Ул курчатова д 6 корп 3: СПБ ГБУЗ №104

Вы не можете продолжить?
Телефон: xxxxx

Перекресток Сибирская-7 — Справочник контрактов Sniper Ghost Warrior

Ключевые точки контрактов Sniper Ghost Warrior — Карта перекрестка Сибильская-7

Этим значком отмечалось расположение предметов коллекционирования.

Этот значок использовался для обозначения местоположений контрактов и миссий за награды.

Этим значком отмечены достопримечательности — зоны быстрого перемещения, зоны эксфильтрации.

Перекресток Сибирская-7 — последняя локация в Sniper: Ghost Warrior Contracts . Вам предстоит уничтожить диктатора Курчатова, которого вы слышите на протяжении всей игры, а также саботировать поезд с оружием массового поражения. Есть 4 контракта, а также 6 испытаний, вы можете найти 6 предметов коллекционирования и 2 миссии Bounty.На этой странице есть пошаговое руководство для карты развязки Сибирская-7.

Контракты

На перекрестке Сибирская-7 вы можете заключить следующие контракты:

1. Задача 1 — Устранить Ксеника Алиханова.
2. Задача 2 Получите информацию о системе вооружения.
3. Задача 3 — Диверсия поезда, перевозящего ракеты.
4. Задача 4 — Устранить Нергуя Курчатова.

Примечание — На этой карте есть ветвящиеся пути.В конце одного пути вы сможете выполнить контракты 1 и 4, в конце второго вы завершите контракты 2 и 3. По этой причине мы немного изменили порядок выполнения задач.

Испытания

Игрок может участвовать в дополнительных испытаниях, таких как:

1. Отключить 10 электронных устройств.
2. Совершить 5 убийств «смерть сверху».
3. Убить 10 тяжелых врагов.
4. Диверсировать поезд, не подняв тревогу.
5. Устранить Курчатова с дистанции более 100 м.
6. Завершите все контракты менее чем за 25 минут.

Предметы коллекционирования и награды

Есть также 6 предметов коллекционирования и 2 награды. Цели, которые необходимо устранить, описаны в конце этой главы. Мы отметили расположение всех предметов коллекционирования на карте (подробное описание секретов и предметов коллекционирования можно найти на отдельной странице этого руководства).

Устранить Ксеника Алиханова.

Лягте на склоне горы и осмотрите окрестности.

Как только вы научитесь управлять персонажем, вы увидите, что декорации сильно изменились — действие происходит на территориях, покрытых растительностью, снега здесь нет. Идите на север и лягте на склоне горы — поблизости первая застава врага. Начните с убийства снайпера, лежащего в траве к северу от вашего местоположения. Затем устраните другого человека, стоящего в окне здания в конце помещения .

Дрон очень помогает в разведке местности.

Используйте дрон — если у вас есть к нему доступ — чтобы узнать местонахождение всех врагов. Есть много объектов, которые могут легко прикрыть трупы врага, но это также затрудняет осмотр местности в бинокль. Когда вы отслеживаете все цели, начните их устранять — попробуйте убить врагов, когда они находятся за укрытием. Это не вызовет тревогу.

Разветвление дороги — в этот момент следуйте прямо по тропинке.

Когда вы очистите территорию от врагов, идите на север, поднимитесь по лестнице наверх и продолжайте движение вперед. Скоро вы станете на мосту. Вилка, упомянутая во введении, находится в конце — если вы пойдете прямо, вы сможете достичь целей 1 и 4; если вы пойдете налево, вы выполните задачи 2 и 3. В нашем случае мы пошли прямо — цели 1 и 4.

Глушилка рядом — помешает использовать дрон.

Вы достигли узкого прохода, патрулируемого врагами. Дрон недоступен. — Глушитель рядом не может быть отключен. К счастью, это не влияет на способность отмечать цели. На смотровой вышке несколько врагов, одна турель и снайпер.

Дрон можно использовать там, где стоит поезд, кроме глушилки, снимающей маркировочные метки.

Очистите территорию и продолжайте движение вперед. Вы окажетесь в более просторном месте, похожем на вокзал. Здесь глушилка отключает маркировочные метки. Вы не сможете добраться до этого глушителя, чтобы отключить его. Отметьте отдельных врагов, чтобы узнать расстояние между вами и ними, и немедленно убейте их из снайперской винтовки. Остерегайтесь снайперов на крышах и многочисленных камер — вы можете уничтожить их с помощью оружия, ЭМИ-гранат или своего дрона.

Алиханов находится в здании перед вами.

Вы можете пройти через канализацию, чтобы попасть за забор, отделяющий вас от цели контракта — вход на вашей стороне, а выход на другой стороне забора.Вы также можете перепрыгнуть через него, взобравшись на вагон поезда и перепрыгнув через забор. Мишень контракта находится внутри желтого здания — рядом стоит глушилка, промахнуться сложно. Пройдите внутрь и избавьтесь от Алиханова.

Устранить Нергуя Курчатова.

Единственная цель здесь — автоматическая турель.

Когда вы избавитесь от Алиханова, идите на юг к краю этой локации, а затем поднимитесь по лестнице наверх. Вы попадаете в запертую комнату — бой здесь будет намного сложнее из-за ограниченного пространства, поэтому попробуйте использовать штурмовую винтовку и пистолет.Уничтожьте турель, преграждающую путь, и продолжайте движение на запад.

Единственное место в игре, где штурмовая винтовка работает лучше всего.

Вы достигли той части, где нужно убить целую кучу врагов. Противники движутся близко друг к другу, а это значит, что устранение скрытности вызовет у вас проблемы. Если вас не волнует молчаливое выполнение миссии, вытащите штурмовую винтовку и начните убивать врагов — иначе вам придется кропотливо наблюдать за всеми солдатами и отвлекать их внимание камнями. Используйте режим маски, чтобы пометить ближайших врагов — при условии, что у вас есть соответствующее обновление.

Еще одно место с глушилкой — используйте режим маски, чтобы пометить ближайших врагов.

Как только область очистится, продолжайте движение на юг — вы снова окажетесь на поверхности. Вы не можете пометить врагов из-за глушилки — в настоящее время вы не можете добраться до него и отключить, поэтому помечайте отдельные цели и сразу же устраняйте их. Если враги найдут вас, отойдите от этого места — через несколько секунд враги начнут стрелять из миномета.

Расположение глушилки.

Когда вы очистите территорию от врагов, подойдите к зданию на юге и посмотрите на восток — там вы увидите здание, внутри которого находится премьер-министр Курчатов, главная цель. Ранее упомянутый глушитель находится рядом со зданием — выстрелите в его панель управления, чтобы отключить его и пометить врагов.

Ваша главная цель, Курчатов, находится в здании перед вами.

Пройти охрану. Остерегайтесь многочисленных турелей (в том числе свисающих с потолка) и ворвитесь в здание.Курчатов находится в стеклянной комнате на верхнем этаже здания — убейте его, чтобы завершить этот контракт.

Получить информацию о системе вооружения.

Идите по дорожке, чтобы добраться до двух других контрактов.

Когда избавитесь от Курчатова, соберите предметы у побежденных солдат и вернитесь к развилке с начала миссии. Теперь вам нужно пойти по другому пути — с вашей точки зрения, это будет путь, ведущий вниз.

Чтобы продолжить, вам нужно пройтись по трубам.

Убейте врагов и продолжайте движение вниз. Вы дойдете до конца дороги — пройдите по трубам слева, чтобы продолжить движение . Убейте врагов, находящихся на соседней башне, а затем заберитесь на ее вершину.

Используйте это место, чтобы убить как можно больше врагов на последнем объекте.

Вам открывается прекрасный вид на последний вражеский форпост — тот, где вам предстоит саботировать поезд. Лягте на землю и отметьте все цели с помощью бинокля / дрона, а затем начните их устранять. Вам не нужно беспокоиться об обнаружении — у врагов нет миномета, и они слишком далеко, чтобы представлять реальную угрозу.

Используйте зиплайн, чтобы добраться до вражеской заставы.

Как только вы убьете всех врагов, взаимодействуйте с ближайшим зиплайном, чтобы добраться до вражеского объекта. Пройдите канал и доберитесь до поверхности — вы находитесь там же, где стояли убитые вами враги.

Ваша цель — здание CEKTOP 12.

Убейте выживших врагов, соберите их боеприпасы и поднимитесь по лестнице к зданию, обозначенному как Сектор 12 (CEKTOP 12).Там вы найдете информацию, которую нужно собрать для выполнения этого контракта.

Диверсия поезда с ракетами.

Это последняя локация в игре — здесь можно сойти с ума.

Пора заключать последний контракт. Направляйтесь в противоположном направлении, чтобы добраться до здания, отмеченного как Сектор 13 (CEKTOP 13). Вы попадете в другую запертую комнату, полную врагов. Это последняя локация в игре, поэтому вы можете использовать все свои боеприпасы и гаджеты, чтобы убивать врагов.

Поместите взрывчатку C4 между вагонами поезда, чтобы завершить окончательный контракт в игре.

Как только вы избавитесь от них, спрыгните и встаньте между вагонами поезда — поместите сюда взрывчатку C4. После размещения одной зарядки контракт считается завершенным. Идите в зону эвакуации, чтобы завершить последнюю миссию Sniper: Ghost Warrior Contracts .

Все контракты в этой локации выполнены. — теперь вы можете начать поиск предметов коллекционирования (их местонахождение было описано в отдельной главе) или испытаний.

Механизм действия наночастиц серебра и галогенидов серебра против клеток Saccharomyces cerevisiae

Наночастицы (НЧ) серебра и галогенидов серебра (Ag, AgCl, AgBr и AgI), покрытые двумя различными стабилизаторами (цитрат натрия и неионогенное поверхностно-активное вещество Tween 80), были получают восстановлением нитрата серебра боргидридом натрия в водном растворе.Эффект биоцидного действия свежеприготовленных синтезированных материалов против дрожжевых клеток Saccharomyces cerevisiae сравнивали с эффектом, производимым нитратом серебра, и изучали путем измерения гибели клеток и кинетики выхода K ⁺ из клеток в зависимости от концентрации. серебра. Результаты ясно показывают, что ионы серебра либо остались в дисперсии НЧ серебра и НЧ галогенидов серебра после их синтеза, либо были образованы впоследствии путем растворения частиц серебра и галогенидов серебра, играющих основную роль в цитотоксической активности НЧ против дрожжевых клеток.Также предполагалось, что эта активность, скорее всего, не связана с повреждением клеточной мембраны.

1. Введение

С начала эры антибиотиков в начале 1930-х годов и появления сульфонамидов и пенициллинов применение соединений на основе серебра в медицинской практике было редким явлением, а соли серебра использовались в лечении пациентов. строго уменьшилось во время Второй мировой войны [1]. Однако интерес к серебру никогда полностью не исчезал, и в настоящее время он снова возродился с разработкой материалов и композитов, содержащих наносеребро, в основном из-за повторного открытия высокой антибактериальной активности частиц коллоидного серебра.На данный момент серебро в виде НЧ имеет самую высокую степень коммерциализации среди всех наноматериалов [2] и стало многообещающей альтернативой традиционно применяемым антимикробным средствам при лечении отсроченных ран [3], ожогов [4], язв, воспалений мочевого пузыря. [5] и другие болезни.

К сожалению, неконтролируемое производство и бездумное внутреннее использование коллоидов серебра для лечения таких заболеваний, как грипп, гепатит, пневмония, бронхит и даже ВИЧ-инфекция в 1990-х годах вынудили Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США ввести запрет на «предъявление любых терапевтическая или профилактическая ценность продукта с учетом того, что коллоидное серебро продается при многих заболеваниях без доказательств безопасности или эффективности »в августе 1999 года.В результате коллоидное серебро теперь рассматривается в США только как пищевая добавка и больше не перечислено в Британском национальном формуляре продуктов для лечения ран; кроме того, по данным Австралийского управления терапевтических товаров, «коллоидное серебро не используется в законных медицинских целях и нет доказательств, подтверждающих его маркетинговые заявления». Очевидно, что эти ограничения связаны с возможными побочными эффектами у людей, принимающих лекарства, содержащие наносеребро [6]. Имея в виду, что во внутреннем применении наносеребра нет внятного смысла, следует отметить, что для того, чтобы серебро было токсичным снаружи, оно должно всасываться в организм в достаточных количествах [7, 8].Наиболее частым изменением, наблюдаемым в коже в ответ на чрескожное всасывание серебра, является аргирия — изменение цвета кожи на голубой или голубовато-серый цвет [9]. В то же время хорошо известно, что аргирия не является серьезным заболеванием и имеет только отрицательный косметический эффект.

По нашему мнению, вышеупомянутая ситуация была вызвана не только неконтролируемым внутренним использованием серебра, но и отсутствием четкой научной информации о действии коллоидного серебра на живые клетки. Кроме того, недостаточно работ [10, 11], направленных на систематическое изучение действия НЧ серебра на живые клетки — ни бактерии, ни млекопитающие.Механизмы антибактериального действия серебра мало изучены.

Эта статья — еще один шаг в процессе понимания механизма действия НЧ серебра на живые клетки.

2. Экспериментальная часть

2.1. Chemicals

Моноолеат полиоксиэтилен (20) сорбитана (Tween 80) был приобретен у Acros Organics и использовался без дополнительной очистки и нитрата серебра (99,9 +%, Sigma-Aldrich), дигидрата цитрата натрия (99+%, Sigma-Aldrich), натрия боргидрид (Lancaster, 98 +%), бромид натрия (99 +%, Sigma-Aldrich), йодид натрия (99,9 +%, Sigma-Aldrich) и хлорид натрия (99 +%, Sigma-Aldrich) были аналитическими сорт и используется без дополнительной очистки.Все водные растворы готовили на бидистиллированной воде.

2.1.1. Синтез НЧ стабилизированных галогенидов серебра Tween 80

Получение стабилизированных галогенидов серебра Tween 80 коллоидного серебра выполняли следующим образом. Пятьдесят миллилитров водного раствора AgNO ₃ (0,0157 г, 9,2 × 10 ^-5 моль) по каплям добавляли к 50 мл водного раствора Tween 80 при интенсивном перемешивании. Смесь перемешивали 15 мин. Количество Tween 80 было отрегулировано до 0.05% (5 × 10 ^-4 г / мл ^-1 ) общей концентрации в реакционной смеси. Затем по каплям при интенсивном перемешивании добавляли 100 мл водного раствора галогенида натрия (9,2 × 10 ^-5 моль).

2.1.2. Синтез стабилизированных цитратом НЧ серебра

Получение стабилизированных цитратом НЧ серебра выполняли следующим образом. 50 мл водного раствора AgNO ₃ (0,0063 г, 3 , 7 × 10 ^-5 моль) по каплям добавляли к 50 мл раствора цитрата натрия при интенсивном перемешивании.Затем пошагово добавляли два 50 мл раствора с разной концентрацией NaBH ₄ (0,0008 г, 2,1 × 10 ^–5 моль и 0,0015 г, 4 × 10 ^–5 моль, соответственно). Количество цитрата натрия доводили до 3 × 10 ^-4 моль. Л ^-1 общей концентрации цитрата в реакционной смеси. Процесс восстановления проводился при комнатной температуре.

2.1.3. Синтез НЧ галогенида серебра

Перед синтезом галогенида серебра были приготовлены различные растворы: (а) 17 мг (0,0001 моль) AgNO ₃ растворяли в 50 мл воды; (б) 58.5 мг (0,0001 моль) NaCl растворяли в 50 мл воды; (c) 103 мг (0,0001 моль) NaBr растворяли в 50 мл воды; (d) 150 мг (0,0001 моль) NaI растворяли в 50 мл воды; (e) 20 мг цитрата натрия растворяли в 100 мл воды; (f) 2,3 мг 3-меркаптопропансульфоната натрия растворяли в 100 мл воды; (g) 100 мг полиоксиэтилен (80) сорбитанмоноолеат (Tween 80) растворяли в 100 мл воды.

Синтез проводили в трехгорлой колбе с механической мешалкой и двумя капельными воронками.50 мл раствора нитрата серебра и 50 мл раствора галогенида натрия медленно (1 мл в минуту) одновременно закапывали в 100 мл раствора стабилизатора при интенсивном перемешивании. После этого конечную дисперсию перемешивали около 60 минут и предварительно приготовленный раствор выдерживали в темноте под аргоном.

2.2. Измерения

Спектры поглощения в УФ и видимой областях регистрировали с использованием спектрофотометра Shimadzu UV-1800 (Япония), а для измерения видимых спектров использовали кварцевые кюветы с длиной пути 1 мм.

Электронные изображения и дифрактограммы были получены на просвечивающем электронном микроскопе (ПЭМ) Leo 912 AB Omega (Leo Ltd., Германия), работающем при 100 кВ. Образцы для исследования методом ПЭМ готовили, помещая каплю коллоидного раствора на покрытую формваром медную сетку, которую сушили при комнатной температуре. Распределение по всем размерам рассчитывали с помощью программы Femtoscan Online v. 2.2.91 (Центр перспективных технологий, Россия).

Измерения дзета-потенциала полученных дисперсий проводили на анализаторе Zetasizer Nano ZS со встроенным гелий-неоновым лазером мощностью 4 мВт, нм (Malvern Instruments Ltd.). Дзета-потенциал измеряли путем приложения электрического поля к дисперсии НЧ серебра с использованием метода лазерной доплеровской анемометрии.

Концентрацию ионов серебра в суспензиях НЧ определяли с помощью Ag ⁺ -ион-отобранного электрода (<>, Россия) в термостатической ячейке (3,0 мл), содержащей 0,01 М цитратный буфер (pH 6,0) при температуре 20 ° C при перемешивании. Калибровку электрода проводили фракционным добавлением 0,01 М раствора AgNO ₃ .В качестве электрода сравнения использовали электрод ЭСр-10101 / 4,2 (Россия).

2.2.1. Микробиологические тесты

Saccharomyces cerevisiae Клетки VKM Y-1173 культивировали во встряхиваемых колбах со средой Reader [12] с 2% глюкозой при 29 ° C до тех пор, пока культура не достигла логарифмической фазы роста [13]. После этого дрожжевые клетки дважды промывали дистиллированной водой, собирали центрифугированием при 5000 g в течение 15 мин и хранили в плотной водной суспензии (0,9–1.2) × 10 ⁹ клеток / мл на протяжении всего эксперимента (3-4 часа) при 0 ° C.

Для определения выживаемости S. cerevisiae после обработки НЧ серебра, стабилизированных нитратом и цитратом серебра, первичную суспензию клеток растворяли в дистиллированной воде (1: 100). Использовали исследуемые агенты (ионная форма серебра (Ag ⁺ ): 0,01 М водный раствор AgNO ₃ в концентрациях от 0,75 до 18 мкМ М). Были использованы следующие НЧ серебра: отрицательно заряженные стабилизированные цитратом Ag-НЧ в концентрациях, отличных от 1.От 8 до 18 мкМ М добавляли к суспензии клеток (~ 3 · 10 ⁷ клеток / мл), содержащей 0,5 мл 0,01 М цитратного буфера (pH 6,0), и инкубировали в течение 30 мин при 30 ° C. Суспензию необработанных клеток использовали в качестве контрольного (100% выживаемости) образца. Различные разведения (от 1:10 до 1: 1000) дрожжевых клеток (0,1 мл) высевали на чашки Петри с агар-агаром и инкубировали в течение 3–5 дней при 24–30 ° С, после чего подсчитывали количество колоний.

Для регистрации оттока K ⁺ из S.cerevisiae использовали ионно-селективные электроды (<>, США) и (<>, Россия) [13]. Измерения проводили в термостатической ячейке (3 мл) при 20 ° C при перемешивании. Суспензию клеток (60 мкМ М) добавляли в среду для измерений с 0,01 М цитратным буфером (pH 6,0), чтобы получить концентрацию клеток ~ 3 × 10 ⁷ клеток / мл. Общий уровень S. cerevisiae внутриклеточного K ⁺ определяли путем добавления 20 мкМ M Ag ⁺ к суспензии клеток или после термообработки при 70 ° C в течение 15 мин на водяной бане.Уровни K ⁺ , определенные обоими методами, практически равны. Общий уровень K ⁺ , определенный на нативных дрожжевых клетках, был принят за 100% в экспериментах, направленных на изучение эффектов агентов, содержащих наносеребро.

3. Обсуждение

3.1. Характеристика НЧ

Способ получения НЧ серебра, стабилизированного цитратом, заключался в восстановлении водного раствора нитрата серебра, содержащего цитрат натрия в качестве нековалентного стабилизатора, раствором NaBH ₄ .Оптимальная концентрация цитрат-аниона оказалась в хорошем соответствии с [14]. Приготовленные наночастицы серебра имели средний диаметр около 10 нм, были хорошо диспергированы и заряжены отрицательно, а их дзета-потенциал составлял -мВ при pH = 7,8. Дисперсия наносеребра была стабильной по крайней мере через 6 месяцев после синтеза и демонстрировала полосы поверхностного плазмона при 401 нм, соответствующие нековалентно стабилизированным НЧ Ag (Фигуры 1 и 2).