Malaria Pf / Pv «панмалярийными» антителами выявить симптоматическую инфекцию Plasmodium malariae . Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 94 : 518. [PubMed] [Google Scholar] 13. Данн, С. Р., М. Дж. Бэнфилд, Дж. Дж. Баркер, К. В. Хинхэм, К. М. Мортон, Д. Т. Балик, Р. Л. Брэди и Дж. Дж. Холбрук. 1996. Структура лактатдегидрогеназы из Plasmodium falciparum открывает новую мишень для противомалярийного дизайна. Nat. Struct. Биол. 3 : 912–915. [PubMed] [Google Scholar] 14. Eisen, D. P., and A. Saul. 2000. Исчезновение панмалярийной реактивности антигена с использованием набора ICT Malaria Pf / Pv происходит параллельно со снижением явной паразитемии, как показывает микроскопия. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 94 : 169–170. [PubMed] [Google Scholar] 14a. Fryauff, D. J., Purnomo, M. A. Sutamihardja, I. R. S. Elyazar, I. Susanti, Krisin, B. Subianto, и H. Marwoto. 2000. Проведение оптимального анализа для обнаружения и идентификации малярийных инфекций у бессимптомных жителей Ириан-Джая, Индонезия. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 63 : 139–145. [PubMed] [Google Scholar] 15. Гей, Ф., Б. Траоре, Дж. Занони, М. Данис и М. Джентилини. 1996. Прямое исследование флуоресценции акридинового апельсина в препаратах крови в сравнении с современными методами диагностики малярии.Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 90 : 516–518. [PubMed] [Google Scholar] 16. Gaye, O., M. Diouf, and S. Diallo. 1999. Сравнение толстых пленок, тест-полосок на малярию QBC, ПЦР и PATH falciparum для диагностики малярии Plasmodium falciparum . Паразит 6 : 273–275. [PubMed] [Google Scholar]

17. Gilles, H. 1993 . Методы диагностики малярии, стр.78. В Х. М. Жиль и Д. А. Уоррелл (ред.), Основы маляриологии, 3-е изд.П. Эдвард Арнольд, Лондон, Соединенное Королевство.

18. Gomez, M. S., R. C. Piper, L. Hunsiker, and D. Vander Jagt. 1997. Субстратная и кофакторная специфичность и избирательное ингибирование лактатдегидрогеназы малярийного паразита Plasmodium falciparum . Мол. Biochem. Паразитол. 90 : 235–246. [PubMed] [Google Scholar] 19. Hanscheid, T. 1999. Диагностика малярии: обзор альтернатив традиционной микроскопии. Clin. Лаборатория. Haematol. 21 : 235–245.[PubMed] [Google Scholar] 20. Hakim, S. L., T. Furuta, A. N. Rain, Y. Normaznah, M. R. Zamri, S. Kojima, and J. W. Mak. 1993. Диагностика малярии с помощью светового микроскопа с интерференционным фильтром для диагностики малярии. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 56 : 44–48. [Google Scholar] 21. М. Хинд, М. Агабани, И. А. Эль-Хаг, И. А. Эль-Тум, М. Сатти и А. М. Эль-Хассан. 1994. Флуоресцентная микроскопия с использованием светового микроскопа с интерференционным фильтром для диагностики малярии.Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 88 : 61. [PubMed] [Google Scholar] 22. Хумар А., К. Орт, М. А. Харрингтон, Д. Пиллаи и К. К. Кейн. 1997. Тест ParaSight® F в сравнении с полимеразной цепной реакцией и микроскопией для диагностики малярии Plasmodium falciparum у путешественников. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 56 : 44–48. [PubMed] [Google Scholar] 23. Хант-Кук, А. Х., П. Л. Чиодини, Т. Дочерти, А. Х. Муди, Дж. Райс и М. Пиндер. 1999.Сравнение иммунохроматографического анализа антигена на основе лактатдегидрогеназы паразитов (OptiMAL®) с микроскопией для обнаружения малярийных паразитов в образцах крови человека. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 60 : 20–23. [PubMed] [Google Scholar] 23a. Икбал, Дж., П. Р. Хира, А. Шер и А. А. Аль-Энези. 2001. Диагностика завезенной малярии с помощью анализа иммунозахвата на основе Plasmodium лактатдегидрогеназы (pLDH) и богатого гистидином белка 2 (PfHRP-2). Являюсь. J. Trop.Med. Hyg. 64 : 20–23. [PubMed] [Google Scholar] 24. Икбал, Дж., А. Шер, П. Р. Хира и Р. Аль-Овайш. 1999. Сравнение теста OptiMAL® с ПЦР для диагностики малярии у иммигрантов. J. Clin. Microbiol. 39 : 3644–3646. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 25. Iqbal, J., A. Sher, and A. Rab. 2000. Plasmodium falciparum Диагностический анализ иммунозахвата на основе богатого гистидином протеина-2 при малярии: перекрестная реактивность с ревматоидными факторами.J. Clin. Microbiol. 38 : 1184–1186. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 26. Идзумо А., К. Танабэ и М. Като. 1987. Способ мониторинга жизнеспособности малярийных паразитов ( Plasmodium yoelii ), освобожденных от эритроцитов хозяина. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 81 : 264–267. [PubMed] [Google Scholar] 27. Елинек Т., М. П. Гробуш, С. Швенке, С. Штейдл, Ф. Н. Э. фон Зонненбург и Т. Лошер. 1999. Чувствительность и специфичность тест-полосок для быстрой диагностики неиммунных путешественников.J. Clin. Microbiol. 37 : 721–723. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28. Джон, С. М., А. Сундаршанам, У. Ситарам и А. Х. Муди. 1998. Оценка OptiMAL®, тест-полоски для диагностики малярии. Анна. Троп. Med. Паразитол. 92 : 621–622. [PubMed] [Google Scholar] 29. Каин, К. К., А. Е. Браун, Л. Мирабелли и Х. К. Вебстер. 1993. Обнаружение Plasmodium vivax с помощью полимеразной цепной реакции в полевых исследованиях. J. Infect.Дис. 168 : 1323–1326. [PubMed] [Google Scholar] 30. Kain, K. C., D. E. Kyle, C. Wongrichanalai, и A. E. Brown. 1994. Качественная и полуколичественная полимеразная цепная реакция для прогнозирования неудачи лечения Plasmodium falciparum . J. Infect. Дис. 170 : 1626–1630. [PubMed] [Google Scholar] 31. Карбванг, Дж., О. Тасанор, Т. Канда, Ю. Ватанагун, М. Ибрагим, К. Набанчанг, А. Танавибил и В. Рунти. 1996. Тест ParaSight® F для выявления неэффективности лечения при малярии с множественной лекарственной устойчивостью Plasmodium falciparum .Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 90 : 513–515. [PubMed] [Google Scholar] 32. Kawamoto, F. 1991. Быстрая диагностика малярии с помощью флуоресцентной микроскопии со световой микроскопией и интерференционными фильтрами. Ланцет i : 200–202. [PubMed] [Google Scholar] 33. Кавамото, Ф. 1991. Быстрая диагностика малярии с помощью флуоресцентной микроскопии. Ланцет i : 624–625. [PubMed] [Google Scholar] 34. Кавамото, Ф., Х. Мияке, О. Канеко, М. Кимура, Т. Д. Нгуен, К.Луи, М. Чжоу, Д. Д. Ле, С. Кавай, С. Исомура и Ю. Ватая. 1996. Вариация последовательности гена 18S рРНК, мишени для диагностики малярии на основе ПЦР, у Plasmodium ovale из южного Вьетнама. J. Clin. Microbiol. 34 : 2287–2289. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Килиан, А. Х. Д., Э. Б. Мугусу, Г. Кабагамбе и Ф. Фон Зонненбург. 1997. Сравнение двух быстрых диагностических тестов на основе HRP-2 для Plasmodium falciparum . Пер.R. Soc. Троп. Med. Hyg. 91 : 666–667. [PubMed] [Google Scholar] 36. Кодисингхе, Х. М., К. Л. Перера, С. Д. Т. Премаванса, С. Наотунне, А. Р. Викрамайнгхе и К. М. Мендис. 1997. Тест ParaSight® F как рутинный инструмент диагностики малярии в Шри-Ланке. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 91 : 398–402. [PubMed] [Google Scholar] 37. Kong, H. H., and D. I. Chung. 1995. Сравнение акридинового апельсина и красителей Гимзы для диагностики малярии. Корейский J. Parasitol.33 : 391–394. [PubMed] [Google Scholar] 38. Лафери, Х., К. Кандел и Х. Пихлер. 1997. Ложноположительный тест на малярию. N. Engl. J. Med. 337 : 1635–1636. [PubMed] [Google Scholar] 39. Лоу, Б. С., Н. Ф. Джеффа, Л. Нью, К. Педерсон, К. Энгбак и К. Марш. 1996. Методы флуоресценции акридиновым оранжевым в качестве альтернативы традиционному окрашиванию по Гимзе для диагностики малярии в развивающихся странах. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 90 : 34–36.[PubMed] [Google Scholar] 40. Маклер, М. Т., Л. К. Райс, Дж. Райс, Р. Дж. Хортон и Д. Дж. Хинрикс. 1991. Обнаружение инфекции Plasmodium falciparum флуоресцентным красителем Бензотиокарбоксипурин. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 44 : 11–16. [PubMed] [Google Scholar] 41. Маклер, М. Т., К. Дж. Палмер и А. Л. Агер. 1992. Обзор практических методов диагностики малярии. Анна. Троп. Med. Паразитол. 92 : 419–433. [PubMed] [Google Scholar] 42. Маклер, М. Т., Дж. М. Райс, Дж. А. Уильямс, Дж. Э. Бэнкрофт, Р. К. Пайпер, Б. Л. Гиббинс и Д. Дж. Хинрихс. 1993. Лактатдегидрогеназа паразитов как тест на чувствительность к лекарствам Plasmodium falciparum . Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 48 : 739–741. [PubMed] [Google Scholar] 43. Makler, M. T., and D. J. Hinrichs. 1993. Измерение активности лактатдегидрогеназы Plasmodium falciparum как оценка паразитемии. Являюсь. J. Trop. Med.Hyg. 48 : 205–210. [PubMed] [Google Scholar] 44. Маклер, М. Т., Р. К. Пайпер и В. Милхаус. 1998. Лактатдегидрогеназа и диагностика малярии. Паразитол. Сегодня 14 : 376–377. [PubMed] [Google Scholar] 45. Мейер, Б., Х. Добели и У. Черта. 1992. Стадия-специфическая экспрессия изоферментов альдолазы у малярийного паразита грызунов Plasmodium bergei . Мол. Biochem. Паразитол. 52 : 15–27. [PubMed] [Google Scholar] 46. Миллер, Р.Л., С. Икрам, Г. Л. Армелагос, Р. Уокер, В. Б. Харер, К. Дж. Чиф, Д. Баггетт, М. Карриган и С. М. Мане. 1994. Диагностика инфекции Plasmodium falciparum у мумий с помощью ручного экспресс-теста ParaSight® F. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 88 : 31–32. [PubMed] [Google Scholar] 47. Mills, C. D., D. C. H. Burgess, H. J. Taylor и K. C. Kain. 1999. Оценка быстрого и недорогого тест-полоски для диагностики малярии Plasmodium falciparum .Бык. W. H. Org. 77 : 553–559. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 48. Милн, Л. М., П. Л. Чиодини и Д. К. Уорхерст. 1994. Точность рутинной лабораторной диагностики малярии в Соединенном Королевстве. J. Clin. Патол. 47 : 740–742. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 49. Муди А., А. Хант-Кук, Э. Габбетт и П. Чиодини. 2000. Характеристики полоски OptiMAL® для улавливания антигена малярии для диагностики и мониторинга лечения малярии в Больнице тропических болезней в Лондоне.Br. J. Haematol. 109 : 891–894. [PubMed] [Google Scholar] 50. Одуола, А. М., Г. О. Омитовой, А. Совунми, М. Т. Маклер, К. О. Фаладе, Д. Э. Кайл, Ф. А. Фехинтола, О. А. Огундахунси, Р. К. Пайпер, Б. Г. Шустер и В. К. Милхаус. 1997. Plasmodium falciparum : оценка лактатдегидрогеназы при мониторинге терапевтического ответа на стандартные противомалярийные препараты в Нигерии. Exp. Паразитол. 87 : 283–289. [PubMed] [Google Scholar] 51. Палмер, К.Дж., Дж. Ф. Линдо, В. И. Класкала, Дж. А. Кесада, Р. Камински, М. К. Баум и А. Л. Агер. 1998. Оценка теста OptiMAL для быстрой диагностики Plasmodium vivax и Plasmodium falciparum малярия. J. Clin. Microbiol. 36 : 203–206. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 52. Палмер, К. Дж., Л. Валидум, Дж. Линдо, А. Кампа, К. Валидум, М. Маклер, Р. Р. Куадрадо и А. Агер. 1999 г. Полевая оценка экспресс-теста OptiMAL® на малярию во время противомалярийной терапии в Гайане.Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 93 : 517–518. [PubMed] [Google Scholar] 53. Пейрон, Ф. Г., Дж. П. Мартет и А. Виглер. 1994. Тест на захват антигена с помощью индикаторной полоски для выявления малярии. Ланцет i : 1502–1503. [PubMed] [Google Scholar] 54. Pieroni, P., C. D. Mills, C. Ohrt, M. A. Harrington, and K. C. Kain. 1998. Сравнение теста ParaSight® F и ICT® malaria Pf с полимеразной цепной реакцией для диагностики малярии Plasmodium falciparum у путешественников.Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 92 : 166–169. [PubMed] [Google Scholar] 55. Р. Пайпер, Дж. Лебрас, Л. Вентворт, А. Хант Кук, С. Хоуз, П. Чиодини и М. Маклер. 1999. Диагностический анализ для выявления малярии с использованием лактатдегидрогеназы Plasmodium (pLDH). Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 60 : 109–118. [PubMed] [Google Scholar] 56. Пайпер Р. К., Д. Л. Вандерджагт, Дж. Дж. Холбрук и М. Маклер. 1996. Лактатдегидрогеназа малярии: цель для диагностики и разработки лекарств.Анна. Троп. Med. Паразитол. 90 : 433. [Google Scholar] 57. Premji, Z., J. N. Minjas, and C. J. Schiff. 1994. Лабораторная диагностика малярии сельскими медработниками с помощью экспресс-теста ParaSight® F. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 88 : 418. [PubMed] [Google Scholar] 58. Китана М., Р. Пайпер, Х. Болинг, М. Маклер, Г. Э. Шерман, Э. Фернандес и С. Мартин. 1998. Диагностика малярии с помощью тест-полоски в гондурасской популяции с коэндемичными Plasmodium falciparum и vivax .Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 59 : 868–871. [PubMed] [Google Scholar] 59. Rock, E. P., K. Marsh, S. J. Saul, T. E. Wellems, D. W. Taylor, W. L. Maloy и R. J. Howard. 1987. Сравнительный анализ Plasmodium falciparum гистидин-богатых белков HRP1, HRP2 и HRP3 при диагностике малярии различного происхождения. Паразитология 95 : 209–227. [PubMed] [Google Scholar] 60. Schiff, C.J., Z. Premji, and J. N. Minjas. 1993. Быстрый ручной тест ParaSight® F.Новый диагностический инструмент для инфекции Plasmodium falciparum . Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 87 : 646–648. [PubMed] [Google Scholar] 61. Seesod, N., J. Lundeberg, A. Hedrum, L. Asland, A. Holder, S. Thaithong, and M. Uhlen. 1993. Иммуномагнитная очистка для облегчения диагностики ДНК Plasmodium falciparum . J. Clin. Microbiol. 31 : 2715–2719. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 62. Сетхабутр, О., А. Э. Браун, С. Паним, К.К. Каин, К. Вебстер и П. Эчеверрия. 1992. Обнаружение Plasmodium falciparum с помощью полимеразной цепной реакции в полевых исследованиях. J. Infect. Дис. 166 : 145–148. [PubMed] [Google Scholar] 63. Сингх Н., М. Валенча и В. П. Шарма. 1997. Диагностика малярии полевыми работниками с помощью иммунохроматографического теста. Пер. R. Soc. Троп. Med. Hyg. 91 : 396–397. [PubMed] [Google Scholar] 64. Сноуну Г., С. Вириякосол, В. Джарра, С. Тайтонг и К.Н. Браун. 1993. Идентификация четырех видов малярии человека в полевых образцах с помощью полимеразной цепной реакции и выявление высокой распространенности смешанных инфекций. Мол. Biochem. Паразитол. 58 : 283–292. [PubMed] [Google Scholar] 65. Srinavasan, S., A.H. Moody, and P.L. Chiodini. 2000. Сравнение микроскопии мазка крови, тест-полоски OptiMAL®, родамин 123 и ПЦР для мониторинга лечения от малярии. Анна. Троп. Med. Паразитол. 94 : 227–232.[PubMed] [Google Scholar] 66. Tanabe, K. 1983. Окрашивание эритроцитов мышей, инфицированных Plasmodium yoelii , флуоресцентным красителем родамином 123. J. Protozool. 30 (4): 707–710. [PubMed] [Google Scholar] 67. Э. Тжитра, С. Суприанто, М. Дайер, Б. Дж. Карри и Н. М. Ансти. 1999. Полевая оценка иммунохроматографического теста на малярию Pf / Pv для обнаружения Plasmodium falciparum и Plasmodium vivax у пациентов с предполагаемым клиническим диагнозом малярии в восточной Индонезии.J. Clin. Microbiol. 37 : 2412–2417. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 68. Verle, P., L. N. Bink, T. T. Lieu, P. T. Yen и M. Coosemans. 1996. Тест ParaSight® F для диагностики малярии в гипоэндемичных и подверженных эпидемиям регионах Вьетнама. Троп. Med. Int. Здоровье 1 : 794–796. [PubMed] [Google Scholar] 70. Ватая Ю., М. Араи, Ф. Кубочи, К. Мизулоши, Т. Какутани, Н. Охта и А. Исии. 1993. ДНК-диагностика малярии falciparum с использованием метода двойной ПЦР: полевые испытания на Соломоновых островах.Мол. Biochem. Паразитол. 58 : 65–168. [PubMed] [Google Scholar] 71. Ватья, Ю., Ф. Кубочи, К. Мизукоши, Ю. Охя, К. Ватанабэ, М. Араи, А. Исии и А. Накагам. 1991. ДНК-диагностика малярии falciparum. Nucleic Acids Symp. Сер. 25 : 155–156 [PubMed] [Google Scholar] 71a. Whitty, C.J.M., M. Armstrong, and R.H. Behrens. 2000. Самостоятельное тестирование на малярию falciparum с помощью карт захвата антигена путешественниками с симптомами малярии. Являюсь. J. Trop Med.Hyg. 63 : 295–297. [PubMed] [Google Scholar] 72. Wongsrichanalai, C., N. Chuanak, S. Tulyayon, N. Thanoosingha, A. Laboonchal, T. G. Thimasarn, and D. G. Heppner. 1999. Сравнение быстрого полевого иммунохроматографического теста с экспертной микроскопией для обнаружения Plasmodium falciparum бесполой паразитемии в Таиланде. Acta Trop. 73 : 263–273. [PubMed] [Google Scholar] 73. Wongsrichanalai, C., J. Pornsilapatip, V. Namsiriponpun, H.K Webster, A.Луччини, П. Пансамданг, Х. Уайлд и М. Праситтисук. 1991. Флуоресцентная микроскопия с акридиновым оранжевым и выявление малярии у популяций с паразитемией низкой плотности. Являюсь. J. Trop. Med. Hyg. 44 : 17–20. [PubMed] [Google Scholar]

74. Всемирная организация здравоохранения. 2000. WHO / MAL / 2000.1091. Новые перспективы в диагностике малярии. Всемирная организация здравоохранения, Женева, Швейцария.

Густые и жидкие мазки крови при малярии

Обзор экзамена

Врачи используют толстые и жидкие мазки крови, чтобы определить, есть ли у вас малярия.Если один тест окажется отрицательным и паразитов не обнаружено, вам нужно будет сдавать мазок крови каждые 8 ​​часов в течение нескольких дней, чтобы подтвердить отсутствие малярийной инфекции.

Мазки крови чаще всего берут от укола пальца. Толстые и жидкие мазки крови позволят врачам узнать процент инфицированных эритроцитов (плотность паразитов) и тип паразитов.

  • Густой мазок крови — это капля крови на предметном стекле. Густые мазки крови наиболее полезны для обнаружения паразитов, поскольку они исследуют более крупный образец крови.(Часто на момент проведения анализа в крови бывает мало паразитов.)
  • Тонкий мазок крови — это капля крови, распределенная по большой площади предметного стекла. Тонкие мазки крови помогают врачам определить, какой вид малярии вызывает инфекцию.

Зачем это делают

На сегодняшний день микроскопическое исследование толстых и жидких мазков крови является самым простым и надежным тестом на малярию.

Результаты

Результаты толстых и жидких мазков крови могут показать:

Нормальный

В красных кровяных тельцах паразитов нет.Ваш врач будет повторять анализ каждые 8 ​​часов в течение 1-2 дней, если он или она все еще подозревает, что у вас малярия.

Аномальные

Паразиты присутствуют в эритроцитах. Идентифицирован инфекционный вид Plasmodium . Также определяется процент эритроцитов, инфицированных паразитом Plasmodium (плотность).

Лечение может варьироваться в зависимости от:

  • Виды Plasmodium присутствуют. Малярия, вызванная P.falciparum является более серьезным заболеванием, чем другие типы, и с ним можно лечить по-другому.
  • Процент инфицированных эритроцитов (плотность паразитов), а не количество паразитов. Если инфицирован большой процент клеток крови, лекарство можно вводить непосредственно в вену (внутривенно или внутривенно), а не перорально (перорально).

Что думать

Мазки крови — самые надежные тесты на малярию. Вы можете спросить, планируется ли мазок крови: густой или тонкий, или и то, и другое.Тонкий мазок крови позволит определить вид малярийного паразита. Эта информация важна для предотвращения или предупреждения опасных для жизни осложнений, если P. falciparum является источником инфекции.

Кредиты

Текущий по состоянию на: 23 сентября 2020 г.

Автор: Healthwise Staff
Медицинский обзор:
Э. Грегори Томпсон, врач-терапевт
Адам Хусни, доктор медицины, семейная медицина
W.Дэвид Колби IV Магистр, MD, FRCPC — Инфекционные заболевания

Текущее состояние: 23 сентября 2020 г.

Автор: Здоровый персонал

Медицинское обозрение: E. Грегори Томпсон, врач-терапевт и Адам Хусни, доктор медицины, семейная медицина и В. Дэвид Колби IV, магистр, доктор медицинских наук, FRCPC — инфекционные заболевания

Малярия — Диагностика и лечение

Диагноз

Чтобы диагностировать малярию, ваш врач, скорее всего, изучит вашу историю болезни и недавние поездки, проведет медицинский осмотр и назначит анализы крови.Анализы крови могут указать:

  • Наличие паразита в крови, подтверждающее, что у вас малярия
  • Какой тип малярийных паразитов вызывает у вас симптомы
  • Если ваша инфекция вызвана паразитом, устойчивым к определенным лекарствам
  • Вызывает ли болезнь какие-либо серьезные осложнения?

На выполнение некоторых анализов крови может потребоваться несколько дней, в то время как другие могут дать результаты менее чем за 15 минут. В зависимости от ваших симптомов ваш врач может назначить дополнительные диагностические тесты для оценки возможных осложнений.

Лечение

Малярия лечится лекарствами, отпускаемыми по рецепту, чтобы убить паразита. Типы лекарств и продолжительность лечения будут варьироваться в зависимости от:

  • Какой тип малярийных паразитов у вас?
  • Степень тяжести симптомов
  • Ваш возраст
  • Беременны ли вы

Лекарства

К наиболее распространенным противомалярийным препаратам относятся:

  • Хлорохинфосфат. Хлорохин является предпочтительным средством от любых паразитов, чувствительных к этому препарату. Но во многих частях мира паразиты устойчивы к хлорохину, и этот препарат больше не является эффективным средством лечения.
  • Комбинированная терапия на основе артемизинина (ККТ). ACT представляет собой комбинацию двух или более препаратов, которые по-разному действуют против малярийных паразитов. Обычно это предпочтительный метод лечения устойчивой к хлорохину малярии. Примеры включают артеметер-люмефантрин (Коартем) и артесунат-мефлохин.

Другие распространенные противомалярийные препараты включают:

  • Атоваквон-прогуанил (Маларон)
  • Сульфат хинина (Qualaquin) с доксициклином (Oracea, Vibramycin, другие)
  • Примахин фосфат

Подготовка к приему

Если вы подозреваете, что у вас малярия или вы подверглись заражению, вы, скорее всего, начнете с посещения семейного врача.Однако в некоторых случаях, когда вы звоните, чтобы записаться на прием, вас могут направить к инфекционисту. Если у вас наблюдаются серьезные симптомы, особенно во время или после поездки в район, где распространена малярия, обратитесь за неотложной медицинской помощью.

Что вы можете сделать

Перед встречей вы можете записать ответы на следующие вопросы:

  • Каковы ваши симптомы и когда они появились?
  • Куда вы недавно ездили?
  • Как долго вы путешествовали и когда вернулись?
  • Принимали ли вы какие-либо профилактические препараты во время путешествия?
  • Какие еще лекарства вы принимаете, включая пищевые добавки и лечебные травы?

Октябрь12, 2021

Показать ссылки
  1. AskMayoExpert. Малярия. Клиника Майо; 2019.
  2. Jameson JL, et al., Eds. Малярия. В: Принципы внутренней медицины Харрисона. 20-е изд. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: компании McGraw-Hill; 2018. https://accessmedicine.mhmedical.com. По состоянию на 9 октября 2018 г.
  3. Bennett JE, et al. Малярия (виды плазмодиев). В: Принципы и практика инфекционных заболеваний Манделла, Дугласа и Беннета. 9 изд. Эльзевир; 2020. https: // www.Clinicalkey.com. Проверено 15 декабря 2020 г.
  4. Малярия. Руководство Merck Professional Version. http://www.merckmanuals.com/professional/infectious-diseases/extraintestinal-protozoa/malaria. Проверено 15 декабря 2020 г.
  5. Brunette GW, et al., Eds. Желтая книга CDC 2020: Информация о здоровье для международных поездок. Издательство Оксфордского университета; 2019. https://wwwnc.cdc.gov/travel/page/yellowbook-home. Проверено 15 декабря 2020 г.
  6. Breman JG. Клинические проявления малярии у небеременных взрослых и детей.https://www.uptodate.com/contents/search. Проверено 15 декабря 2020 г.
  7. Daily J. Лечение неосложненной малярии falciparum у небеременных взрослых и детей. https://www.uptodate.com/contents/search. Проверено 15 декабря 2020 г.
  8. Всемирный доклад о малярии 2020 г. Всемирная организация здравоохранения. https://www.who.int/publications/i/item/978

    15791. Проверено 15 декабря 2020 г.

  9. Sanchez L, et al. Ответы антител на вакцину RTS, S / AS01E и антигены Plasmodium falciparum после бустерной дозы в рамках испытания фазы 3 в Мозамбике.NPJ Vaccines. 2020; DOI: 10.1038 / s41541-020-0192-7.
  10. Вопросы и ответы по вакцине против малярии RTS, S. Всемирная организация здравоохранения. https://www.who.int/news-room/q-a-detail/q-a-on-rts-s-malaria-vaccine. Доступ 7 октября 2021 г.

Связанные

Продукты и услуги

Показать больше продуктов и услуг Mayo Clinic

Диагностических средств при детской малярии | Паразиты и переносчики

  • 1.

    Центры по контролю и профилактике заболеваний CDC. История малярии, древней болезни, 11 марта 2016 г., 2016 г. https://www.cdc.gov/malaria/about/history/. По состоянию на 10 июня 2017 г.

  • 2.

    Neva FA, Brown HW. Основы клинической паразитологии. Appleton & Lange: Норуолк, Коннектикут; 1994.

    Google ученый

  • 3.

    Кроули Дж., Чу К., Мтове Дж., Ностен Ф. Малярия у детей. Ланцет. 2010; 375: 1468–81.

    PubMed Статья Google ученый

  • 4.

    Рабочая группа МАИР по оценке канцерогенных рисков для людей. Малярия и некоторые полиомавирусы (вирусы SV40, BK, JC и клетки Меркеля). IARC Monogr Eval Канцерогенные риски Hum. 2014; 104: 41–53.

    Google ученый

  • 5.

    Барбер Б.Е., Уильям Т., Джикал М., Джилип Дж., Дхарарадж П., Менон Дж. И др. Plasmodium knowlesi Малярия у детей. Emerg Infect Dis. 2011; 17 (5): 814.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 6.

    Махгуб Х., Гасим Г.И., Муса И.Р., Адам И. Тяжелая Plasmodium vivax малярия среди суданских детей в новой больнице Халфа, Восточный Судан. Векторы паразитов. 2012; 5: 154.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 7.

    Доктор С.М., Лю Й., Андерсон О.Г., Уайтселл А.Н., Мвандагалирва М.К., Мувонга Дж. И др. Низкая распространенность моноинфекций Plasmodium malariae и Plasmodium ovale среди детей в Демократической Республике Конго: популяционное поперечное исследование.Малар Дж. 2016; 15 (1): 350.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 8.

    Всемирная организация здравоохранения. Малярия у детей до пяти лет, 6 апреля 2016 г., 2016 г. http://www.who.int/malaria/areas/high_risk_groups/children/en/. По состоянию на 10 июня 2017 г.

  • 9.

    Всемирная организация здравоохранения. Информационный бюллетень о малярии, апрель 2016 г., 2016 г. http://www.who.int/malaria/media/world-malaria-report-2016/en/. По состоянию на 10 июня 2017 г.

  • 10.

    Родригес-Моралес А.Дж., Санчес Э., Варгас М., Пикколо С., Колина Р., Аррия М. Анемия и тромбоцитопения у детей с малярией Plasmodium vivax . J Trop Pediatr. 2006. 52 (1): 49–51.

    PubMed Статья Google ученый

  • 11.

    Genton B, D’Acremont V, Rare L, Baea K, Reeder JC, Alpers MP, et al. Plasmodium vivax и смешанные инфекции связаны с тяжелой формой малярии у детей: проспективное когортное исследование из Папуа-Новой Гвинеи.PLoS Med. 2008; 5 (6): e127.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 12.

    Уильям Т., Менон Дж., Раджахрам Дж., Чан Л., Ма Дж., Дональдсон С. и др. Тяжелая форма малярии Plasmodium knowlesi в больнице третичного уровня, Сабах, Малайзия. Emerg Infect Dis. 2011; 17 (7): 1248–55.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 13.

    Van den Eede P, Van HN, Van Overmeir C, Vythilingam I, Duc TN, Hung LX и др. Человек Plasmodium knowlesi Инфекции у детей младшего возраста в центральном Вьетнаме. Малар Дж. 2009; 8 (1): 249.

    PubMed Статья CAS Google ученый

  • 14.

    Stauffer W, Fischer PR. Диагностика и лечение малярии у детей. Clin Infect Dis. 2003. 37 (10): 1340–8.

    PubMed Статья Google ученый

  • 15.

    Келландер К., Нсунгва-Сабиити Дж., Петерсон С. Частичное совпадение симптомов малярии и пневмонии — политические последствия для стратегий ведения домашнего хозяйства. Acta Trop. 2004; 90: 211–4.

    PubMed Статья Google ученый

  • 16.

    Марш К., Форстер Д., Варуиру К., Мванги И., Винстенли М., Марш В. и др. Показатели опасной для жизни малярии у африканских детей. N Engl J Med. 1995. 332 (21): 1399–404.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 17.

    Hotchkiss RS, Karl IE. Патофизиология и лечение сепсиса. N Engl J Med. 2003; 348: 138–50.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 18.

    Ари, М.Д., Гурача А., Фадил М.А., Нджугуна С., Ньенга М.К., Калани Р. и др. Проблемы установления правильного диагноза вспышек острых лихорадочных заболеваний в Африке: случай вероятной вспышки Brucella среди кочевых скотоводов, северо-восток Кении, март – июль 2005 г.Am J Trop Med Hyg. 2011. 85 (5): 909–12.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 19.

    Ониле-эре О., Опенибо Дж., Оласехинде Г.И., Диагностика малярии: современные подходы и перспективы на будущее. В: 3-я Международная конференция по вопросам развития Африки (CU-ICADI), 9–11 мая. Университет Ковенанта. Нигерия: Ота; 2016.

    Google ученый

  • 20.

    Oladosu OO, Oyibo WA.Гипердиагностика и избыточное лечение малярии у детей с лихорадкой в ​​Лагосе, Нигерия. ISRN Infect Dis. 2012; 2013

  • 21.

    Мванги Т.В., Мохаммед М., Дайо Х., Сноу Р.В., Марш К. Клинические алгоритмы диагностики малярии бесполезны среди людей разных возрастных групп. Tropical Med Int Health. 2005; 10: 530–6.

    Артикул Google ученый

  • 22.

    Мод Р.Дж., Вудро С.Дж., Белый ЖЖ. Артемизининовые противомалярийные препараты: сохранение «волшебной пули».Drug Dev Res. 2010; 71: 12–9.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 23.

    Cui L, Mharakurwa S, Ndiaye D, Rathod PK, Rosenthal PJ. Устойчивость к противомалярийным препаратам: обзор литературы, деятельность и результаты сети ICEMR. Am J Trop Med Hyg. 2015; 93: 57–68.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 24.

    Эшли Э.А., Дорда М., Фэрхерст Р.М., Амаратунга С., Лим П., Суон С. и др.Распространение устойчивости к артемизинину при малярии Plasmodium falciparum . N Engl J Med. 2014; 371 (5): 411–23.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 25.

    Рекомендации Всемирной организации здравоохранения по лечению малярии. 3-е издание. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2015.

  • 26.

    Всемирная организация здравоохранения Глобальный план сдерживания устойчивости к артемизинину (GPARC).Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2011.

  • 27.

    Д’Акремонт В., Ленгелер С., Мшинда Х., Мтасива Д., Таннер М., Гентон Б. Пора переходить от лечения предполагаемой малярии к лабораторно подтвержденной диагностике и лечению африканских детей с лихорадкой. PLoS Med. 2009; 6: e252.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 28.

    Инглиш М., Рейберн Х., Гудман С., Сноу Р. Отказ от предполагаемого противомалярийного лечения детей с лихорадкой в ​​возрасте до пяти лет — случай бега до того, как мы сможем ходить? PLoS Med.2009; 6: e1000015.

    PubMed Статья Google ученый

  • 29.

    Чоге Дж. К., Нг’Вена Г.М., Ахвале В., Коеч Дж., Нгейва М.М., Ойоо-Окот Э. и др. Симптоматическая диагностика малярии переоценивает распространенность малярии, но недооценивает бремя анемии у детей: результаты последующего исследования в Кении. BMC Public Health. 2014; 14 (1): 332.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 30.

    Okoro C, Chukwuocha U, Nwakwuo G, Ukaga C. Предполагаемый диагноз и лечение малярии у детей с лихорадкой в ​​некоторых частях юго-восточной Нигерии. J Infect Dis Ther. 2015; 3: 5.

    Google ученый

  • 31.

    Chukwuocha UM. Лечение малярии у детей на основании предположительного диагноза: марка или марка ?. J Pediatric Infect Dis. 2016; 1: 6.

    Google ученый

  • 32.

    Planche T, Krishna S, Kombila M, Engel K, Faucher JF, Ngou-Milama E, et al.Сравнение методов экспресс-лабораторной оценки детей с малярией. Am J Trop Med Hyg. 2001. 65 (5): 599–602.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 33.

    Йонкман А., Чибве Р.А., Хоромана Колорадо, Лябунья УЛ, Чапонда М.Э., Кандиеро Г.Э. и др. Экономия средств за счет микроскопии по сравнению с предполагаемой диагностикой малярии у взрослых амбулаторных пациентов в Малави. Bull World Health Organ. 1995. 73 (2): 223–7.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 34.

    Mbakilwa H, Manga C, Kibona S, Mtei F, Meta J, Shoo A и др. Качество микроскопии малярии в лабораториях 12 районных больниц Танзании. Pathog Glob Health. 2012; 106: 330–4.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 35.

    Silamut K, White NJ. Связь стадии развития паразитов в периферической крови с прогнозом тяжелой формы малярии, вызванной falciparum. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1993; 87: 436–43.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 36.

    Nguyen PH, Day N, Pram TD, Ferguson DJ, White NJ. Пигмент внутрилейкоцитарной малярии и прогноз при тяжелой малярии. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1995; 89: 200–4.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 37.

    Ngasala B, Mubi M, Warsame M, Petzold MG, Massele AY, Gustafsson LL, et al. Влияние обучения клинической и микроскопической диагностике детской малярии на назначение противомалярийных препаратов и результаты для здоровья на уровне первичной медико-санитарной помощи в Танзании: рандомизированное контролируемое исследование.Малар Дж. 2008; 7: 199.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 38.

    Pasricha JM, Juneja S, Manitta J, Whitehead S, Maxwell E, Goh WK, et al. Требуется ли серийное тестирование для диагностики завозной малярии в эпоху быстрых диагностических тестов? Am J Trop Med Hyg. 2013. 88 (1): 20–3.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 39.

    Белый NJ. Лечение малярии. N Engl J Med. 1996. 335 (11): 800–6.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 40.

    Тангпукди Н., Дуангди К., Вилайратана П., Крудсуд С. Диагностика малярии: краткий обзор. Корейский J Parasitol. 2009; 47: 93–102.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 41.

    Strom GE, Haanshuus CG, Fataki M, Langeland N, Blomberg B.Проблемы диагностики детской малярии в Дар-эс-Саламе, Танзания. Малар Дж. 2013; 12: 228.

    PubMed Статья Google ученый

  • 42.

    Neumann CG, Bwibo NO, Siekmann JH, McLean ED, Browdy B, Drorbaugh N. Сравнение микроскопии мазка крови с экспресс-тестом для тестирования in vitro на малярию P. falciparum у кенийских школьников . East Afr Med J. 2008; 85: 544–9.

    CAS PubMed Google ученый

  • 43.

    Audu HO, Abdulsalam MY. Обнаружение малярийных паразитов с помощью микроскопа и набора для экспресс-диагностики (pLDH) у беременных женщин и детей, Лагос, Нигерия. Nig J Parasitol. 2015; 36: 137–40.

    Google ученый

  • 44.

    Ли К.С., Кокс-Сингх Дж., Сингх Б. Морфологические особенности и дифференциальные подсчеты Plasmodium knowlesi паразитов в естественных инфекциях человека. Малар Дж. 2009; 8: 73.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 45.

    Ситали Л., Чипета Дж., Миллер Дж. М., Мунга Х. Б., Кумар Н., Мосс В. Дж. И др. Паттерны смешанных инфекций видов Plasmodium среди детей в возрасте шести лет и младше в отдельных гиперэндемичных по малярии общинах Замбии: наблюдения за популяционным обследованием. BMC Infect Dis. 2015; 15: 204.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 46.

    Орт С., Пурномо Сутамихарджа М.А., Тан Д., Каин К.С.. Влияние ошибки микроскопии на оценку защитной эффективности в испытаниях по профилактике малярии.J Infect Dis. 2002; 186: 540–6.

    PubMed Статья Google ученый

  • 47.

    Wongsrichanalai C, Barcus MJ, Muth S, Sutamihardja A, Wernsdorfer WHA. Обзор средств диагностики малярии: микроскопия и экспресс-тест (RDT). Am J Trop Med Hyg. 2007. 77: 119–27.

    PubMed Google ученый

  • 48.

    McKenzie FE, Sirichaisinthop J, Miller RS, Gasser RA Jr, Wongsrichanalai C.Зависимость выявления малярии и диагностики видов с помощью микроскопии от плотности паразитов. Am J Trop Med Hyg. 2003. 69: 372–6.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 49.

    Pornsilapatip J, Namsiripongpun V, Wilde H, Hanvanich M, Chutivongse S. Обнаружение плазмодиев в капиллярных трубках, окрашенных акридиновым оранжевым (система QBC). Юго-Восточная Азия J Trop Med Public Health. 1990; 21: 534–40.

    CAS PubMed Google ученый

  • 50.

    Bosch I, Bracho C, Perez HA. Диагностика малярии с помощью флуоресцентной микроскопии с акридиновым апельсином в эндемичной зоне Венесуэлы. Mem Inst Oswaldo Cruz. 1996. 91: 83–6.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 51.

    Бенито А., Рош Дж., Молина Р., Амела С., Альвар Дж. Применение и оценка диагностики малярии QBC в голоэндемичной зоне. Appl Parasitol. 1994; 35: 266–72.

    CAS PubMed Google ученый

  • 52.

    Олоо А.Дж., Ондиджо С.О., Дженга И.О., Борига Д.А., Овага М.Л., Нгаре Д. и др. Оценка метода QBC для выявления малярийных инфекций в полевых исследованиях. East Afr Med J. 1994; 71: 297–9.

    CAS PubMed Google ученый

  • 53.

    Пинто М.Дж., Родригес С.Р., Десуза Р., Веренкар М.П. Полезность системы количественного определения паразитов в лейкоцитной крови в диагностике малярии. Индийский J Med Microbiol. 2001; 19: 219–21.

    CAS PubMed Google ученый

  • 54.

    Салмани МП, Прити Б.М., Пирапур Б.В. Сравнительное исследование мазка периферической крови и количественной лейкоцитарной пленки в диагностике малярии. J Commun Dis. 2011; 43: 57–9.

    PubMed Google ученый

  • 55.

    Чотиванич К., Силамут К., Дэй НПЖ. Лабораторная диагностика малярийной инфекции — краткий обзор методов. N Z J. Med Lab Sci. 2007; 61: 4–7.

    Google ученый

  • 56.

    Prashanth GP. Количественный тест лейкоцитарной пленки (QBC) для быстрой диагностики малярии. Eur J Pediatr. 2012; 171: 199–200.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 57.

    Mirdha BR, Samantray JC, Burman D, Mishra B, Ghimire P. Количественный лейкоцитный покров: специальное дополнение для диагностики малярии. J Commun Dis. 1999; 31: 19–22.

    CAS PubMed Google ученый

  • 58.

    Nkrumah B, Agyekum A, Acquah SE, May J, Tannich E, Brattig N, et al. Сравнение нового экспресс-теста Partec на малярию с традиционным окрашиванием по Гимзе и золотым стандартом ПЦР в реальном времени. J Clin Microbiol. 2010. 48: 2925–8.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 59.

    Kimbi HK, Ajeagah HU, Keka FC, Lum E, Nyabeue HN, Tonga CF. Бессимптомная малярия у школьников и оценка рабочих характеристик Partec Cyscope® в регионе Маунт-Камерун.J Bacteriol Parasitol. 2012; 3: 153.

    Google ученый

  • 60.

    Nkrumah B, Acquah SE, Ibrahim L., May J, Brattig N, Tannich E, et al. Сравнительная оценка двух полевых экспресс-тестов для диагностики малярии: экспресс-тест на малярию Partec® и экспресс-тест Binax now® для диагностики малярии. BMC Infect Dis. 2011; 11: 143.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 61.

    Шривастава Б., Анвикар А.Р., Гош С.К., Мишра Н., Кумар Н., Хури-Яфин А. и др. Технология на основе компьютерного зрения для быстрой, точной и рентабельной диагностики малярии. Малар Дж. 2015; 14: 526.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 62.

    Houri-Yafin A, Eshel Y, Lezmy N, Larbi B, Wypkema E, Dayanand V и др. Улучшенная платформа компьютерного зрения для клинической диагностики малярии. Борьба с ликвидацией малярии.2016; 5: 138.

    Google ученый

  • 63.

    Эшель Й., Хури-Яфин А., Бенкузари Х., Лезми Н., Сони М., Чарльз М. и др. Оценка платформы Parasight для диагностики малярии. J Clin Microbiol. 2017; 55 (3): 768–75.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 64.

    Всемирная организация здравоохранения. Экспресс-диагностические тесты. 14 июля 2017 г. http: //www.who.int / малярия / районы / диагностика / quick_diagnostic_tests / en /. По состоянию на 25 сентября 2017 г.

  • 65.

    Всемирная организация здравоохранения. Всемирный доклад о малярии, 2015 г., 2015 г. http://www.who.int/malaria/publications/world-malaria-report-2015/report/en/. По состоянию на 25 сентября 2016 г.

  • 66.

    Murray CK, Gasser RA Jr, Magill AJ, Miller RS. Обновленная информация о экспресс-диагностике малярии. Clin Microbiol Rev.2008; 21 (1): 97–110.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 67.

    Всемирная организация здравоохранения. Эффективность экспресс-тестов на малярию: результаты тестирования продуктов ВОЗ для БДТ против малярии: 6-й раунд (2014–2015 гг.). Декабрь 2015 г. http://www.who.int/malaria/publications/atoz/978

    10035/en/. По состоянию на 25 сентября 2016 г.

  • 68.

    Rock EP, Marsh K, Saul AJ, Wellems TE, Taylor DW, Maloy WL, et al. Сравнительный анализ Plasmodium falciparum богатых гистидином белков HRP-I, HRP-II и HRP-III у малярийных паразитов различного происхождения. Паразитология.1987. 95 (2): 209–27.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 69.

    Маклер М.Т., Пайпер Р.К., Милхаус В.К. Лактатдегидрогеназа и диагностика малярии. Паразитол сегодня. 1998. 14 (9): 376–7.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 70.

    Мейер Б., Добели Х., Серта У. Стадия-специфическая экспрессия изоферментов альдолазы у малярийного паразита грызунов Plasmodium berghei .Мол Биохим Паразитол. 1992. 52 (1): 15–27.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 71.

    Abba K, Deeks JJ, Olliaro PL, Naing CM, Jackson SM, Takwoingi Y, et al. Экспресс-тесты для диагностики неосложненной малярии P. falciparum в эндемичных странах. Кокрановская база данных Syst Rev.2011; 6 (7): CD008122.

    Google ученый

  • 72.

    Chiodini PL, Bowers K, Jorgensen P, Barnwell JW, Grady KK, Luchavez J, et al.Термостабильность экспресс-тестов малярии на основе лактатдегидрогеназы плазмодия и богатого гистидином протеина 2. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2007. 101 (4): 331–7.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 73.

    Ли Н., Бейкер Дж., Эндрюс К.Т., Гаттон М.Л., Белл Д., Ченг К.и др. Влияние вариации последовательности в Plasmodium falciparum гистидин-богатый белок 2 на связывание специфических моноклональных антител: значение для экспресс-тестов для диагностики малярии.J Clin Microbiol. 2006. 44 (8): 2773–8.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 74.

    Лафери Х., Кандел К., Пихлер Х. Ложноположительный тест на малярию. N Engl J Med. 1997. 337 (22): 1635–6.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 75.

    Koita OA, Doumbo OK, Ouattara A, Tall LK, Konare A, Diakite M, et al. Ложноотрицательные экспресс-тесты для диагностики малярии и делеции богатой гистидином области повторов гена hrp2.Am J Trop Med Hyg. 2012; 86: 194–8.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 76.

    Kozycki CT, Umulisa N, Rulisa S, Mwikarago EI, Musabyimana JP, Habimana JP, et al. Ложноотрицательные экспресс-тесты на малярию в Руанде: влияние изолятов Plasmodium falciparum , не содержащих hrp2, и снижение передачи малярии. Малар Дж. 2017; 16: 123.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 77.

    Мурильо Солано С., Акини Окотх С., Абдалла Дж. Ф., Пава З, Дорадо Е., Инкардона С. и др. Делеция генов Plasmodium falciparum гистидин-богатого белка 2 (pfhrp2) и гистидин-богатого белка 3 ( pfhrp3 ) у колумбийских паразитов. PLoS One. 2015; 10: e0131576.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 78.

    Амоа Л.Е., Абанква Дж., Оппонг А. Plasmodium falciparum Разнообразие белка-2, богатого гистидином, и последствия для PfHRP 2: основанные на экспресс-тестах диагностики малярии в Гане.Малар Дж. 2016; 15: 101.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 79.

    Бешир К.Б., Сепульведа Н., Бхармал Дж., Робинсон А., Мвангузи Дж., Бусула А.О. и др. Plasmodium falciparum паразиты с гистидин-богатым протеином 2 (pfhrp2) и делециями гена pfhrp3 в двух эндемичных регионах Кении. Научный отчет 2017; 7: 14718.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 80.

    Парр Дж. Б., Верити Р., Доктор С. М., Янко М., Кэри-Эвенд К., Турман Б. Дж. И др. Pfhrp2-удаленный Plasmodium falciparum паразитов в Демократической Республике Конго: национальное поперечное исследование. J Infect Dis. 2017; 216: 36–44.

    PubMed Статья Google ученый

  • 81.

    Бхарти П.К., Чандель Х.С., Ахмад А., Кришна С., Удхаякумар В., Сингх Н. Распространенность делеции гена pfhrp2 и / или pfhrp3 в популяции Plasmodium falciparum в восьми высокоэндемичных штатах Индии.PLoS One. 2016; 11 (8): e0157949.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 82.

    Всемирная организация здравоохранения. Ложноотрицательные результаты БДТ и последствия новых сообщений о делециях гена 2/3 гена, богатого гистидином P. falciparum . 2017. http://www.who.int/malaria/publications/atoz/information-note-hrp2-based-rdt/en/. По состоянию на 15 ноября 2017 г.

  • 83.

    Cooke AH, Chiodini PL, Doherty T, Moody AH, Ries J, Pinder M.Сравнение иммунохроматографического анализа антигена на основе лактатдегидрогеназы паразитов (OptiMAL) с микроскопией для обнаружения малярийных паразитов в образцах крови человека. Am J Trop Med Hyg. 1999. 60 (2): 173–6.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 84.

    Murahwa FC, Mharakurwa S, Mutambu SL, Rangarira R, Musana BJ. Диагностические характеристики двух тестов захвата антигена для диагностики малярии Plasmodium falciparum в Зимбабве.Cent Afr J Med. 1999. 45 (4): 97–100.

    CAS PubMed Google ученый

  • 85.

    Smart LR, Orgenes N, Mazigo HD, Minde M, Hokororo A, Shakir M, et al. Малярия и ВИЧ среди педиатрических стационаров в двух больницах Танзании: проспективное исследование. Acta Trop. 2016; 159: 36–43.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 86.

    D’Acremont V, Kahama-Maro J, Swai N, Mtasiwa D, Genton B, Lengeler C.Снижение потребления противомалярийных препаратов после внедрения экспресс-тестов в Дар-эс-Саламе: рандомизированное контролируемое исследование до и после и кластерное рандомизированное исследование. Малар Дж. 2011; 10: 107.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 87.

    Абдулкадир И., Руфаи Х.А., Очапа С.О., Малам М.С., Гарба Б.И., Олоко А.Г. и др. Экспресс-тест на малярию у детей: Замфара. Опыт Нигерии Niger Med J. 2015; 56 (4): 278–82.

    PubMed Статья Google ученый

  • 88.

    Сани У.М., Джия Н.М., Ахмед Х. Оценка быстрого диагностического теста на малярию среди детей с лихорадкой в ​​Сокото, Нигерия. Int J Med Sci. 2013; 3: 433–40.

    Google ученый

  • 89.

    Дас С., Джанг И.К., Барни Б., Пек Р., Рек Дж. К., Аринаитве Е. и др. Проведение высокочувствительного экспресс-теста на малярию Plasmodium falciparum у бессимптомных лиц из Уганды и Мьянмы, а также у наивных зараженных людей.Am J Trop Med Hyg. 2017; 97 (5): 1540–50.

    PubMed Статья Google ученый

  • 90.

    Nwuba RI, Anumudu CI, Omosun YO, Sodeinde O, Nwagwu M. Оценка быстрого иммунохроматографического карточного теста для Plasmodium falciparum в Ибадане, Нигерия. Afr J Med Med Sci. 2001. 30 (1–2): 123–4.

    CAS PubMed Google ученый

  • 91.

    Beadle C, Long GW, McElroy PD, Hoffman SL, Weiss WR, Maret SM, et al.Диагностика малярии путем обнаружения антигена Plasmodium falciparum HRP-2 с помощью экспресс-теста на определение антигена с помощью тест-полоски. Ланцет. 1994. 343 (8897): 564–8.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 92.

    Huong NM, Davis TM, Hewitt S, Van Huong N, Uyen TT, Nhan DH, et al. Сравнение трех методов обнаружения антигенов для диагностики и терапевтического мониторинга малярии: полевое исследование из южного Вьетнама. Tropical Med Int Health.2002. 7 (4): 304–8.

    Артикул Google ученый

  • 93.

    Oddoux O, Debourgogne A, Kantele A, Kocken CH, Jokiranta TS, Vedy S, et al. Идентификация пяти человеческих видов Plasmodium , включая P. knowlesi , методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. J Clin Microbiol. Заразить Dis. 2010; 30: 597–601.

    Google ученый

  • 94.

    Ta TT, Salas A, Ali-Tammam M, del Carmen MM, Lanza M, Arroyo E, et al.Первый случай обнаружения Plasmodium knowlesi в Испании методом ПЦР в реальном времени у путешественника из Юго-Восточной Азии. Малар Дж. 2010; 9: 219–24.

  • 95.

    Рубио Дж. М., Бенито А., Берзоса П. Дж., Рош Дж., Пуэнте С., Субиратс М. и др. Полезность полугнездовой мультиплексной ПЦР в надзоре за завозной малярией в Испании. J Clin Microbiol. 1999; 37: 3260–4.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 96.

    Schneider P, Wolters L, Schoone G, Schallig H, Sillekens P, Hermsen R, et al.Амплификация на основе последовательностей нуклеиновых кислот в реальном времени более удобна, чем ПЦР в реальном времени для количественного определения Plasmodium falciparum . J Clin Microbiol. 2005; 43: 402–5.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 97.

    Mixson-Hayden T, Lucchi N, Udhayakumar V. Оценка трех диагностических тестов на основе ПЦР для обнаружения смешанной инфекции Plasmodium . BMC Res Notes. 2010; 3: 88.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 98.

    Белл Д., Вонгсриханалай С., Барнуэлл Дж. Обеспечение качества и доступа к диагностике малярии: как этого можно достичь? Nat Rev Microbiol. 2006; 4: S7 – S20.

    PubMed Статья CAS Google ученый

  • 99.

    Abramo C, Fontes CJ, Krettli AU. Перекрестная реактивность между антителами в сыворотке крови людей с лейшманиозом, токсоплазмозом и болезнью Шагаса и антигенами гематологических форм Plasmodium falciparum , определенная с помощью непрямой иммунофлуоресценции.Am J Trop Med Hyg. 1995; 53: 202–5.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 100.

    Пилчер С., Эрон Дж., Галвин С., Гей С., Коэн М., Острый ВИЧ. Еще раз: новые возможности лечения и профилактики. J Clin Invest. 2004. 113: 937–45.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 101.

    Snounou G. Выявление и идентификация четырех видов малярийных паразитов, инфицирующих людей, с помощью ПЦР-амплификации.Методы Мол биол. 1996; 50: 263–91.

    CAS PubMed Google ученый

  • 102.

    Mens P, Spieker N, Omar S, Heijnen M, Schallig H, Kager P. Является ли молекулярная биология лучшей альтернативой микроскопии для диагностики малярии? Сравнение микроскопии, обнаружения антигенов и молекулярных тестов в сельской Кении и городской Танзании. Tropical Med Int Health. 2007; 12: 238–44.

    CAS Google ученый

  • 103.

    Schoone GJ, Oskam L, Kroon NC, Schallig HD, Omar SA. Обнаружение и количественное определение Plasmodium falciparum в образцах крови с использованием количественной амплификации на основе последовательностей нуклеиновых кислот. J Clin Microbiol. 2000. 38 (11): 4072–5.

    CAS PubMed PubMed Central Google ученый

  • 104.

    Сантана-Моралес М.А., Афонсо-Леманн Р.Н., Киспе М.А., Рейес Ф., Берзоса П., Бенито А. и др. Микроскопия и молекулярная биология для диагностики и оценки малярии в больнице в сельской местности Эфиопии.Малар Дж. 2012; 11: 199.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 105.

    Хасан А.Ю., Сугури С., Саттабонгкот Дж., Фудзимото С., Амакава М., Харада М. и др. Внедрение нового метода на основе ПЦР для обнаружения малярийных паразитов у естественно инфицированных комаров в Папуа-Новой Гвинее. Малар Дж. 2009; 8: 182.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 106.

    Steenkeste N, Incardona S, Chy S, Duval L, Ekala MT, Lim P, et al. На пути к высокопроизводительному молекулярному обнаружению Plasmodium : новые подходы и молекулярные маркеры. Малар Дж. 2009; 8: 86.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 107.

    Hsiang MS, Lin M, Dokomajilar C, Kemere J, Pilcher CD, Dorsey G, et al. Объединение сухих пятен крови на основе ПЦР для обнаружения паразитов малярии: оптимизация и применение для когорты угандийских детей.J Clin Microbiol. 2010. 48: 3539–43.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 108.

    Махенде С., Нгасала Б., Лусингу Дж., Йонг Т.С., Лушино П., Лемнге М. и др. Проведение экспресс-диагностики, микроскопии мазка крови и ПЦР для диагностики малярийной инфекции среди детей с лихорадкой в ​​районе Корогве. Танзания. Малар Дж. 2016; 15 (1): 391.

    PubMed Статья Google ученый

  • 109.

    Нсобя С.Л., Парих С., Киронда Ф., Любега Г., Камя М.Р., Розенталь П.Дж. и др. Молекулярная оценка естественного течения бессимптомной паразитемии у детей Уганды. J Infect Dis. 2004. 189: 2220–6.

    PubMed Статья Google ученый

  • 110.

    Jeanne LD, Berry A, Dutoit E, Leclerc F, Beaudou J, Leteurtre S, et al. Молекулярный метод диагностики завозной детской малярии. Med Mal Infect. 2010; 40: 115–8.

    Артикул Google ученый

  • 111.

    Hofmann N, Mwingira F, Shekalaghe S, Robinson LJ, Mueller I., Felger I. Сверхчувствительное обнаружение Plasmodium falciparum путем амплификации многокопийных субтеломерных мишеней. PLoS Med. 2015; 12 (3): e1001788.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 112.

    Gavina K, Arango E, Larrotta CA, Maestre A, Yanowac SK. Чувствительный видоспецифичный метод ПЦР с обратной транскрипцией в реальном времени для обнаружения Plasmodium falciparum и Plasmodium vivax .Контроль эпидемиологии паразитов. 2017; 2 (2): 70–6.

    Артикул Google ученый

  • 113.

    Lau YL, Lai MY, Fong MY, Jelip J, Mahmud R. Петлевой изотермический анализ амплификации для идентификации пяти человеческих видов Plasmodium в Малайзии. Am J Trop Med Hyg. 2015; 94: 336–9.

    PubMed Статья CAS Google ученый

  • 114.

    van Vianen PH, van Engen A, Thaithong S, van der Keur M, Tanke HJ, van der Kaay HJ, et al.Проточно-цитометрический скрининг образцов крови на малярийных паразитов. Цитометрия. 1993; 14: 276–80.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 115.

    Хейворд Р., ДеРизи Дж., Альфадли С., Каслоу Д., Браун П., Ратод П., Shotgun DNA. Микромассивы и стадийно-специфическая экспрессия генов в малярии Plasmodium falciparum . Mol Microbiol. 2000; 35: 6–14.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 116.

    Всемирная организация здравоохранения. Схема внешнего обеспечения качества ВОЗ для тестирования амплификации нуклеиновых кислот малярии. 2015. http://www.who.int/malaria/publications/atoz/978

    09985/en/. По состоянию на 12 декабря 2017 г.

  • 117.

    Hänscheid T, Grobusch M. Насколько полезна ПЦР в диагностике малярии? Trends Parasitol. 2002; 18: 395–8.

    PubMed Статья Google ученый

  • 118.

    Berna AZ, McCarthy JS, Wang RX, Saliba KJ, Bravo FG, Cassells J, et al.Анализ образцов дыхания на биомаркеры инфекции Plasmodium falciparum . J Infect Dis. 2015; 212 (7): 1120–8.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 119.

    Огуону Т., Шу Э, Эзеонву БУ, Лиге Б., Деррик А., Уме Р.Э. и др. Оценка эффективности набора для анализа мочи на малярию (UMT) для диагностики малярии у лиц с лихорадкой на юго-востоке Нигерии: поперечное аналитическое исследование.Малар Дж. 2014; 13: 1.

    Артикул CAS Google ученый

  • 120.

    Ойибо В.А., Эзейгве Н., Нтадом Дж., Оладосу О.О., Рейнуотер-Ловет К., О’Мира В. и др. Многоцентровое базовое клиническое исследование теста на малярию в моче для быстрой диагностики малярии Plasmodium falciparum . J Clin Microbiol. 2017; 55 (1): 253–63.

    PubMed Статья Google ученый

  • 121.

    Putaporntip C, Buppan P, Jongwutiwes S.Повышение эффективности использования слюны и мочи в качестве альтернативных источников ДНК для диагностики малярии с помощью ПЦР на основе митохондриальной ДНК. Clin Microbiol Infect. 2011; 17 (10): 1484–91.

    CAS PubMed Статья Google ученый

  • 122.

    Buppan P, Putaporntip C, Pattanawong U, Seethamchai S, Jongwutiwes S. Сравнительное обнаружение ДНК Plasmodium vivax и Plasmodium falciparum в образцах слюны и мочи пациентов с симптоматической малярией в низкоэндемичных регионах.Малар Дж. 2010; 9 (1): 72.

    PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

  • 123.

    Уилсон Н.О., Аджей А.А., Андерсон В., Байду С., Стайлз Дж. Обнаружение Plasmodium falciparum богатого гистидином белка II в слюне больных малярией. Am J Trop Med Hyg. 2008. 78 (5): 733–5.

    PubMed PubMed Central Google ученый

  • 124.

    Fung AO, Damoiseaux R, Grundeen S, Panes JL, Horton DH, Judy JW, et al.Количественное определение pf HRP2 в слюне больных малярией на Филиппинах. Малар Дж. 2012; 11 (1): 175.

    PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 125.

    Лукьянова-Глеб Е., Безек С., Сигети Р., Ходарев А., Келли Т., Харрелл А. и др. Трансдермальная диагностика малярии с помощью паровых нанопузырьков. Emerg Infect Dis. 2015; 21: 1122.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • 126.

    МакМорроу М.Л., Аиду М, Качур СП. Экспресс-тесты для диагностики малярии в условиях ликвидации — могут ли они найти последнего паразита? Clin Microbiol Infect. 2011. 17 (11): 1624–31.

    CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

  • Малярия — лабораторные тесты онлайн AU

    Распечатать статью полностью

    Толстые и тонкие мазки крови

    В идеале для диагностики малярии необходимо сдать три анализа крови — как толстых, так и тонких мазков крови с интервалом 12-24 часа.Эти тесты в настоящее время являются «золотым стандартом» для выявления и выявления малярии.

    Толстые пленки — это чувствительные тесты для диагностики малярийной инфекции. Большое количество эритроцитов исследуется под микроскопом, чтобы найти паразитов внутри клеток. Количество инфицированных эритроцитов также можно рассчитать, чтобы узнать о паразитарной нагрузке.

    Тонкие пленки делают с меньшим количеством клеток крови, исследуемых на одном слайде, но эти тесты позволяют идентифицировать тип Plasmodium , вызывающий инфекцию.Это важно для правильного лечения.

    Экспресс-диагностические тесты
    Эти тесты выявляют малярию () в крови пациента и показывают положительный результат по изменению цвета тест-полоски. Иногда их называют тестами с помощью щупа.

    Доступны различные экспресс-диагностические тесты, которые могут обнаруживать только Plasmodium falciparum или другие виды.

    Эти тесты чаще всего используются в отдаленных районах, где нет доступа к точной микроскопии (так что нельзя использовать мазки крови).В Австралии и других странах, где малярия редко встречается, эти тесты используются в лабораториях, где недостаточно опыта для проведения точной микроскопии. Это позволяет быстро и точно диагностировать и лечить малярию на ранних этапах, что очень важно для улучшения результатов лечения пациентов. В Австралии для подтверждения диагноза обычно проводятся дополнительные тесты, часто в центральной лаборатории.


    Полимеразная цепная реакция усиливает малярию и позволяет обнаруживать и идентифицировать виды Plasmodium .Этот тест можно использовать для подтверждения диагноза в лабораториях, где нет опыта микроскопии. Это также полезно в случаях низкой паразитарной нагрузки или смешанных инфекций, когда микроскопия может быть менее точной. Стоимость этих методов ограничивает их использование во многих регионах, где малярия носит эндемический характер.

    Дата последней проверки: 6 ноября 2017 г.

    мазков толстой и жидкой крови на малярию

    Обзор обследования

    Врачи используют толстые и жидкие мазки крови, чтобы определить, есть ли у вас малярия.Если один тест окажется отрицательным и паразитов не обнаружено, вам нужно будет сдавать мазок крови каждые 8 ​​часов в течение нескольких дней, чтобы подтвердить отсутствие малярийной инфекции.

    Мазки крови чаще всего берут от укола пальца. Толстые и жидкие мазки крови позволят врачам узнать процент инфицированных эритроцитов (плотность паразитов) и тип паразитов.

    • Густой мазок крови — это капля крови на предметном стекле. Густые мазки крови наиболее полезны для обнаружения паразитов, поскольку они исследуют более крупный образец крови.(Часто на момент проведения анализа в крови бывает мало паразитов.)
    • Тонкий мазок крови — это капля крови, распределенная по большой площади предметного стекла. Тонкие мазки крови помогают врачам определить, какой вид малярии вызывает инфекцию.

    Зачем это нужно

    Микроскопическое исследование толстых и жидких мазков крови — надежный и широко доступный тест на малярию.

    Результаты

    Результаты толстых и жидких мазков крови могут показать:

    Нормальный

    В красных кровяных тельцах паразитов нет.Ваш врач будет повторять анализ каждые 8 ​​часов в течение 1-2 дней, если он или она все еще подозревает, что у вас малярия.

    Аномальные

    Паразиты присутствуют в эритроцитах. Идентифицирован инфекционный вид Plasmodium . Также определяется процент эритроцитов, инфицированных паразитом Plasmodium (плотность).

    Лечение может варьироваться в зависимости от:

    • Виды Plasmodium присутствуют. Малярия, вызванная P.falciparum является более серьезным заболеванием, чем другие типы, и с ним можно лечить по-другому.
    • Процент инфицированных эритроцитов (плотность паразитов), а не количество паразитов. Если инфицирован большой процент клеток крови, лекарство можно вводить непосредственно в вену (внутривенно или внутривенно), а не перорально (перорально).

    Что думать о

    Мазки крови — надежный тест на малярию. Вы можете спросить, планируется ли мазок крови: густой или тонкий, или и то, и другое.Тонкий мазок крови позволит определить вид малярийного паразита. Эта информация важна для предотвращения или предупреждения опасных для жизни осложнений, если P. falciparum является источником инфекции.

    Кредиты

    Текущий по состоянию на: 23 сентября 2020 г.

    Автор: Healthwise Staff
    Медицинский обзор:
    Э. Грегори Томпсон, врач-терапевт,
    Энн К.Poinier MD — Internal Medicine
    Adam Husney MD — Family Medicine
    W. David Colby IV MSc, MD, FRCPC — Инфекционные заболевания

    По состоянию на 23 сентября 2020 г.

    Автор: Healthwise Staff

    Медицинский обзор: E.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *