4 октября прошла повторная акция по бесплатной вакцинации против гриппа в г. Якутске от 05.10.16
4 октября прошла повторная акция по бесплатной вакцинации против гриппа в г. Якутске
4 октября в городе Якутске состоялась повторная акция по бесплатной вакцинации против гриппа взрослого населения. На площадях имени Орджоникидзе и Ленина, а также в ТРК «Туймаада» медицинские работники лечебных учреждений прививали всех желающих. В этот день бесплатно привились 369 жителей столицы.
Управление Роспотребнадзора по Республике Саха (Якутия) обращает внимание, что грипп — это инфекционное заболевание, заболеть которым может любой человек.
Возбудителем гриппа является вирус, который от инфицированных людей попадает в носоглотку окружающих.
Одни болеют гриппом несколько дней, а другие дольше и с тяжёлыми осложнениями. Всего существует три типа вируса гриппа, которым свойственна бесконечная изменчивость, при этом защитить себя от гриппа и его последствий — в силах каждого.
При гриппе обостряются имеющиеся хронические заболевания, кроме этого, грипп имеет обширный список возможных осложнений от легочных, таких как бронхит и пневмония, до осложнений со стороны нервной и сердечно-сосудистой систем (менингит, энцефалит, невралгии, миокардит и перикардит и др.).
Обычно грипп начинается внезапно. Возбудители гриппа, вирусы типов А и В, отличаются агрессивностью и исключительно высокой скоростью размножения, поэтому за считанные часы после заражения вирус приводит к глубоким поражениям слизистой оболочки дыхательных путей, открывая возможности для проникновения в неё бактерий.
Согласно позиции Всемирной организации здравоохранения, наиболее эффективным средством против гриппа является вакцинация, ведь именно вакцина обеспечивает защиту от тех видов вируса гриппа, которые являются наиболее актуальными в данном эпидемиологическом сезоне и входят в её состав.
В текущем эпидемическом сезоне по прогнозам Всемирной организации здравоохранения на территории северного полушария будут циркулировать два новых штамма, все они включены в состав отечественных вакцин против гриппа.
Вакцинация рекомендуется всем группам населения, но особенно показана детям начиная с 6 месяцев, пожилым, людям, страдающим хроническими заболеваниями, беременным женщинам, а также лицам из групп профессионального риска — медицинским работникам, учителям, школьникам, студентам, работникам сферы обслуживания и транспорта. Бесплатно получить прививки можно в поликлиниках по месту жительства.
Также Управление Роспотребнадзора по Республике Саха (Якутия) обращается к руководителям предприятий и населению, чьи работники и кто не входит в перечень групп риска по заболеваемости гриппом, и призывает позаботиться о своих работниках, себе, своих родных и близких, и получить прививку против гриппа. Профилактическая вакцинация населения является экономически оправданной, так как позволяет снизить заболеваемость гриппом среди трудоспособного населения. Платную вакцинацию против гриппа можно получить в коммерческих центрах иммунопрофилактики, а также в медицинских организациях, имеющих лицензию на оказание услуг по вакцинации.
Эффективность вакцины от гриппа несравнимо выше всех неспецифических медицинских препаратов, которые можно принимать в течение зимних месяцев.
Не стойте в стороне, получите прививку от гриппа. Берегите свое здоровье и здоровье ваших детей, родных и близких!
Акция: Вакцинация от гриппа
- Главная
- Новости и акции
- Вакцинация от гриппа
Оформите заявку на сайте, мы свяжемся с вами в ближайшее время и ответим на все интересующие вопросы. | Запись онлайн |
Вопросы и ответы
Как подготовить ребенка к вакцинации (прививке)?
ия ремиссии.
Обязательно проконсультируйтесь со специалистом!Собственно вакцинация
Непосредственно перед введением вакцины ребенка должен осмотреть врач (врач вакцинальной бригады/врач-педиатр), проводится измерение температуры тела. Повышенная температура тела является противопоказанием к вакцинации.
Сведения о вакцинации должны быть занесены в прививочный сертификат и амбулаторную карту.
После вакцинации:
- После введения вакцины ребенок находится под наблюдением врача в течение 30 минут
- По возможности рекомендуется воздержаться от посещения людных мест, детских коллективов в течение 3-7 дней после вакцинации
- Прогулки разрешаются
- Через несколько часов после вакцинации при условии хорошего самочувствия ребенка можно купать
-
После введения оральной полиомиелитной вакцины питье и прием пищи разрешаются только через 1 час.
Можно ли заболеть гриппом после прививки от гриппа?
Вакцинация значительно снижает риск заражения гриппом и чаще всего заболевания не наступает. У людей с ослабленным иммунитетом титр антител может быть недостаточен для полной защиты, но даже в случае болезни грипп протекает в легкой форме и не приводит к осложнениям.
Каковы меры предосторожности после вакцинации?
Место введения вакцины желательно не мочить в течении суток
Хотя сама вакцинация от гриппа не исключает приема небольшого количества алкоголя, однако лучше от этого воздержаться.
Осложнения и побочные эффекты при вакцинации
Слухи о вредности и опасности вакцины слишком преувеличены. Осложнения возникают менее чем у одного человека из ста.
Где и как проводится вакцинация от гриппа?
Наша клиника уже не первый год занимается иммунопрофилактикой от многих инфекционных заболеваний у детей и взрослых, в том числе и от гриппа.
Необходима ли особая подготовка к вакцинации от гриппа?
Особой подготовки не требуется, однако лучше, чтобы в течении 2-х недель, предшествующих вакцинации, у Вас не было простудных заболеваний.
Какие противопоказания?
Противопоказания для проведения вакцинации — это гиперчувствительность к компонентам вакцины (в т.ч. к куриному белку), тяжелые аллергические реакции на введение вакцин в прошлом. Взрослые, как правило, знают о наличии такой аллергии и могут сообщить о ней врачу. Эту проблему также можно решить с помощью лабораторного анализа на аллергены.
Вакцинацию следует отложить и в случае заболевания, сопровождающегося повышением температуры тела (в т.ч. острые проявления инфекционного заболевания).
Стоит ли вакцинироваться после начала эпидемии?
Широко распространенное мнение, что после начала эпидемии вакцинация противопоказана, является ошибочным.
Целесообразность прививки от гриппа. Необходима ли вообще вакцинация?
Распространение вируса гриппа происходит воздушно-капельным путем. Даже кратковременный контакт с человеком, больным гриппом, может привести к заболеванию.
Исключить все возможные контакты, к сожалению, невозможно. Но мы можем защитить себя и наших близких, создав защитный титр антител от вируса гриппа. Для этого необходима вакцинация.
Какие существуют способы профилактики гриппа?
Прививка (вакцинация) против гриппа — основное средство массовой профилактики гриппа.
Что такое грипп?
Грипп — тяжелое инфекционное вирусное заболевание, поражающее верхние и нижние дыхательные пути и протекающее с выраженными общими симптомами — высокой температурой, головной болью, болью в мышцах, слабостью, интоксикацией. Почти ежегодно грипп вызывает эпидемии с большим числом осложнений.
После проникновения вируса в организм человека через несколько дней происходит резкий подъем температуры до 39-40 °C, озноб, возникает «ломота» в теле, головная боль.
Вернуться
Противовирусные препараты, активные в отношении вирусов гриппа А
1. Ferguson NM, et al. Стратегии сдерживания возникающей пандемии гриппа в Юго-Восточной Азии.
Природа. 2005; 437: 209–214. [PubMed] [Google Scholar]
2. Ferguson NM, et al. Стратегии смягчения последствий пандемии гриппа. Природа. 2006; 442:448–452. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
3. Kaye D, Pringle CR. Вирусы птичьего гриппа и их значение для здоровья человека. клин. Заразить. Дис. 2005; 40:108–112. [PubMed] [Академия Google]
4. Beigel JH, et al. Инфицирование людей птичьим гриппом A (H5N1). Н. англ. Дж. Мед. 2005; 353:1374–1385. [PubMed] [Google Scholar]
5. Taubenberger JK, Morens DM. Грипп 1918 года: мать всех пандемий. Возникновение инфекции. Дис. 2006; 12:15–22. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
6. Kilbourne ED. Пандемии гриппа 20 века. Возникновение инфекции. Дис. 2006; 12:9–14. [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
7. Белше РБ. Происхождение пандемического гриппа — уроки XIX века18 вирус. Н. англ. Дж. Мед. 2005; 353:2209–2211. [PubMed] [Google Scholar]
8. Палезе П.
Грипп: старые и новые угрозы. Природа Мед. 2004; 10: S82–S87. [PubMed] [Google Scholar]
9. Davies WL, et al. Противовирусная активность 1-адамантанамина (амантадина) Наука. 1964; 144: 862–863. [PubMed] [Google Scholar]
10. Horimoto T, Kawaoka Y. Грипп: уроки прошлых пандемий, предупреждения о текущих инцидентах. Nature Rev. Microbiol. 2005; 3: 591–600. [PubMed] [Академия Google]
11. Шак К., Лэмб Р.А., Пинто Л.Х. Анализ структуры пор ионного канала вируса гриппа А М 2 методом доступности замещенного цистеина. Дж. Вирол. 2000; 74: 7755–7761. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
12. Sansom MS, Kerr ID. Белок M2 вируса гриппа: исследование молекулярного моделирования ионного канала. Белок англ. 1993; 6: 65–74. [PubMed] [Google Scholar]
13. Bright RA, et al. Устойчивость к адамантану среди вирусов гриппа А, выделенных в начале сезона гриппа 2005–2006 гг. в США. ДЖАМА. 2006;295:891–894. [PubMed] [Google Scholar]
14.
Bright RA, et al. Заболеваемость резистентностью к адамантану среди вирусов гриппа A (h4N2), выделенных во всем мире с 1994 по 2005 год: повод для беспокойства. Ланцет. 2005; 366:1175–1181. [PubMed] [Google Scholar]
15. Weinstock DM, Zuccotti G. Устойчивость к адамантану при гриппе A. JAMA. 2006; 295:934–936. [PubMed] [Google Scholar]
16. Kolocouris N, et al. Синтез и оценка противовирусной активности некоторых производных аминоадамантана. Дж. Мед. хим. 1994;37:2896–2902. [PubMed] [Google Scholar]
17. Kolocouris N, et al. Синтез и оценка противовирусной активности некоторых новых производных аминоадамантана. 2. J. Med. хим. 1996; 39:3307–3318. [PubMed] [Google Scholar]
18. Kolocouris N, et al. Синтез 2-(2-адамантил)пиперидинов и изучение взаимосвязи активности вируса гриппа А с использованием комбинации ЯМР-спектроскопии и молекулярного моделирования. биоорг. Мед. хим. лат. 1999;9:3465–3470. [PubMed] [Академия Google]
19. Stamatiou G, et al.
Новые 3-(2-адамантил)пирролидины с высокой активностью против вируса гриппа А — идентификация производных аминоадамантана, несущих две фармакофорные аминогруппы. биоорг. Мед. хим. лат. 2001; 11: 2137–2142. [PubMed] [Google Scholar]
20. Zoidis G, et al. Являются ли 2-изомеры препарата римантадин активными противогриппозными средствами? Противовирусная хим. Чемотер. 2003; 14: 153–164. [PubMed] [Google Scholar]
21. Stamatiou G, et al. Гетероциклические аналоги римантадина с противовирусной активностью. биоорг. Мед. хим. 2003; 11: 5485–549.2. [PubMed] [Google Scholar]
22. Zoidis G, et al. Гетероциклические аналоги римантадина с противовирусной активностью. биоорг. Мед. хим. 2006; 14:3341–3348. [PubMed] [Google Scholar]
23. Tanner JA, et al. Бананины, полученные из адамантана, являются мощными ингибиторами активности геликазы и репликации коронавируса SARS. хим. биол. 2005; 12:303–311. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
24. De Clercq E.
Противовирусные препараты и противовирусные стратегии. Nature Rev. Microbiol. 2004; 2: 704–720. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
25. Москона А. Ингибиторы нейраминидазы при гриппе. Н. англ. Дж. Мед. 2005; 353:1363–1373. [PubMed] [Google Scholar]
26. Матросович М., Матросович Т.Ю., Грей Т., Робертс Н.А., Кленк Х-Д. Нейраминидаза важна для инициации вирусной инфекции гриппа в эпителии дыхательных путей человека. Дж. Вирол. 2004; 78:12665–12667. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
27. Shinya K, et al. Птичий грипп: рецепторы вируса гриппа в дыхательных путях человека. Природа. 2006; 440:435–436. [PubMed] [Академия Google]
28. van Riel D, et al. Прикрепление вируса H5N1 к нижним дыхательным путям. Наука. 2006; 312:399. [PubMed] [Google Scholar]
29. Абдель-Магид А.Ф., Марванофф К.А., Мерман С.Дж. Синтез ингибиторов нейраминидазы гриппа. Курс. мнение Препарат Дисков. Девел. 2001; 4: 776–791. [PubMed] [Google Scholar]
30.
von Itzstein M, et al. Рациональный дизайн сильнодействующих ингибиторов репликации вируса гриппа на основе сиалидазы. Природа. 1993; 363: 418–423. [PubMed] [Академия Google]
31. Kim CU, et al. Ингибиторы нейраминидазы гриппа, обладающие новым гидрофобным взаимодействием в активном центре фермента: дизайн, синтез и структурный анализ аналогов карбоциклической сиаловой кислоты с мощной противогриппозной активностью. Варенье. хим. соц. 1997; 119: 681–690. [PubMed] [Google Scholar]
32. Aoki FY, et al. Раннее назначение перорального осельтамивира повышает эффективность лечения гриппа. Дж. Антимикроб. Чемотер. 2003; 51: 123–129. [PubMed] [Академия Google]
33. Kaiser L, et al. Влияние лечения осельтамивиром на связанные с гриппом осложнения нижних дыхательных путей и госпитализации. Арка Стажер Мед. 2003; 163:1667–1672. [PubMed] [Google Scholar]
34. Welliver R, et al. Эффективность осельтамивира в профилактике гриппа при бытовых контактах. ДЖАМА. 2001; 285: 748–754.
[PubMed] [Google Scholar]
35. Hayden FG, et al. Ведение гриппа в домашних хозяйствах: проспективное рандомизированное сравнение лечения осельтамивиром с постконтактной профилактикой или без нее. Дж. Заразить. Дис. 2004; 189: 440–449. [PubMed] [Google Scholar]
36. Kawai N, et al. Сравнение эффективности осельтамивира для лечения гриппа А и гриппа В: японское многоцентровое исследование сезонов гриппа 2003–2004 и 2004–2005 гг. клин. Заразить. Дис. 2006; 43: 439–444. [PubMed] [Google Scholar]
37. Де Клерк Э. Стратегии разработки противовирусных препаратов. Nature Rev. Drug Discov. 2002; 1:13–25. [PubMed] [Google Scholar]
38. Russell RJ, et al. Структура нейраминидазы птичьего гриппа H5N1 предлагает новые возможности для разработки лекарств. Природа. 2006; 443:45–49. [PubMed] [Google Scholar]
39. McKimm-Breschkin JL. Резистентность вирусов гриппа к ингибиторам нейраминидазы — обзор. Противовирусный рез. 2000;47:1–17. [PubMed] [Google Scholar]
40.
McKimm-Breschkin J, et al. Анализ последовательности нейраминидазы и чувствительность клинических изолятов вируса гриппа к занамивиру и осельтамивиру. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2003;47:2264–2272. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
41. Kiso M, et al. Резистентные вирусы гриппа А у детей, получавших осельтамивир: описательное исследование. Ланцет. 2004;364:759–765. [PubMed] [Google Scholar]
42. Zürcher T, et al. Мутации, придающие резистентность к занамивиру в нейраминидазе N2 вируса гриппа человека, ставят под угрозу приспособленность вируса и не поддерживаются стабильно in vitro . Дж. Антимикроб. Чемотер. 2006; 58: 723–732. [PubMed] [Google Scholar]
43. Herlocher ML, et al. Вирус гриппа, несущий мутацию R292K в гене нейраминидазы, не передается хорькам. Противовирусный рез. 2002; 54: 99–111. [PubMed] [Академия Google]
44. Herlocher ML, et al. Вирусы гриппа, устойчивые к противовирусному препарату осельтамивир: исследования передачи на хорьках.
Дж. Заразить. Дис. 2004; 190:1627–1630. [PubMed] [Google Scholar]
45. Yen H-L, et al. Вирусы гриппа, устойчивые к ингибиторам нейраминидазы, могут существенно различаться по приспособленности и трансмиссивности. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2005; 49: 4075–4084. [Статья PMC бесплатно] [PubMed] [Google Scholar]
46. Оксфорд Дж., Баласингам С., Ламбкин Р. Загадка нового тысячелетия: как использовать мощный класс антинейраминидазных препаратов против гриппа (NAI) в сообществе. Дж. Антимикроб. Чемотер. 2004; 53: 133–136. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
47. Tumpey TM, et al. Существующие противовирусные препараты эффективны против вирусов гриппа с генами пандемического вируса 1918 года. проц. Натл акад. науч. США. 2002; 99:13849–13854. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
48. Le QM, et al. Птичий грипп: выделение лекарственно-устойчивого вируса H5N1. Природа. 2005; 437:1108. [PubMed] [Google Scholar]
49. Губарева Л.В., Кайзер Л.
, Матросович М.Н., Су-Ху Ю., Хейден Ф.Г. Селекция мутантов вируса гриппа у экспериментально инфицированных добровольцев, получавших осельтамивир. Дж. Заразить. Дис. 2001; 183: 523–531. [PubMed] [Академия Google]
50. Ives JA, et al. Мутация h374Y в активном сайте нейраминидазы вируса гриппа A/h2N1 после лечения осельтамивиром фосфатом оставляет вирус серьезно скомпрометированным как in vitro , так и in vivo . Противовирусный рез. 2002; 55: 307–317. [PubMed] [Google Scholar]
51. de Jong MD, et al. Резистентность к осельтамивиру при лечении инфекции гриппа A (H5N1). Н. англ. Дж. Мед. 2005; 353: 2667–2672. [PubMed] [Google Scholar]
52. Говоркова Е.А., Илюшина Н.А., Смит Дж., Вебстер Р.Г. Осельтамивир защищает хорьков от смертельной инфекции вирусом гриппа H5N1. Противовирусный рез. 2006;70:А29. [Google Scholar]
53. Йен Х-Л, Монто А.С., Вебстер Р.Г., Говоркова Е.А. Вирулентность может определять необходимую продолжительность и дозировку лечения осельтамивиром высокопатогенного вируса гриппа A/Vietnam/1203/04 у мышей.
Дж. Заразить. Дис. 2005; 192: 665–672. [PubMed] [Google Scholar]
54. Сми Д. Ф., Хаффман Дж. Х., Моррисон А. С., Барнард Д. Л., Сидвелл Р. В. Циклопентановые ингибиторы нейраминидазы с мощной противогриппозной активностью in vitro. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2001; 45: 743–748. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
55. Sidwell RW, et al. Эффект ингибирования вируса гриппа in vivo ингибитором циклопентаннейраминидазы RJW-270201. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2001; 45: 749–757. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
56. Chand P, et al. Сравнение противогриппозной активности производных циклопентана с осельтамивиром и занамивиром in vivo . биоорг. Мед. хим. 2005; 13:4071–4077. [PubMed] [Google Scholar]
57. Chand P, et al. Систематический структурный дизайн и стереоселективный синтез новых многозамещенных производных циклопентана с мощной противогриппозной активностью. Дж. Мед. хим. 2001;44:4379–4392. [PubMed] [Google Scholar]
58.
Chand P, et al. Синтезы и ингибирующая нейраминидазу активность полизамещенных циклопентанамидных производных. Дж. Мед. хим. 2004; 47:1919–1929. [PubMed] [Google Scholar]
59. Wang GT, et al. Дизайн, синтез и структурный анализ ингибиторов нейраминидазы гриппа, содержащих пирролидиновые ядра. Дж. Мед. хим. 2001;44:1192–1201. [PubMed] [Google Scholar]
60. DeGoey DA, et al. Энантиоселективный синтез противогриппозного соединения А-315675. Дж. Орг. хим. 2002; 67: 5445–5453. [PubMed] [Академия Google]
61. Ханесян С., Байракдарян М., Луо Х. Полный синтез А-315675: мощный ингибитор нейраминидазы гриппа. Варенье. хим. соц. 2002; 124:4716–4721. [PubMed] [Google Scholar]
62. Kati WM, et al. In vitro характеристика A-315675, сильнодействующего ингибитора нейраминидазы вирусов гриппа штаммов A и B и репликации вируса гриппа. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2002;46:1014–1021. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
63. Maring CJ, et al. Структурная характеристика и оптимизация новых взаимодействий гидрофобного связывания в ряде пирролидиновых ингибиторов нейраминидазы гриппа.
Дж. Мед. хим. 2005;48:3980–3990. [PubMed] [Google Scholar]
64. Wang GT, et al. Дизайн, синтез и структурный анализ ингибиторов нейраминидазы гриппа, содержащих ядро 2,3-дизамещенной тетрагидрофуран-5-карбоновой кислоты. биоорг. Мед. хим. лат. 2005; 15: 125–128. [PubMed] [Google Scholar]
65. Мишин В., Хейден Ф.Г., Губарева Л.В. Восприимчивость противовирусно-устойчивых вирусов гриппа к новым ингибиторам нейраминидазы. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2005;49:4515–4520. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
66. Molla A, et al. Селекция in vitro и характеристика вариантов вируса гриппа A (A/N9), устойчивых к новому ингибитору нейраминидазы, A-315675. Дж. Вирол. 2002; 76: 5380–5386. [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
67. Губарева Л.В. Молекулярные механизмы устойчивости вирусов гриппа к ингибиторам нейраминидазы. Вирус рез. 2004; 103:199–203. [PubMed] [Google Scholar]
68. Bantia S, Arnold CS, Parker CD, Upshaw R, Chand P.
Активность перамивира против вируса гриппа у мышей при однократной внутримышечной инъекции. Противовирусный рез. 2006;69: 39–45. [PubMed] [Google Scholar]
69. Sidwell RW, et al. Эффект одиночного i. м. или я. v. инъекция перамивира при заражении мышей вирусом гриппа A (H5N1). Противовирусный рез. 2006;70:А50. [Google Scholar]
70. Баррозу Л., Треанор Дж., Губарева Л., Хейден Ф.Г. Эффективность и переносимость перорального ингибитора нейраминидазы перамивира при экспериментальном человеческом гриппе: рандомизированные контролируемые исследования по профилактике и лечению. Противовирусный Тер. 2005; 10:901–910. [PubMed] [Академия Google]
71. Honda T, et al. Синтез и противогриппозная активность 7- О -алкилированных производных, родственных занамивиру. биоорг. Мед. хим. лат. 2002; 12:1925–1928. [PubMed] [Google Scholar]
72. Masuda T, et al. Синтез и противогриппозная оценка перорально активных производных бициклических эфиров, родственных занамивиру.
биоорг. Мед. хим. лат. 2003; 13: 669–673. [PubMed] [Google Scholar]
73. Macdonald SJ, et al. Димерные конъюгаты занамивира с различными связывающими группами являются сильнодействующими, длительно действующими ингибиторами нейраминидазы гриппа, включая птичий грипп H5N1. Дж. Мед. хим. 2005;48:2964–2971. [PubMed] [Google Scholar]
74. Macdonald SJF, et al. Мощные и пролонгированные димерные ингибиторы нейраминидазы вируса гриппа эффективны при режиме дозирования один раз в неделю. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2004; 48:4542–4549. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
75. Sidwell RW, et al. Противовирусная активность широкого спектра действия виразола: 1-β-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид. Наука. 1972; 177: 705–706. [PubMed] [Google Scholar]
76. Sidwell RW, Bailey KW, Wong M-H, Barnard DL, Smee DF. In vitro и in vivo ингибирующее действие вирамидина на вирус гриппа. Противовирусный рез. 2005;68:10–17. [PubMed] [Google Scholar]
77.
Smith CB, Charette RP, Fox JP, Cooney MK, Hall CE. Отсутствие эффекта перорального рибавирина при естественной инфекции вируса гриппа А (h2N1). Дж. Заразить. Дис. 1980; 141: 548–554. [PubMed] [Google Scholar]
78. Knight V, Gilbert BE. Рибавирин аэрозоль для лечения гриппа. Заразить. Дис. клин. Северная Ам. 1987; 1: 441–457. [PubMed] [Академия Google]
79. Hayden FG, Sable CA, Connor JD, Lane J. Внутривенное введение рибавирина путем постоянной инфузии при тяжелой инфекции гриппа и парагриппа. Противовирусный Тер. 1996; 1: 51–56. [PubMed] [Google Scholar]
80. McCormick JB, et al. Лихорадка Ласса. Эффективная терапия рибавирином. Н. англ. Дж. Мед. 1986; 314: 20–26. [PubMed] [Google Scholar]
81. Huggins JW, et al. Проспективное двойное слепое параллельное плацебо-контролируемое клиническое исследование внутривенной терапии рибавирином геморрагической лихорадки с почечным синдромом. Дж. Заразить. Дис. 1991;164:1119–1127. [PubMed] [Google Scholar]
82.
Малахов М.П., и соавт. Слитый белок сиалидаза как новый ингибитор вируса гриппа широкого спектра действия. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2006; 50:1470–1479. [бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
83. Гамбарян А.С., и соавт. Полимерный ингибитор прикрепления вируса гриппа защищает мышей от экспериментальной гриппозной инфекции. Противовирусный рез. 2002; 55: 201–205. [PubMed] [Google Scholar]
84. Гамбарян А.С., и соавт. Связанный с полимером 6′-сиалил- N -ацетиллактозамин защищает мышей, инфицированных вирусом гриппа. Противовирусный рез. 2005; 68: 116–123. [PubMed] [Google Scholar]
85. Ge Q, et al. Ингибирование продукции вируса гриппа у инфицированных вирусом мышей с помощью РНК-интерференции. проц. Натл акад. науч. США. 2004; 101:8676–8681. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
86. Томпкинс С.М., Ло К.И., Тампи Т.М., Эпштейн С.Л. Защита от летального заражения вирусом гриппа с помощью РНК-интерференции in vivo .
проц. Натл акад. науч. США. 2004; 101:8682–8686. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
87. Li BJ, et al. Использование миРНК в профилактических и терапевтических схемах против коронавируса SARS у макак-резусов. Природа Мед. 2005; 11: 944–951. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
88. Vaillant A, et al. Rep 9: мощный аэрозоль широкого спектра действия для профилактики и терапии гриппозной инфекции in vivo . Противовирусный рез. 2006;70:А52. [Google Scholar]
89. Iversen P, et al. Ингибирование нескольких подтипов гриппа А в культуре клеток с помощью антисмысловых фосфородиамидатных морфолиноолигомеров. Противовирусный рез. 2006;70:А49. [Google Scholar]
90. Дэн Т., Шарпс Дж., Фодор Э., Браунли Г.Г. Сборка PB2 in vitro с димером PB1-PA поддерживает новую модель сборки субъединиц полимеразы вируса гриппа А в функциональный тримерный комплекс. Дж. Вирол. 2005; 79: 8669–8674. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
91.
Salomon R, et al. Гены полимеразного комплекса способствуют высокой вирулентности изолята вируса гриппа H5N1 человека A/Vietnam/1203/04. Дж. Эксп. Мед. 2006;203:689–697. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
92. Таттл Дж.В., Тисдейл М., Креницкий Т.А. Пуриновые 2′-дезокси-2′-фторрибозиды как противогриппозные средства. Дж. Мед. хим. 1993; 36: 119–125. [PubMed] [Google Scholar]
93. Тисдейл М., Эллис М., Клумпп К., Корт С., Форд М. Ингибирование транскрипции вируса гриппа 2′-дезокси-2′-фторгуанозином. Антимикроб. Агенты Чемотер. 1995; 39: 2454–2458. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
94. Furuta Y, et al. In vitro и in vivo активности соединения T-705 против вируса гриппа. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2002; 46: 977–981. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
95. Takahashi K, et al. In vitro и in vivo активности Т-705 и осельтамивира против вируса гриппа. Противовирусная хим.
Чемотер. 2003; 14: 235–241. [PubMed] [Google Scholar]
96. Furuta Y, et al. Механизм действия Т-705 против вируса гриппа. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2005;49: 981–986. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
97. Tomassini J, et al. Ингибирование кэп (m 7 GpppXm)-зависимой эндонуклеазы вируса гриппа соединениями 4-замещенной 2,4-диоксобутановой кислоты. Антимикроб. Агенты Чемотер. 1994; 38: 2827–2837. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
98. Cianci C, et al. Идентификация соединений N -гидроксамовой кислоты и N -гидроксиимида, ингибирующих полимеразу вируса гриппа. Противовирусная хим. Чемотер. 1996;7:353–360. [Google Scholar]
99. Tomassini J, et al. Новое противовирусное средство, ингибирующее эндонуклеазу вирусов гриппа. Антимикроб. Агенты Чемотер. 1996;40:1189–1193. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
100. Sun C, et al. Новый класс мощных ингибиторов вируса гриппа: полизамещенная ацилтиомочевина и ее слитые производные гетероцикла.
биоорг. Мед. хим. лат. 2006; 16: 162–166. [PubMed] [Google Scholar]
101. Wang W-L, et al. Синтез и биологическая оценка новых соединений, содержащих бистероцикл, в качестве потенциальных противогриппозных агентов. биоорг. Мед. хим. лат. 2005; 15: 5284–5287. [PubMed] [Академия Google]
102. Исаакс А., Линденманн Дж. Вирусное вмешательство. I. Интерферон. проц. Р. Соц. Лонд. Б биол. науч. 1957; 147: 258–267. [PubMed] [Google Scholar]
103. Барон С., Айзекс А. Отсутствие интерферона в легких при смертельных случаях гриппа. бр. Мед. Дж. 1962; 5270:18–20. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
104. Isomura S, et al. Профилактическое действие человеческого интерферона-α на гриппозную инфекцию; модификация клинических проявлений гриппа у детей в условиях закрытого стационара. Байкен Дж. 1982;25:131–137. [PubMed] [Google Scholar]
105. Philpotts RJ, et al. Интраназальная профилактика лимфобластоидным интерфероном («Веллферон») против риновируса и вируса гриппа у добровольцев.
Дж. Интерферон Рез. 1984; 4: 535–541. [PubMed] [Google Scholar]
106. Fried MW, et al. Пегинтерферон α-2а плюс рибавирин при хронической инфекции, вызванной вирусом гепатита С. Н. англ. Дж. Мед. 2002; 347: 975–982. [PubMed] [Google Scholar]
107. Филд А.К., Тайтелл А.А., Лэмпсон Г.П., Хиллеман М.Р. Индукторы интерферона и резистентность хозяина. II. Многоцепочечные синтетические полинуклеотидные комплексы. проц. Натл акад. науч. США. 1967;58:1004–1010. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
108. Saravolac EG, et al. Иммунопрофилактические стратегии против респираторной вирусной инфекции гриппа. вакцина. 2001;19:2227–2232. [PubMed] [Google Scholar]
109. Ichinohe T, et al. Синтетическая двухцепочечная РНК поли(I:C) в сочетании с вакциной для слизистых оболочек защищает от заражения вирусом гриппа. Дж. Вирол. 2005; 79: 2910–2919. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
110. Yang H, et al. Противовирусная химиотерапия облегчает борьбу с поксвирусными инфекциями за счет ингибирования передачи клеточного сигнала.
Дж. Клин. Вкладывать деньги. 2005;115:379–387. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
111. Reeves PM, et al. Отключение патогенеза поксвируса путем ингибирования тирозинкиназ семейства Abl. Природа Мед. 2005; 11: 731–739. [PubMed] [Google Scholar]
112. Pleschka S, et al. Распространение вируса гриппа нарушается ингибированием сигнального каскада Raf/MEK/ERK. Природа Клетка Биол. 2001; 3: 301–305. [PubMed] [Google Scholar]
113. Marjuki H, et al. Мембранное накопление гемагглютинина вируса гриппа А запускает ядерный экспорт вирусного генома через опосредованную протеинкиназой Cα активацию передачи сигналов ERK. Дж. Биол. хим. 2006; 281:16707–16715. [PubMed] [Академия Google]
114. Тву К.Ю., Ной Д.Л., Рао П., Куо Р.Л., Круг Р.М. Сайт связывания CPSF30 на белке NS1A вируса гриппа А является потенциальной противовирусной мишенью. Дж. Вирол. 2006; 80: 3957–3965. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
115. Bizollon T, et al. Тройная противовирусная терапия амантадином для пациентов, не отвечающих на интерферон-рибавирин, с рецидивирующим посттрансплантационным гепатитом С.
Трансплантация. 2005; 79: 325–329. [PubMed] [Google Scholar]
116. Хайден Ф.Г., Шлепушкин А.Н., Пушкарская Н.Л. Комбинированный интерферон-α 2 , римантадина гидрохлорид и рибавирин ингибируют репликацию вируса гриппа in vitro . Антимикроб. Агенты Чемотер. 1984; 25: 53–57. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
117. Говоркова EA, Fang H-B, Tan M, Webster RG. Комбинации ингибитора нейраминидазы и римантадина оказывают аддитивное и синергетическое действие против вируса гриппа в клетках MDCK. Антимикроб. Агенты Чемотер. 2004; 48:4855–4863. [PMC free article] [PubMed] [Google Scholar]
118. Ильюшина Н., Хоффманн Э., Саломон Р., Вебстер Р., Говоркова Е. Преимущества комбинированной химиотерапии высокопатогенного вируса гриппа A/Vietnam/1203/04 (H5N1) у мышей. Противовирусный рез. 2006;70:А29. [Google Scholar]
119. Ison MG, et al. Безопасность и эффективность распыляемого занамивира у госпитализированных пациентов с тяжелым гриппом.
Противовирусный Тер. 2003; 8: 183–190. [PubMed] [Google Scholar]
Способы противовирусного действия химических частей и компонентов экстракта корня вайды против вируса гриппа A FM1
На этой странице
РезюмеВведениеМатериалы и методыРезультаты и обсуждениеЗаключениеДополнительные материалыСсылкиАвторское правоСтатьи по теме
Исследовательская статьяВыражение беспокойства
!
Опубликовано Выражение беспокойства по поводу этой статьи. Чтобы просмотреть подробности статьи, нажмите на вкладку «Выражение беспокойства» выше.
Корень вайды использовался для профилактики гриппа в течение сотен лет во многих азиатских странах. В этом исследовании противовирусные режимы клемастанина B (CB), эпигоитрина, фенилпропаноидной части (PEP) и смеси фенилпропаноидов, алкалоидов и частей органических кислот (PEP + ALK + OA) из экстракта корня древесины против вируса гриппа A FM1 были исследованы.
Результаты показали, что CB, эпигоитрин, PEP и PEP + ALK + OA проявляют свою противогриппозную активность посредством ингибирования размножения вируса, профилактики и блокирования прикрепления вируса. Основным механизмом действия ФЕП и ФЕП + ALK + ОА является ингибирование репликации вируса. Ингибирующее действие на прикрепление и размножение вируса является основным механизмом действия эпигоитрина. Все соединения или химические части экстракта корня вайды, протестированные в этом исследовании, не обладают прямой вирулицидной активностью. Наши результаты обеспечили всесторонний анализ противовирусного механизма экстракта корня древесины.
1. Введение
Грипп или грипп является одним из наиболее значимых острых респираторных заболеваний, вызываемых инфекцией вируса гриппа. Сезонный грипп ежегодно поражает миллионы людей в мире, создавая серьезную угрозу для здоровья населения, особенно детей и пожилых людей. Кроме того, вирус гриппа может вызвать серьезную пандемию и экономический ущерб [1].
Вспышка птичьего гриппа А в Китае в 2013 году нанесла экономике ущерб почти в 6,5 млрд долларов.
В настоящее время синтетические противовирусные препараты или вакцины имеют ограниченное применение в развивающихся странах из-за появления резистентных штаммов, высокой стоимости и вредных побочных эффектов [2, 3]. Однако противогриппозные средства, полученные из трав, имеют много преимуществ, таких как низкая стоимость и токсичность, обширный источник и легкость доступа [4, 5]. При этом растительные препараты обычно обладают многоцелевым действием, выступая не только как противовирусные средства, но и стимулируя иммунитет [6]. Поэтому в последнее десятилетие экстракты лекарственных растений и фитохимические вещества привлекают все больше внимания как потенциальные источники для разработки новых противовирусных препаратов.
Корень вайды (обычное название: Ban Lan Gen) — сухой корень растения Isatis indigotica Fort. Корень вайды был впервые задокументирован как растительное лекарственное средство в каноне Травяного фонда Божественного земледельца, известной древней медицинской книге династии Хань в Китае (200 г.
н.э.). Он использовался для лечения простуды, боли в горле и головной боли в течение сотен лет в Китае [7, 8]. Корень вайды использовался для профилактики тяжелого острого респираторного синдрома (ТОРС) в 2003 г. и пандемии свиного гриппа в 2009 г.в Китае, Гонконге, Тайване и Японии [9, 10].
Вакцины против гриппа являются основным профилактическим средством в зимнее время для защиты от вирусов гриппа. Подсчитано, что ежегодно федеральное правительство США тратит более 3,2 млрд долларов на производство противогриппозных вакцин [11]. Поэтому необходимо разработать недорогие препараты с эффективной профилактической активностью. Использование водного экстракта корня вайды для профилактики простуды документировано уже сотни лет.
Недавно противовирусный эффект метанола, воды и экстракта этилового эфира корня вайды был подтвержден через in vitro тест [10, 12]. Однако способы противовирусного действия этих экстрактов до сих пор не ясны. Кроме того, имеется мало информации о различиях противовирусного действия между отдельным чистым соединением и экстрактом, из которого это соединение выделено.
Фенилпропаноиды (ФЕП), алкалоиды и органические кислоты являются тремя основными химическими компонентами корня вайды. Клемастанин B (CB) является наиболее распространенным соединением, принадлежащим к фенилпропаноидам. Эпигоитрин является основным алкалоидным соединением, выделенным из корня вайды (рис. 1) [13, 14]. Предыдущий скрининг показал, что CB и эпигоитрин обладают сильным ингибирующим действием на вирус гриппа А1 FM1 [15]. Цель настоящего исследования состояла в том, чтобы выяснить возможные противогриппозные механизмы CB и эпигоитрина и сравнить их с частью фенилпропаноидов и смесью частей фенилпропаноидов, алкалоидов и органических кислот (PEP + ALK + OA).
2. Материалы и методы
2.1. Вирусные штаммы, клеточные линии и реагенты
Адаптированный к легким мышей вариант вируса гриппа Штамм FM1 был получен на кафедре микробиологии и иммунологии Шаньдунского университета. Вирус дважды размножали в аллантоисной полости 9-10-дневных куриных яиц с эмбрионами при 35°С в течение 48 ч для повышения вирулентности.
Аллантоисную жидкость собирали для измерения ее гемагглютинирующей активности. Как только титр гемагглютинации достигал 1 : 640, вирус разделяли на аликвоты и хранили при -80°C до использования. Клетки почки собаки Madin-Darby (MDCK) и клетки рака шейки матки человека (HeLa) были получены из Института клеточной биологии Китайской академии наук. Рибавирин для положительного контроля (номер партии: 101018) был приобретен у Baili Pharmaceutical Co. Ltd. в провинции Сычуань, Китай.
2.2. Приготовление растительных экстрактов
Корень вайды был собран в провинции Аньхой, Китай. Идентификация трав подтверждена морфологическим и микроскопическим анализом в соответствии с Китайской фармакопеей [16]. Экстракцию чистых соединений и химических частей корня вайды проводила компания Tianjin SunnyPeak Biotech. Co. Ltd. Смесь порций фенилпропаноидов, алкалоидов и органических кислот (ФЕП + АЛК + ОА) готовили путем смешивания каждой из указанных выше порций в соотношении 1 : 2 : 2 (мас.
/мас./мас.) [17] . Лиофилизированные материалы непосредственно ресуспендировали в среде для культивирования клеток и стерилизовали фильтрованием через фильтр 0,22 9Мембрана 0311 мкм мкм. Те соединения, которые нельзя растворить в среде, сначала растворяли в ДМСО, а затем разбавляли свежей средой. Конечная концентрация ДМСО в среде была менее 1%. Концентрация CB и эпигоитрина составляла 50 мкг/мл г/мл, а исходная концентрация ФЕП и ФЕП + ALK + ОА составляла 100 мкг/мл г/мл.
2.3. Способы противогриппозного действия
Противогриппозное действие CB, эпигоитрина и химических компонентов экстракта корня вайды исследовали четырьмя различными способами: терапевтическое действие, профилактика, прямая инактивация вируса и ингибирование прикрепления вируса.
2.4. Преинкубация с вирусом (терапевтическое действие препаратов)
Клетки предварительно инфицировали вирусом перед добавлением чистых соединений или химических порций растительного экстракта.
Терапевтическое действие препаратов оценивали как по анализу снижения цитопатических эффектов (ЦПЭ), так и по анализу клеточного МТТ.
Анализ восстановления ЦПД проводили в соответствии с предыдущим отчетом с небольшими изменениями [18]. Вкратце, клетки монослоя MDCK в четырех экземплярах в 96-луночных планшетах инфицировали 0,1-мл суспензией, содержащей 100 TCID 9.0023 50 (50% инфекционной дозы тканевой культуры) вируса в течение 2 часов. Затем неабсорбированный вирус отмывали с помощью PBS. На четырехкратные клеточные монослои последовательно наносили 0,1 мл среды, содержащей различные нетоксичные двукратные серийные разведения чистых соединений, химические порции экстракта корня вайды. В качестве контроля использовали клетки с вирусной инфекцией без лекарственной обработки и клетки без вируса и лекарств. Планшеты инкубировали при 37°C в атмосфере 5% CO 2 в течение 72 часов. Индуцированный вирусом ЦПД наблюдали под световым микроскопом в сравнении с параллельным вирусным контролем и клеточным контролем.
Анализ восстановления МТТ проводили по стандартному протоколу [19]. Короче говоря, экспериментальная установка была такой же, как и процедуры анализа CPE. Через 3 дня инкубации в каждую лунку добавляли 20 мкл л МТТ и инкубировали при 37°C в течение 4 ч. Затем добавляли ДМСО и измеряли оптическую плотность при 570 нм. Степень защиты клеток (%) рассчитывали по следующей формуле: См. [16].
2.5. Предварительная обработка лекарственными средствами (профилактика)
Чтобы оценить влияние чистых соединений и химических компонентов экстракта вайды на профилактику клеточной инфекции, клетки монослоя MDCK в 9На 6-луночные планшеты наносили разные нетоксичные двукратные серийные разведения чистых соединений, химические порции экстракта корня вайды. Для каждой обработки и контроля устанавливали по четыре повтора. Через 4 ч тестируемые вещества удаляли из лунок, а затем клетки монослоя инфицировали 100 TCID 50 вируса гриппа A FM1 при 37°C в течение 2 ч для обеспечения абсорбции вируса.
Затем неабсорбированный вирус отмывали с помощью PBS и в каждую лунку добавляли равное количество поддерживающей среды. Планшеты инкубировали при 37°C в атмосфере 5% CO 2 на 72 ч. Индуцированный вирусом ЦПД наблюдали под световым микроскопом.
2.6. Прямой анализ на вирулицидность
Прямую вирулицидную активность чистых соединений и химических компонентов из экстракта вайды тестировали в соответствии с методами, описанными Carlucci et al. [20]. Сто микролитров 100 TCID 50 вируса обрабатывали равными объемами двукратно разведенных чистых соединений или порциями экстракта в течение 2 ч при 37°С. Затем образцы последовательно разбавляли в десять раз. При формировании конфлюэнтного монослоя клеток MDCK выживший вирус в смесях определяли в анализе ЦПД и титрах (TCID 50 значений) рассчитывали по методу Рида-Мюнха.
2.7. Анализ ингибирования прикрепления вируса
Монослой клеток MDCK культивировали в 96-луночных планшетах..jpg)
К клеткам MDCK одновременно добавляли 100 мкл различных нетоксичных двукратных серийных разведений чистых соединений, химические порции экстракта корня вайды и равный объем 100 TCID 50 вируса [21]. После инкубации в течение 2 ч при 37°С смесь вирус/экстракт удаляли из лунок, после чего добавляли поддерживающую среду. Планшеты инкубировали при 37°C в атмосфере 5% CO 2 на 72 ч. Индуцированный вирусом ЦПД наблюдали под световым микроскопом.
2.8. Статистический анализ
Все эксперименты были повторены три раза, каждый с пятикратным определением. Данные были выражены как среднее значение ± стандартное отклонение. Тест Стьюдента был проведен для сравнения между контролем и лечением. Величина считалась значимой разницей () и считалась очень значимой ().
3. Результаты и обсуждение
3.1. Терапевтическое действие чистых соединений и химических компонентов экстракта корня вайды
Для исследования терапевтического действия на вирус гриппа А клетки предварительно инфицировали вирусом в течение 2 ч с последующим добавлением противовирусных соединений и химических порций экстракта корня вайды.
Бланк растворителя, CB, эпигоитрин и химические части экстракта корня вайды не обладали явной цитотоксичностью (данные не представлены). Терапевтическое действие оценивали как с помощью анализа CPE, так и с помощью анализа MTT. Явные цитопатические эффекты наблюдались в клетках MDCK, инфицированных FM1, через 72 часа, такие как увеличение промежутков между клетками, разрыв клеточного ядра и частичный или полный коллапс клеток (рис. 2(а), вирусный контроль). В группе контроля вируса наблюдалось 50–75% CPE (см. Таблицу S1 в дополнительных материалах, доступных онлайн по адресу http://dx.doi.org/10.1155/2016/253729).4). Однако клетки MDCK хорошо растут в группах лечения лекарственным средством (рис. 2(а), рибавирин и группы PEP + ALK + OA), а образование CPE полностью ингибируется во всех разведениях (таблица S1).
Анализ восстановления МТТ показал, что добавление порций CB, эпигоитрина, PEP и PEP + ALK + OA из экстракта корня вайды значительно повышало жизнеспособность клеток MDCK, предварительно инфицированных вирусом, по сравнению с контрольной группой вируса во всех разведениях () (Рисунок 2(б)).
Молекулярные механизмы противовирусной активности клемастанина В и эпигоитрина до конца не изучены. Недавний отчет показал, что клемастанин В может нацеливаться на вирусный эндоцитоз и удерживать рибонуклеопротеин (РНП) вируса гриппа в ядре [22]. Интересно, что степень защиты в четырех группах лечения была значительно выше, чем в группе положительного контроля с рибавирином при том же разведении (1). Это указывает на то, что соединения и части экстракта из корня вайды обладают лучшим терапевтическим действием против вируса гриппа А FM1, чем текущий коммерческий синтетический противовирусный препарат рибавирин. Кроме того, защитный эффект частей CB, эпигоитрина, PEP и PEP + ALK + OA не зависел от дозы. Наивысшая степень защиты наблюдалась при разведении 1 : 4 CB, эпигоитрина или смеси порций PEP + ALK + OA, в то время как PEP, разбавленный 1 : 8, приводил к самой высокой жизнеспособности клеток (рис. 2(c)). По сравнению с различными группами лечения, смесь порций PEP + ALK + OA (1 : 4) имеет самую высокую степень защиты клеток.
3.2. Профилактическое действие чистых соединений и химических частей экстракта корня вайды
Чтобы оценить влияние чистых соединений и химических частей экстракта корня вайды на профилактику вируса гриппа А, клетки MDCK обрабатывали серийными разведениями CB, эпигоитрина , PEP и PEP + ALK + OA, соответственно. Через 4 часа препараты удаляли из лунок и клетки инфицировали 100 TCID 50 . Наблюдали образование ЦПЭ и измеряли жизнеспособность клеток с помощью анализа МТТ. Анализ CPE показал, что не было явного образования CPE в клетках MDCK, предварительно обработанных порциями CB, эпигоитрина, PEP и PEP + ALK + OA во всех разведениях (таблица S2).
Как показано в Таблице 1, предварительная обработка либо чистыми соединениями, либо химическими порциями экстракта корня вайды во всех разведениях значительно улучшала жизнеспособность клеток MDCK (). Более того, по сравнению с рибавирином природные соединения или экстракты из корня древесины обладают более высокой профилактической активностью в отношении вируса гриппа А FM1 ().
Жизнеспособность клеток дозозависимо повышалась при использовании частей ФЕП и ФЕП + ALK + OA (таблица 1). Напротив, степень защиты и жизнеспособность клеток существенно не изменились при разведении CB и эпигоитрина (от 1 : 2 до 1 : 16). Среди четырех различных натуральных продуктов, использованных в этом исследовании, часть PEP показала наиболее значительный защитный эффект с уровнем защиты клеток 263,467%.
3.3. Прямое вирулицидное действие чистых соединений и химических фрагментов экстракта корня вайды
Затем мы исследовали влияние фрагментов CB, эпигоитрина, ФЕП и ФЕП + ALK + OA на инактивацию вируса гриппа A FM1 при 37°C. Клетки без обработки показаны на рис. 3(а), а вирусный контроль — на рис. 3(б). Клетки MDCK, инфицированные вирусом гриппа и сокультивированные с CB, эпигоитрином, PEP или PEP + ALK + OA, демонстрировали конденсацию пикноза и даже лизис (рис. 3(c)–3(f)). Титр выжившего вируса составил 0,01 TCID 9.0023 50 во всех опытных группах. Однако рибавирин положительного контроля полностью ингибирует образование CPE во всех уровнях разведения (рис.
3(g)). Эти наблюдения показали, что CB, эпигоитрин, PEP и PEP + ALK + OA не могли напрямую инактивировать вирус гриппа A FM1 даже в концентрации разведения 1 : 2. В предыдущем исследовании Hsuan et al. также обнаружили, что ингибирование вируса псевдобешенства метанольным экстрактом экстракта листьев вайды не было связано с прямой инактивацией вируса [12].
3.4. Ингибирующая активность чистых соединений и химических фрагментов экстракта корня вайды в отношении вируса гриппа А FM1 Приложение
Прикрепление вируса гриппа А в основном опосредуется двумя типами гликопротеинов, называемыми гемагглютинином и нейраминидазой [23]. В этом исследовании мы исследовали, ингибируют ли встречающиеся в природе соединения и химические части экстракта вайды прикрепление вируса к клеткам-хозяевам. Результаты анализа CPE приведены в таблице S. Во всех группах лечения препаратом не было образования CPE даже при самой низкой концентрации (разведение 1 : 16). Результаты показали, что части CB, эпигоитрина, PEP и PEP + ALK + OA обладают сильным ингибирующим действием на связывание вируса гриппа А с клетками MDCK.
Жизнеспособность клеток MDCK через 72 ч после инфицирования вирусом и одновременной обработки природными соединениями определяли методом восстановления МТТ. Как показано в Таблице 2, жизнеспособность клеток MDCK была значительно повышена в результате лечения лекарствами по сравнению с вирусным контролем (1). Ингибирование адсорбции вируса на клетках-хозяевах CB, эпигоитрином и ФЕП носило дозозависимый характер. Максимальный ингибирующий эффект ЦБ, эпигоитрина и ФЕП наблюдался при разведении 1 : 2, что давало 3,53, 3,99, и увеличение жизнеспособности клеток в 4,43 раза соответственно. Напротив, самая высокая степень защиты клеток в группах PEP + ALK + OA и положительном контроле с рибавирином была обнаружена в разведении 1 : 4. Кроме того, было показано, что CB, эпигоитрин, PEP и PEP + ALK + OA более эффективны, чем рибавирин, в отношении ингибирования прикрепления вируса гриппа A FM1 (таблица 2). При сравнении четырех природных соединений и химических порций было замечено, что порция ПЭП, разведенная 1 : 2, обладала максимальным ингибирующим действием на абсорбцию вируса, что привело к максимальной защите 273,218%.
Классически определенные противовирусные механизмы для лекарственных растений включают ингибирование репликации вируса, блокирование прикрепления вируса, прямую инактивацию вируса и предотвращение вирусной инфекции [24]. В этом исследовании было четко продемонстрировано, что CB, эпигоитрин, ФЕП или ФЕП + ALK + ОА проявляют противогриппозную активность за счет терапевтического действия (подавление размножения вируса), профилактики и подавления прикрепления вируса. Однако наблюдались различия в основных режимах противовирусного действия в разных соединениях и химических частях (рис. 4). Например, самая высокая степень защиты клеток при ФЕП или ФЕП + АЛК + ОА была обусловлена его терапевтическим действием (рис. 4, ФЕП, А1; ФЕП + АЛК + ОА, А1). Основными противогриппозными режимами эпигоитрина являются ингибирование размножения и прикрепления вируса (рис. 4, эпигоитрин A1, эпигоитрин A3). Напротив, три режима противовирусного действия CB в равной степени влияют на степень защиты клеток.
CB является основным фенилпропаноидным соединением в корне вайды, а эпигоитрин является распространенным алкалоидом и индикатором для контроля качества корня вайды [16]. Предыдущие исследования показали, что общий ингибирующий эффект зеленого чая на вирусы сильнее в общем экстракте растений, чем отдельное чистое соединение из экстракта из-за возможных синергетических взаимодействий между ингредиентами в экстракте [18, 25]. Однако наши результаты показали, что изменение противовирусной активности может быть связано с различиями противовирусных механизмов между отдельным соединением и смесью экстрактов.
4. Заключение
В настоящем исследовании изучались способы противогриппозного действия химических частей и компонентов экстракта корня вайды. Наши результаты показали, что CB, эпигоитрин, PEP или PEP + ALK + OA продемонстрировали свою противогриппозную активность за счет терапевтического действия, профилактики клеток и ингибирования прикрепления вируса. Все протестированные соединения или химические части не обладают прямой вирулицидной активностью.
Основным противовирусным режимом для ФЕП и ФЕП + АЛК + ОА является терапевтическое действие, тогда как эпигоитрин в основном ингибирует размножение и прикрепление вируса. Насколько нам известно, это первый отчет о противовирусном механизме соединений и химических компонентов экстракта корня вайды.
Конфликт интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Вклад авторов
Jia-Hang Su и Rui-Gang Diao внесли равный вклад в эту работу.
Дополнительные материалы
Три таблицы (таблицы S1-S3) в дополнительных материалах описывают формирование CPE (цитопатический эффект) в клетках MDCK после обработки экстрактом корня вайды. Клетки инфицировали предварительно инфицированным вирусом гриппа А FM1. Затем клетки обрабатывали химическими порциями и чистыми соединениями из экстракта корня вайды тремя различными способами, включая терапевтическое действие, профилактику и прямую инактивацию вируса.
- Дополнительный материал
Ссылки
Давуд Ф.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Т. Х. Бэкон, М. Дж. Левин, Дж. Дж. Лири, Р. Т. Сариски и Д. Саттон, «Устойчивость вируса простого герпеса к ацикловиру и пенцикловиру после двух десятилетий противовирусной терапии», Clinical Microbiology Reviews , vol. 16, нет. 1, стр. 114–128, 2003 г.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
С. Людвиг, «Нацеливание на клеточные сигнальные пути для борьбы с гриппом: к изменению парадигмы противогриппозной терапии», Journal of Antimicrobial Chemotherapy , vol. 64, нет. 1, стр. 1–4, 2009 г.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
X.
Wang, W. Jia, A. Zhao и X. Wang, «Противогриппозные средства из растений и традиционная китайская медицина», Фитотерапевтические исследования , vol. 20, нет. 5, стр. 335–341, 2006 г.Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Z. Wang and Y. Zhu, «Противореспираторный вирус китайской фитотерапии», Health , vol. 2, нет. 12, стр. 1397–1400, 2010.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Х. Вагнер, «Исследования синергии: приближаясь к новому поколению фитофармацевтических препаратов», Фитотерапия , том. 82, нет. 1, стр. 34–37, 2011 г.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Ю.-К. Чанг, Ф.-Ю. Тан, Дж.-В. Liao et al., « Isatis indigotica индуцирует гибель гепатоцеллюлярных раковых клеток через каспазо-независимый апоптоз-индуцирующий фактор транслокации апоптотического пути in vitro и in vivo», Integrative Cancer Therapies , vol.
10, нет. 2, стр. 201–214, 2011.Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Академия Google
Ю.-Л. Хо и Ю.-С. Чанг, «Исследования антиноцицептивного, противовоспалительного и жаропонижающего действия корня Isatis indigotica »,
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
C.-W. Лин, Ф.-Дж. Цай, К.-Х. Tsai et al., «Противовирусные 3C-подобные протеазные эффекты Isatis indigotica корневых и растительных фенольных соединений», Antiviral Research , том. 68, нет. 1, стр. 36–42, 2005 г.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Z. Yang, Y. Wang, S. Zhong et al., « In vitro ингибирование вирусной инфекции гриппа с помощью неочищенного экстракта корня Isatis indigotica, приводящее к предотвращению прикрепления вируса»,
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
М. Ларкин, «Вакцина против гриппа: дефицит улучшит соблюдение требований в США», стр. The Lancet Infectious Diseases , vol. 4, нет. 12, статья 715, 2004.
Посмотреть по адресу:
Google Scholar
С.-Л. Сюань, С.-К. Чанг, С.-Ю. Wang et al., «Цитотоксичность в отношении клеток лейкемии и противовирусное действие экстрактов
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
С. Лю, Дж. Ян, Х. Л. Ли и др., «Исследования химических составляющих сложных гранул корня вайды индиго методом масс-спектрометрии», Химический журнал китайских университетов , том.
31, нет. 6, pp. 1137–1142, 2010.Просмотр по адресу:
Google Scholar
Дж. Пэн, Г. Фан и Ю. Ву, «Выделение и очистка клемастанина В и индиготикозида А из Radix Isatidis с помощью высокоскоростной противоточной хроматографии», Journal of Chromatography A , vol. 1091, нет. 1–2, стр. 89–93, 2005 г.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Академия Google
В.-Я. Йе, X. Ли и Дж.-В. Ченг, «Скрининг одиннадцати химических компонентов из Radix isatidis на противовирусную активность», African Journal of Pharmacy and Pharmacology , vol. 5, нет. 16, стр. 1932–1936, 2011.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Национальная аптека и комитет, «Isatis indigotica», в Китайской фармакопее , Chemical Industry Press, Пекин, Китай, 1-е издание, 2010 г.
Просмотр по адресу:
Google Scholar
J. Chen, X. Dong, Q. Li et al., «Биосинтез активных соединений Isatis indigotica на основе секвенирования транскриптома и профилирования метаболитов», BMC Genomics , том. 14, нет. 857, стр. 1–13, 2013 г.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Серкеджиева Ю., Иванчева С. Противогерпетическая активность экстрактов лекарственного растения Geranium sanguineum L.», Journal of Ethnopharmacology , vol. 64, нет. 1, стр. 59–68, 1998.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Y. Li, PPH But и VEC Ooi, «Противовирусная активность и механизм действия кофеилхиновых кислот из Schefflera heptaphylla (L.) Frodin», Antiviral Research , vol.
68, нет. 1, стр. 1–9, 2005 г.Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
М. Дж. Карлуччи, М. Чианча, М. С. Матулевич, А. С. Сересо и Э. Б. Дамонте, «Противогерпетическая активность и механизм действия натуральных каррагинанов различных структурных типов», Противовирусные исследования , vol. 43, нет. 2, стр. 93–102, 1999.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
Х.-Дж. Квон, Х.-Х. Kim, S.Y. Yoon et al., « In vitro , ингибирующая активность экстрактов Alpinia katsumadai против вирусной инфекции гриппа и гемагглютинации», Virology Journal , vol. 7, нет. 1, статья 307, стр. 1–9, 2010.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Академия Google
Z. Yang, Y.
Wang, Z. Zheng et al., «Противовирусная активность клемастанина B, полученного из корня Isatis indigotica, против вирусов гриппа A и B человека и птиц in vitro», International Journal of Molecular Medicine , vol. . 31, нет. 4, стр. 867–873, 2013 г.Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
В. К. Чу и Г. Р. Уиттакер, «Для проникновения и заражения вирусом гриппа требуется N-связанный гликопротеин клетки-хозяина», Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America , том. 101, нет. 52, стр. 18153–18158, 2004.
Посмотреть по адресу:
Сайт издателя | Google Scholar
М. Мухтар, М. Аршад, М. Ахмад, Р. Дж. Померанц, Б. Вигдал и З. Парвин, «Антивирусные возможности лекарственных растений», Virus Research , vol. 131, нет. 2, стр. 111–120, 2008 г.
Wang, W. Jia, A. Zhao и X. Wang, «Противогриппозные средства из растений и традиционная китайская медицина», Фитотерапевтические исследования , vol. 20, нет. 5, стр. 335–341, 2006 г.
10, нет. 2, стр. 201–214, 2011.
5, нет. 3, стр. 793–799, 2012 г.
31, нет. 6, pp. 1137–1142, 2010.
68, нет. 1, стр. 1–9, 2005 г.
Wang, Z. Zheng et al., «Противовирусная активность клемастанина B, полученного из корня Isatis indigotica, против вирусов гриппа A и B человека и птиц in vitro», International Journal of Molecular Medicine , vol. . 31, нет. 4, стр. 867–873, 2013 г.