Ппп в пфо: Официальный сайт полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе

Официальный сайт полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе

Помощник полномочного представителя Сергей Козлов принял участие в заседании межведомственной рабочей группы по вопросу восстановления рынка труда

16 марта 2023

«iВолга» с продолжением: в Самаре окружная команда обсуждает новую концепцию проведения форума в 2023 году

16 марта 2023

Игорь Комаров оценил социально-значимые объекты Самарской области

16 марта 2023

Помощник полномочного представителя Президента РФ в ПФО Владимир Колчин провел прием граждан

16 марта 2023

Рабочая поездка Игоря Комарова в Самару

16 марта 2023

Выпускников профильных российских вузов ждут на предприятиях Удмуртии

15 марта 2023

В Самаре пройдет Совет при полномочном представителе Президента РФ в ПФО

15 марта 2023

Игорь Буренков провел совещание по общественно-политическому развитию Удмуртской Республики

14 марта 2023

Заместитель полномочного представителя Игорь Буренков обсудил с руководителями Молодежных парламентов ПФО актуальные вопросы социального самочувствия в молодежной среде

14 марта 2023

На заседании Межведомственной комиссии под руководством заместителя полпреда Игоря Паньшина обсудили готовность к паводку и пожароопасному периоду

14 марта 2023

Стартует новый сезон фестиваля стрит-арта ПФО «ФормART»

14 марта 2023

Игорь Комаров совершит рабочую поездку в Ижевск

14 марта 2023

Помощник полномочного представителя Сергей Козлов принял участие в заседании коллегии Росавиации

10 марта 2023

Помощник полномочного представителя Сергей Козлов принял участие в заседании межведомственной рабочей группы по вопросу восстановления рынка труда

9 марта 2023

Сергей Козлов принял участие в совещании по обсуждению актуальных вопросов цифровой трансформации

6 марта 2023

В мероприятиях рабочей поездки вице-премьера России Дмитрия Чернышенко в Уфе принял участие заместитель полпреда Алексей Кузьмицкий

3 марта 2023

Помощник полномочного представителя Сергей Козлов принял участие в заседании межведомственной рабочей группы по вопросу восстановления рынка труда

2 марта 2023

На заседании Координационного совета отделений РСПП в ПФО обсуждены вопросы подготовки кадров для промышленности и достижения технологической независимости

2 марта 2023

В Марий Эл наградили победителей Кубка Приволжского федерального округа по спортивному туризму на лыжных дистанциях

2 марта 2023

Самарская область присоединилась к окружному общественному проекту «Ментальное здоровье»

1 марта 2023

Показать еще

Доклад помощника полномочного представителя Президента РФ в ПФО Леонида Гильченко на Всероссийской практической конференции по реализации Федерального закона «О порядке рассмотрения обращений граждан Российской Федерации».

Уважаемые коллеги, дорогие друзья!

По поручению полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе позвольте приветствовать участников Всероссийской практической конференции о ходе реализации Федерального закона «О порядке рассмотрения обращений граждан Российской Федерации».

Знаменательно, что наша Конференция проходит в Казани – столице Республики Татарстан, на территории Приволжского федерального округа.

В Поволжье реально действует механизм работы с обращениями граждан, на протяжении 7 лет в едином формате осуществляет свою деятельность широкомасштабная сеть общественных приемных полномочного представителя.

Вступление в силу Федерального закона «О порядке рассмотрения обращений граждан Российской Федерации» существенно поддержало сложившуюся систему, укрепило наши позиции в данной сфере, позволив активизировать работу с обращениями граждан региональных и местных органов власти, территориальных федеральных органов, юридического сообщества.

Хотелось бы отметить особую значимость происходящего сегодня события. Очень важно, что мы с вами имеем возможность, основываясь на богатом практическом опыте работы с обращениями граждан, обобщить предложения и выработать наиболее оптимальные механизмы по реализации данного Федерального закона.

Мы рассматриваем работу с обращениями граждан, их анализ – как один из критериев оценки деятельности органов власти всех уровней, нашей с вами работы.

Аппарат полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе уделяет этой работе особое внимание.

На сегодняшний день наша сеть общественных приемных полномочного представителя включает в себя 14 региональных и 65 территориальных общественных приемных. За период с 2000 года по настоящее время с учетом прямых телефонных линий Президента России отработано почти 200 000 письменных обращений. Только в 2006 году аппаратом полномочного представителя отработано более 20 тысяч письменных обращений. С января по 1 июня 2007 года – отработано более 8 тысяч письменных обращений. За весь период работы по округу проведено около 800 прямых телефонных линий и свыше 400 круглых столов, посвященных актуальным вопросам, волнующим граждан. Только за эти полгода в наших приемных главными федеральными и федеральными инспекторами, представителями федеральных органов власти, руководителями общественных приемных, специалистами общественных организаций – наших партнеров на личных приемах принято более 6 тысяч человек.

В связи с принятием Федерального закона N 59-ФЗ «О порядке рассмотрения обращений граждан Российской Федерации» в аппарате полномочного представителя еще в мае 2006 года был подготовлен план  мероприятий по обеспечению введения его в действие со 2 ноября 2006 года. Основные направления данного плана: предварительный анализ регионального законодательства, регламентирующего работу с обращениями граждан, на соответствие  нормам Федерального закона; обобщение предложений граждан по реализации данного Федерального закона; устранение выявленных нарушений и высказанных гражданами замечаний; проведение межведомственных региональных совещаний по вопросам готовности местных органов власти к его реализации; всемерная популяризация и разъяснение норм и требований Федерального закона, прав граждан и обязанностей органов власти, вытекающих из вступления Закона в силу.

Участниками проведенных по инициативе аппарата полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе совещаний были представители региональных и местных органов власти, сотрудники территориальных федеральных органов. В ходе совещаний обсуждались мероприятия, направленные на информирование населения о Законе, вырабатывались рекомендации для государственных и муниципальных органов власти по обеспечению необходимых мер, направленных на его успешную реализацию. Совещания использовались, в том числе, как возможность обмена опытом представителей органов власти всех уровней в работе с обращениями граждан.

Мощным стимулом в реализации данного плана стало проведение во всех регионах ПФО личных приемов граждан полномочным представителем Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе  А.В.Коноваловым. В процессе подготовительной работы таких приемов организовывалось оповещение населения через  региональные электронные и печатные СМИ, осуществлялась предварительная запись граждан.

В ходе подготовительной работы поступило 1216 обращений. Полномочный представитель Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе А.В. Коновалов принял более 200 человек. В рамках приемов прошли встречи с представителями ряда общественных организаций, в т.ч. ветеранами Вооруженных Сил России, лидерами профсоюзных и молодежных организаций.

Обращения граждан, не рассмотренные на приеме у полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе, прорабатывались главными федеральными инспекторами с привлечением соответствующих органов власти. При необходимости заявители приглашались на приемы к заместителям и помощникам полномочного представителя, начальникам департаментов аппарата в ходе их рабочих поездок в регионы округа.

По результатам приемов на имя Руководителя Администрации Президента Российской Федерации полномочным представителем направлен ряд предложений, в т. ч. по восстановлению почетных званий и государственных наград для многодетных матерей, по проблемам военнослужащих и военных пенсионеров.

В целях обеспечения мер по вступлению Федерального закона в силу во всех приемных полномочного представителя были подготовлены информационные материалы по разъяснению положений принятого Федерального закона, в средствах массовой информации размещались материалы с необходимыми комментариями. После  проведенной работы совместно с региональными органами исполнительной власти и депутатами инициированы изменения в действовавшие региональные нормативные акты, регламентирующие работу с обращениями граждан в Республике Мордовия,  Чувашской Республике, Пензенской области, Пермском крае, Оренбургской областях. Приняты новые региональные правовые нормативные акты в Республике Башкортостан, Республике Марий Эл, Саратовской и Ульяновской областях. 

Итоги проведенной работы обсуждались на специальном заседании Окружного совета общественных приемных в декабре 2006 года (г. Ульяновск).

В 2007 году мы продолжаем работу по реализации Федерального закона об обращениях граждан. С учетом его требований в аппарате полномочного представителя разработан новый регламент деятельности аппарата, изменена инструкция по делопроизводству и работе с поступающими в аппарат обращениями граждан.

Особое внимание уделяется обращениям граждан, в которых сообщаются факты нарушений данного Федерального закона. При организации выездных приемов проводятся рабочие встречи с ответственными сотрудниками местных администраций по вопросам организации работы в рамках действующего Федерального закона. Из наиболее значимых результатов работы в данном направлении можно отметить:

— семинары и совещания, организованные в региональных приемных со студентами ВУЗов (юридических факультетов и факультетов «государственное и муниципальное управление») по вопросам реализации Федерального закона;

— организованный в региональных общественных приемных сбор от населения предложений и замечаний по контролю за реализацией Федерального закона. На основании этих замечаний и предложений подготовлен список организаций, руководители которых не имели графика своих приемов. Устранение данного нарушения находилось на контроле у  главных федеральных инспекторов.

— выработанные в региональных общественных приемных формы ежеквартальной отчетности территориальных федеральных органов исполнительной власти в адрес главного федерального инспектора. Это позволяет контролировать соблюдение Федерального закона при рассмотрении обращений граждан, сроки рассмотрения обращений, а также осуществление руководителями территориальных органов систематических личных приемов граждан.

Как уже отмечали ранее выступавшие, необходимость повышения правовой культуры населения обусловлена возрастающей потребностью людей в получении качественной и доступной для всех слоев населения правовой помощи и защиты.

Произошедшие за последние годы изменения в жизни общества привели к масштабным изменениям в законодательстве, принятию целого ряда основополагающих нормативных правовых актов, регулирующих различные сферы деятельности государства, в том числе вопросы социальной защиты и работы с обращениями граждан.

В Российском законодательстве существуют и иные нормативные акты, которые можно и нужно использовать в работе с обращениями граждан, в оказании практической помощи населению. Речь идет, в первую очередь, об организации бесплатной юридической помощи, которая возложена на органы государственной власти субъектов Федерации требованиями Федерального закона от 6 октября 1999 года «Об общих принципах организации законодательных (представительных) и исполнительных органов государственной власти субъектов Российской Федерации» и Федерального закона от 31 мая 2002 года «Об адвокатской деятельности и адвокатуре в Российской Федерации». В соответствии с этими Федеральными актами к полномочиям органов государственной власти субъекта Федерации относится решение вопросов материально — технического и финансового обеспечения оказания адвокатской помощи в труднодоступных и малонаселенных местностях; определение порядка предоставления компенсации расходов адвокату, оказывающему бесплатную юридическую помощь гражданам РФ в порядке, установленном Законом об адвокатуре; определение перечня документов, необходимых для получения гражданами РФ юридической помощи бесплатно, а также порядка предоставления указанных документов. Однако в Республике  Мордовия, Кировской и Оренбургской областях на настоящее время отсутствуют нормативные правовые акты по вышеуказанным вопросам. При этом соотношение малоимущих граждан к общему количеству населения составляет: в Республике Мордовия – 28,8%, Кировской области – 26,8% и Оренбургской области – 22,2%. Т.е. речь идет о создании правовых условий защиты не менее четверти всего населения в этих регионах.

В нашем взаимодействии с Ассоциацией законодателей ПФО мы готовы оказать необходимое содействие, чтобы органы государственной власти Республики Мордовия, Кировской и Оренбургской областей приняли соответствующие нормативные правовые акты, обеспечивающие реальную защиту прав и законных интересов малоимущих граждан.

Со своей стороны мы включились в работу по повышению правовой грамотности населения. В 2007 году в Приволжском федеральном округе началась работа по созданию комплексных «Центров социально – правовой поддержки и просвещения граждан» с использованием опыта сети наших общественных приемных. Основная идея состоит в том, чтобы объединить имеющиеся возможности, опыт и ресурсы всех заинтересованных структур для проведения постоянной работы среди населения по повышению правовой грамотности. Создание таких Центров – это не создание еще одной структуры, декларирующей работу с гражданами, а объединение действенных механизмов предоставления социально – правовой информации для населения, оказания реальной практической помощи гражданам с помощью уже существующих структур в органах власти и общественных организациях. Мы поддерживаем и привлекаем к практической деятельности те организации, в деятельности которых присутствует гражданская, гуманитарная и социальная инициатива. Объединить эту работу, сделать ее более доступной, прозрачной – одна из главных задач Центров.

Такая работа невозможна без широкого взаимодействия органов государственной и муниципальной власти, учреждений высшего образования, средств массовой информации, общественных объединений и  организаций. Основными нашими партнерами в создании Центров являются партия «Единая Россия», общественная организация «Ассоциация юристов России», окружной и региональные Советы ректоров ВУЗов.

По инициативе главных федеральных инспекторов практически во всех регионах прошли рабочие встречи с участниками данного проекта. На этих совещаниях были определены принципы сотрудничества и типовые механизмы взаимодействия. Участники совещаний определили основные направления совместной деятельности, разработали графики проведения консультаций, определили  ответственных за их проведение. Были подготовлены и оформлены информационные стенды и материалы. Для закрепления данной работы подписаны «Соглашения о сотрудничестве», которое, надеемся, будет плодотворным и долговременным. Только за последний месяц такие соглашения подписаны в Республике Мордовия, Республике Марий Эл, Республике Татарстан, Республике Башкортостан, Нижегородской, Пензенской и Оренбургской областях.

В настоящее время работа Центров разворачивается как на базе региональных общественных приемных полномочного представителя, так и на базе общественных приемных региональных отделений партии «Единая Россия» и структурных подразделений «Ассоциации юристов России», а также существующих и создающихся пунктов вузовских юридических клиник.

Так, в рамках мероприятий Года молодежи в ПФО совместно с Советом ректоров ВУЗов ПФО проработаны организационные вопросы по включению в работу Центров студентов социальных и правовых специальностей. Это направление работы осуществляется в рамках еще одного проекта нашего аппарата, инициированного полномочным представителем Президента РФ в ПФО: создание и развитие в регионах округа Малых академий государственного управления (МАГУ). Студенты с активной жизненной позицией, молодёжные лидеры привлекаются к работе в юридических клиниках, наших общественных приемных, факультативно им читают лекции руководители региональных и федеральных органов власти. Данный проект позволяет в процессе обучения слушателям на практике, в том числе и в различных органах власти, применять полученные на лекциях теоретические знания. После специальных экзаменов, которые проходят в виде защиты проектов по различным вопросам нашей жизни, ребята получают специальный сертификат, подписанный полномочным представителем и зачисляются в кадровый резерв. В июне этого года  состоялся первый выпуск слушателей МАГУ в Республике Татарстан, Пермском крае, Саратовской и Нижегородской областях.

В соответствии с предложением полномочного представителя, поддержанным Координационным Советом ПФО по государственной кадровой политике и Советом ректоров ПФО, в новом учебном году запланировано создание Малых академий во всех 14-ти регионах ПФО с двухлетнем периодом обучения и приоритетом на практическую работу, с тем чтобы усилить составляющую обучения.

В преддверии Всероссийской практической конференции по инициативе аппарата полномочного представителя Президента Российской Федерации в Приволжском федеральном округе в регионах округа с 7 мая по 7 июня т. г. проведены комплексные тематические совещания. В них приняли участие сотрудники аппаратов ГФИ, общественных приемных, представители территориальных органов федеральных органов власти, региональных органов государственной власти и местного самоуправления, отвечающие за работу с обращениями граждан. На совещаниях обсуждены итоги проведённой работы по созданию условий реализации Федерального закона об обращениях граждан, перспективы развития регионального законодательства, регламентирующего работу с обращениями граждан, механизмы работы административных регламентов рассмотрения обращений граждан в органах власти и управления.

Некоторые итоги совещаний: общие недостатки, которые носят, как правило, организационный характер, в реализации Федерального закона (по материалам выступлений на совещаниях работников прокуратуры) заключаются в следующих моментах: не везде соблюдаются сроки рассмотрения обращений, в органах власти и управления зачастую отсутствует информация о графиках приемов руководителей. Иногда происходит подмена личного приема на ответы на вопросы в телевизионном или радио эфире, слабо ведется аналитическая работа по обращениям граждан.

Итогом проведения региональных совещаний стали также предложения по совершенствованию и конкретизации ряда норм Федерального закона об обращениях граждан. Думается, что такую обобщающую аналитическую работу надо сосредоточить сейчас в Управлении Президента России по работе с обращениями граждан, с тем, чтобы, избегая поспешности и коньюктурности, по истечении не менее года работы по Федеральному закону, сформулировать необходимые поправки и внести их в Федеральное Собрание от имени Президента РФ.

В ходе предварительной работы по подготовке материалов к Всероссийской практической конференции о ходе реализации Федерального закона от 02 мая 2006 года N59-ФЗ «О порядке рассмотрения обращений граждан Российской Федерации» к нам в аппарат поступали предложения также о необходимости усиления взаимодействия с избирательными комиссиями. Здесь есть рациональное зерно. Это связано с тем, что в период избирательной компании усиливается поток различных обращений как от политических партий, так и от самих избирателей в различные органы власти и управления. Механизмы взаимодействия и сотрудничества могут, на наш взгляд, быть различны: «прямые телефонные линии», «круглые столы», разработка и распространение информации по выборным вопросам. Главное – чтобы такое взаимодействие не являлось попытками оказания влияния на деятельность территориальных избиркомов.

Мы рассчитываем, что реализуемый аппаратом ППП РФ в ПФО во взаимодействии с органами власти всех уровней комплекс мероприятий позволит обеспечить выполнение поручения Президента Российской Федерации по итогам работы с обращениями граждан в 2006 году, предусматривающего необходимость активизировать роль общественных приемных полномочных представителей Президента Российской Федерации в федеральных округах как центров взаимодействия с институтами гражданского общества в преддверии избирательных компаний 2007 – 2008 годов.

Спасибо за внимание!

Источник: http://pfo.gov.ru//?id=12960

Возврат к списку

дешевых рейсов из Прозерпина в Пафос от самой низкой цены | ППП — ПФО

×

Алжир Ангола Аргентина Австралия Бахрейн Бангладеш Ботсвана Бразилия Камерун Канада Чили Китай Колумбия Конго Берег Слоновой Кости Египет Эфиопия Франция Габон Германия Гана Гонконг Индия Индонезия Ирак Ирландия Италия Япония Иордания Кения Кувейт Ливан Ливия Макао Малайзия Мали Маврикий Мексика Марокко Мозамбик Намибия Нидерланды Новая Зеландия Нигерия Оман Пакистан Палестина Филиппины Польша Португалия Катар Руанда Саудовская Аравия Сенегал Сингапур Южная Африка Южная Корея Испания Шри-Ланка Судан Швеция Швейцария Тайвань Танзания Таиланд Тунис Турция ОАЭ Уганда Великобритания Соединенные Штаты Вьетнам Замбия Зимбабве العربية Английский

• Дом >
• Дешевые перелеты >
• Прозерпина на Кипр >
• Прозерпина в город Пафос >

COVID-19 Ограничения на поездки в город Пафос

Я

и лечу с

Город Пафос, Кипр

Большинству путешественников из Прозерпины разрешен въезд в город Пафос.

Обновлено 9 марта 2023 г. Источник: Туризм Кипра.

Нет рекомендаций по поездкам

Как далеко город Пафос от Прозерпины?

Расстояние полета между Прозерпиной и Пафосом составляет 13628км . Проверьте все доступные рейсы на Wego.

Популярные направления из Пафоса

• Пафос — Амман
• из Пафоса в Гватемалу
• Пафос — Кёльн
• Пафос — Афины
• Пафос — Рим
• Пафос — Дубай
• Пафос — Агадир
• Пафос — Каир
• Пафос — Берлин
• из Пафоса в Доминику

Популярные направления от Прозерпины

• Прозерпина в Йоханнесбург

Популярные отели в городе Пафос

• Амфора Отель & Сьютс
• Авлида Отель
• Константину Брос Азимина Сьютс Отель
• Кэпитал Кост Резорт & Спа
• Пафос Гарденс Холидей Резорт
• Роман Бутик Отель
• Синтиана Бич
• Кинг Эвелтон Бич Отель & Резорт
• Акти Бич Виладж Резорт
• Венус Бич Отель

Отели в популярных местах

• Отели в Каире
• Отели Бангкока
• Отели в Стамбуле
• Отели в Дубае
• Отели Касабланки
• Отели в Исламабад
• Отели Кувейта
• Отели в Кочин
• Отели в Абу-Даби
• Отели в Маниле

Wego ищет лучшие предложения на этих и многих других сайтах.

Сверхчувствительное безметочное определение белково-мембранного слоя Взаимодействие на примере внедрения токсина в липосому

• Список журналов
• Выбор автора ACS
• PMC⁶¹

Журнал физической химии Letters

J Phys Chem Lett. 2022 14 апреля; 13(14): 3197–3201.

Опубликовано в сети 4 апреля 2022 г. doi: 10.1021/acs.jpclett.1c04011

, ^† , ^{† ‡} , ^§ , ^∥ , ^⊥ , ^⊥ , ^§ , ^∥ and ^{* † #}

Author information Примечания к статье Информация об авторских правах и лицензии Отказ от ответственности

Дополнительные материалы

Измерение высокой аффинности связывание белков с мембранами липосом остается проблемой. Здесь мы показываем сверхчувствительное и прямое обнаружение связывания белка с липосомными мембранами с использованием второй высокопроизводительной гармоническое рассеяние (СВС). Перфринголизин О (ПФО), порообразующий токсин с высокой мембраноселективной вставкой в ​​богатые холестерином используются мембраны. ПФО встраивается только в липосомы с холестерином концентрация >30%. Двадцать молярных процентов холестерина приводят к ни один Отклонение СВС-сигнала и образование пор по данным криоэлектронной микроскопии ПФО и липосомы. PFO встраивается в богатые холестерином мембраны крупных однослойных везикул в водном растворе с K _d = (1,5 ± 0,2) × 10 ^–12 М. Наши результаты демонстрируют многообещающий подход к исследованию белково-мембранных взаимодействия ниже субпикомолярных концентраций в немаркированных и неинвазивным способом на 3D-системах. Что еще более важно, объем образец белка очень мал (<10 мкл). Эти выводы позволяют обнаружение белков с низким содержанием и их взаимодействие с мембраны.

Липидные мембраны служат центром для жизненно важных биохимических реакций и играют важную роль в химических сигнализация. ¹ Мембранно-белковые взаимодействия характеризуются редким, высокоаффинным и высокоспецифическим связыванием взаимодействия, приводящие к определенным реакциям. ² Мембранные каналы и поры являются примерами результата таких взаимодействий, хранение определенных химических веществ внутри или снаружи клетки или органеллы для поддержания функций организма. Поры также используются бактериями. для противоположного эффекта: вторгаться в клетки, эффективно пробивая отверстие в мембране. ³ Эти порообразующие токсины (PFT) обладают высокоспецифическими мембранными взаимодействиями, часто требующими специфические рецепторы, определенный состав мембран и водная среда. Одним из примеров является перфринголизин O (PFO, изображенный на A), который является представителем из семейства холестеринзависимых цитолизинов. ПФО представляет собой растворимую пролонгированную 4-доменный белок, богатый β-листами и продуцируемый патогенный Clostridium perfringens . ⁴ Было показано, что PFO избирательно взаимодействует с богатыми холестерином мембранами ⁵ где он самостоятельно собирается в бочкообразную структуру шириной 38 нм размером до 50 мономеров ⁶ (см. А). Получена мономерная структура ПФО. рентгеновской кристаллографией, ⁵ , в то время как его олигомер структура характеризуется объединением информации о мономерная форма, данные криоэлектронной микроскопии (крио-ЭМ) пневмолизина, ⁷ и моделирование молекулярной динамики (МД). ⁸ B показаны крио-ЭМ-изображения однослойных пластин диаметром 120 нм. везикулы (LUV) с мембранами, состоящими из сфингомиелина (SM) и холестерин (Chol) при 50:50 мол. % (1B i, iii, iv) и при 80:20 мол. % (Б, ii). PFO четко демонстрирует сильное взаимодействие с мембраной в изображения i, iii и iv, тогда как на ii взаимодействие не наблюдается. Этот согласуется с предыдущими исследованиями ^7,9 , которые полностью показывают встроенные поры в мембранах, содержащих 50:50 мол. % SM:Chol.

Открыть в отдельном окне

PFO структуру, взаимодействие PFO-мембраны и высокую пропускную способность Установка рассеяния второй гармоники. (A) Структура PFO:PFO мономер с ундекапептидом, расположенным на домене 4, который связывается с холестерин показан красным, вставка мембраны PFO, состоящая из одной поры из 40 протомеров и вид сверху на такую ​​пору. Эта фигура адаптирована из ссылки (3). (Б) Крио-ЭМ изображения SM:Chol 50:50 мол. % (i) и 80:20 мол. % (ii) измеренные LUV при той же концентрации ПФО в растворе ( с = 9 × 10 ^–6 М). 2D-классификации крио-ЭМ изображения олигомеризации на мембране СМ:Хол 50:50 мол. % из сбоку (iii) и сверху (iv). Масштабная линейка соответствует 200 нм для i и ii и до 20 нм для iii и iv соответственно. (С) Иллюстрация установки СВС. Все измерения были записаны со всеми поляризованными лучами. в горизонтальной плоскости, что приводит к комбинации поляризации PPP. Для одноугловых экспериментов угол рассеяния θ был равен установить на 45°, что соответствует углу с максимальным рассеянием интенсивность.

Для понимания белково-мембранного взаимодействие за пределами кристаллографический уровень, в настоящее время используются методы кристаллического кварца микровесы (QCM), ¹⁰⁻¹² флотационные анализы, ¹³ поверхностные плазмонный резонанс (ППР), ¹⁴⁻¹⁸ калориметрические методы, ¹⁹ и другие приближается флуоресценция. ²⁰⁻²² Хотя эти методы обеспечивают информации о кинетике связывания, они требуют большого количества образец и чувствительность ограничены; а именно, не позволяет обнаружение белков с низким содержанием, концентрация которых ниже микромолярности. Помимо ограниченной чувствительности, флуориметрия требует маркировки/связывания флуорофора, который может изменить химические и/или структурные свойства мембранных белков-мишеней, тем самым нарушая нативное связывание сродство с мембраной. Точно так же QCM и SPR являются косвенными методами. которые требуют определенного субстрата, что ограничивает применение в основном к плоским модельным мембранам, а калориметрия отсутствует специфичность к событию связывания. Резонансное отражение второй гармоники генерация (SHG) недавно успешно применялась и предлагалась как альтернатива иммуноанализам ^23,24 с Фотоны SH выходят непосредственно из интерфейса и, таким образом, облегчают прямое обнаружение межфазных событий. В этих экспериментах фотоны ВГ были созданы по схеме полного внутреннего отражения от УФ-резонансного взаимодействие (266 нм). Дальнейшие улучшения должны допускать нерезонансные обнаружение с высокой чувствительностью от любого типа реалистичной мембраны интерфейс, такой как липосома.

Здесь мы показываем метод для обнаружения взаимодействия белков с липосомами с помощью межфазная вода мембраны в качестве контрастного вещества и демонстрирует чувствительность в фемтомолярном диапазоне, используя небольшие объемы белкового раствора. Высокопроизводительное рассеяние второй гармоники ²⁵ (К) был показал, что это метод без меток, использующий обнаружение межфазных вода на скрытых поверхностях в водном растворе, например, липосомы ^26,27 и капли масла. ²⁸ В нерезонансном Эксперимент СВС, импульсный фемтосекундный лазерный луч ближнего инфракрасного диапазона взаимодействует липосомальным раствором. Фотоны ВГ испускаются всеми нецентросимметричными молекулы, распределенные нецентросимметрично. Поскольку интерфейс вода распределена нецентросимметрично, а объемная жидкость — нет, SHS обладает исключительной межфазной чувствительностью. Пограничная вода превосходит липиды с соотношением >1:100, а за счет нерезонансного характер процесса, обе составляющие реагируют электромагнитным поля, имеющие равные величины. Поскольку интенсивность ВГ масштабируется квадратично с излучаемым электромагнитным полем, СВС в общем случае отчеты о гидратации мембраны, обнаруживая чистое ориентационное распределение молекул воды вдоль нормали к поверхности. Реакция воды был успешно использован для количественной оценки физико-химических межфазных свойства, такие как электростатический потенциал (Φ ₀ ) и степень упорядоченности воды (количественно определяемая вторым порядком восприимчивость, χ _{с, 2} ⁽²⁾ ). ^29,30 Недавнее исследование также показано, что изменения в мембранной воде могут помочь понять взаимодействие α-синуклеина и водной среды липосомы. ³¹ Опираясь на эти выводы, мы используем высокопроизводительный СВС для исследования связывания трансмембранного белок, взяв в качестве примера PFO (A в качестве иллюстрации). Мы демонстрируем чувствительность в фемтомолярном диапазоне и определить скорость связывания PFO-липосомы (1,5 ± 0,2) × 10 ^–12 М.

Открыть в отдельном окне

ПФО-везикулярное связывание. (A) Иллюстрация вставки PFO в 50:50 мол. % соотношение SM:Chol LUV, окруженных водой. Вставка пор ожидается, что он будет модулировать интенсивность СВС, удаляя значительный часть мембраны. Без этой мембраны количество межфазных ориентированных молекул воды уменьшается из-за отсутствия индуцированного мембраной анизотропия (синий цвет обозначает водную среду, а вода выделены молекулы, вносящие вклад в сигнал СВС; для простоты молекулярно сложное взаимодействие показано здесь как образование отверстия). (B) Измеренный ζ-потенциал 50:50 мол. % SM:Chol LUV с 0 M и 10 ^–9 М ПФО. (C) СВС-паттерны 50:50 мол. % SM:Chol LUV с 0 M (красные кружки), 10 ^–12 M (синие треугольники) и 10 ^–9 M (черные квадраты) PFO, записанное с использованием комбинации поляризации PPP. Вставка показывает нормализованные паттерны СВС. Планки ошибок были определены как стандартное отклонение от 20 измерений. (D) разница интенсивности SH (Δ S ) под углом с максимальной интенсивностью (θ _макс = 45°) в зависимости от концентрации PFO в логарифмическом выражении шкала для двух различных составов мембран LUV, SM:Chol 50:50 моль % (синие кружки) и 80:20 мол. % (красные квадраты). Δ S – разница между когерентным сигналом от везикул с заданной концентрации ПФО и везикул без ПФО (с наибольшее количество межфазно-ориентированных молекул воды). Ошибка бары были определены как стандартное отклонение от 100 измерений. Данные SM:Chol 50:50% подгоняются с использованием уравнения 5, что дает константу диссоциации K _d = (1,5 ± 0,2) × 10 ^–12 M.

Для проверки пригодности СВС измерения для сверхчувствительных обнаружение трансмембранных белково-мембранных взаимодействий, мы использовать события взаимодействия белка PFO с липидной мембраной, сравнивая две мембранные системы B, используя соотношение молярных % SM:Chol 50:50 и 80:20 соотношение мол. % SM:Chol, при котором связывание/вставка белка происходит только в первом случае. показаны значения ζ-потенциала (B) и картины СВС-рассеяния (C), полученные для дисперсий LUV с радиусом 120 нм и с мол. % соотношением SM:Chol 50:50. Добавление в раствор 1 пМ и 1 нМ ПФО не изменяет ζ-потенциал. но изменяет интенсивность паттернов СВС. Интенсивность ВГ возникает из-за когерентного рассеяния света ориентированной межфазной водой. Эта вода либо ориентирована химическими межфазными взаимодействиями (например, водородная связь, диполь-диполь или ван-дер-ваальсова связь). взаимодействия) или межфазными электростатическими эффектами. В рамках теория нелинейного рассеяния света, которая используется для описания этого типа данных, оба взаимодействия фиксируются различными физическими параметрами, а именно межфазная восприимчивость второго порядка (χ _{s ,2} ⁽²⁾ ) и поверхностный потенциал (Φ ₀ ). Поскольку мембрана событие взаимодействия PFO интерпретируется как результат появления отверстия, влияние на межфазную структуру воды уменьшить количество межфазно ориентированных молекул воды за счет отсутствие индуцированной мембраной анизотропии, так как межфазная поверхность уменьшенный (см. иллюстрацию А). Следовательно, изменение реакции СВС возникает от изменения поверхностной восприимчивости, а не от поверхностный потенциал. Это подтверждается данными по ζ-потенциалу, который не показывает изменений, вызванных PFO. Получена дополнительная проверка по форме картин рассеяния для разных концентраций PFO: поскольку χ _s,2 ⁽²⁾ и Φ ₀ термины взвешены по разным функции формфактора, зависящие от угла рассеяния, картины СВС не меняют форму при увеличении концентрации PFO. Это значит что изменения интенсивности должны происходить либо от изменений χ _с,2 ⁽²⁾ , либо от изменений в Φ ₀ , но не от одновременных изменений.

когерентные нормированные картины интенсивности СВС ( S (2ω, θ)) из C, таким образом, являются суммой диаграмм рассеяния отдельных голые LUV ( с _L (2ω, θ)) и LUV, содержащие белок PFO ( s _LP (2ω, θ)) вставлен. С N ₀ исходное количество липосом и N количество липосом со связанным белком, получим для суммарной интенсивности:

1

Соотношение между когерентной интенсивностью ВГ ( I (2ω, θ)) и нанесенный на график отклик ( S (2ω, θ)) задается уравнением S1 в SI. Подтвердив, что реакция SHS возникает чисто по степени упорядочения воды на границе раздела мы выполнили измерения при угле рассеяния максимальной интенсивности (θ _макс , С). D отображает разница в отклике ВГ, Δ S = | S (2ω, θ) – S _L (2ω, θ)|, где S _L (2ω, θ) – нормированная когерентная интенсивность СВС в воде из липосом без ПФО в зависимости от концентрации ПФО в растворе. Мы используем два типа LUV, состоящих из 80:20 мол. % (красные квадраты) и 50:50 мол. % (синие кружки) SM:Chol соответственно. Первые LUV с более низким содержанием Chol не показывают видимых изменений в интенсивность СВС, в то время как с 50 мол. % Chol проявляют постепенное увеличение примерно на 100 фМ и быстрое увеличение примерно на 1 пМ ПФО. Разница в интенсивности SH выравнивается при 10 нМ, что соответствует насыщение системы означает, что белки больше не могут связываться к липосомам. Это вызванное белком изменение интенсивности напоминает изотерму Ленгмюра. Мы описываем это взаимодействие как равновесие, чтобы получить N (количество липосом предполагается наличие (пред)поры (A)) для получения выражения для измеренной интенсивности СВС разница. Связывание PFO (P) с липосомами (L) может упрощенно описывается как

2

Далее следует кинетическое уравнение, связывающее скорость вставки ( k ₁ ) к изменению количество липосом с ПФО ( N ):

3

В равновесных условиях ( dN / dt = 0) имеем тогда

4

где K _d = k _–1 / k ₁ is константа равновесного связывания/встраивания PFO. Соединив это с уравнением 1, измеренная разница в когерентной интенсивности ВГ D тогда становится

5

Применяя это выражение к данным в D, мы получаем константу внедрения пор K _d = (1,5 ± 0,2) × 10 ^–12 M.

Используя высокопроизводительный метод СВС с угловым разрешением, мы, таким образом, демонстрируют сверхчувствительное обнаружение связывания белка с липосомами. Это представляет особый интерес, поскольку стандартные методы требуют работы на поддерживаемом липидном бислое или прикрепленных к поверхности пузырьках. QCMD или другие анализы связывания на основе массы теряют чувствительность при массе менее нанограммов белка. Технологии на основе SPR требуют кинетических данных для записи и моделирования, что ограничивает их чувствительность в микромолярный диапазон. Кроме того, представленный здесь СВС не требует любого плоского субстрата и может использовать свободно плавающие липосомы в водная среда. Более того, полученные данные СВС поддаются количественной оценке. и может быть расширена следующими способами: Полученные значения для константа связывания, поверхностная восприимчивость воды второго порядка, и электростатический поверхностный потенциал ²³ может быть связан с моделированием МД, как это делается в настоящее время для Рентгеновская кристаллография и криоэлектронная микроскопия. На самом деле, если прогноз МД молекулярные конформации были бы использованы здесь, это было бы можно явно вычислить ответ SHS, а не использовать более упрощенное предположение, как было сделано здесь. Ожидается также что разные механизмы взаимодействия приведут к разной интенсивности или реакции шаблона рассеяния. Например, коренная реструктуризация. липосом (например, превращение в бицеллы или мицеллы) изменит формфакторы нелинейного рассеяния второго порядка и Таким образом, измените интенсивность иначе, чем здесь. Другим примером может быть белок или пора, которые подвергаются резкому изменению. изменение распределения заряда, так как это приведет к другому (но все же поддающееся количественной оценке) изменение эффективной формы третьего порядка факторы. Многие из таких структурных и зарядных эффектов были смоделированы ранее. ³²⁻³⁵ Таким образом, метод СВС расширяет набор инструментов для количественной оценки структурных биологические подходы к высокой пропускной способности, образцам меньшего размера и без этикеток и неинвазивные подходы. Это приведет к лучшему пониманию белково-мембранных взаимодействий.

В общем, помимо QCM, SPR и флотационные анализы, которые обычно используется для определения аффинности связывания белок-мембрана, мы представил дополнительный метод, высокопроизводительную вторую гармонику рассеяния, что позволяет преодолеть многие ограничения этих методов. Метод СВС позволяет имитировать нативную среду мембраны. белок, так как состав и кривая мембраны могут быть смоделированы, преодоление существующего разрыва между in vitro и in vivo экспериментов. Мы показали сверхчувствительное обнаружение взаимодействия белков с липосомами в водном растворе с чувствительностью в диапазоне от фемтомолярного до пикомолярного, что соответствует одному трансмембранный белок, связанный с одной липосомой. Более того, СВС с высокой пропускной способностью потенциально может выполняться с небольшой площадью основания. настольный прибор, использующий небольшие объемы пробы (<10 мкл), вместо 800 мкл, использованных в текущем исследовании, и небольшие количества белка (нМ). Что еще более важно, как показано здесь, он позволяет обнаруживать мембранно-белковых взаимодействий в низком фемтомолярном режиме прямым, без этикеток, без моделей и неинвазивным способом.

Дополнительная информация доступен бесплатно по адресу https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.jpclett.1c04011.

• (S1) Химические вещества, (S2) образец подготовка, (S3) вторая гармоника рассеяние и (S4) получение крио-ЭМ-изображений и обработка изображений (PDF)

С.Р. признает Фонд Джулии Якоби. Х.И.О. благодаря EU MCSA-IF (Грант № 899088) для финансовой поддержки. ВЕЧЕРА. и В.В. поддержали словенские Исследовательское агентство (грант P1–0207). В.В. признает EMBO Краткосрочное общение (№ 7326). Б.З., М.Д.П. и К.С. поблагодарить Швейцарский национальный научный фонд (179520 к Б.З., 157217 к М.Д.П., и PR00P3_193090 до C.C.). Электронную микроскопию проводили с инструменты, поддерживаемые Центром визуализации микроскопии (MIC) Университет Берна.

Авторы заявлять об отсутствии конкурирующих финансовых интересов.

jz1c04011_si_001.pdf ^{(167K, pdf)}

• Альбертс Б.; Джонсон А.; Льюис Дж.; Робертс К.; Рафф М.; Уолтер П.. Мол. биол. Клетка; Garland Science, 2008. [Google Scholar]
• Берг Дж. М.; Тимочко Ю.Л.; Страйер Л.; Берг Дж. М.; Тимочко Ю.Л.; Страйер Л. Биохимия, 5-е изд.; WH Freeman, 2002. [Google Scholar]
• Даль Пераро М.; ван дер Гут Ф.Г. Порообразующие токсины: древние, но Никогда не выходит из моды. Обзоры природы микробиология 2016, 14 (2), 77–92. 10.1038/nrmicro.2015.3. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Хотце Э. М.; Тветен Р.К. Мембранная сборка холестеринзависимого цитолизина Поровый комплекс. Биохимика и биофизика Acta (BBA) — Биомембраны 2012, 1818 (4), 1028–1038. 10.1016/j.bbamem.2011.07.036. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Россджон Дж.; Фейл С.К.; МакКинстри В.Дж.; Тветен Р.К.; Паркер М. В. Состав холестерин-связывающего, тиол-активируемого цитолизина и модели Его мембранная форма. Клетка 1997, 89 (5), 685–692. 10.1016/S0092-8674(00)80251-2. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Йылмаз Н.; Кобаяши Т. Сборки порообразующих токсинов, визуализированных с помощью атомной Силовая микроскопия. Биохимика и биофизика Acta (BBA) — Биомембраны 2016, 1858 (3), 500–511. 10.1016/j.bbamem.2015.11.005. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]
• Тилли С. Дж.; Орлова Е. В.; Гилберт RJC; Эндрю П.В.; Сайбил Х. Р. Структурный Основа образования пор бактериальным токсином пневмолизином. Клетка 2005, 121 (2), 247–256. 10.1016/j.cell.2005.02.033. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Reboul C. F.; Уисток Дж. К.; Данстон М. А. Новая модель для Порообразование Холестеринзависимые цитолизины. PLoS-компьютер. биол. 2014, 10 (8), e1003791. 10.1371/journal.pcbi.1003791. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Данг Т. Х.; Хотце Э. М.; Руйе И.; Тветен Р.К.; Уилсон-Кубалек Э. М. Подготовить переход в пору холестерин-зависимого цитолизина, визуализированный с помощью электронной микроскопии. Дж. Структура. биол. 2005, 150 (1), 100–108. 10.1016/j.jsb.2005.02.003. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Эдвардссон М.; Сведем С.; Ван Г.; Рихтер Р.; Родаль М.; Касемо Б. QCM-D и прибор рефлектометрии: приложения к Поддерживаемые липидные структуры и их биомолекулярные взаимодействия. Анальный. хим. 2009 г., 81 (1), 349–361. 10.1021/ac801523w. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Лозо Л. Д.; Ролле М.В.; Камезано Т. А. QCM-D Исследование концентрации- и зависящие от времени взаимодействия LL37 человека с модельным млекопитающим Липидные бислои. Коллоиды Серф., Б 2018, 167, 229–238. 10.1016/j.colsurfb.2018.04.016. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Nielsen S. B.; Отзен Д. Э. Воздействие противомикробного препарата Пептид новичидин на мембране Структура и целостность. J. Коллоидный интерфейс науч. 2010, 345 (2), 248–256. 10.1016/j.jcis.2010.01.065. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]
• Чжао Х.; Лаппалайнен П. Простое руководство по биохимическим подходам для анализа Белково-липидные взаимодействия. MBoC 2012, 23 (15), 2823–2830. 10.1091/mbc.e11-07-0645. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Бесеничар М.; Мачек П.; Лейки Дж. Х.; Андерлу Г. Поверхностный плазмонный резонанс в белок-мембранных взаимодействиях. хим. физ. Липиды 2006, 141 (1), 169–178. 10.1016/j.chemphyslip.2006.02.010. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• MacKenzie C. R.; Хирама Т .; Бакли Дж. Т. Анализ связывания рецепторов Каналообразующий токсин аэролизин с использованием поверхностного плазмонного резонанса. Дж. Биол. хим. 1999, 274 (32), 22604–22609. 10.1074/jbc.274.32.22604. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Figueira T. N.; Фрейре Дж. М.; Кунья-Сантос К.; Герас М.; Гонсалвеш Х.; Москона А.; Портотто М.; Саломе Вейга А.; Кастаньо М. А. Р. Б. Количественный анализ молекулярных Раздел в сторону Липидные мембраны с использованием поверхностного плазмонного резонанса. науч. Респ. 2017, 7 (1), 45647. 10.1038/srep45647. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Cooper M. А.; Попробуйте AC; Кэрролл Дж.; Эллар Д.Дж.; Уильямс Д. Х. Поверхность Анализ плазмонного резонанса в липидном монослое на подложке. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) — Биомембраны 1998, 1373 (1), 101–111. 10.1016/S0005-2736(98)00091-1. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Haes A. J.; Ван Дайн Р. П. Наноразмерный оптический биосенсор: чувствительность и селективность ПОДХОД НА ОСНОВЕ ЛОКАЛИЗОВАННОЙ СПЕКТРОСКОПИИ ПОВЕРХНОСТНОГО ПЛАЗМОННОГО РЕЗОНАНСА треугольных наночастиц серебра. Варенье. хим. соц. 2002, 124 (35), 10596–10604. 10.1021/ja020393x. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Seelig J. Термодинамика липид-пептидных взаимодействий. Биохимика et Biophysica Acta (BBA) — Биомембраны 2004, 1666 (1), 40–50. 10.1016/j.bbamem.2004.08.004. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]
• Спраг Б. Л.; МакНалли Дж. Г. FRAP-анализ Переплет: Правильный и примерный. Тенденции клеточной биологии. 2005, 15 (2), 84–91. 10.1016/j.tcb.2004.12.001. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Сенгупта П.; Йованович-Талисман Т.; Скоко Д.; Ренц М.; Витч С.Л.; Липпинкотт-Шварц Дж. Исследование гетерогенности белков в плазматической мембране Использование PALM и парного корреляционного анализа. Нац. Методы 2011, 8 (11), 969–975. 10.1038/nmeth.1704. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Чон М. Г.; Чжоу К.; Парк С.; Х.; Квон Ю.; Чанг Ю.; Ким Д.-Х.; Рю С. Х. Анализ переходных процессов Мембранные белковые взаимодействия за счет диффузионной подвижности одиночных молекул Анализ сдвига. Экспл. мол. Мед. 2021, 53 (2), 291–299. 10.1038/s12276-021-00567-1. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Tran R. J.; Слай К.Л.; Конбой Дж. К. Выявление кинетическое преимущество конкурентный низкомолекулярный иммуноанализ методом прямого обнаружения. Анальный. хим. 2020, 92 (19), 13163–13171. 10.1021/acs.analchem.0c02286. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]
• Тран Р. Дж.; Слай К.Л.; Конбой Дж. К. Приложения поверхностной второй гармоники Генерация в биологическом зондировании. Годовой обр. Анальный. хим. 2017, 10 (1), 387–414. 10.1146/аннурев-анчем-071015-041453. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Гомопулос Н.; Лютгебаукс К.; Сан К.; Масиас-Ромеро К.; Рок С. Вторая гармоника без меток и гиперрэлеевское рассеяние с высоким Эффективность. Опц. Выражать 2013, 21 (1), 815. 10.1364/ОЭ.21.000815. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Окур Г. И.; Тарун О.Б.; Рок С. Химия липидных мембран из Модели живых систем: взгляд на гидратацию, поверхностный потенциал, Кривизна, ограничение и неоднородность. Дж. Являюсь. хим. соц. 2019, 141 (31), 12168–12181. 10.1021/jacs.9b02820. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Schönfeldová T. ; Пиллер П.; Ковачик Ф.; Пабст Г.; Окур Х. И.; Рок С. Плавление липидов Переходы связаны со структурным перераспределением межфазных Вода. Дж. Физ. хим. Б 2021, 125 (45), 12457–12465. 10.1021/acs.jpcb.1c06868. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• Scheu R.; Чен Ю.; де Агияр Х.Б.; Ранкин Б. М.; Бен-Амоц Д.; Рок С. Специфические ионные эффекты в гидратации амфифилов и стабилизации интерфейса. Варенье. хим. соц. 2014, 136 (5), 2040–2047. 10.1021/ja4120117. [PubMed] [CrossRef] [Академия Google]
• Гонелла Г.; Лютгебаукс К.; де Бир А.Г.Ф.; Рок С. Вторая гармоника и Генерация суммарной частоты от водных интерфейсов модулируется интерференцией. Дж. Физ. хим. С 2016, 120 (17), 9165–9173. 10.1021/acs.jpcc.5b12453. [CrossRef] [Google Scholar]
• Lütgebaucks C.; Гонелла Г.; Roke S.. Без оптических этикеток и безмодельное зондирование поверхностного потенциала наноразмерных и микроскопических Объекты в водном растворе. физ. B 2016, 94 ((19), ), 10.1103/PhysRevB. 94.195410. [Перекрестная ссылка] [Академия Google]
• Дедик Дж.; Роша С.; Окур Х. И.; Виттунг-Стафшеде П.; Рок С. Мембранно-белково-гидратационное взаимодействие α-синуклеина с анионными везикулами, зондируемыми с помощью рассеяния второй гармоники с угловым разрешением. Дж. Физ. хим. Б 2019, 123 (5), 1044–1049. 10.1021/acs.jpcb.8b11096. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• de Beer A.G.F.; Roke S.. Суммарная частота Рассеяние генерации от границы раздела изотропной частицы: Геометрические и киральные эффекты. физ. преп. B 2007, 75 ((24), ), 10.1103/PhysRevB.75.245438. [Перекрестная ссылка] [Академия Google]
• де Пиво А.Г.Ф.; Рок С. Получение молекулярной ориентации из Эксперименты по рассеянию второй гармоники и суммарной частоты в воде: Угловое распределение и поляризационная зависимость. Дж. Хим. физ. 2010, 132 (23), 234702. 10.1063/1.3429969. [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
• de Beer A.G.F.; Кампен Р.К.; Роке С.. Разделяющая поверхность Структура и поверхностный заряд со второй гармоникой и суммарной частотой Рассеяние.

  No related posts.