Роспотребнадзор по цао: Отдел территориального управления Роспотребнадзора по городу Москве в Центральном административном округе (Отдел ТУ Роспотребнадзора в ЦАО)

Роспотребнадзор

Содержание

Как доехать до Роспотребнадзор в Центральный Административный Округ на автобусе, троллейбусе или маршрутке

Общественный транспорт до Роспотребнадзор в Центральный Административный Округ

Не знаете, как доехать до Роспотребнадзор в Центральный Административный Округ, Россия? Moovit поможет вам найти лучший способ добраться до Роспотребнадзор от ближайшей остановки общественного транспорта, используя пошаговые инструкции.

Moovit предлагает бесплатные карты и навигацию в режиме реального времени, чтобы помочь вам сориентироваться в городе. Открывайте расписания, поездки, часы работы, и узнайте, сколько займет дорога до Роспотребнадзор с учетом данных Реального Времени.

Ищете остановку или станцию около Роспотребнадзор? Проверьте список ближайших остановок к пункту назначения: 6-Я Линия; 9-Я Линия; Ул. 10 Лет Октября; 5-Я Линия; Городской Музей.

Вы можете доехать до Роспотребнадзор на автобусе, троллейбусе или маршрутке. У этих линий и маршрутов есть остановки поблизости: (Автобус) 2, 22, 59, 72 (Троллейбус) 12, 16 (Маршрутка) 275(М), 304, 322

Хотите проверить, нет ли другого пути, который поможет вам добраться быстрее? Moovit помогает найти альтернативные варианты маршрутов и времени. Получите инструкции, как легко доехать до или от Роспотребнадзор с помощью приложения или сайте Moovit.

С нами добраться до Роспотребнадзор проще простого, именно поэтому более 930 млн. пользователей доверяют Moovit как лучшему транспортному приложению. Включая жителей Центральный Административный Округ! Не нужно устанавливать отдельное приложение для автобуса и отдельное приложение для метро, Moovit — ваше универсальное транспортное приложение, которое поможет вам найти самые обновленные расписания автобусов и метро.

В Роспотребнадзоре открыта горячая линия по качеству и безопасности молочной продукции

Фото: сайт мэра Москвы

Территориальный отдел Управления Роспотребнадзора по городу Москве в ЦАО г. Москвы (далее – территориальный отдел) информирует об открытии горячей линии по вопросам качества и безопасности молочной продукции и срокам годности.

В территориальном отделе с 25 января 2021г. по 05февраля 2021г. открыта горячая линия по тематическому консультированию граждан по вопросам качества и безопасности молочной продукции и срокам годности.

Интересующие вопросы можно задать по телефонам горячей линии:

8 (495) 629-47-95; 8 (495) 692-56-46; 8 (495) 692-15-64 в рабочие дни с 9.00 до 18 часов.

Специалисты территориального отдела дадут разъяснения и рекомендации по правилам покупки и продажи молочной продукции, условиям хранения и срокам реализации продукции, нормативным требованиям, предъявляемым к качеству и безопасности молочной продукции, составлению обращения в случае обнаружения некачественного продукта в магазине.

На сайте http://zpp.rospotrebnadzor.ru/ для потребителей и предпринимателей функционирует в открытом доступе online-ресурс ГИС ЗПП, где размещена вся необходимая информация, в том числе о предприятиях, производящих и реализующих фальсифицированную пищевую продукцию.

В случае обнаружения некачественного продукта в магазине потребитель вправе направить в Управление Роспотребнадзора по г. Москве (территориальный отдел) обращение, которое будет рассмотрено в соответствии с требованиями Федерального закона от 02.05.2006 №59-ФЗ «О порядке рассмотрения обращений граждан Российской Федерации».

Направить обращение в адрес Управления Роспотребнадзора по г. Москве (территориальный отдел) можно:

— в форме электронного документа через форму «Прием обращений граждан» на сайте Управления http://77.rospotrebnadzor.ru/;

— на почтовый адрес: 107031, г. Москва, ул. Б. Дмитровка, д. 8, стр. 1,2,3.

Крым вводит ограничения для туристов и местных жителей

16 июня на расширенном заседании Общественной палаты глава крымского управления Роспотребнадзора обсудила с участниками конкретные ограничительные меры, которые будут вводиться в Крыму в ближайшее время.

Роспотребнадзор предложил ограничить работу ресторанов и кафе до 10 вечера — после 22.00 они будут работать только навынос. Будут закрыты дискотеки, кальянные и клубы, а также запрещено проведение выпускных вечеров и общегородских массовых мероприятий. Помимо этого, заполняемость театров и кинотеатров предлагается сократить с 75% до 50%, а внутри запретить торговлю едой. В торговых центрах в выходные и праздничные дни прекратят работу детские досуговые и праздничные организации.

В Ялте, которая является лидером по заболеваемости коронавирусом, уже анонсировали введение дополнительных собственных ограничений.

«с учетом сложившейся ситуации, кроме того, что соблюдаем принятые для всего Крыма ограничения, вводим свои», — сообщила глава администрации Ялты Янина Павленко.

Проректор по научной деятельности ФГАОУ ВО «КФУ имени В.И.Вернадского» Анатолий Кубышкин предложил вдобавок к ограничениям пускать в республику лишь туристов с сертификатом о вакцинации. По его словам, такие меры надо вводить с 10-15 июля.

«Перемещения туристов должны быть увязаны с прививочными сертификатами, которые размещаются на портале Госуслуг. Дело добровольное. Хочешь в Крым приезжать — прививайся. Нет — сиди на даче», — сказал Анатолий Кубышкин.

Министр здравоохранения республики Александр Остапенко с ним согласился, отметив, что вакцинация — по сути, единственный способ остановить пандемию. А также подтвердил всю серьезность ситуации. По его словам, в острейшие периоды в республике было 2200 вызовов в сутки, сейчас — около 1700 вызовов. Число госпитализированных так же растет, как и число тяжелых случаев.

«Это пограничный уровень. К тому же многие лечатся на дому, в результате поражение легких у них доходит до 70-80%. Летальность по сравнению с прошлым годом выросла с 5 до 8,6%. Я вижу, что молодежь скептически настроена по отношению к пандемии, никто маски не носит. Вынужден их расстроить — ковид помолодел, у нас большой удельный вес молодых людей от 30 до 50 лет в тяжелом состоянии, в 3,5 раза увеличилось число тяжелых случаев у пациентов в возрасте от 18 до 24 лет. Мы побороли оспу и полиомиелит благодаря вакцинации. Это единственный путь победить и эту болезнь», — сказал Остапенко.

Заместитель председателя Совета Министров Республики Крым – министр труда и социальной защиты Республики Крым Елена Романовская предложила запретить проезд в общественном транспорте для лиц  старше 65 лет с 1 июля.

Введение ограничений в Крыму, это вынужденная мера, на которую необходимо пойти. Так считает глава крымского управления Роспотребнадзора Наталья Пеньковская и все участники состоявшегося заседания с ней согласны.

Очень длинные межгенные некодирующие (vlinc) РНК напрямую регулируют множественные гены цис- и транс- | BMC Biology

Стратегия коэкспрессии для аннотации lncRNA

Мы предположили, что стратегия коэкспрессии, основанная на комбинации следующих функций, вероятно, будет генерировать наиболее точные регуляторные сети lncRNAs (Fig. 1). Во-первых, мы выбрали платформу для секвенирования одной молекулы (SMS) 3-го поколения секвенирования следующего поколения (NGS) в качестве основы для оценки экспрессии каждого вида днРНК и мРНК.Эта платформа для секвенирования имеет относительно простую процедуру подготовки библиотеки, которая не включает этапы амплификации [24] и, таким образом, с большей вероятностью представляет истинную исходную численность различных видов РНК, особенно в диапазоне низкой численности [25, 26]. Точность в этом диапазоне особенно важна для днРНК, которые обычно имеют низкие уровни экспрессии [3, 27]. Следовательно, SMS теоретически может обеспечить более точную оценку коэкспрессии между днРНК и их потенциальными мРНК-мишенями.Во-вторых, мы использовали один тип клеток для создания сетей коэкспрессии. Хотя доступно множество общедоступных наборов данных экспрессии, использование их в аннотации коэкспрессии lncRNAs страдает от серьезной потенциальной проблемы: lncRNAs часто экспрессируются только в одном или нескольких типах клеток [3, 27]. Следовательно, анализ коэкспрессии в нескольких типах клеток, вероятно, будет включать множество образцов, в которых любая данная днРНК либо не экспрессируется, либо экспрессируется на уровне шума и, таким образом, сильно ослабляет реальные сигналы корреляции.В-третьих, мы использовали короткие сроки лечения нарушения транскриптома (см. Ниже). Мы предположили, что анализ коэкспрессии, основанный на уровнях РНК, измеренных вскоре после того, как система была нарушена и вынуждена адаптироваться путем изменения уровней различных транскриптов, с большей вероятностью улавливает прямые регуляторные взаимодействия, а не более длительные обработки, которые можно разбавить косвенными эффектами.

Ранее мы обнаружили экспрессию многих vlincRNA в клеточной линии лейкемии человека K562 [18].Этот факт, вместе с доступностью нескольких типов геномных данных для этой клеточной линии от консорциума ENCODE [3], сделал K562 привлекательной системой для этого исследования. Первым шагом в нашем конвейере было создание базы данных экспрессии при различных условиях лечения для расчета коэкспрессии каждой vlincRNA со всеми белок-кодирующими мРНК. Мы профилировали транскриптомы клеточной линии K562 после лечения 29 ингибиторами и противораковыми препаратами, влияющими на различные клеточные пути и функции (сигнальные пути, клеточный цикл, метаболизм и восстановление ДНК, модификаторы хроматина и т. Д.)) (Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S1). Как упоминалось выше, мы использовали относительно короткие процедуры по 3 и 6 часов для каждого препарата.

Общая обработанная DNaseI РНК из каждого образца была преобразована в кДНК с использованием не очень случайных (NSR) гексамеров, лишенных последовательностей, которые связываются с рРНК [28], и проанализирована с использованием RNA-seq, выполненного на платформе SMS. Чтобы оценить степень нарушения транскриптома каждым лекарством, мы оценили количество дифференциально экспрессируемых (DE) повышающих или понижающих регуляций транскриптов — как мРНК, кодирующих белок, так и vlincRNA, — определяемых кратным изменением (FC)> 1.5 в обеих временных точках относительно растворителя (ДМСО или вода) контролируют как 12 995 аннотированных генов, экспрессируемых в K562, так и 407 vlincRNA, обнаруженных ранее в этой клеточной линии [18] (рис. 2a – c, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S2) . В целом, экспрессия 10 248 (78,9%) генов, кодирующих белок, изменилась в этих условиях, по крайней мере, в одном лекарственном препарате с 7229 активными и 6698 подавляющими генами (рис. 2a, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S2). Соответствующие числа для vlincRNA были 392 (96.3%) с 176 положительной и 374 отрицательной регуляцией (рис. 2a, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S2). Для любого лекарственного лечения мы обнаружили 1190 (9,2%) и 623 (4,8%) генов с повышенной или подавляющей регуляцией и, соответственно, 11 (2,7%) и 79 (19,4%) vlincRNA на основе соответствующих средних значений для всех видов лечения (рис. 2а). В целом, влинкРНК имели тенденцию подавляться по сравнению с известными генами в ответ на лекарственное лечение, что указывает на потенциальную отрицательную корреляцию между этими двумя типами транскриптов (рис.2а, см. Также ниже).

Рис. 2

Анализ экспрессии и коэкспрессии на основе SMS для различных лекарственных препаратов. a Распределение количества мРНК DE (слева) и vlincRNA (справа). Желтые внутренние круги представляют мРНК или влинкРНК, экспрессируемые в K562; оранжевая и зеленая средние секции представляют соответственно повышенную или понижающую регуляцию транскриптов по меньшей мере при одном лечении препаратом; оранжевые и зеленые внешние секции представляют соответственно повышенную или понижающую регуляцию транскриптов при всех видах лечения лекарственными средствами. b , c Количество DE vlincRNA ( b ) и мРНК ( c ) для каждого указанного лечения. Синие и оранжевые полосы представляют соответственно повышенную и понижающую регуляцию транскриптов. d Фракции DE vlincRNA, подтвержденные с помощью количественной ПЦР для каждого указанного лечения. e Коробчатые диаграммы, представляющие количество генов, обнаруженных в сетях vlincRNA на основе отрицательной и положительной коэкспрессии

Препараты значительно различались по влиянию на кодирующие и некодирующие транскриптомы (рис.2b, c, Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S2). Из трех основных препаратов, которые проявили наибольший положительный эффект на vlincRNAs — мирин (ингибитор MRE11, компонент комплекса MRN), BML-277 (ингибитор CHK2) и YM-155 (возможный интеркалятор ДНК) (рис. 2b, Дополнительный файл 1: дополнительная таблица S2) — известно, что по крайней мере два из них ингибируют распознавание повреждений ДНК или пути ответа (мирин и BML-277). Препараты, связанные с повреждением ДНК, также вызывали значительные изменения в кодирующем белок транскриптоме (рис.2c, Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S2). Тем не менее, фракция vlincRNAs, активированная в ответ на лечение мирином и BML-277, была выше, чем доля мРНК, кодирующих белок (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S2). Кроме того, препараты, которые индуцируют самые высокие фракции экспрессии генов, кодирующих белок, влияют на эпигенетические функции, такие как модификаторы хроматина (панобиностат и EPZ-6438, ингибирующие гистондеацетилазы и Ezh3 соответственно) или считыватели специфических меток гистонов (ингибитор бромодомена I-BET151) и функции, не связанные с повреждением ДНК (рис.2c, Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S2). Таким образом, кажется, что подкласс днРНК vlincRNA может быть обогащен транскриптами, которые участвуют по крайней мере в некоторых клеточных процессах, связанных с повреждением ДНК.

Чтобы проверить воспроизводимость и достоверность нашего анализа экспрессии, мы провели независимые эксперименты по лечению с тремя препаратами (мирин, этопозид и SN-38) и проанализировали изменения экспрессии выбранных влинкРНК в ответ на эти препараты через 6 часов лечения. с использованием ПЦР в реальном времени.Мы выбрали 42 дифференциально экспрессируемых (DE) vlincRNAs, и, как и ожидалось, большинство (36, 85,7%) DE vlincRNAs могли быть проверены (рис. 2d, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S3). Кроме того, из 6 vlincRNAs, которые не могли быть проверены в экспериментах ПЦР в реальном времени, 4 (66,7%) показали ожидаемое направление изменения, хотя и не достигли FC 1,5. Таким образом, анализ DE, основанный на платформе SMS RNA-seq, по-видимому, фиксирует аутентичные и воспроизводимые изменения экспрессии.

Затем мы создали список мРНК, коэкспрессированных с каждой vlincRNA.Коэкспрессия была определена как корреляция Спирмена> 0,35 или <-0,35 между vlincRNA и кодирующей белок мРНК со значимостью корреляции p , значение <0,01 (рис. -обработанные контрольные образцы). Для каждой влинкРНК мы обнаружили от 134 до 5385 (медиана 1615) коэкспрессированных транскриптов с использованием этих пороговых значений. Интересно, что мы наблюдали гораздо большее количество отрицательно коррелированных мРНК, чем положительно коррелированных, с медианами 430 и 1022 для положительно и отрицательно коэкспрессируемых транскриптов соответственно, и тенденция к отрицательной корреляции была очень значимой (значение p < 2.2E-16, знаковый ранговый критерий Уилкоксона) (рис. 2e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S4). Тем не менее, аналогично результатам, описанным ранее [29], гены, положительно коррелирующие с vlincRNAs, были обогащены в непосредственной близости от этих транскриптов. Медианная корреляция коэкспрессии между vlincRNA и генами, расположенными в пределах 5 kb, 5-10 kb, 10-100 kb и> 100 kb друг от друга, составила 0,44, 0,37, -0,38 и -0,38 соответственно.

Валидация сетей коэкспрессии с использованием профилей взаимодействия днРНК-хроматин

Основным потенциальным ограничением стратегии коэкспрессии является то, что корреляция экспрессии (положительная или отрицательная) может происходить без прямых физических или функциональных взаимодействий между коррелированными объектами.Поскольку ряд функционально охарактеризованных днРНК, по-видимому, регулируют другие гены, взаимодействуя и модулируя их хроматиновое окружение [4, 5], мы предположили, что vlincRNA могут также функционировать таким же образом, как это было фактически показано для vlincRNA VAD [4, 5]. 19]. Таким образом, мы подтвердили сети коэкспрессии, полученные в этом исследовании, путем картирования сайтов взаимодействий РНК-хроматин выбранных vlincRNA в масштабе всего генома с ключевым предположением, что vlincRNA должны либо взаимодействовать, либо находиться в относительно близкой близости к своим генам-мишеням ( Инжир.1).

Для этой цели мы адаптировали ранее опубликованный подход RAT (reverse transcription-associated trap) [30, 31], который имеет два ключевых преимущества для очень длинных транскриптов, изученных в этой работе (рис. 3a). Во-первых, RAT полагается на обратную транскрипцию in situ внутри сшитых ядер с олигонуклеотидами, комплементарными интересующей РНК, и в присутствии биотинилированного dCTP для мечения комплексов РНК-хроматин. После иммунопреципитации стрептавидином связанные области хроматина идентифицируют на основе анализа NGS (рис.3а). Включение биотина в полученную кДНК устраняет необходимость конструирования множества близко расположенных биотинилированных олигонуклеотидов, как и в других методах (например, ChIRP и подобных методах), разработанных для картирования сайтов взаимодействий между конкретной днРНК и хроматином [32,33,34], что было бы экономически непомерно для этих очень длинных стенограмм. Во-вторых, фрагментация хроматина проводится с помощью рестрикционных ферментов (рис. 3a, b), которые не фрагментируют РНК или одноцепочечную ДНК в отличие от других подходов, использующих обработку ультразвуком [32,33,34], которые, вероятно, разрушили бы эти очень длинные транскрипты.

Рис. 3

Описание и валидация анализа RAT. a Блок-схема молекулярно-биологической части анализа RAT. Светло-голубой овал представляет собой область ядра в относительной близости от vlincRNA, которая должна быть очищена совместно с vlincRNA с помощью анализа RAT. Зеленые и черные линии представляют молекулы ДНК, которые соответственно находятся и не находятся в относительной близости от vlincRNA. Красные и фиолетовые линии представляют собой специфические олигонуклеотиды из наборов 1 и 2, нацеленные на каждую vlincRNA (короткие линии) и кДНК, примированные этими олигонуклеотидами (длинные линии). b Пример распределения ДНК по размерам, полученного после фрагментации хроматина в типичном эксперименте на RAT для образцов, обработанных ДМСО или лекарственным средством (этопозид или SN-38). Анализы выполняли либо с набором олигонуклеотидов 1 («P1»), 2 («P2»), либо с неолигонуклеотидным контролем («NP») для vlincRNA ID-1202. c Распределение частиц по размерам, полученное в эксперименте по сортировке, либо в буфере (средняя панель), либо в буфере, содержащем хроматин, фрагментированный с использованием условий, используемых в типичном эксперименте RAT (нижняя панель).Распределение частиц с известными размерами 100, 200 и 300 нм показано на верхней панели. Обратите внимание на увеличение доли частиц в диапазоне 300-500 нм в образце фрагментированного хроматина по сравнению с буфером для сортировки (7,06% против 2,85%). d Блок-схема аналитической части анализа RAT. e Вверху: определение отношения шансов и описание гипотезы, проверенной в части ниже. Внизу: прямоугольные графики отношений шансов перекрытий между двумя биологическими репликами анализа RAT на уровне гена (слева) и области (справа) при разных порогах сигнала RAT ( X -осей)

Недавно был опубликован ряд методов обнаружения полногеномных взаимодействий РНК-хроматин.Однако одной общей чертой этих методов (таких как GRID-seq [35], MARGI [36] и Red-C [37]) было лигирование близлежащих молекул ДНК и РНК с использованием мостиковых олигонуклеотидов. Последние находились в диапазоне ~ 40–60 оснований и, таким образом, могли обнаруживать молекулы, разделенные не более чем на 20 нм, при длине нуклеотида 0,34 нм. Однако в наших анализах RAT размер частиц хроматина после фрагментации ДНК достигал 300-500 нм (рис. 3c, методы). Поскольку все области генома должны быть расположены внутри таких частиц, их следует соосаждать с транскриптом-мишенью (рис.3a), это может означать, что RAT не ограничивается непосредственными взаимодействиями, а скорее может измерять гораздо более дистальную близость или совместную локализацию между областями РНК и хроматина.

Поскольку препараты, вызывающие повреждение ДНК, оказывали наибольшее влияние на экспрессию влинкРНК, мы выбрали 6 влинкРНК, индуцированных ингибиторами топоизомеразы (этопозид и / или SN-38) для анализа на RAT с примером одной такой влинкРНК, показанной в Дополнительных файл 2: дополнительный рисунок S1. Процедуру RAT проводили на клетках, обработанных этопозидом, SN-38 или ДМСО.В целом, RAT-анализ был выполнен на 14 комбинациях лечения vlincRNA с двумя биологическими репликами на комбинацию с целью анализа потенциальных изменений в сетях в ответ на лечение лекарством. Каждый анализ RAT проводили отдельно с 2 наборами неперекрывающихся олигонуклеотидов, разработанных против одной и той же vlincRNA (фиг. 3a, методы). Кроме того, для каждого лечения процедуру RAT также выполняли без олигонуклеотидов в качестве контроля специфичности. Последующий анализ выполнялся с использованием двух уровней обработанного сигнала RAT: (1) средний нормализованный балл RAT, рассчитанный для каждой пары оснований в геноме человека, или (2) уровень геномной области, полученный после применения порогов различной строгости к среднему нормализованному баллу RAT ( Инжир.3д, Методы). Пороговые значения были определены на основе первого (наиболее строгого), 5, 10, 20 или 30 (наименее строгого) перцентиля (% -ile) среднего нормализованного показателя RAT для каждого образца (рис. 3d, методы). Гены, содержащие области RAT на своих границах, считались локализованными с соответствующей vlincRNA.

В качестве первого шага в оценке эффективности подхода RAT мы оценили перекрытие между областями RAT, полученными из биологических реплик, на уровне области или гена.В первом случае точные геномные координаты взаимодействующих областей должны были присутствовать в обеих репликах, в то время как во втором гены должны были содержать взаимодействующие области в любом месте в пределах их границ в обеих репликах, но координаты взаимодействующих областей могли быть разными. В целом, мы обнаружили статистически значимое перекрытие сигнала RAT между репликами для каждой комбинации лечения vlincRNA на обоих уровнях (рис. 3e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S5). Кроме того, перекрытия сигнала RAT между двумя репликами были статистически значимыми при нескольких порогах; однако, как и следовало ожидать, сила совпадений, измеренная с помощью отношения шансов (определено на рис.3e) увеличивалось с увеличением строгости порога сигнала RAT (рис. 3e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S5, методы). В целом, отношения шансов перекрытия на уровне генов между двумя репликами были постоянно выше (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S5). Следовательно, если не указано иное, все анализы ниже были выполнены на генах, содержащих области взаимодействия vlincRNA-хроматина в любом месте в пределах их границ в обеих репликах (методы).

Чтобы оценить взаимосвязь между коэкспрессией и относительной близостью в ядре между vlincRNA и коэкспрессируемыми генами, для каждой vlincRNA мы измерили среднюю нормированную агрегированную оценку RAT (ANARS) в границах соответствующей коэкспрессии и фона. контрольные гены и в их фланкирующих областях размером 5 т.п.н. (дополнительный файл 3: дополнительный рисунок S2, методы).Как показано на фиг. 4a для одной vlincRNA (ID-1132), отрицательно и положительно коэкспрессируемые гены имели тенденцию иметь более высокие значения ANARS в телах генов и их фланкирующих областях, чем фоновые гены. Чтобы формализовать это наблюдение, мы создали графики эмпирической кумулятивной функции распределения (ECDF), представляющие распределение ранжированных ANARS для коэкспрессированных и фоновых генов (рис. 4b, дополнительный файл 4: дополнительный рисунок S3, методы). ANARS коэкспрессируемых генов был постоянно выше для отрицательных и положительных коэкспрессируемых генов, чем фоновых генов, в телах генов и во фланкирующих областях для большинства условий обработки vlincRNA, как показано на рис.4b для vlincRNA ID-1132 и в дополнительном файле 4: дополнительный рисунок S3 для всех других vlincRNA.

Рис. 4

Паттерны и статистическая значимость обогащения сигнала RAT коэкспрессируемыми генами. a Графики, показывающие ANARS для тел генов и фланкирующие области ± 5 т.п.н. для всех генов, коэкспрессированных с vlincRNA ID-1132 и фоновыми генами. Размеры генных областей были увеличены до 5 т.п.н. Показанный в этом примере ANARS был рассчитан на основе анализа RAT, проведенного в обработанных ДМСО клетках.ANARS для положительного, отрицательного и контрольного фоновых генов представлен соответственно красными, синими и оранжевыми точками. b Графики ECDF для данных, показанных в a . Обратите внимание на сдвиг вправо графиков, соответствующих коэкспрессируемым генам, что означает усиление сигнала по сравнению с фоновыми генами. Верхние 30% данных, используемых для анализа статистической значимости, выделены прямоугольниками. c Резюме распределения статистической значимости обогащения ANARS коэкспрессируемыми по сравнению с фоновыми генами (вверху) и цис по сравнению со всеми генами (внизу). d Графики, показывающие ANARS для тел генов и фланкирующие области ± 5 т.п.н. для генов, коэкспрессируемых с vlincRNA ID-1132 (и расположенных на той же хромосоме ( цис , красные точки) и всех совместно экспрессируемых генов (синие точки) Размеры генных областей были масштабированы до 5 кб. e Коробчатые диаграммы данных, представленных в d для позиций с ненулевым ANARS

Чтобы проверить, является ли разница значимой, мы вычислили p значения обогащение нормализованного сигнала RAT коэкспрессируемыми по сравнению с фоновыми контрольными генами.Статистический анализ был выполнен на 30% лучших ранжированных значений ANARS для совместно экспрессируемых и фоновых генов, как показано областями графиков ECDF, разграниченными прямоугольниками на рис. 4b (методы). Фактические значения p приведены в дополнительном файле 1: дополнительная таблица S6, а результаты анализа суммированы на рисунке 4c (тела гена) и дополнительном файле 5: дополнительном рисунке S4 (тела гена и фланкирующие области) . Интересно, что обогащение ANARS положительно и отрицательно коэкспрессируемыми генами по сравнению с фоновыми генами было статистически значимым для большинства (12/14) комбинаций лечения vlincRNA (рис.4c, дополнительный файл 5: дополнительный рисунок S4). Кроме того, обогащение было статистически значимым во всех 14 комбинациях положительно или отрицательно или для обоих типов совместно экспрессируемых генов (рис. 4c, дополнительный файл 5: дополнительный рисунок S4).

Большинство коэкспрессируемых генов было локализовано на хромосомах, отличных от той, которая несет соответствующие vlincRNA ( транс, ). Однако интересно отметить, что ANARS для коэкспрессируемых генов cis (расположенных на той же хромосоме, что и vlincRNA) имел тенденцию быть выше, чем для всех коэкспрессируемых генов, как показано на рис.4d, e для vlincRNA ID-1132 и в дополнительном файле 6: дополнительный рисунок S5 для всех других vlincRNA. Затем мы оценили статистическую значимость обогащения ANARS генами cis по сравнению со всеми генами (рис. 4c, дополнительный файл 5: дополнительный рисунок S4, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S6). Обогащение было статистически значимым среди всех образцов для положительно коэкспрессируемых генов и для большинства (9/14) образцов для отрицательно коэкспрессированных генов (рис. 4c, дополнительный файл 5: дополнительный рисунок S4, дополнительный файл 6: дополнительный Рисунок S5, Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S6).Взятые вместе, эти результаты предоставили сильную поддержку тому, что коэкспрессируемые гены были обогащены с использованием процедуры RAT и, следовательно, были расположены в непосредственной близости от соответствующих vlincRNAs в ядре. Однако гены с положительной коэкспрессией и гены, расположенные на одной и той же хромосоме, имели стабильно более высокий сигнал, чем гены с отрицательной коэкспрессией и гены, расположенные на других хромосомах (см. Раздел «Обсуждение»).

Затем мы оценили перекрытие между набором данных о коэкспрессии и генами, содержащими области RAT для каждой vlincRNA, и сделали следующие два наблюдения.Во-первых, значимость перекрытия зависела от уровней экспрессии. В частности, гены с низким обилием имели гораздо более высокую вероятность наличия значительного перекрытия между генами с положительной коэкспрессией и генами, показывающими доказательства совместной локализации, по сравнению с генами с высоким содержанием (рис. 5a, b, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S7. ). Однако тенденция была обратной для генов, отрицательно коррелирующих с vlincRNAs (рис. 5a, b, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S7). Мы наблюдали эту тенденцию для каждой vlincRNA и каждого лечения (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S7).Поэтому, чтобы увеличить соотношение сигнал / шум, мы сначала отсортировали гены по максимальной экспрессии среди всех образцов, а затем отфильтровали гены с отрицательной коэкспрессией, находясь в верхней половине экспрессируемых генов, и гены с положительной коэкспрессией, находясь в нижней части. половина. Во-вторых, сила перекрытия увеличивалась со строгостью порога сигнала RAT, о чем судили по возрастающим отношениям шансов, как показано на фиг. 5c (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S8). Этот результат показал, что пороги сигналов RAT действительно были информативными для обогащения локализованных vlincRNAs и их регуляторных мишеней.

Рис. 5

Валидация сетей, полученных из коэкспрессии, с использованием анализа RAT. a , b Ящичковые диаграммы нечетных соотношений ( a ) и значений p ( b ) перекрытия между сетями коэкспрессии и наборами данных взаимодействия хроматина после стратификации генов на верхнюю и нижнюю половину на основе выражения. c Вверху: определение отношения шансов и описание гипотезы, проверенной в части ниже. Внизу: прямоугольные графики отношений шансов перекрытий между сетями коэкспрессии и генами, содержащими области RAT на уровне гена (слева) и области (справа) при различных порогах сигнала RAT ( X -осей). d Диаграмма, иллюстрирующая выбор конечных пороговых значений сигнала RAT для каждой из 14 комбинаций лечения vlincRNA на основе наилучшего перекрытия с коэкспрессируемыми генами. e , f Перекрытие между сетями коэкспрессии и генами, содержащими сигналы RAT, на конечных порогах сигнала RAT для платформ SMS и Illumina. Отношения шансов ( e ) и значения p ( f ) показаны

В качестве следующего шага мы устанавливаем индивидуальный выбор порога одного сигнала RAT для каждой из 14 комбинаций лечения vlincRNA на основе наилучшего перекрытия с коэкспрессируемые гены, как показано на фиг.5д (Методы). Используя эти критерии, мы обнаружили, что vlincRNA может находиться в районе 20–2030 (медиана 1104) и 47–239 (медиана 123) отрицательно и положительно коэкспрессируемых генов соответственно. Отношения шансов и значения p для перекрытия между окончательными картами взаимодействия хроматина и отрицательно коэкспрессируемыми генами варьировались соответственно от 1,07 до 2,4 (медиана 1,23) и от 1,16E-81 до 7,82E-2 (медиана 9,36E-2). −48) (рис. 5e, f, диаграммы с пометкой «SMS» и дополнительный файл 1: дополнительная таблица S9).Соответствующие значения для положительно коэкспрессируемых генов составляли от 1,14 до 2,38 (медиана 1,33) и от 7,83E-15 до 3,89E-2 (медиана 3,91E-9) (рис. 5e, f, прямоугольные диаграммы с пометкой «SMS» и дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S10). Важным результатом этого анализа было то, что большинство генов, коэкспрессируемых с vlincRNA (74,2% положительных или 81,7% отрицательно коррелирующих транскриптов) имели доказательства совместной локализации с этой vlincRNA.

ВлинкРНК непосредственно регулируют экспрессию генов в своих регуляторных сетях

В качестве следующего шага, чтобы обеспечить прямую поддержку регуляторного эффекта влинкРНК, мы оценили эффекты прямого нокдауна 2 влинкРНК, достигнутые с помощью системы CRISPR / Cas13 [23] от экспрессии генов в их регуляторных сетях (рис.1). Мы воспользовались преимуществом клеточной линии K562, экспрессирующей индуцируемый доксициклином (Dox) Cas13, который ранее использовался нами для демонстрации биологической значимости влинкРНК при высокопроизводительном скрининге [22]. В этом исследовании смешанная популяция клеток, каждая из которых стабильно экспрессирует одну из 588 отдельных гРНК, подвергалась проверке выживания с помощью различных противораковых препаратов [22]. Здесь мы создали 8 стабильных клеточных линий, экспрессирующих отдельные gRNA, которые, как было установлено, делают клетки чувствительными к генотоксическому стрессу в этом высокопроизводительном скрининге и нацелены на 2 vlincRNAs [22].Для каждой vlincRNA мы сгенерировали 4 стабильные клеточные линии, конститутивно экспрессирующие 2 различных направленных gRNAs и 2 родственных несоответствующих контрольных gRNAs, содержащих мутации в основаниях 12-14 28-мерной gRNA, как сообщалось ранее [22]. Эти мутации аннулируют активность gRNA [23]. Чтобы избежать клональных эффектов, каждая клеточная линия была представлена ​​смешанной популяцией клеток с разными сайтами встраивания лентивируса.

Каждую из 8 клеточных линий обрабатывали Dox в течение 0, 3 или 6 дней, и популяцию РНК из каждого образца подвергали анализу RNA-seq.В целом, мы наблюдали устойчивый нокдаун в 3 из 4 гРНК со средним истощением 20,4% по сравнению с днем ​​0 и нецелевыми контрольными гРНК на основе анализа последовательности РНК (методы, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10). Если истощение vlincRNA оказывает влияние на гены, которые она регулирует, то уровни РНК отрицательно коррелированных генов должны увеличиваться, а уровни РНК положительно коррелированных — уменьшаться (рис. 6a). Таким образом, кратность изменений первого в ответ на нокдаун vlincRNA будет выше, чем у второго.И наоборот, если vlincRNA не влияет на гены, которые она регулирует, не должно быть различий в относительных изменениях экспрессии между генами, отрицательно и положительно коррелирующими с ней. Чтобы определить, существует ли разница, было рассчитано кратное изменение каждого гена для 3- и 6-дневной временной точки относительно (1) соответствующего контроля несоответствия и (2) неиндуцированных образцов (контрольные дни 0) на основе РНК-seq анализ (Методы).

Рис. 6

Влияние нокдаунов vlincRNA с использованием CRISPR / Cas13 на относительные кратные изменения коэкспрессируемых генов. a Схематическое изображение ожидаемой связи между положительно или отрицательно коэкспрессируемыми генами (слева) и соответствующим изменением уровня экспрессии в ответ на нокдаун vlincRNA (справа). b e Относительные различия в кратных изменениях между отрицательно и положительно коэкспрессируемыми генами для каждой пары нацеливания гРНК-контроль (внизу). Относительные различия были рассчитаны как метрики Коэна d ( b , d ) или различия медиан ( c , e ) путем объединения данных для обоих временных точек (3 и 6 дней) ( b , c ) или анализируя их по отдельности ( d , e ).Более подробная информация в тексте

Затем мы оценили различия в относительных кратных изменениях между 4 группами генов для каждой vlincRNA. Первые 3 группы были основаны на коэкспрессируемых генах: (1) все отрицательно экспрессируются против всех положительно коэкспрессируемых генов, (2) 100 наиболее отрицательно против 100 наиболее положительно коэкспрессируемых генов и (3) 50 наиболее отрицательно экспрессируются против 50 наиболее позитивно коэкспрессируемые гены. Последняя группа фонового контроля состояла из всех оставшихся генов, многие из которых также демонстрировали слабую корреляцию (положительную или отрицательную) с экспрессией vlincRNA, которая, однако, не превышала пороговые значения, описанные выше, чтобы эти гены считались коэкспрессированными с vlincRNA ( Инжир.6а). Теоретически эффект истощения vlincRNA на эти фоновые гены должен быть меньше, чем на коэкспрессируемые гены. Таким образом, относительная разница кратных изменений фоновых генов, отрицательно и положительно коррелирующих с экспрессией vlincRNA, могла бы служить контролем для различий, наблюдаемых между отрицательно и положительно коэкспрессируемыми генами (фиг. 6a). Таким образом, фоновая группа была разделена на два подмножества на основе отрицательной или положительной корреляции с vlincRNA, и были рассчитаны различия в относительных кратных изменениях между двумя группами.Для каждого сравнения мы рассчитали 3 показателя: (1) различия между медианными относительными кратными изменениями, (2) эффекты Коэна d различий между средними относительными кратными изменениями и (3) статистическая значимость разницы с использованием суммы рангов Вилкоксона. тест (Рис. 6b – e, Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S10). Сравнения проводились путем отдельной обработки трех- и шестидневных временных точек и объединения двух временных точек.

Поразительно, но относительные кратные изменения отрицательно коэкспрессируемых генов почти всегда были выше, чем у положительно коэкспрессируемых генов, о чем свидетельствует разница между медианами и положительными оценками Коэна d (рис.6b – e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10). Однако различия медиан и значений Коэна d были намного выше для коэкспрессируемых генов по сравнению с фоновыми коррелированными генами (рис. 6b – e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10). Это различие было особенно выражено, когда верхние 50 или 100 отрицательно коэкспрессируемых генов сравнивали с верхними 50 или 100 положительно коэкспрессируемыми генами (рис. 6b – e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10). В целом, величины эффектов Коэна d были довольно небольшими, в основном <0.1 для контрольных фоновых генов (рис. 6b, d, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10). Различия медиан и значений Коэна d были выше на 3-й день по сравнению с 6-м днем ​​(рис. 6d, e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10), возможно, из-за накопления косвенных эффектов, влияющих на экспрессию целевых генов. . Кроме того, при использовании критерия суммы рангов Уилкоксона медианные относительные кратные изменения отрицательно коэкспрессируемых генов были значительно выше (значение p <0.05), чем у положительно коэкспрессированных для 2 из 3 гРНК (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10). Однако несколько сравнений для оставшейся гРНК достигали порога значимости со значениями p в диапазоне 0,05–0,09 (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10). На основании этих результатов мы сделали следующие выводы. Во-первых, vlincRNAs, по-видимому, напрямую регулируют множество других генов, как положительно, так и отрицательно, и эти регуляторные взаимодействия можно предсказать на основе корреляции экспрессии в нашем анализе совместной экспрессии.Во-вторых, гены с более сильной коэкспрессией с vlincRNA действительно демонстрируют более сильную регуляцию с помощью vlincRNA. В-третьих, даже относительно скромные уровни истощения этих транскриптов могут иметь измеримые молекулярные фенотипы.

Функциональные свойства регуляторных сетей vlincRNA

Сильное статистическое перекрытие между коэкспрессией SMS и наборами данных взаимодействия хроматина в сочетании с валидацией CRISPR / Cas13 указывает на то, что мы идентифицировали истинные регуляторные сети vlincRNA. Как описано выше, сигнал RAT для генов в сетях vlincRNA был значительно выше, чем в фоновых генах при большинстве обработок.Таким образом, оказывается, что различные методы лечения существенно не меняют регуляторные сети vlincRNA. Для дальнейшей количественной оценки этого наблюдения мы определили списки генов, общих для наборов данных коэкспрессии и взаимодействия хроматина при каждом лечении (ДМСО или лекарственные препараты) для каждой vlincRNA. Затем мы оценили долю перекрытия среди этих списков для каждой vlincRNA. В целом, 83,7–100% (медиана 92,9%) и 48,6–83,8% (медиана 63,7%) соответственно отрицательно и положительно коррелированных коэкспрессируемых генов были общими для контрольной группы, получавшей ДМСО, и для лечения лекарственными препаратами.Соответствующие отношения шансов положительного и отрицательного ко-выражений составили 52,8–192,7 (медиана 83) и 6,3–95,6 (медиана 12,6), что указывает на статистически значимое совпадение между лекарственными препаратами и обработками ДМСО (рис. 7a, дополнительный файл 1 : Дополнительная таблица S11). Кроме того, сети не претерпели значительных изменений в ответ на лечение разными препаратами. Для двух vlincRNAs, профилированных как в клетках, обработанных этопозидом, так и в SN-38, 87,2–99% (медиана 93,1%) и 80,4–93,7% (медиана 87.1%) соответственно отрицательно и положительно коррелированных коэкспрессируемых генов были общими для двух препаратов.

Рис. 7

Свойства регуляторных сетей vlincRNA. a Стабильность регуляторных сетей при различных обработках — прямоугольные диаграммы отношений шансов перекрытия между сетями в образцах, обработанных ДМСО и лекарственным препаратом, для 6 vlincRNA. b e Регулирование нескольких генов в транс, и цис . Большинство генов в положительно и отрицательно коррелирующих сетях обнаруживаются на разных хромосомах, как показано для сетей коэкспрессии vlincRNA ID-1202 при лечении этопозидом или ДМСО.Связи между vlincRNA, расположенной на хромосоме 3, и каждым геном, коэкспрессируемым (положительно или отрицательно) с ним и содержащим сайт взаимодействий vlincRNA-хроматин, показаны тонкими линиями. Ящичковые диаграммы отношений шансов ( c ), значений p ( d ) и общего числа общих генов ( e ) на основе сравнений сетей коэкспрессии и наборов данных взаимодействия хроматина для либо все гены (левые графики), либо гены, обнаруженные на одной и той же хромосоме (правые графики) для 14 комбинаций vlincRNA-лекарства. f , g Десять лучших терминов GO, обогащенных генами, обнаруженных в сетях либо отрицательной ( f ), либо положительной ( g ) коэкспрессии для всех 407 vlincRNA. Термины GO были ранжированы на основе количества vlincRNA ( X -axes), чьи сети были обогащены этими терминами. Цифры рядом с каждым термином представляют% vlincRNAs, содержащих термин, от общего числа 407 vlincRNAs. h Коробчатые диаграммы значений корреляции Спирмена всех возможных парных комбинаций мРНК-мРНК, vlincRNA-vlincRNA и mRNA-vlincRNA

Во-вторых, сети состояли в основном из генов, расположенных на хромосомах, отличных от тех, где были обнаружены vlincRNA, как показано на примере на рис.7b. Однако, в соответствии с приведенными выше результатами, отношения шансов перекрытия между наборами данных коэкспрессии и взаимодействия хроматина были выше для генов, расположенных на тех же хромосомах ( цис, ), что и vlincRNA, чем для генов на других хромосомах ( транс ) (рис. 7c), но только 12/28 из этих совпадений были статистически значимыми (рис. 7d, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S12). Вероятная причина этого в том, что количество генов на одних и тех же хромосомах было не таким высоким, как во всем геноме (рис.7e, Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S12). Таким образом, мы объединили все образцы для увеличения статистической мощности и действительно смогли показать, что отношения шансов перекрытия между наборами данных коэкспрессии и взаимодействия хроматина были выше в цис , чем в транс ( p , значение 6,1E-3. , Критерий суммы рангов Вилкоксона). Следовательно, эти результаты предполагают, что vlincRNAs участвуют как во взаимодействиях cis и trans ; однако, хотя последних гораздо больше, взаимодействия РНК-хроматина с генами на тех же хромосомах имеют тенденцию быть сильнее (см. раздел «Обсуждение»).

Для дальнейшего понимания свойств регуляторных сетей vlincRNA, мы выполнили анализ Gene Ontology (GO), чтобы аннотировать все 407 vlincRNAs на основе функций генов в сетях. Поразительно, что сети для разных vlincRNAs обнаруживают обогащение сходными функциями (Fig. 7f, g, Additional file 1: Supplemental Table S13). Большинство отрицательно коррелированных сетей были значительно обогащены функциями, связанными с РНК (рис.7f), в то время как положительные сети были значительно связаны с различными условиями развития GO (рис.7г). Например, пять основных обогащенных терминов GO среди отрицательно коррелированных сетей и общих для ≥ 65% vlincRNAs были «обработка РНК», «сплайсинг РНК», «сплайсинг мРНК», «метаболический процесс мРНК» и «сплайсинг мРНК» (Рис. 7f, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S13). «Транскрипция с ДНК-шаблоном» входила в топ-20 таких терминов GO и разделялась на 50% всех vlincRNA (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S13). С другой стороны, пять основных терминов GO, обогащенных положительно коррелированными сетями, были «развитие нервной системы», «развитие центральной нервной системы», «развитие многоклеточного организма», «развитие системы» и «развитие анатомической структуры», которые разделяли 27 человек. –35% vlincRNA (рис.7g, Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S13). Расширение до 50 основных терминов GO выявило дополнительное обогащение отрицательно коэкспрессируемых сетей функциями, связанными с клеточным циклом, такими как «фазовый переход клеточного цикла», «клеточный цикл», «процесс митотического клеточного цикла», «митотическая сестринская хроматида». сегрегация »и« негативная регуляция процесса клеточного цикла », общие для 43–46% vlincRNAs (дополнительный файл 1: Supplemental Table S13). Тот же самый шаг выявил обогащение функций, связанных с клеточной адгезией, среди генов, обнаруженных в положительно коррелированных сетях и общих для 13–21% vlincRNAs (дополнительный файл 1: Supplemental Table S13).

В целом, обогащение сходных функций среди совместно экспрессируемых генов свидетельствует о том, что vlincRNAs имеют несколько схожие паттерны экспрессии. Чтобы решить эту проблему, мы рассчитали медианную корреляцию Спирмена только между vlincRNA или мРНК и между парами vlincRNA и мРНК. Медианные корреляции vlincRNA-vlincRNA, vlincRNA-mRNA и mRNA-mRNA составляли соответственно 0,28, -0,02 и 0,03 (фиг. 7h). Таким образом, действительно, vlincRNAs имеют тенденцию координированно регулироваться и участвовать в контроле генов со сходными функциями.

ВлинкРНК необходимы для выживания клеток в стрессовых условиях

Чтобы напрямую проверить, могут ли влинкРНК и их регуляторные сети иметь биологическое значение, мы проверили важность двух влинкРНК, используемых в экспериментах CRISPR / Cas13, для способности клетки выдерживать генотоксический стресс. Клетки из 8 отдельных клеточных линий CRISPR / Cas13, описанных выше, смешивали в равных пропорциях, выращивали в течение 3 дней в присутствии или в отсутствие Dox, а затем обрабатывали этопозидом (также с Dox или без него).Как показано в нашем предыдущем исследовании, этопозид оказывал сильное и продолжительное токсическое действие на клетки K562, приводя к постоянной гибели клеток даже после отмены препарата и медленному восстановлению [22]. В данном случае для каждой обработки после удаления этопозида клеткам давали возможность вырасти в течение ~ 10 дней, пока они не возобновили нормальный рост и внешний вид, а затем мы оценили выживаемость клеток, несущих каждую гРНК, вычислив нормализованное содержание этой гРНК в геноме. ДНК из объединенных клеток с использованием NGS.Для каждого лечения и каждой пары гРНК мы рассчитали соотношение численности нацеливающих / нецелевых гРНК для оценки относительной выживаемости клеток, несущих гРНК, нацеленных на vlincRNA, по сравнению с клетками, несущими их родственные не нацеленные контроли.

Интересно, что среднее / медиана соотношений нацеленных гРНК по сравнению с их родственными контролями сразу после объединения или роста в течение 3 дней до добавления этопозида составляло 0,9 / 0,91, даже если все клеточные линии были смешаны в равных пропорциях (дополнительный файл 1 : Дополнительная таблица S14, Методы).Это предполагает, что даже во время стадий роста и размножения, ведущих от лентивирусной трансфекции к созданию индивидуальных клеточных линий, преимущественная потеря клеток, экспрессирующих нацеливающие гРНК, предположительно происходила из-за их токсичности в сочетании с неплотной экспрессией Cas13 в отсутствие Dox. Последующие обработки этопозидом привели к дальнейшему падению этого отношения, особенно в сочетании с индукцией Cas13 доксом (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S14). Среднее / медианное соотношение нацеленных и нецелевых гРНК составляло 0.91 / 0,87 для этопозида / −Dox и 0,78 / 0,76 для лечения этопозидом / + Dox (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S14). В целом, по всем 4 парам гРНК падение отношения (указывающее на большее количество мертвых клеток) в образцах этопозид / + Dox было статистически значимым со значениями p 0,01 и 0,04 (односторонний тест Стьюдента t ) по сравнению с клетки, не обработанные этопозидом, или клетки, обработанные этопозидом / -Dox. Интересно, что клетки, экспрессирующие гРНК D33_v2_6, которые не показали значительного истощения vlincRNA в анализе транскриптома, были наиболее истощены даже без лекарственной обработки по сравнению с их нецелевым контролем в анализе выживаемости клеток с соответствующими средними отношениями 0.84, 0,76 и 0,66 (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S14). Эти результаты предполагают, что наша неспособность обнаружить последовательные изменения уровня транскрипта-мишени может быть вызвана гибелью клеток, в которых эта vlincRNA истощена в смешанной популяции клеток. В целом эти результаты демонстрируют, что эти влинкРНК необходимы для выживания клеток в нормальных условиях роста и особенно в условиях генотоксического стресса.

Влияние платформы измерения РНК на аутентичность сетей, производных от коэкспрессии

Чтобы проверить, будет ли значительное перекрытие между сетями, производными от коэкспрессии, и наборами данных взаимодействия хроматина общей характеристикой для любого набора данных экспрессии, мы регенерировали часть набор данных, используемый для анализа коэкспрессии с использованием платформы Illumina 2-го поколения, также с использованием полной РНК-истощенной рРНК.Мы создали сети коэкспрессии, используя те же критерии, что и выше. Важно отметить, что применение одного и того же порогового значения p для оценки надежности оценок корреляции теоретически должно учитывать различное количество выборок, используемых для расчета корреляций коэкспрессии (64 для SMS против 32 для Illumina). Кроме того, набор данных Illumina имел гораздо большее (в среднем ~ 10-кратное) количество считываний, сгенерированных на выборку, и значительно более длительные считывания: 150 базовых считываний на парном конце по сравнению с однократным считыванием в среднем ~ 35 баз для SMS.Для каждой vlincRNA мы обнаружили большее количество коэкспрессированных транскриптов с использованием тех же пороговых значений в наборе данных Illumina RNA-seq, чем в SMS, с соответствующими средними числами 2073 и 1615. Как и в анализе коэкспрессии на основе SMS, мы наблюдали статистически значимую тенденцию к отрицательной корреляции между vlincRNA и мРНК с соответствующим средним числом отрицательно и положительно коэкспрессированных мРНК 1119 и 943 на vlincRNA (значение p < 2.2E – 16, знаковый ранговый тест Вилкоксона).

Однако совпадение с набором данных RAT было слабым на основании сравнений с отдельными комбинациями vlincRNA-лечение или на объединенном наборе данных, сделанном путем объединения всех обработок для всех vlincRNAs (рис. 5e, f, дополнительный файл 1: дополнительные таблицы 15 и 16) . В то время как отношения шансов совпадений с отрицательно коэкспрессируемыми генами указывали на обогащение и варьировались от 1,03 до 1,74 (медиана 1,19) (рис. 5e, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S15), значения p были гораздо менее значимыми по сравнению с с теми из SMS RNA-seq, упомянутых выше, со средним значением p , равным 3.7E-2 (в диапазоне от 2,22E-47 до 0,35) (рис. 5f, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S15). Кроме того, отношения шансов для положительно коэкспрессируемых генов были намного ниже, чем для набора данных SMS RNA-seq, в диапазоне от 0,8 до 1,06 со средним значением 1,0 и средним значением p , равным 0,53 (в диапазоне от 3,09E-2). до 0,93) (рис. 3a, b, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S15). Сходные результаты были получены с использованием объединенных данных: хотя перекрытие было значительным для отрицательно коэкспрессированных vlincRNA для обеих платформ, хотя и с более высокой значимостью в случае SMS, оно было значимым только для положительно коэкспрессированных vlincRNA, обнаруженных с помощью SMS. платформа (Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S16).Когда были объединены как положительно, так и отрицательно коэкспрессируемые vlincRNA, перекрытие было значительным только для платформы SMS (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S16).

Мы также сравнили эффект нокдауна vlincRNA на сети коэкспрессии, генерируемые обеими платформами. В целом, сети, созданные Illumina, имели такие же профили, как и SMS (Дополнительный файл 1: Дополнительная таблица S17). Однако различия между коэкспрессируемыми генами в сетях и фоновыми генами были гораздо менее значительными (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S17).Например, эффекты Коэна d объединенных данных 3 и 6 дней для gRNAs gRNA D30_v6_6 и D33_v2_10 составили 0,148 и 0,273 для сетевых генов и соответственно 0,062 и 0,113 для фоновых генов для сетей, генерируемых SMS (рис. 6b, дополнительный файл 1: дополнительная таблица S10) — в среднем в 2,4 раза выше для сетевых генов. Соответствующие значения для сетей Illumina составили 0,086 и 0,295 по сравнению с 0,080 и 0,218 (дополнительный файл 1: дополнительная таблица S17) — в среднем 1.В 2 раза выше. Следовательно, сети, созданные с использованием разных платформ экспрессии даже на одном и том же типе образцов, вероятно, будут значительно отличаться с точки зрения их подлинности.

Без маски никуда не денешься

К нарушителям, которых невозможно убедить словами, предъявляется административный протокол по статьям 20.6.1 и 6.3 КоАП РФ, влекущий наложение штрафа. За последние 24 часа был оформлен 41 протокол.

14 декабря межведомственные рабочие группы проверили объекты торговли и других организаций Магнитогорска на соответствие маскам и другим санитарно-эпидемиологическим мероприятиям.Многие покупатели пренебрегли СИЗ. Сотрудники правоохранительных органов провели разъяснительные беседы с посетителями в магазинах «Лакомка» (ул. Труда, 33б), «Пятерочка» (ул. Труда, 33а), «Красное и Белое» (ул. Жукова, 4). Также была проведена профилактическая беседа с сотрудниками парикмахерской «Дива», где не было разметки, обеспечивающей социальную дистанцию ​​между посетителями и персоналом.

К сожалению, во время рейдов не обошлось без более строгих мер. Так, для посетителей Центрального крытого рынка составлено два административных протокола, три протокола — для сотрудников магазинов «Красное и Белое», расположенных на улице Комсомольской, 19 и проспекта Карла Маркса, 92, и пекарни «Семейные традиции».Во всех трех магазинах не было должного контроля над использованием масок покупателями и сотрудниками. По этой же причине было возбуждено административное дело в отношении сотрудника Гастронома (ул. Труда, 49/1).

Все торговые объекты и другие организации города будут проверены еще раз.

В этот же день сотрудниками полиции и специалистами отдела инженерии, транспорта и связи составлено девять административных протоколов на пассажиров без масок в маршрутных транспортных средствах.Профилактические беседы прошли со всеми горожанами.

За нарушение правил поведения при введении законодательством режима повышенной готовности предупреждение или наложение административного штрафа в размере от одного до тридцати тысяч рублей на граждан, на должностных лиц — от десяти тысяч до пятидесяти тысяч рублей, на предпринимателям без образования юридического лица — от тридцати тысяч до пятидесяти тысяч рублей, на юридических лиц — от ста тысяч до трехсот тысяч рублей.

Повторное совершение административного правонарушения, предусмотренного частью 1 статьи 20.6.1 Кодекса об административных правонарушениях, предусматривает наложение штрафа на должностных лиц — от трехсот тысяч до пятисот тысяч рублей или дисквалификацию на срок от одного года до трех лет.

Немаловажным фактором является также возможность приостановить деятельность организации на 90 дней в случае повторных или грубых нарушений санитарно-эпидемиологических норм. Так, в городе закрылись магазины «Уральский фермер» и «Продукты», мясной комплекс в ТЦ «Чкаловский», ресторан-бар «Voodoo Bar».

Из соображений безопасности жители должны носить медицинские маски и сохранять социальную дистанцию ​​в общественных местах, следить за гигиеной рук и дезинфицировать поверхности часто используемых предметов. В случае появления первых признаков болезни максимально ограничьте контакт с другими людьми и обратитесь за медицинской помощью.

Роспотребнадзор сходит с ума от жары в Москве, а зимой будет «колотить» от мороза в Магадане

Роспотребнадзор посоветовал сократить рабочий день при высоких температурах в помещении.Соответствующие рекомендации размещены на сайте агентства. Говорят, если температура в рабочем помещении близка к + 28,5 ° С, то рабочий день нужно сократить на один час, при повышении температуры до + 29 ° С — на два часа, при + 30,5 ° С — на четыре часа.

Инициатива Роспотребнадзора оперативно прокомментирована в Госдуме. Член комитета Госдумы по труду, социальной политике и делам ветеранов Светлана Бессараб заявила, что в парламенте не планируется вносить законопроект о сокращении продолжительности рабочего дня при высоких температурах в помещениях, поскольку нормативная гильотина не коснулась санитарные правила и нормы, устанавливающие эти параметры.

Действительно, при ближайшем рассмотрении инициатива Роспотребнадзора — это не инициатива, а всего лишь саундтрек к существующему с 1996 года СанПиН 2.2.4.548−96, в котором содержатся рекомендации по установлению сокращенного рабочего дня из-за жары. То есть ничего нового здесь нет, все нормы давно существуют, как и прописанная в КоАП ответственность работодателя до штрафа в размере 80 тысяч рублей за их нарушение. Тем не менее, новость преподносится как бурная деятельность Роспотребнадзора и висит во всех топах.

И пусть Роспотребнадзор тоже обсудит зимние проблемы. Иногда бывает холодно в Магадане, Чукотке, Якутии, Красноярске. Сотрудников Роспотребнадзора тоже хватает, чтобы поднять эту тему…

Это всего лишь один типичный пример того, что делают исполнительная власть в целом и подконтрольные ей департаменты в частности, и законодательная власть не является исключением. Если речь не идет о очередном повышении налогов, чиновники и депутаты постоянно выступают с такими инициативами, как перекраска Кремля в белый цвет или введение четырехдневного рабочего дня, за что выступает Дмитрий Медведев, , в то время как более важные и насущные вопросы остаются без внимания.

Но сотрудники министерств и ведомств получают немалые зарплаты и должны их хотя бы отрабатывать. Последний раз Росстат публиковал подробный отчет по ведомствам только за 2018 год. Уже тогда среднемесячная зарплата сотрудников Роспотребнадзора составляла 99,6 тысячи рублей, больше среди медицинских ведомств было только в самом Минздраве — 104 тысячи. В 2019 году

Среднемесячная брутто-заработная плата государственных служащих центральных аппаратов федеральных государственных органов составила 140 тыс. Руб.Но на региональном уровне среднемесячная зарплата госслужащих составляла всего 55,7 тысячи рублей.

При этом нужно понимать, что зарплаты руководителей исполнительных ведомств и рядовых чиновников могут отличаться на порядок, а это среднее арифметическое.

На сайте Роспотребнадзора можно найти информацию о среднемесячной заработной плате руководителей, их заместителей и главных бухгалтеров федеральных государственных учреждений и федеральных государственных унитарных предприятий, находящихся в ведении Роспотребнадзора (но почему-то не самого центрального управления).

Например, заместитель директора Информационно-методического центра получает в среднем 301 тысячу рублей в месяц, а заместитель директора предприятия «Дезинфекционист» в Махачкале — всего 20,7 тысячи рублей. А сама глава Роспотребнадзора Анна Попова задекларировала доход за 2019 год в размере 11 миллионов 439 тысяч рублей.

Хорошие деньги получают и сотрудники других министерств и ведомств. Например, среднемесячная заработная плата в Минэкономразвития в 2019 году составляла 138 тысяч рублей.Опять же, больше всего на деньги не обижается руководство — первый замминистра получает 10,5 должностных окладов (одна зарплата 10,6 тыс. Руб. В месяц), а им надбавка в размере 150-200% за особые условия госслужбы, от 15 % до 30% за выслугу лет, от 5% до 75% за секретность и т. д.

И при этом нам дают качество инициатив на уровне норм 20-летней давности или просто неважные вопросы, не заслуживающие внимания федеральных властей.

По мнению старшего научного сотрудника Института экономической политики Сергея Жаворонкова, это не просто непрофессионализм, а сознательная линия властей.

— Естественно, что наша исполнительная власть обсуждает такие темы и выдвигает такие инициативы, потому что самые важные вопросы, такие как здравоохранение, ЖКХ, рост цен и, наконец, политические свободы, неудобны для властей. Поэтому предлагается обсудить любую чушь.

Например, сегодня я прочитал, что Госсовет Татарстана предлагает зарегистрировать кошек и собак. «Самая главная» проблема современности, если мы начнем регистрировать домашних кошек, то сразу будем спасены. Все это явления одного порядка.

Власти издают белый шум, который призван отвлечь от обсуждения реальных вопросов, которые вы не хотите обсуждать, потому что они болезненны. Отчасти тот же белый шум в информационной повестке дня — это бесконечное обсуждение внешней политики, Украины, Америки и всего, что имеет мало общего с повседневной жизнью россиянина.Большинство россиян никогда не видели в своих глазах живого американца.

«СП»: — Это информационный аспект, но насколько эффективно само госуправление и исполнительная власть, если во главу угла ставятся такие незначительные вопросы?

— Насколько эффективна исполнительная власть, ответить очень просто. Мы наблюдаем за ситуацией с коронавирусом в течение последнего года. Казалось бы, это новая и не совсем привычная ситуация, требующая предельного хладнокровия и быстрой реакции.А что мы видим со стороны власти? Мы видим полное отсутствие диалога с экспертным сообществом, не говоря уже о гражданах, мы наблюдаем чистый волюнтаризм.

Например, теперь выясняется, что наш вирус распространяется в зоопарках и на детских площадках, а не на концертах и ​​в фан-зонах. Почему-то в ресторанах, кафе и клубах он начинает распространяться только после 23:00, а днем, видимо, отдыхает и безопаснее. Хотя мы прекрасно понимаем, что именно днем ​​в заведениях больше всего людей.Это чистая тирания, которую мы видим на практике собственными глазами.

Власти ни с кем не хотят ничего обсуждать. Они запираются в офисе узкой группой и из фонаря начинают изобретать. «Давай запретим детские площадки и скамейки». Потом подумали, решили, что скамеек слишком много, и все же запрещать их не стоит. То есть решения принимаются на коленях людьми, которые считают себя всезнающими и не нуждаются в обсуждении.

«СП»: — А в чем причина нежелания исполнительной власти прислушиваться даже к экспертному сообществу? Боятся ли они потерять монополию на принятие решений?

«Они глубоко презирают простых людей, и в их число входят ученые, не входящие в правящую группу среди простых людей.У них сформировалось такое самосознание небожителей, что все может и все решит для себя.

«СП»: — Но при этом в начале пандемии федеральная власть вообще на какое-то время вышла из ситуации и оставила ее на откуп региональным властям…

— Дело в том, что пандемия началась одновременно с подготовкой референдума по обнулению. И это была сознательная попытка снять ответственность с Путин , чтобы все непопулярные решения можно было переложить на губернаторов, а иногда и ниже — только на Роспотребнадзор.Например, в столичном регионе храмы закрыли именно на основании приказа Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Даже Собянин Я не хотел брать на себя ответственность, поэтому решение было отодвинуто на второй план.

Когда решение непопулярно, они пытаются обратиться к второстепенным чиновникам. Хотя, по сути, эти инициативы взяты на самом верху в логике вертикали власти, что они будут управлять всей страной из Москвы и что они знают, что происходит в этой стране.

«СП»: — А как появляются такие предложения, есть ли норма по инициативам для ведомств?

— Нормы конечно нет. Есть просто органы, которые отвечают за государственную пропаганду, формируют повестку дня государственных телеканалов, официальных сайтов и даже новостей Яндекса, якобы генерируемую автоматически. И они приглашают нас обсудить самые «важные» вещи. В топах может висеть новость, что на заборе в Киеве что-то написано, и нас приглашают это обсудить.

Или посмотрите темы обсуждения в ток-шоу на федеральных каналах. Тему ЖКХ вы там не увидите. Но вы увидите бесконечную Украину и прочую чушь. Случайно?

Nga đăng ký bộ xét nghiệm phát hiện biến thể mi của вирус SARS-CoV-2

BNEWS Các nhà khoa học Nga ã ăng ký bộ xét nghiệm đầu tiên trên thế giới phát hiện được biến thể mới của вирус SARS-CoV-2.

Тео THONG BaO mới Djay được Đăng TAI ТРЕН Trang MANG của Viện Нгьен Cuu dịch Tè Чунг Уонг của Роспотребнадзор (Нга), CaC nhà Khoa học nước NaY DJA Đăng ký bộ XET Нгьем đầu Тьен ТРЕН Gioi PHAT Хьен được Biên МВД của вирус SARS-CoV-2 был заражен вирусом COVID-19, вирус заражен вирусом SARS-CoV-2.

Thông báo nêu rõ Viện Nghiên cứu dịch tễ trung ương của Роспотребнадзор đã phát triển và ăng ký một bộ xét nghiệm phát hiện biến tha mi.

Bộ thuốc thử này có tên gọi AmpliSense® SARS-CoV-2-UK-IT. Thông báo cũng lưu ý rằng bộ xét nghiệm mới này phát hiện được úng biến thể mới và nhấn mnh ây là bộ xét nghiệm đầu tiên như th vy tr.

Тео Роспотребнадзор, kt quả xét nghiệm trên các mẫu lâm sàng nhiễm biến thể mới đã chứng minh bộ thuốc thử có độ chính xác cao. Thông báo khẳng định công nghệ mới có thể được sử dụng để phát triển thuốc thử với khả năng phát hiện bất kỳ biến thể nào khác của virus SARS-CoVhn .
Trong khi ó, theo phóng viên TTXVN tại Sydney, Bộ trưởng Y tế Australia Greg Hunt ngày 15/2 xác nhận lô вакцина u tiên do hãng Pfizer sản xuất ã в Австралии và nc ncn từ đầu tuần tới.

B trưởng Hunt nêu rõ 142,000 liu вакцина của Pfizer đã được chuyển từ Bỉ tới Australia một cách an toàn và bảo m chất lượng. Trong số 80.000 liều вакцина sẽ được tiêm từ ngày 22/2 tới, 55.000 liều sẽ được phân bổ cho các bang trong cả nước để tiêm chủng cho các nhân viên làm nhiệm vâ vi người nhập cảnh từ nước ngoài.

Chính phủ liên bang sẽ trực tiếp phân phối 30,000 liều вакцина cho các nhân viên làm việc tại cơ sở chăm sóc người cao tuổi trên khắp Австралия. Ông Hunt khẳng định Australia đang trên đà thực hiện mục tiêu tiêm chủng cho 4 triệu người trong tổng s hơn 25 triu dân vào u tháng 4 tới.

Theo kế hoạch, cơ quan Quản lý Sản phẩm Điu trị Australia (TGA) sẽ tiến hành công tác thử nghiệm cuối cùng để bảo m Vacine có chất lượng tâm chăm sóc người cao tuổi trên toàn quốc.

Các lô Vacine khác của Pfizer sẽ tiếp tục được chuyển tới Australia với số lượng khoảng 80,000 liều / tuần, bắt đầu từ đầu tháng 3, trong tổng s

Trong khi ó, cũng vào đầu tháng 3, hơn 3 triệu liều вакцина của AstraZeneca sẽ bắt đầu được vận chuyển tới Australia từ châu Âu. Ngoài ra, còn 47 triệu liều вакцина của AstraZeneca ang được sản xuất tại thành phố Melbourne./.

крымских СМИ не предоставляют людям полную информацию о коронавирусе (результаты мониторинга) — Крымская правозащитная группа

Крымские СМИ освещали ситуацию с пандемией коронавируса в Крыму, в основном используя данные оккупационных властей.Об этом свидетельствуют результаты мониторинга Крымской правозащитной группы, проведенного в апреле-июне 2020 года.

Исследование проводилось на сайтах, редакции или журналисты которых работают на территории полуострова.

Всего для изучения было выявлено 15 сайтов, регулярно публикующих информацию о ситуации с пандемией в Крыму.

https://sevastopol.su/

https://ruinformer.com/

http: // www.kerch.com.ru/

https://kerch.fm/

https://c-pravda.ru/

http://crimea24.tv/

http://www.c-inform.info/

https://kafanews.com/

https://www.novoross.info/

https://www.politnavigator.net/

https://crimea.ria.ru/

https://crimea.mk.ru/

https: // вести-к.ru /

https://vesti92.ru/

https://www.crimea.kp.ru/

На этих сайтах публикации проверялись по следующим ключевым запросам: «коронавирус Крым», «COVID-19 Крым», «пандемия Крыма», «коронавирус Севастополь», «COVID-19 Севастополь», «пандемия Севастополь».

В выборку вошли тексты, опубликованные на указанных сайтах с 1 по 7 апреля, с 1 по 7 мая и с 1 по 7 июня 2020 г.

Всего за исследованные интервалы с помощью поисковой системы Google по выбранным ключевым запросам на этих сайтах было обнаружено 752 публикации, причем представители российских или подчиненных крымских де-факто властей упоминаются или цитируются в 93% из них.Альтернативные точки зрения в таких материалах не представлены. Критических публикаций среди отобранных для мониторинга не зафиксировано.

Например, 276 статей было найдено на этих сайтах по указанным выше ключевым запросам в течение первых семи дней апреля.

Из них

250 статей касались действий российских или оккупационных властей в связи с пандемией, что составляет 90,5% от общего количества публикаций по данной тематике.

253 статей было опубликовано на этих сайтах по указанным выше ключевым запросам в течение первых семи дней мая.

Из них

245 статей посвящены действиям российских или оккупационных властей в связи с пандемией, что составляет 96,8% от общего количества публикаций по данной тематике.

223 статей было опубликовано на этих сайтах по указанным выше ключевым запросам в течение первых семи дней июня.

Из них

211 статей касались действий российских или оккупационных властей, связанных с пандемией, что составляет 94.6% от общего количества публикаций по данной теме.

Президент России В. Путин упоминается как минимум в 41 из этих публикаций, «глава» Крыма Аксенов — в 130, крымское «МВД» — в 60, Роспотребнадзор — в 177. Информация о штрафах представлена ​​в 55 статей. Слово «власть» встречается в 151 публикации, российское или местное «правительство» упоминается в 155 статьях.

В этих новостях цитируются также главы городских оккупационных администраций, упоминаются «спикер» Крыма Константинов и «губернатор» Севастополя Развожаев.В статьях представлены многочисленные пресс-релизы различных крымских «правительственных» министерств о ситуации с заболеваемостью, данные оккупационных властей об изменении экономической ситуации и выплатах.

При этом цитаты представителей общественности и силовиков в этих статьях не подвергаются сомнению и критике. В таких публикациях нет альтернативных точек зрения.

И только 46 из выбранных для мониторинга публикаций содержали информацию, не связанную с цитированием российских и подчиненных им крымских общественных деятелей и силовиков.В этих статьях авторы описывали состояние местной инфраструктуры, режим работы различных учреждений и учреждений, а также цитировали экспертов. Среди избранных нет ни одной критической публикации.

Важно отметить, что эти публикации включают тексты, в которых нарушаются стандарты полноты, точности и достоверности.

Например, в публикации Республиканского информационного агентства «Крым» «Ничего, кроме ветра — Как обстоят дела на границе Крыма и Украины — фото» сообщается, что въезд людей в Крым, похоже, полностью запрещен Украиной (что действительно не соответствует реальной ситуации).При этом источник такой информации не указывается; вместо этого автор публикации невнятно заявляет «согласно последней информации».

Иногда авторы просят людей, не являющихся экспертами в данной области, прокомментировать ситуацию с пандемией.

Например, на сайте МК КРЫМ в статье «Определены самые опасные дни 2020 года» ситуацию с пандемией комментирует астролог.

Одна из публикаций на сайте Крым 24 об использовании защитных масок во время пандемии полностью состоит из цитаты иллюзиониста.

В некоторых материалах представлена ​​противоречивая информация. Например, на сайте КРЫМ РИА РИА Крым была размещена публикация «Когда закончится вспышка коронавируса в России — прогноз из Сингапура». Авторы сначала заявляют, что ученые дали точный прогноз о том, когда закончится пандемия в Российской Федерации, но в следующем предложении они добавляют «но это не точно».

Таким образом, подавляющее большинство информации о пандемии в крымских СМИ цитируют представителей оккупационных властей без каких-либо альтернативных точек зрения на представленную ситуацию.Абсолютное отсутствие критических материалов в популярных интернет-СМИ Крыма и ряд нарушений стандартов журналистики при освещении такой серьезной темы, как пандемия, ставят под угрозу ситуацию с доступом населения к объективной и достоверной информации о распространении опасного для населения заболевания. жизнь и здоровье крымчан.

Напомним, что с начала апреля 2019 года российские власти ввели серьезные ограничения на освещение в СМИ пандемии COVID-19, тем самым фактически закрывая возможность местным журналистам выпускать критические публикации о пандемии.Речь идет не только об административных статьях (новая статья 20.6.1 КоАП РФ и дополненные статьи 6.3 и 13.15 КоАП РФ), но и об угрозе уголовного преследования (статьи 207.1, 207.2, 236 УК РФ).

Ситуация ухудшается, поскольку Российская Федерация не только продолжает, но и усиливает систематические сбои в вещании независимых украинских СМИ в Крыму.

Подобные действия существенно ограничивают доступ жителей Крыма к информации независимых украинских интернет-СМИ и FM-радиостанций.В условиях пандемии такая политика России в Крыму, по сути, блокирует независимую информацию о ситуации с пандемией на Украине и в Крыму, от которой напрямую может зависеть жизнь и здоровье людей.

Подобные действия Российской Федерации недопустимы и представляют собой серьезное ограничение доступа к информации для жителей полуострова. Необходимо немедленно прекратить блокировку украинских СМИ и обеспечить журналистам свободу выпускать профессиональные публикации о ситуации с распространением коронавируса на территории Крыма.

Nga cảnh báo không tiêm вакцина Covid-19 khi ang làm p bằng Botox

Nhà chức trách Nga cảnh báo không tiêm вакцина Covid-19 Epivaccorona khi ang làm p bằng Botox.

Роспотребнадзор (Cơ quan Liên bang Giám sát việc bảo vệ người tiêu dùng và sức khỏe con người của Nga) ngày 31/5 ã a ra li khuyên chong v các hóa chất khác.

Тео Роспотребнадзор, các chuyên gia không khuyến nghị kết hợp tiêm вакцина Epivaccorona, một trong ba loại thuốc tiêm chủng nội a c ăng k th

Khoảng cách giữa liều thứ hai của вакцина Epivaccorona và các ln tiêm Botox (chủ yếu để làm đẹp) tiếp theo phải kéo dài là ít nhất một tháng.

Роспотребнадзор giải thích rằng sau khi tiêm Epivakkorona, vào ngày thứ 42 sau lần tiêm chủng thứ hai, một «phản ứng miễn dịch căng thẳng» cển.

Hơn nữa, chỉ từ 1-5% trường hợp sử dụng độc tố Botulinum, các kháng thể có thể được tạo ra ở các bệnh nhân.

«Do ó cần phải tách các thủ tục (tiêm Vacine và sử dụng Botox) này ra» — thông báo của Rospotrebnadzor nhấn mạnh.

Hin chưa rõ vic sử dụng Botox có nh hưởng gì không n việc tiêm các loại vacine chống Covid-19 khác của Nga cũng như i với các вакцина против вируса гриппа инфекции Conrona.

Ботокс сено Botulinum là một protein và là một độc tố thần kinh do vi khuẩn Clostridium botulinum tạo ra.Nó cóng thức phân tử là C₆₇₆₀ H₁₀₄₄₇N₁₇₄₃O₂₀₁₀S₃₂. Ботокс là chất độc gây chết người mạnh nhất từng được biết, với liều gây chết trung bình ở người khoảng 1,3–2,1 нг / кг tiêm tĩnh mạch hoặc tiêh.

Tuy nhiên, ở liều lượng nh, Ботокс có thể được sử dụng để loại bỏ nếp nhăn an toàn. Ботокс được biết đến như một loại thuốc chuyên dụng có thể giúp giảm nếp nhăn, vết chân chim ở khu vực quanh mắt hay ở trán.

Ботокс hoạt động dựa trên cơ chế khóa các tín hiệu thần kinh ở vùng cơ, nơi được tiêm thuốc.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.