Профилактика бешенства — МСЧ №2 Самары
Последнее десятилетие характеризуется значительным распространением эпизоотии бешенства на многих территориях России. Случаи заболевания бешенством диких и домашних животных регистрируются по всей стране, причём уровень заболеваемости остается значительным и в последние годы имеет тенденцию к росту.
Протекающая в настоящее время эпизоотия бешенства характеризуется тем, что на фоне резкого сокращения заболеваемости собак значительно участились случаи бешенства диких животных и кошек, а также скота. Подобное изменение эпизоотической ситуации связано с необычайной активизацией издавна известных очагов природного бешенства, а также с формированием новых, обширных очагов на территориях, ранее свободных от этой инфекции. В природных очагах заболевание поражает главным образом лисиц, а в ряде районов — енотовидных собак, поскольку именно эти животные весьма восприимчивы к возбудителю болезни, интенсивно выделяют вирус со слюной, склонны к сравнительно дальним миграциям и агрессивны.
Говоря о специфическом лечении гидрофобии, необходимо ещё раз подчеркнуть, что в настоящее время все попытки применения различных медикаментозных средств и методов реанимационной терапии уже развившегося заболевания оказываются безрезультатными и болезнь оканчивается смертью.
Единственной мерой, предупреждающей заболевание, является своевременное проведение антирабических прививок с применением в необходимых случаях антирабического гамма-глобулина.
Определяет показания и назначает курс антирабических прививок только врач, прошедший специальную подготовку.
Антирабические прививки назначаются с учетом тяжести повреждения, локализации, вида покусавшего животного. Непосредственное проведение прививок осуществляют средние медицинские работники, подготовленные по оказанию антирабической помощи.
При назначении комбинированного лечения антирабическим гамма-глобулином и вакциной гамма-глобулин вводят после проверки чувствительности организма пациента к сыворотке лошади. При положительной пробе антирабический гамма-глобулин применять не следует. Через 24 часа после введения гамма-глобулина начинают курс прививок антирабической вакциной. Вопрос о продолжении или прекращений прививок решает врач, назначивший курс лечения, совместно с невропатологом. Возможность возникновения реакций и осложнений в ответ на введение антирабических препаратов обусловливает необходимость проведения прививок под контролем врача и в определенных случаях в условиях стационара. Госпитализации подлежат все лица, которым назначен безусловный курс прививок и которые относятся к одной из следующих групп: тяжело укушенные, проживающие в сельской местности, прививающиеся повторно, беременные и грудные дети, лица, имеющие в анамнезе заболевания нервной системы, аллергические и тяжелые хронические болезни, перенесшие инфекционные заболевания, а также лица, привитые бактериальным или вирусными препаратами в течение предшествующих 2 месяцев.
Несмотря на то, что в последние годы отмечается существенное изменение видовой структуры заболеваемости бешенством животных, важнейшая роль в распространении его среди людей до сих пор принадлежит собакам. Они являются связующим звеном между бешенством у диких животных и заболеваниями домашних животных и людей. Каким бы эффективным мероприятием не являлась антирабическая вакцинация людей, решающим условием в профилактике заболеваемости гидрофобией является борьба с этим заболеванием среди животных, главным образом среди собак и кошек, которые являются основным источником бешенства для человека.
Оказание первичной медико-санитарной помощи против бешенства населению на базе поликлиники организовано функционирование антирабического кабинета. Экстренная антирабическая помощь осуществляется дежурными врачами-травматологами в травмпункте круглосуточно. Весь медицинский персонал, оказывающий данный вид медицинской помощи (основной и дублирующий персонал), имеет специальную подготовку по оказанию антирабической помощи.
Курс профилактического лечения составляет, как правило, 6 аппликаций и продолжается в течение 6 месяцев. Проведение иммунизации антирабической вакциной осуществляется в рамках программы госгарантий, т.е. безотказно и бесплатно.
Прививки от бешенства в Самаре, что делать после укуса
Фото: Алексей ФОКИН
Бешенство остается одной из важнейших проблем как в ветеринарии, так и в здравоохранении. Его эпизоотическая и эпидемиологическая значимость определяется абсолютной летальностью и повсеместным распространением. Бешенство — острое инфекционное заболевание животных и людей, вызываемое вирусом, при котором в необратимой форме поражается центральная нервная система. Методов лечения животных и людей в настоящее время не существует! Вирус бешенства поражает все виды теплокровных животных, поэтому переносчиком может быть любое животное.
Источником инфекции в природе являются плотоядные звери -волки, шакалы, лисы. Домашние животные: собаки, кошки, крупный и мелкий рогатый скот, лошади заражаются при укусах диких животных и становятся основными источниками инфекции человека..jpg)
Бешенство проникает в городские и сельские населенные пункты в большинстве случаев по вине людей. Дикие животные всё чаще заявляют о себе в населённых пунктах, их привлекаютместа размещения бытовых отходов, на которые зачастую в нарушении действующего ветеринарного и санитарного законодательства попадают пищевые отходы и продукты убоя животных. Важным звеном в распространении бешенства являются безнадзорные собаки и кошки, которые появляются на улицах городов и сел в результате неразумного, безответственного отношения к ним человека, в первую очередь, самих же владельцев животных.
Клинические признаки бешенства сходны у всех видов животных. Различают тихую и буйную форму заболевания. В большинстве случаев у животного наблюдается: изменение стиля поведения и неадекватная реакция на окружающих, может наблюдаться агрессивность, настороженность, сонливость или пугливость; странные предпочтения в еде, например, поедание травы, песка или земли; яркими признаками бешенства является обильное слюноотделение, тошнота и рвота, неспособность проглотить еду и т.
д.; нарушения в работе опорно- двигательного аппарата, тремор головы или отдельных частей тела; судорожные подергивая или сокращения мышц; проявление агрессии, паралич всего тела или конечностей символизирует скорый летальный исход животного. Довольно опасным является тот факт, что первое время после заражения животное никак не проявляет наличие вируса в своем организме, но уже представляет угрозу для человека и других животных.
Заболевание человеку от животных передается через укусы, ссадины, царапины, при попадании слюны на кожные покровы, слизистую оболочку глаз, полости рта, носа и при соприкосновении с каким- либо предметом или одеждой, загрязненными слюной больного животного.
Что делать, если вас укусили?
Первое, что сделать необходимо, это немедленно промыть место укуса мылом. Мыть надо довольно интенсивно, в течение 10 минут. Глубокие раны рекомендуется промывать струей мыльной воды, например, с помощью шприца или катетера. Не нужно прижигать раны или накладывать швы.
После этого нужно сразу же обратиться в ближайший травмпункт, ведь успех вакцинопрофилактики бешенства сильно зависит от того, насколько быстро вы обратились за помощью к врачу.
На территории Самарской области за 6 месяцев 2018 года зарегистрировано 25 случаев заболевания животных бешенством, из них 9 в дикой фауне, 16 случаев заболевания домашних животных. Владельцы заболевших домашних животных игнорировали требования по профилактике бешенства животных, чем подвергли смертельной опасности свою жизнь, жизнь своих близких.
И в заключение самое главное:
Всех собак и кошек следует ежегодно вакцинировать от бешенства, иммунизации против бешенства в обязательном порядке также подлежит крупный рогатый скот. Вакцинация против бешенства животных проводится во всех учреждениях государственной ветеринарной службы Самарской области. Адреса и телефоны государственных ветеринарных клиник во всех городах и районах Самарской области можно узнать на сайте.Следует отметить, что ситуация по бешенству животных находится под постоянным контролем специалистов государственной ветеринарной службы Самарской области.
Почему в Москве и других городах не хватает препаратов
В столице заканчивается вакцина от бешенства — ее нет во многих травмпунктах. Как выяснил «Ъ FM», врачи вынуждены отказывать пациентам и направлять их в больницы, где пока остаются запасы с прошлого года. С марта столичный департамент здравоохранения не смог закупить ни одной пачки препарата. Почему так получилось? Разбирался Иван Корякин.
Сейчас прививка от бешенства — это шесть инъекций по строгому расписанию, пропускать уколы нельзя. И если пострадавший от укусов животного человек мог без проблем получить помощь в начале августа, то на этой неделе — спустя месяц после инцидента — он, скорее всего, услышал в травмпункте нечто подобное.
— Вакцина от бешенства есть у вас?
— Нет.
— Закончилась?
— Обращайтесь на Физкультурный проезд, дом 6.
Но и в травмпункте, расположенном по адресу Физкультурный проезд, 6, аналогичная ситуация.
«В больницу надо ехать, нет вакцины, вот в чем у нас загвоздка».
В некоторых травпмунктах Москвы вакцина все-таки нашлась, но только «для своих» — горожан, прикрепленных к этим участкам.
— Если вы прикреплены, то найдем. Если нет, то только в травмпункте по своему месту прикрепления.
— Но там уже нет вакцины.
— Да, она во всех травмпунктах заканчивается, поэтому такое вот ограничение.
— Препарат не закупили?
— Закупили, вроде бы как будет 9-го числа.
Как известно, бешенство — неизлечимое и смертельное заболевание, которое можно только предупредить, сделав укол в течение суток после укуса животного. Затем вакцина вводится по графику. Но раз проблема системная, то поиск лекарства может испортить планы москвича, и это в лучшем случае.
Между тем, оказалось, что вакцин от бешенства не хватает по всей стране. Так, глава Белгородской области Евгений Савченко требует наказать тех, кто «не принял меры»; в больнице города Камышин Волгоградской области медики вынуждены отказывать пациентам; а в Красноярске краевой Минздрав признает дефицит вакцины.
В начале августа «Ъ» писал, что более четверти аукционов по госзакупкам жизненно важных препаратов сорваны. Почему? Из-за новой методики Минздрава, который установил начальную максимальную цену контракта, которая оказалась слишком низкой, объясняет заместитель гендиректора фармкомпании Stada CIS Иван Глушков: «Государство, преследуя цель обеспечить всех пациентов лекарственными препаратами, очень сильно закрутило гайки. В итоге по ряду препаратов предложение на рынке очень сильно сократилось.
Производители не заинтересованы в производстве и поставке препаратов, которые находятся на грани рентабельности либо вовсе убыточны».
Запрос «Ъ FM» московский департамент здравоохранения проигнорировал, зато спустя несколько часов на его сайте появилось официальное сообщение. Как следует из него, ситуация еще хуже. «В текущем году закупки на поставку вакцины для профилактики бешенства не состоялись», — говорится в сообщении — пять из пяти объявленных тендеров остались не разыгранными.
Но причина, как пишет департамент, не в ценах, а том, что препарата нет у производителя. Их в России два — НПО «Микроген» и Федеральный научный центр иммунобиологических препаратов им. Чумакова. И в последнем существует проблема с задержкой в сертификации вакцины, так что дело может быть в этом, полагает генеральный директор дистрибутора «Торговый дом Аллерген» Алла Денисова: «У центра им. Чумакова были проблемы с регистрацией. Они поменяли линию, свои технологические проблемы решили с точки зрения улучшения, но вот процесс регистрации у нас в стране выглядит именно так, к сожалению. Нам производитель говорит — ждите, все будет».
В результате всю страну обеспечивает «Микроген» — власти с переменным успехом закупают препарат и распределяют его в ручном режиме, ведь сами учреждения дополнительно приобрести вакцины не имеют права.
Между тем, прививки можно прекратить в том случае, если животное не погибло. Но едва ли у москвича найдется время искать укусившую его собаку или кошку, чтобы удостовериться в судьбе животного, особенно когда ему приходится искать по городу вакцину.
В Научном центре Чумакова не смогли предоставить оперативный комментарий. Департамент здравоохранения Москвы на своем сайте сообщил, что будет возобновлять торги, пока не закупит необходимое количество препаратов.
Бешенство | Прививки.уз — Предупредить. Защитить. Привить.
Новые инфо материалы по иммунизации во время пандемии COVID-19
для медицинский работников и родителей
Вакцинация во время пандемии COVID-19
Вопросы и ответы для РОДИТЕЛЕЙ
Вакцинация во время пандемии COVID-19
Вопросы и ответы для МЕДРАБОТНИКОВ
В ВОЗ отмечают 40-летие победы над оспой
и призывают проявить такую же солидарность в борьбе с COVID-19
Может ли БЦЖ вакцина помочь в борьбе с коронавирусом?
Международные исследования анализируют влияние БЦЖ вакцины на коронавирус
Совместное заявление ВОЗ и ЮНИСЕФ
Во время пандемии COVID-19 крайне важно сохранить услуги плановой иммунизации
В условиях пандемии COVID-19 вакцинацию необходимо продолжать, чтобы она сохраняла свою эффективность
Европейская неделя иммунизации — 2020
ГАВИ, ВОЗ, ЮНИСЕФ: успешное сотрудничество и новые планы
22-23 ноября 2019 года в конференц-зале гостиницы Hyatt Regency Tashkent при поддержке ВОЗ Министерство здравоохранения провело ежегодную национальную конференцию по иммунизации
Первый этап вакцинации против ВПЧ прошел успешно и эффективно
Минздрав провел конференцию по итогам первого этапа прививочной кампании против ВПЧ в Узбекистане.
Первые результаты вакцинации от ВПЧ!
Как вы знаете, с 21 октября 2019 года по всей республике проводится вакцинация против ВПЧ.
В Узбекистане дан старт вакцинации против вируса папилломы человека
В столице состоялась пресс-конференция, посвященная началу вакцинации против вируса папилломы человека.
Встреча с блогерами о ВПЧ
«Мероприятие полностью меня поглотило».
Профилактика рака шейки матки и внедрение ВПЧ вакцины в Узбекистане
Все о вакцинации от ВПЧ
Встреча с Ассоциацией частных школ Узбекистана по внедрению ВПЧ вакцины
Научно-практическая конференция по профилактике, раннему выявлению и лечению рака шейки матки.
20 августа 2019 года В Ташкенте под слоганом «Будущее без рака шейки матки» прошла научно-практическая конференция по профилактике, раннему выявлению и лечению рака шейки матки.
Техническая поддержка Узбекистану в оценке температурных рисков в системе холодовой цепи для вакцин
В рамках оказания технической поддержки Узбекистану в достижении лучших стандартов качества и безопасности вакцин, с 13 по 24 августа 2019 года проходит миссия в составе консультантов ВОЗ г-жи Claire Frijs-Madsen и г-жи Erida Nelaj.
Рабочий визит делегации Республики Узбекистан по опыту внедрения внедрения вакцинации против ВПЧ в Молдове
«Это наши мамы, наши сестры, наши дочери, которых мы можем защитить от рака шейки матки уже сегодня благодаря вакцине от ВПЧ и программе скрининга», — неоднократно повторяли представители Молдовы.
Прививки: абсолютно исчерпывающая инструкция для взрослых и детей Даже для тех, кто не верит в вакцинацию
Антипрививочное движение продолжает шириться, а вместе с ним растети частота вспышек инфекций
Совсем недавно в рамках Европейской недели иммунизации состоялась очень необычная и интересная встреча
Мобильные пункты вакцинации от бешенства откроются около площадок для выгула собак
В апреле на территории столицы начнут работать дополнительные 40 мобильных пунктов вакцинации животных от бешенства. Они появятся рядом с площадками для выгула и дрессировки собак во всех округах, в том числе Троицком и Новомосковском. Специалисты пунктов проведут вакцинацию питомцев бесплатно.
Узнать дополнительные мобильные прививочные пункты не составит труда: это синие палатки с логотипом государственной ветеринарной службы Москвы. Они будут принимать хвостатых пациентов до октября.
Ознакомиться с адресами размещения дополнительных мобильных пунктов и режимом их работы можно на mos.ru. График работы и адреса пунктов будут обновляться ежемесячно.
Бешенство — это острое инфекционное заболевание нервной системы, которое в 100 процентах случаев заканчивается летально. Вирус передается от больных животных, он опасен в том числе и для людей. Распознать заболевание у питомца позволит необычное поведение. Это может быть беспричинное беспокойство, повышенная чувствительность к свету и шуму, агрессия. Дикие животные, зараженные бешенством, не проявляют страха перед человеком. Кроме того, инфекция вызывает судороги, слюнотечение, нарушение координации движений, паралич. Единственная мера профилактики заболевания ― вакцинация.
«Мы напоминаем владельцам животных, что отсутствие вакцинации у питомцев или уклонение от ее проведения является нарушением закона, за которое предусмотрена административная ответственность», ― отметили в пресс-службе Комитета ветеринарии города Москвы.
Кроме того, сделать питомцу прививку от бешенства можно бесплатно во временных прививочных пунктах. Они работают во всех округах столицы в офисах объединенной диспетчерской службы ГБУ «Жилищник». На территории Троицкого и Новомосковского округов такие пункты организованы на базе белых спецавтомобилей с логотипом столичного Комитета ветеринарии. Адреса и график работы временных прививочных пунктов размещены на mos.ru. Дополнительную информацию о вакцинации животных можно уточнить по телефону горячей линии: +7 (495) 612-04-25 (круглосуточно).
Также привить питомца можно в любом подразделении государственной ветеринарной службы. Информация о работе ветклиник размещена на портале открытых данных Правительства Москвы в разделе «Центры бесплатной вакцинации животных против бешенства».
Услуга по записи питомца на прием к ветврачу доступна онлайн на сайте mos.ru или в мобильном приложении «Госуслуги Москвы». Кроме того, для вакцинации животного можно вызвать ветеринарного врача на дом.
Прививка от бешенства
Бешенство является острой зоонозной (передающейся от животных) инфекцией, которая поражает ЦНС и заканчивается в 100% случаях летальным исходом при отсутствии своевременной специфической иммунопрофилактики.
Вирус находится в слюне диких животных (лисицы, собаки, кошки, летучие мыши, кабаны, грызуны), появляясь в ней не ранее чем за 10 дней до развития симптомов инфекции. Заражение происходит при попадании инфицированной слюны дикого животного на поврежденные участки кожных покровов человека, на слизистую оболочку, через загрязненные слюной предметы, при разделке зараженных туш и проч.
Клинические проявления бешенства проявляются, как правило в период от 1 до 3 месяцев, но могут колебаться как в одну, так и в другую сторону (от нескольких дней до года). Такой разброс зависит от инфицирующей дозы, места укуса. Основные клинические проявления бешенства: возбуждение, паралич, чувство страха, боязнь воды.
Вакцинации подлежат лица, контактировавшие с больными животными.
Плановая профилактика отечественными вакцинами путем трехкратного внутримышечного введения одной дозы вакцины (0,7,30 день) проводится у сотрудников ветеринарных лабораторий, охотников, егерей. Ревакцинация через 1 год, далее — каждые 3 года.
Выработка иммунитета происходит на 10-14 дней после вакцинации.
Если вы проходите курс вакцинации от бешенства, нельзя переутомляться, переохлаждаться или, наоборот, перегреваться, употреблять спиртные напитки. Во время прививок необходимо тщательно следить за состоянием здоровья. И при любых жалобах на ухудшение состояния необходимо обратиться к врачу, а прививки временно прекратить.
Побочные эффекты у всех вакцин примерно одинаковы и включают в себя местные реакции в виде болезненности, отека и уплотнения, увеличение лимфатических узлов, общее недомогание, слабость, головная боль, нарушение сна и аппетита, повышение температуры, а также иногда бывает аллергическая реакция на компоненты вакцины.
Ни в коем случае не следует отказываться от назначенного лечения и самовольно прерывать его, это может привести к трагическим последствиям.
Прививочный курс, с учетом результатов наблюдения за домашним животным (собакой или кошкой), может быть по решению врача сокращен.
В заключение хотелось бы сказать: все зависит только от нас, наше здоровье — не исключение. Как, и с какой ответственностью, мы будем относиться к себе, окружающим нас людям и животным, таким и будет результат.
Это должен знать каждый! Будьте бдительны
Чаще всего бешенство передается через слюну животных: укус зараженной собаки, кошки, крысы, белки. Особенно распространены случаи заражения бешенством от укуса собак. Бешенство — страшная болезнь, ведущая к смерти в течении двух недель с момента появления первых симптомов. Однако оно поддается легкому, безболезненному и бесплатному лечению, если действовать сразу после укуса.
Представляем Вам пошаговую инструкцию, что нужно делать после укуса собаки, чтобы не умереть от бешенства:
Сразу после укуса — промойте рану проточной теплой водой с мылом. После этого обработайте рану перекисью водорода.
Идите в ближайший травма пункт. Не откладывайте «на завтра», даже если укус произошёл ночью.
В травмо пункте вам должны осмотреть рану и принять решение о назначении лечения. Если есть возможность найти укусившее вас животное, то нужно сделать это. Если нет — то необходимо начинать лечение сразу.
Процедура лечения безболезненна и бесплатна. В настоящее время для профилактики бешенства нужно пройти курс из 6 уколов в плечо. Уколы делаются на 0, 3, 7, 14, 30 и 90 день после укуса. Прививки от бешенства обязаны делаться бесплатно и вне очереди.
Во время уколов и через полгода после них нельзя пить алкогольные напитки. Это может нивелировать эффект уколов и навредить вашему организму, особенно печени.
Помните, что бешенство очень опасно и убивает человека спустя 2 недели после появления первых симптомов. Болезнь может не проявиться сразу после укуса собаки, а переждать инкубационный период (до года). Намного лучше и эффективнее — начать лечение сразу после укуса собаки.
Начинать лечение после появления симптомов бешенства — крайне неэффективно. Поэтому, даже если вас укусила ваша домашняя собака — обязательно обратитесь к врачу. Даже у животных признаки бешенства могут проявляться не сразу.
Если у вас есть возможность наблюдать за животным, которое вас укусило (например, если это ваша домашняя собака) — то отлично. Если у животного не начнут проявляться признаки бешенства спустя 2 недели, то курс уколов можно приостановить.
Савицкая Т.С. Медицинская сестра травматологического отделения УЗ «29 поликлиника»
Прививки от бешенства и бустеры для людей
Если у вас есть дополнительная информация о вакцине против бешенства, позвоните или посетите ближайшее отделение Pharmaca.
НАЙТИ МАГАЗИН
Получите дополнительную информацию о прививках от бешенства для людей и о том, следует ли вам получить вакцину от бешенства в Pharmaca:
О вакцине против бешенства Вакцина против бешенства для людей доступна людям, которые живут в местах или имеют работу, которая подвергает их более высокому риску контакта с бешенством, например ветеринарам.
Он также доступен и вводится людям после укуса животного, потенциально способного заразиться бешенством.
Вакцина против бешенства для людей безопасна и эффективна. Он используется для предотвращения бешенства до контакта с вирусом, а также для борьбы с вирусом после контакта с ним. Полный курс вакцины обеспечивает длительный иммунитет. Вакцина от бешенства обычно вводится путем инъекции в кожу или мышцы, а если вы подверглись заражению, вакцинация обычно проводится вместе с иммуноглобулином против бешенства.
CDC рекомендует вакцинировать людей, которые подвергаются высокому риску заражения бешенством, до потенциального контакта с ним.
Где получить вакцину против бешенстваВакцина от бешенства — безопасная и эффективная вакцина, которую можно сделать почти каждому, и она может помочь предотвратить передачу бешенства при контакте с бешеным животным.
ФармацевтыPharmaca являются одними из лучших в своей области и уделяют особое внимание индивидуальному консультированию и уходу за каждым пациентом.Мы работали с некоторыми из ведущих специалистов медицинской отрасли, чтобы обеспечить самые лучшие и безопасные услуги иммунизации по всей стране.
Думаете о вакцинации от бешенства? Щелкните здесь, чтобы назначить встречу.
Что такое бешенство?Бешенство — это вирусное заболевание млекопитающих, которое передается от укуса бешеного животного. Большинство случаев бешенства, о которых сообщается в CDC, происходит в результате укусов диких животных. Бешенство у человека может возникнуть в результате укуса инфицированного животного и является серьезным заболеванием.
Вирус бешенства поражает центральную нервную систему, в конечном итоге вызывая заболевание мозга и, если его не лечить, смерть.
Как передается бешенство?Бешенство передается человеку через слюну инфицированных животных.
Бешенство переносится только среди млекопитающих, и, согласно CDC, причиной бешенства у людей являются в основном такие животные, как летучие мыши, койоты, лисы, еноты и скунсы. В некоторых странах Африки и Юго-Восточной Азии бездомные собаки часто являются наиболее вероятными виновниками распространения бешенства среди людей.
В редких случаях передача бешенства может происходить при попадании инфицированной слюны в открытую рану или на слизистые оболочки, такие как рот или глаза. Это может произойти, если животное, больное бешенством, зализывало открытый порез или рану на коже.
Симптомы бешенстваРанние симптомы бешенства у людей аналогичны симптомам многих других болезней, включая жар, головную боль и общую слабость или дискомфорт. По мере прогрессирования болезни появляются более специфические симптомы бешенства, которые становятся тем серьезнее, чем дольше вирус продолжает распространяться.Смерть обычно наступает в течение нескольких дней после появления этих симптомов.
Ранние симптомы бешенства у людей могут быть очень похожи на симптомы гриппа и могут длиться несколько дней. Более поздние признаки и симптомы могут включать:
- Лихорадка
- Головная боль
- Тошнота
- Рвота
- Агитация
- Беспокойство
- Путаница
- Гиперактивность
- Затруднение глотания
- Чрезмерное слюноотделение
- Боязнь воды (водобоязнь) из-за затруднения глотания
- Галлюцинации
- Бессонница
- Частичный паралич
Вам следует немедленно обратиться за медицинской помощью, если вас укусило какое-либо животное или если вы подверглись контакту с животным, которое могло болеть бешенством.Затем медицинский работник может решить, следует ли вам лечиться от бешенства.
Вакцинация против бешенстваХотя бешенство неизлечимо по прошествии определенного времени, существует вакцина против бешенства для человека, которая полностью предотвращает заражение бешенством. Эта прививка от бешенства сделана из вируса бешенства, которого уже нет в живых, и поэтому он не может вызывать бешенство.
Вакцина против бешенства для людей рекомендуется людям с повышенным риском контакта с бешенством.Например, вакцина против бешенства может потребоваться для:
- Ветеринары или обработчики животных
- Люди, изучающие или исследующие пещеры
- Люди, изучающие сам вирус бешенства
- Путешественники в страны, где широко распространено бешенство
Вакцинация от бешенства проводится в трех дозах. Вторая доза вводится через 7 дней после первой, а третья доза — через 21 или 28 дней после первой.
Побочные эффекты вакцины против бешенстваКак и в случае с любым другим лекарством, очень малая вероятность того, что вакцина против бешенства может вызвать побочную реакцию.Но вакцинация от бешенства намного безопаснее, чем заражение самим бешенством.
Побочные эффекты вакцины против бешенства обычно незначительны и проходят через несколько дней. Они могут включать:
- Боль, опухоль или покраснение в месте укола
- Головная боль
- Расстройство желудка
- Боль в животе
- Боли в мышцах
- Головокружение
Менее распространенные побочные эффекты вакцины против бешенства включают:
- Крапивница (зудящие пятна на коже)
- Боль в суставах
- Лихорадка
Серьезные побочные эффекты вакцины против бешенства очень редки.
Бешенство — Диагностика и лечение
Диагноз
Когда бешеное животное кусает вас, невозможно узнать, передало ли оно вам вирус бешенства. По этой причине рекомендуется лечение для предотвращения заражения вашего организма вирусом бешенства, если врач считает, что есть вероятность, что вы подверглись воздействию вируса.
Лечение
Если инфекция бешенства установлена, эффективного лечения не существует.Хотя небольшое количество людей пережили бешенство, болезнь обычно приводит к смерти. По этой причине, если вы думаете, что заразились бешенством, вам необходимо сделать серию уколов, чтобы инфекция не распространялась.
Лечение людей, укушенных бешенством животными
Если вас укусило животное, которое, как известно, больно бешенством, вам сделают серию уколов, чтобы вирус бешенства не заразил вас. Если животное, которое укусило вас, не может быть найдено, безопаснее всего предположить, что оно больно бешенством.Но это будет зависеть от нескольких факторов, таких как вид животного и ситуация, в которой произошел укус.
Прививки от бешенства включают:
- Укол быстрого действия (иммуноглобулин бешенства) для предотвращения заражения вирусом. Часть этой инъекции вводится рядом с местом, где животное укусило вас, если возможно, как можно скорее после укуса.
- Серия прививок от бешенства, чтобы помочь вашему организму выявлять вирус бешенства и бороться с ним. Прививки от бешенства делаются в виде инъекций в руку.Вы получите четыре инъекции в течение 14 дней.
Определение наличия бешенства у животного, которое укусило вас.
В некоторых случаях до начала серии прививок от бешенства можно определить, есть ли у животного, которое вас укусило, бешенство. Таким образом, если будет установлено, что животное здорово, вам не понадобятся уколы.
Процедуры определения наличия у животного бешенства различаются в зависимости от ситуации. Например:
Домашние и сельскохозяйственные животные. За кусающимися кошками, собаками и хорьками можно наблюдать в течение 10 дней, чтобы узнать, проявляются ли у них признаки и симптомы бешенства. Если животное, укусившее вас, остается здоровым в течение периода наблюдения, значит, у него нет бешенства, и вам не понадобятся прививки от бешенства.
Другие домашние и сельскохозяйственные животные рассматриваются в индивидуальном порядке. Поговорите со своим врачом и местными чиновниками здравоохранения, чтобы определить, следует ли вам делать прививки от бешенства.
- Дикие животные, которых можно поймать. Дикие животные, которых можно найти и поймать, например летучую мышь, попавшую в ваш дом, можно убить и проверить на бешенство. Исследования мозга животного могут выявить вирус бешенства. Если животное не болеет бешенством, вам не понадобятся прививки.
- Животные, которых нельзя найти. Если животное, которое укусило вас, не найдено, обсудите ситуацию со своим врачом и местным отделом здравоохранения. В некоторых случаях безопаснее всего предположить, что животное больно бешенством, и продолжить вакцинацию от бешенства.В других случаях маловероятно, что укусившее вас животное болело бешенством, и может быть определено, что прививки от бешенства не нужны.
Подготовка к приему
Если животное укусило вас, обратитесь за медицинской помощью по поводу раны. Также сообщите врачу об обстоятельствах получения травмы. Врач спросит:
- Какое животное тебя укусило?
- Было ли это дикое животное или домашнее животное?
- Если это было домашнее животное, знаете ли вы, кому принадлежит домашнее животное? Была ли вакцинирована?
- Можете ли вы описать поведение животного перед тем, как оно вас укусило? Было ли животное спровоцировано?
- Удалось ли вам поймать или убить животное после того, как оно вас укусило?
Что вы можете сделать тем временем
Осторожно и тщательно промойте рану с мылом и большим количеством воды.Это может помочь смыть вирус.
Если животное, которое укусило вас, можно задержать или поймать, не причинив ему большего вреда, сделайте это. Не убивайте животное ударом или выстрелом в голову, поскольку полученные травмы могут затруднить выполнение лабораторных тестов для определения наличия у животного бешенства.
Сообщите врачу, что вы поймали животное, которое вас укусило. Затем ваш врач может связаться с местным отделом здравоохранения, чтобы определить, что делать с животным.
Декабрь06, 2019
Схема постконтактной профилактики бешенства, укусы животных и риск бешенства
На этой странице:
Обзор ПКП от бешенства
Иммуноглобулин против бешенства человека (HRIG)
Вакцина против бешенства
Биологические препараты против бешенства
Побочные реакции
Обзор ПКП от бешенства
Схема ПКП против бешенства включает введение человеческого иммуноглобулина против бешенства (HRIG), который вводится только один раз, и серию из четырех вакцинаций против бешенства объемом 1,0 мл (Таблица 3: Постконтактная профилактика бешенства для здоровых, иммунокомпетентных лиц, включая беременных женщин (PDF )).HRIG и первая вакцинация проводятся в первый день лечения (обозначенный день 0), а три дополнительных вакцинации от бешенства делаются на 3, 7 и 14 дни.
Лица с ослабленным иммунитетом получают пятую вакцинацию на 28 день и должны пройти тестирование на сероконверсию через 7–14 дней после завершения режима ПКП (Таблица 4: Лица с ослабленным иммунитетом после контакта с бешенством (PDF)).
Пациенты, которые ранее получали профилактику бешенства до или после контакта, должны получить только две ревакцинации против бешенства после контакта, введенные в дни 0 и 3.Пациентам, которые были ранее вакцинированы, НЕ СЛЕДУЕТ получать HRIG.
Иммунный глобулин против бешенства человека (HRIG)
Человеческий антирабический иммуноглобулин (HRIG) проникает вокруг места укуса (-ов) и обеспечивает быструю пассивную иммунную защиту с периодом полураспада примерно 21 день. Его вводят только один раз, в первый день режима ПКП (обозначенный день 0). Следует вводить не более рекомендованной дозировки HRIG, поскольку чрезмерное количество HRIG может частично подавить активную выработку антител.Если HRIG не вводился в день 0, его можно вводить до 7 дня схемы ПКП включительно. После 7-го дня HRIG не указывается, поскольку в этот период времени возникает антительный ответ пациента на вакцину.
- Рекомендуемая доза HRIG составляет 20 МЕ / кг массы тела для всех возрастов, включая детей.
- Проникните как можно большим количеством HRIG в рану от укуса и вокруг нее.
- Ввести оставшийся HRIG внутримышечно (IM) в месте, удаленном от первого места вакцинации, обычно в четырехглавой или дельтовидной мышцах.
- Если раны нет, например, после контакта с летучей мышью в спальне, введите всю дозу HRIG в квадрицепсы или дельтовидные мышцы.
Вмешательство HRIG при введении вакцины против живого вируса
HRIG может взаимодействовать с живыми вирусными вакцинами. Таким образом, рекомендуемый интервал между вакцинацией HRIG и вакцинами против кори или ветряной оспы составляет четыре месяца.
Вакцина против бешенства
Доза вакцины против бешенства 1,0 мл вводится внутримышечно в дельтовидную область взрослым или переднебоковую часть бедра маленьким детям в дни 0, 3, 7 и 14 режима ПКП против бешенства (Таблица 3: Профилактика бешенства после контакта с здоровьем, Иммунокомпетентные люди, в том числе беременные женщины (PDF)).Первая вакцинация проводится одновременно с HRIG в месте, удаленном от HRIG. Дополнительная пятая доза вакцины против бешенства вводится на 28 день пациентам с ослабленным иммунитетом (Таблица 4: Профилактика бешенства после контакта с ослабленным иммунитетом (PDF)). Вакцину против бешенства нельзя вводить в ягодичные мышцы из-за возможности плохой абсорбции из этого места и более низких титров нейтрализующих антител.
Две инактивированные вакцины против бешенства на культуре клеток доступны в настоящее время в Соединенных Штатах: вакцина на основе диплоидных клеток человека (HDCV) или вакцина из очищенных клеток куриного эмбриона (PCEC).Оба считаются одинаково безопасными и эффективными. Рекомендуется начать серию вакцины и дополнить ее одним и тем же вакцинным продуктом; однако снижение эффективности или увеличение частоты побочных реакций не были зарегистрированы, когда серия начиналась с одного вакцинного продукта и дополнялась другим. Серия вакцины против бешенства вызывает активный иммунный ответ, для развития которого требуется от 7 до 10 дней и который сохраняется в течение многих лет. Информационный бюллетень о вакцине против бешенства (VIS) доступен для распространения в CDC.
Ранее вакцинированные
Ранее вакцинированные лица — это лица, завершившие курс вакцины на основе диплоидных клеток человека (HDCV) или вакцины из очищенных клеток куриного эмбриона (PCEC) до или после контакта или получившие другую вакцину за пределами США и имеющие документально подтвержденный титр сыворотки, соответствующий полной нейтрализации при разведении сыворотки> 1: 5 (или его эквиваленте, приблизительно 0,1-0,2 МЕ / мл) с помощью теста быстрого подавления флюоресцентного фокуса (RFFIT) (Ссылка № 7).После заражения ранее вакцинированным людям вводят две дозы вакцины по 1,0 мл внутримышечно в дельтовидную область в дни 0 и 3. HRIG не вводят. Если предыдущая схема вакцинации пациента до или после контакта проводилась до 1985 года, то человек считается невакцинированным. Назначьте полный режим ПКП от бешенства, включая HRIG.
Отклонения от рекомендованного графика вакцинации ПКППосле того, как было принято решение начать ПКП против бешенства, режим ПКП должен быть начат как можно скорее.Следует приложить все усилия, чтобы придерживаться рекомендованного графика режима ПКП, особенно в первые два дня лечения, дни 0 и 3. После 3 дня режима допустимы отклонения в несколько дней. В случае самых незначительных задержек или перерывов график вакцинации может быть изменен и возобновлен, как если бы пациент был по графику. Например, если пациент пропустил дозу, назначенную на 7-й день, и поступил на вакцинацию на 10-й день, доза 7-го дня должна быть введена в этот же день, а последняя доза должна быть введена через неделю на 17-й день.
Пожалуйста, проконсультируйтесь с эпидемиологом MDH, если произошли существенные отклонения от рекомендованного графика.
Биопрепараты для борьбы с бешенством человека
Продукты от бешенства коммерчески доступны через фармацевтических дистрибьюторов или могут быть получены напрямую от производителей по бесплатным телефонным номерам, указанным ниже. Министерство здравоохранения Миннесоты не предоставляет биопрепараты от бешенства. Уточняйте наличие в аптеке.
Продукты человеческого иммуноглобулина против бешенства (HRIG)
(Примечание: эффективность зависит от продукта)
Имогам® Rabies-HT
Санофи Пастер
Активность 150 МЕ / мл
1-800-822-2463
HyperRab ™ S / D (производство прекращается в конце 2018 г.)
Grifols Therapeutics
Байер Биологические Продукты
Активность 150 МЕ / мл
1-800-243-4153
HyperRab ™
Grifols Therapeutics
Байер Биологические Продукты
Активность 300 МЕ / мл
1-800-243-4153
KEDRAB ™
Kedrion Biopharma and Kamada Ltd
Активность 150 МЕ / мл
1-855-353-7466
Человеческие вакцины против бешенства
Вакцина с диплоидными клетками человека (HDCV)
Imovax IM® (до и после воздействия)
Санофи Пастер
1-800-822-2463
Очищенная вакцина из клеток куриного эмбриона (PCEC)
RabAvert® (до и после экспонирования)
GlaxoSmithKline
888-825-5249
Программы помощи пациентам
Оба производителя вакцины против бешенства имеют программы помощи пациентам, которые предоставляют биопрепараты соответствующим критериям застрахованным или незастрахованным пациентам.
Побочные реакции
В целом, существует очень низкая частота серьезных побочных реакций на режим ПКП против бешенства. За приемом HRIG могут следовать местная боль, головная боль и субфебрильная температура. Боль, эритема, отек, зуд и другие легкие местные реакции отмечаются у 11-90% вакцин. ПКП от бешенства не следует прерывать или прекращать из-за местных или легких системных побочных реакций на вакцину против бешенства. Нестероидные противовоспалительные препараты и жаропонижающие средства, такие как ибупрофен или ацетаминофен, могут использоваться для контроля легких побочных реакций.
Реакция, подобная иммунному комплексу (генерализованная крапивница, иногда сопровождающаяся артралгией, артритом, ангионевротическим отеком, тошнотой, рвотой, лихорадкой и недомоганием), возникает примерно у 6% предварительно вакцинированных лиц, получивших бустерную дозу вакцины против бешенства после первичной вакцинации. вакцинация. Хотя это бывает редко, эта реакция может возникнуть у людей, получающих первичную вакцинацию. О случаях смерти в результате этих реакций не сообщалось.
Когда человеку с историей серьезной гиперчувствительности к вакцине против бешенства необходимо ревакцинировать, одновременно с вакциной можно вводить антигистаминные препараты, и у пациента следует наблюдать за развитием анафилаксии сразу после вакцинации.
- Отделение зоонозных заболеваний доступно по телефону 651-201-5414, где можно проконсультироваться по поводу лечения возможного заражения бешенством и ПКП у пациентов с серьезными побочными реакциями на вакцину против бешенства в анамнезе.
Для получения дополнительной информации о безопасности биопрепаратов против бешенства обратитесь к Manning, SE., Et al., Профилактика бешенства у людей — США, 2008 г .: Рекомендации Консультативного комитета по практике иммунизации. MMWR Recomm Rep, 2008. 57 (RR-3): стр.9-10.
вакцины против бешенства — e7 Health
e7 Health — компания, специализирующаяся на профилактике здоровья и благополучия. Клинику контролируют сертифицированные врачи. Мы предоставляем комплексные профилактические медицинские и оздоровительные услуги. Мы предлагаем встречи в тот же день или на следующий день и позволяем вам записаться на прием онлайн!
Наши услуги по иммунизации включают все вакцины, доступные в США для работы, учебы, путешествий, иммиграции и общего состояния здоровья.Если вам нужны вакцины, которые входят в серию, мы заранее запланируем все последующие дозы. Можно записаться на прием в тот же или следующий день для вакцинации и лабораторных услуг с минимальным ожиданием или без него. e7 Health предоставит вам официальную копию вашей записи о вакцинации из государственной базы данных иммунизации.
ЧТО ТАКОЕ БЕШЕНСТВО?
Бешенство — это прогрессирующая инфекция центральной нервной системы. Это вызвано вирусом семейства Rhabdoviradae, род Lyssavirus. Он передается через укусы, царапины или облизывания на открытую кожу или слизистые оболочки бешеных животных.
СИМПТОМЫ
Период до появления симптомов после заражения человека варьируется, но обычно составляет 20-90 дней после заражения в зависимости от степени тяжести и места укуса. Иногда инкубационный период может длиться до нескольких лет.
Начальные симптомы могут включать:
- Покалывание в месте укуса / царапины
- Лихорадка
- Головная боль
- Беспокойство / раздражительность
- Депрессия
- Мышечные боли
Бешенство без лечения затем перерастет в яростное или паралитическое бешенство:
Яростное бешенство:
- Боязнь воды
- Спазмы мышц, контролирующих дыхание
- Судороги общие
- Окончательная кома и смерть
Паралитическое бешенство:
- Летаргия
- Дриблинг / пускание слюни
- Паралич
- Окончательная смерть
КТО ДОЛЖЕН ИМЕТЬ ВАКЦИНУ ОТ БЕШЕНСТВА?
Вакцинация от бешенства проводится по одной из двух причин:
- Предэкспозиционная профилактика: профилактическое введение серии вакцин для людей с риском заражения бешенством.
- Путешественники
- Путешественники, совершающие длительные поездки в места повышенного риска
- Путешественники, совершающие краткосрочные поездки в места высокого риска, особенно если пункт назначения находится на расстоянии> 24 часов от надежного источника антирабической вакцины и антирабического иммуноглобулина (лечение от заражения)
- Путешественники в местах повышенного риска с обширным пребыванием на открытом воздухе, независимо от продолжительности пребывания
- Любой, не склонный к риску путешественник в пункт назначения с высоким риском, особенно если он занимается деятельностью с высоким риском.Например, путешественник по Юго-Восточной Азии в гостях у Обезьяньего леса.
- Ветеринары
- Студенты-ветеринары
- Специалисты по контролю за животными и дикой природой
- Работники исследовательских, диагностических или биологических учреждений по изучению бешенства
- Спеланкер
- Путешественники
- Пост-контакт: введение серии вакцин после контакта или возможного контакта с вирусом бешенства.
- Постконтактная вакцинация должна быть сделана по показаниям как можно скорее, но может быть сделана независимо от временного интервала после контакта, даже если контакт произошел за несколько месяцев или лет до этого.
О ВАКЦИНЕ
Предэкспозиционная серия вакцины вводится в 3 приема. Необходимо, чтобы 3 дозы соответствовали точному расписанию: день 0, день 7, день 21 или день 28.Он вводится в дельтовидную мышцу.
Послеконтактная серия вакцины вводится серией из 4 или 5 доз в зависимости от определенных факторов воздействия и информации о состоянии здоровья человека и должна определяться индивидуальной консультацией и оценкой каждого сценария случая. e7 Медицинские врачи хорошо осведомлены о постконтактной профилактике бешенства. У нас всегда под рукой вакцина от бешенства, в отличие от некоторых других клиник, которым требуется специальный заказ этой вакцины.
Загрузить информационные бюллетени по вакцинам (VIS)Рекомендуемые вакцины
e7 Health имеет ВСЕ рекомендуемые и / или необходимые вакцины, необходимые для вашего путешествия:
Биологов грозит счет в 48 512 долларов за прививку от бешенства после укуса кошкиKaiser Health News
Сострадание к голодной бездомной кошке привело к тому, что она укусила палец, а также откусила от бумажника Жаннетт Паркер.
В сельской местности недалеко от национального парка Эверглейдс Флориды Паркер заметил котенка, блуждающего по дороге. Она выглядела тощей и болезненной, и когда Паркер, биолог по дикой природе, предложила тунца, который она ела в своей машине, кошка укусила ее за палец.
«Он сломал мне кожу его зубами», — вспоминает она.
Промыв рану, она провела небольшое исследование и начала беспокоиться о бешенстве, поскольку в округе Майами-Дейд в то время действовали предупреждения об этой потенциально смертельной болезни.
Затем она поехала к себе домой в Флорида-Кис и позвонила в департамент здравоохранения, но тот был закрыт.
Итак, она направилась в отделение неотложной помощи в больнице Маринерс, недалеко от ее дома. Она сказала, что провела около двух часов в отделении неотложной помощи, получила два разных типа инъекций и антибиотик и никогда не разговаривала с врачом.
«Я вернулась домой счастливая, как моллюск», — сказала она.
Потом пришли счета.
После учета выплат страховщика Джаннетт Паркер пришлось заплатить 4 191 доллар.«Мои похороны были бы дешевле», — говорит она.Пациент: Жанетт Паркер, 44-летний государственный биолог, занимающийся рыбой и дикой природой. Застрахована Американским союзом почтовых рабочих (APWU), потому что ее муж работает на федеральное правительство в национальном парке Эверглейдс.
Общий счет: 48 512 долларов США, из них 46 422 доллара на одно профилактическое лекарство.
Поставщик услуг: Mariners Hospital, часть Baptist Health South Florida, религиозной некоммерческой сети с восемью больницами и множеством других учреждений.
Медицинская служба: Рана Паркер была обследована, и ей сделали первую в серии прививок от бешенства, а также инъекцию 12 миллилитров антирабического иммуноглобулина, антитела, которое запускает иммунную систему и обеспечивает защиту от вируса. вирус, пока вакцина не сработает.
Что дает: Когда вы потенциально подвержены смертельному исходу, вам потребуется лечение. В настоящий момент сложно присмотреться к магазинам или отказаться от высоких цен.Пациенты застряли.
По оценкам Центров по контролю и профилактике заболеваний, профилактическое лечение бешенства после контакта, которое включает иммуноглобулин и четыре дозы вакцины, вводимые в течение двухнедельного периода, обычно стоит в среднем более 3000 долларов. По оценкам CDC, от 40 000 до 50 000 человек ежегодно получают такое лечение после контакта с потенциально бешеными животными. Каждая больница может устанавливать свои цены на лечение.В случае Паркера большая часть затрат приходилась на антирабический иммуноглобулин.Только за эту инъекцию больница выставила ей и ее страховщику счет в 46 422 доллара. Это намного больше, чем считается типичным.
«Я никогда не слышал ничего такого высокого для иммуноглобулина», — сказал независимый биомедицинский консультант Чарльз Руппрехт, технический советник Всемирной организации здравоохранения по бешенству, который руководил программой по борьбе с бешенством в Центре контроля заболеваний в течение 20 лет. «Как такое возможно?
Паркер подумала, что это показалось слишком высоким после того, как она запросила и получила детализированный счет от своего страховщика, поэтому она погуглила.
«Я видела, что иммуноглобулин стоит дорого, но не , а дорогой», — сказала она. «Я посидел на нем некоторое время, потому что был расстроен. Наконец, я пошел в больницу, чтобы подтвердить, и они сказали: «Да, верно».
Иммунный глобулин против бешенства — это сложный продукт, изготовленный из плазмы крови, предоставленной добровольцами, иммунизированными против бешенства. По данным Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов, этот продукт производят три производителя, и сейчас дефицита нет. В настоящее время средняя оптовая цена приобретения — сумма, которую платят оптовики, которые затем повышают цену при продаже дистрибьюторам или больницам — составляет 361 доллар.26 на миллилитр, по словам Ричарда Эванса, аналитика фармацевтической отрасли в SSR Health, входящей в бутик-инвестиционную фирму SSR LLC.
Используя это среднее значение, стоимость 12-миллилитровой дозы, которую получил Паркер, составила бы 4334 доллара.
Возможно, больница ошиблась при выставлении счета, добавив лишний ноль?
Нет, — заявила представительница Baptist Health Дори Робау Альварес в заявлении, отправленном по электронной почте.
Сумма в размере 46 422 долларов отражает прейскурантные цены, действовавшие в больнице на сентябрь.22 августа 2018 года, когда Паркер лечился. Альварес не стал раскрывать эту ставку, но простая математика показывает, что больница выставляла счет в размере 7 737 долларов за 2-миллилитровую дозу, как часто упаковывают иммуноглобулин.
Альварес также отметил, что через месяц после лечения Паркера компания Mariners обновила свой полный прайс-лист, получив название «chargemaster». Больница снизила плату за иммуноглобулин против бешенства до 1650 долларов за 2 мл, в результате чего счет Паркера составил бы около 9900 долларов — все еще высокий, но не заоблачный.
Больницы периодически возвращаются к своим «кураторам». Но следует отметить, что это конкретное сокращение на 79 процентов произошло незадолго до января, когда новые правила потребовали, чтобы все больницы впервые публиковали эти ранее скрытые списки платежей на веб-сайтах, что является частью интерпретации администрацией Трампа Закона о доступном медицинском обслуживании.
«Заявления для пациентов, которые получали лечение до изменения, будут отражать предыдущую плату», — сказал Альварес.
Она не ответила на дополнительные вопросы о причинах падения цен или цены выше среднего до изменения.
Цены наChargemaster обычно не те, которые платят люди со страховкой. Одним из преимуществ медицинского страхования является то, что страховщики договариваются о скидках на обслуживание внутри сети. Паркер отправился в больницу внутри сети.
Но не для каждой услуги есть договорная скидка, сказали два эксперта по выставлению счетов из America’s Health Insurance Plan, торгового лобби отрасли. А скидка от очень высокой платы остается очень большой суммой денег. В случае Паркер профсоюзный план медицинского страхования ее мужа оплатил 34 618 долларов из ее общего счета за неотложную помощь, включая 33 423 доллара только за иммуноглобулин.
APWU заявило, что запросило аудит законопроекта для проверки его точности. В заявлении, отправленном по электронной почте, говорится, что больше ничего нельзя сделать. «Помимо договорных скидок, план мало что может сделать, чтобы оспорить расходы больницы. Обвинения не достигают уровня мошенничества », — говорится в заявлении.
Разрешение: После учета платежей страховщика Паркер должна была выплатить 4 191 доллар в качестве последних 344 долларов своей годовой франшизы плюс 10 процентов сборов, принятых ее страховщиком.
«Мои похороны были бы дешевле», — сказала она.
Паркер узнала после того, как позвонила своему страховщику, что укус кошки должен был рассматриваться как случайная травма и, следовательно, имел право на 100-процентное покрытие по ее плану страхования за вычетом оставшейся франшизы. Она просит, чтобы больница повторно представила счет в ее план медицинского страхования, чтобы узнать, покроет ли она оставшуюся часть ее 10-процентной доли расходов. Больница не предлагала снизить цену на иммуноглобулин до нынешней цены.
Вывод: Если вы подозреваете, что заразились бешенством, обратитесь за помощью. «Было бы благоразумно обратиться за немедленной и соответствующей медицинской помощью», — сказал Рупрехт.
Многие услуги, относящиеся к сфере общественного здравоохранения, можно получить бесплатно или по низкой цене в местных департаментах здравоохранения. Они варьируются от вакцинации до постэкспозиционного лечения таких заболеваний, как бешенство. Если возможно, проконсультируйтесь с вашим отделом здравоохранения, чтобы узнать, предлагает ли он лечение. Но при серьезном заболевании, таком как бешенство, если эти услуги не доступны немедленно, не ждите.Отправляйтесь в больницу и убедитесь, что она входит в сеть вашей страховой компании, если у вас есть выбор.
Если вы получили счет на огромную сумму, возьмите в больнице подробный счет, а не просто сводку. Более того, теперь, когда руководители больниц общедоступны на веб-сайтах больниц, используйте их.
Они длинные и сложные. По крайней мере, на данный момент они не написаны простым английским языком. Но многие из них расположены в алфавитном порядке, и нетрудно, например, найти запись «Rabies IG» (Иммуноглобулин против бешенства).
Проверьте, насколько цена, выставленная вам, сравнивается с ценой, выставленной вами в вашем регионе. (Вы также можете проверить средние цены на таких сайтах, как HealthcareBluebook.com или FairHealthConsumer.org.) Поделитесь этой информацией с отделом кадров вашего работодателя или используйте ее для переговоров с вашей больницей и страховщиком .
NPR подготовило и отредактировало интервью с Элизабет Розенталь из Kaiser Health News для трансляции. Нэнси Клингенер, репортер из Флорида-Кис, членской станции WLRN, предоставила аудиорепортаж.
У вас непомерный или непомерно высокий счет за медицинские услуги? Присоединяйтесь к KHN и NPR Bill of the Month Club и расскажите нам о своем опыте .
Бешенство — Вакцинация — NHS
Доступна вакцина для защиты людей, подверженных риску заражения бешенством.
Но даже если вы были вакцинированы, вам все равно следует обратиться за неотложной медицинской помощью, если вас укусило или поцарапало животное, которое, возможно, болело бешенством.
Кому следует сделать прививку от бешенства
Люди, которые путешествуют
Вам следует подумать о вакцинации от бешенства, если вы путешествуете по региону мира, где бешенство широко распространено, и:
- вы планируете остаться на месяц или больше, или вряд ли будет быстрый доступ к соответствующей медицинской помощи
- Вы планируете заниматься деятельностью, которая может подвергнуть вас повышенному риску контакта с животными, больными бешенством, например бегом или ездой на велосипеде
На выполнение требуется до 4 недель курс вакцинации, поэтому вам нужно начать его как минимум за 1 месяц до отъезда.
Беременным женщинам рекомендуется делать прививку от бешенства, если считается, что риск заражения бешенством высок и доступ к медицинской помощи ограничен.
Используйте веб-сайт TravelHealthPro, чтобы узнать, есть ли риск заражения бешенством в стране, в которую вы путешествуете.
Люди, подверженные риску на работе
Вакцинация также рекомендуется всем, кто подвергается риску заражения бешенством в связи с работой (платной или добровольной), например:
- человек, регулярно обращающихся с летучими мышами
- человек, которые обращаются с импортированными животными , например, работники карантинных центров животных
- лабораторные работники, работающие с пробами на бешенство
Если вы считаете, что это относится к вам, поговорите со своим работодателем или специалистом по гигиене труда.Если вы регулярно берете с собой летучих мышей добровольно, поговорите с терапевтом о вакцине против бешенства.
Где сделать вакцину от бешенства
Вы можете сделать прививку от бешенства в приемной терапевта, но вам, возможно, придется заплатить за нее.
Вы также можете оплатить вакцину в частной туристической клинике вакцинации.
Придется ли мне платить за вакцину против бешенства?
Обычно вам придется заплатить за вакцину от бешенства, если она вам понадобится для защиты во время путешествий.
Курс вакцинации состоит из 3 доз. Каждая доза обычно стоит от 40 до 60 фунтов стерлингов, а полный курс обычно стоит от 120 до 180 фунтов стерлингов.
Если вам нужна вакцина из-за риска заражения бешенством на работе, ваш работодатель должен иметь возможность предоставить вам вакцину бесплатно. Спросите об этом своего работодателя или поставщика медицинских услуг.
Если вы регулярно берете с собой летучих мышей добровольно, вам следует поговорить с терапевтом, чтобы узнать, имеете ли вы право на бесплатную вакцинацию.
Как вводится вакцина от бешенства
Вакцина от бешенства вводится в виде инъекций в плечо.
Вам понадобится 3 дозы вакцины, обычно в течение 28 дней.
Если вы планируете отправиться в район, где обнаружено бешенство, вам следует пройти полный курс из 3 доз перед отъездом.
Бустерные дозы
Если вы уже были вакцинированы от бешенства, но продолжаете подвергаться риску (например, по работе), вам могут потребоваться дополнительные «бустерные» дозы, чтобы обеспечить вашу защиту.
Поговорите со своим работодателем или поставщиком медицинских услуг о бустерных дозах, которые могут вам понадобиться.
Путешественникам можно назначить 1 бустерную дозу, если вы были вакцинированы более года назад и снова путешествуете в зону повышенного риска.
Побочные эффекты вакцины против бешенства
После вакцинации против бешенства у некоторых людей появляются временные болезненные ощущения, покраснение и припухлость в месте инъекции на 24–48 часов.
В редких случаях некоторые люди также испытывают:
- умеренно высокую температуру (лихорадку)
- головную боль
- мышечные боли
- рвоту
- сыпь
Вакцины, используемые в Великобритании, содержат неактивные (мертвые) ) форма вируса бешенства, поэтому вы не можете заразиться бешенством после вакцинации.
Последняя проверка страницы: 9 января 2020 г.
Срок следующей проверки: 9 января 2023 г.
Вакцина COVID-19 на основе вируса бешенства CORAVAX ™ индуцирует высокие уровни нейтрализующих антител против SARS-CoV-2
Клетки и вирусы
BSR, клетки Vero E6 и Vero (CCL-81) были получены от ATCC и культивированы в 1X DMEM (Corning, № по каталогу 10-013-CV) с добавлением 5% (об. / об.) фетальной бычьей сыворотки (FBS), 1% (об. / об.) пенициллина / стрептомицина и поддерживали при 37 ° C и 5% CO 2 .
SARS-CoV-2 был получен из BEI (штамм WA-1). Исходные материалы готовили путем инфицирования клеток Vero E6 в 2% сыворотке в течение пяти дней, замораживали-размораживали и осветляли центрифугированием (PO). Титр исходного материала определяли с помощью анализа бляшек с использованием клеток Vero E6 и составляли 1 × 10 7 БОЕ / мл и 1,5 × 10 6 TCID50 / мл. Этот посевной материал амплифицировали в Vero CCL81 (P1) при 1,5 × 10 6 TCID50 / мл. Вся работа с инфекционным вирусом проводилась в лаборатории с уровнем биобезопасности 3 и одобрена институциональным комитетом по биобезопасности и экологической безопасностью и здоровьем.
Антитела
SARS-COV / COV-2 S1 поликлональные кроличьи сыворотки, полученные от Invitrogen, № по каталогу PA5-81798. Поликлональные сыворотки мышей SARS-CoV-2 S1 получали от мышей, иммунизированных вектором VSV, экспрессирующим SARS-CoV2 S1. Человеческий моноклональный препарат против RABV-G 4C12 был получен из гибридомы 4C12 (предоставлен доктором Скоттом Дессейном, Институт медицинских исследований Ланкенау, Виннвуд, Пенсильвания).
Конструирование плазмиды
Вакцинный вектор BNSP333 был описан ранее 37 .Оптимизированная по кодонам кДНК, кодирующая белок SARS-CoV-2 Spike и гликопротеин RABV, были получены от Genscript. Фрагменты ПЦР, кодирующие аминокислоты 1-682 SARS-CoV-2 и аминокислоты 428–524 гликопротеина SAD-B19 RABV, амплифицировали с использованием праймеров CP1674P 5′-AAACTAACACCCCTCCGTACGCCACCATGTTCGTGTTTCTGGT-3 ‘и праймеров CP1675MGGTCCGT-3’ и CP1675MAGGTCCGT-3 ‘и CP1675MAGGTCC CP1676P 5’-CTCCCCAAGGTCTGTGGGAGATGAGGCCG-3 ‘и CP1677M 5′-TTAGTTTTTTTCATGGCTAGCTCACAGCCTGGTCTCGCC-3’ соответственно. Два фрагмента были соединены и вставлены между сайтами BsiWI и NheI BNSP333 с использованием клонирования In-Fusion (Takara Bio Inc., Маунтин-Вью, Калифорния), чтобы создать BNSP333-S1-RVG (CORAVAX). Рекомбинантные клоны проверяли секвенированием ДНК.
Кодоны 16–681 гена белка-шипа были амплифицированы с использованием оптимизированной по кодону кДНК в качестве матрицы и праймеров CP1699P: 5′-TGACGCACCTAGATCTGTGAACCTGACCACAAGGACC-3 ‘и CP1700M: 5′-CGTATGGATAGTCGACGAGTGTGI и сайтов 3′-CGTATGTCGTCGTGTG, вставленных между сайтами 3’-CGTATGTCGACGCCGTG и SalGTGI вектор pDISPLAY для создания плазмиды экспрессии для продукции растворимого S1, слитого с C-концевой меткой HA (Invitrogen Inc., Уолтем, Массачусетс).
Очистка, инактивация и титрование вирусов
Рекомбинантные RABV были выделены, очищены, инактивированы и титрованы. Вкратце, реагент для трансфекции X-tremeGENE 9 (Millipore Sigma, № по каталогу 6365809001) был использован для котрансфекции полноразмерного клона вирусной кДНК, кодирующего CORAVAX, вместе с плазмидами, кодирующими белки N, P и L RABV и РНК-полимеразу T7, в BEAS- 2B клетки легких человека в 6-луночных планшетах (RABV). Супернатант через восемь дней после трансфекции собирали, фильтровали через фильтр 0.Мембранный фильтр 22 мкм (Millipore) и титрование на ячейках VERO. Присутствие рекомбинантного вируса проверяли путем иммуноокрашивания моноклональным антителом против нуклеопротеина (FujiRebio, № по каталогу 800-092) и поликлональной антисывороткой против домена S1 (Thermo Fisher, № по каталогу PA581798). Затем отфильтрованный вирус использовали для инокуляции клеток VERO, засеянных в камерах для культивирования Cellstack (Corning) и размноженных в среде VP-SFM (Thermo Fisher Scientific) в течение 18 дней. Супернатант, собранный на 10 день после инфицирования, фильтровали через 0.45 мкм мембранные фильтры PES (Nalgene) и наслаиваются на 20% сахарозу в DPBS. Вирионы осаждали ультрацентрифугированием в роторе SW32 в течение 1.5 ч при 25000 об / мин. Вирусные частицы ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере (PBS) и инактивировали 50 мкл на мг частиц в разбавлении 1: 100 β-пропиолактона (BPL, Millipore Sigma, № по каталогу P5648) в холодной воде. Отсутствие инфекционных частиц подтверждали инокуляцией клеток BSR 10 мкг вирусов, инактивированных BPL, в течение 3 пассажей.
Для титрования использовали кроличьи поликлональные антитела против субъединицы S1 коронавируса SARS (ThermoFisher, № по каталогу PA581798) для окрашивания в течение ночи.На следующий день клетки промывали DPBS и инкубировали со смесью конъюгированного с AlexaFluor 555 анти-кроличьего IgG (ThermoFisher, № по каталогу A32794) и конъюгированного с Dylight 488 моноклонального антитела 4C12 (доктор Скотт Дессейн), направленного против гликопротеина RABV. После окрашивания в течение ночи клетки промывали DPBS и подсчитывали флуоресцентные очаги для определения вирусных титров.
Характеристика очищенных сахарозой вирионов
Очищенные вирусные частицы денатурировали в 4 × буфере Лэммли (BIO-RAD, каталожный № 161-0747) с добавлением 10% бета-меркаптоэтанола (мас. / Об.) При 95 ° C в течение 5 мин.Затем 2,5 мкг общего белка разделяли на 10% SDS-полиакриламидном геле и после этого окрашивали в течение ночи Sypro Ruby для анализа общего белка или переносили на нитроцеллюлозную мембрану в буфере Towbin (192 мМ глицин, 25 мМ Трис, 20% метанол) для вестерн-блоттинг. Затем нитроцеллюлозную мембрану блокировали в PBST (1X PBS, 0,05% Tween-20), содержащем 5% (мас. / Об.) Обезжиренного сухого молока, при комнатной температуре в течение 1 часа. После блокирования мембрану инкубировали в течение ночи с человеческим моноклональным 4C12, специфичным для гликопротеина RABV (гибридома любезно предоставлена доктором Dr.Scott Dessain) или кроличью сыворотку против субъединицы S1 белка SARS-CoV-2 Spike (Invitrogen, ThermoFisher Scientific, № по каталогу PA5-81798) в разведении 1: 1000 в PBS, содержащем 5% BSA. После отмывки вестерн-блот инкубировали в течение 1 ч с HRP против человеческого IgG (для RABV-G) в концентрации 1: 20000 или против кроличьего IgG HRP (для SARS-CoV-2 S1), разведенного 1: 10000 в блокирующем буфере. . Полосы проявляли с хемилюминесцентным субстратом SuperSignal West Dura (Pierce, ThermoFisher Scientific Cat # 34075). Изображения были получены с использованием системы визуализации FLuorChem R CCD (ProteinSimple).Стандарт окрашенного протеина широкого диапазона (NEB # P7719) использовали для определения молекулярной массы. Все гели или блоты были получены из одного эксперимента и обрабатывались параллельно.
Иммунофлуоресценция
Клетки Vero E6 высевали на покровные стекла в 1 × DMEM (5% FBS) и инфицировали на следующий день CORAVAX ™ или контрольным RABV (BNSP333) в 1X DMEM (2% FBS) при 34 ° C в течение 48 часов. . В конце инкубации клетки промывали 1X PBS, фиксировали в 2% PFA в течение 30 минут и блокировали PBS, содержащим 5% FBS.Затем клетки окрашивали в течение 2 часов при комнатной температуре с помощью мышиной поликлональной антисыворотки против субъединицы S1 белка SARS-CoV-2 Spike и человеческого моноклонального антитела 4C12 против гликопротеина RABV (2 мкг / мл). После промывания PBS и инкубации с Cy3-конъюгированным против кроличьего IgG HRP (1: 200 в PBS, содержащем 5% FBS, Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA, Cat # 711-035-152) и Cy2-конъюгированным против человеческого IgG HRP (1: 250 в PBS, содержащем 5% FBS, Jackson ImmunoResearch, Cat # 109-225-088) вторичных антител.Клетки помещали в среду ProLong ™ Glass Antifade Mountant с окрашиванием NucBlue ™ (Invitrogen, № по каталогу P36983). Изображения были получены с помощью конфокального микроскопа Nikon A1R +. Составные изображения были подготовлены с использованием Fuji.
Конформационная характеристика химерного S1 в CORAVAX
Очищенную инактивированную вакцину CORAVAX или контрольную вакцину покрывали в 3-кратно уменьшающихся концентрациях, начиная с 25 мкг / мл. Контрольный антиген RBD-His был покрыт в 3-кратно уменьшающихся концентрациях, начиная с 300 нг / лунку. Постоянное количество антитела IgG2a мыши против домена связывания рецептора (RBD) SARS COV / 2 (InvivoGen, Cat # srbd-mab10, 1 мкг / мл) или рекомбинантную химеру ACE-2 Fc человека (человеческий IgG, Biolegend, каталожный номер 793208, 1 мкг / мл) добавляли в лунки в 1% молоке в 1 × PBST (0.05% Твин-20). Вторичные антитела, козьи антимышиные IgG-Fc HRP (Southern Biotech, № по каталогу 1033-05, 1: 2000 в PBST) или козьи анти-человеческие IgG-Fc HRP (Jackson ImmunoResearch, № по каталогу 109-035-098, 1: 2000 in PBST) использовали для обнаружения связанного RBD-антитела мышиного IgG2a и химерного белка ACE-2 Fc человека (человеческого IgG) соответственно.
Оптическую плотность измеряли при 490 нм и 630 нм с использованием планшет-ридера ELX800 (Biotek Instruments, Inc., Winooski, VT). Данные за вычетом фона (OD430-630 нм) анализировали с помощью GraphPad Prism (версия 6.0 g) с использованием 4-параметрической нелинейной регрессии.
Заявление об этике животных
Это исследование проводилось в строгом соответствии с рекомендациями, описанными в Руководстве по уходу и использованию лабораторных животных, Управления по защите животных и Министерства сельского хозяйства США. Все работы с животными были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных (IACUC) в Университете Томаса Джефферсона. Все процедуры проводились под анестезией изофлураном обученным персоналом и под наблюдением ветеринарного персонала.Мышей содержали в клетках группами по пять человек в условиях контролируемой влажности, температуры и света (циклы 12 ч света / 12 ч темноты). Еда и вода были доступны без ограничений.
Иммунизация
Самок мышей BALB / c в возрасте от шести до восьми недель были приобретены в Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Две группы из пяти мышей были привиты внутримышечно 10 мкг химически инактивированных частиц CORAVAX ™ с адъювантом и без него (5 мкг MPLA в 2,5% AddaVax, Invitrogen, vac-mpls и vac-adx-10, соответственно) в 100 мкл PBS и однократную повторную вакцинацию таким же количеством вируса ± адъювант на 21 день соответственно.Другую группу из пяти мышей однократно иммунизировали 10 8 БОЕ живого CORAVAX ™. Образцы крови собирали ретроорбитальным кровотечением перед первой иммунизацией до 56 дня после иммунизации.
Рекомбинантные белки для ELISA
Очистка HA-меченного белка из супернатанта трансфицированных клеток для ELISA
Субконфлюэнтные колбы T175 клеток 293T (линия клеток эмбриональной почки человека) трансфицировали вектором pDisplay, кодирующим аминокислоты 16 до 682 SARS-CoV-2 S (S1), слитого с С-концевым пептидом гемагглютинина (НА) с использованием реагента X-tremeGENE 9 (Millipore Sigma, № по каталогу 6365809001).Супернатант собирали через 6 дней после трансфекции, фильтровали через 0,22 мкм мембранные фильтры PES (Nalgene) и наносили на колонку с агарозой против НА (Pierce, № по каталогу 26182), уравновешенную PBS. После промывания десятью объемами слоя PBS в колонку загружали 2 объема колонки пептида HA с концентрацией 400 мкг / мл в PBS и инкубировали в течение ночи при 4 ° C. На следующий день белок элюировали 2 объемами колонки пептида НА, а затем двумя объемами колонки PBS. Фракции собирали и анализировали вестерн-блоттингом с поликлональной антисывороткой против домена S1 (Thermo Fisher, каталожный номер PA581798).Пиковые фракции затем объединяли и диализовали против PBS в диализных кассетах с отсечкой по молекулярной массе (MWCO) (MWCO) (Thermo Fisher Scientific) для удаления избытка пептида НА. После диализа белок определяли количественно с помощью УФ-спектрофотометрии и замораживали небольшими аликвотами при -80 ° C.
Очистка белка RBD-His для ELISA
RBD-HIS 38 : Плазмида SARS COV-2 с меткой RBD-His была приобретена у Bei Resources (NR-52309). Субконфлюэнтные колбы Т175 с клетками 293Т (линия клеток эмбриональной почки человека) трансфицировали плазмидой, меченной RBD-His, с использованием реагента X-tremeGENE 9 (Millipore Sigma, Cat # 6365809001).Супернатант собирали через 6 дней после трансфекции, фильтровали через 0,22 мкм мембранные фильтры PES (Nalgene). Колонку с картриджем HisTALON на 5 мл (Clontech Laboratories, № по каталогу 635683) уравновешивали десятью объемами колонки уравновешивающего буфера (набор буферов HisTALON ™, Clontech Laboratories, № по каталогу 635651). Отфильтрованный супернатант загружали в колонку картриджа HisTALON (Clontech Laboratories, № по каталогу 635683) со скоростью 1 мл / мин. После промывания десятью объемами колонки промывочного буфера (промывочный буфер приготовлен путем смешивания 6.6 частей буфера для элюции с 93,4 частями буфера для уравновешивания из набора буферов HisTALON ™), образец элюируют (при скорости потока ~ 1 мл / мин) примерно восемью колоночными объемами буфера для элюирования, собирая фракции по 1 мл. Концентрацию белка в образце оценивали путем измерения оптической плотности элюированных фракций при 280 нм (Nanodrop, Thermo Fisher Scientific). Элюированные фракции анализировали вестерн-блоттингом с использованием мышиных моноклональных антител, специфичных к RBD (InvivoGen, № по каталогу srbd-mab10).Пиковые фракции затем объединяли и диализовали против PBS в диализных кассетах с отсечкой по молекулярной массе 10000 (MWCO) (Thermo Fisher Scientific). После диализа белок определяли количественно с помощью УФ-спектрофотометрии и замораживали небольшими аликвотами при -80 ° C.
ELISA
Для определения ответа антител на белок S SARS-CoV-2 был разработан непрямой ELISA с использованием очищенного белка S1 или рецептор-связывающего домена (RBD). Производство рекомбинантных белков описано выше.Гуморальные ответы на SARS-CoV-2 S1 и белок RBD измеряли с помощью непрямого ELISA. Мы протестировали индивидуальную сыворотку мыши с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) на наличие IgG, специфичного к SARS-Cov-2 S1 или RBD. Чтобы проверить гуморальный ответ против SARS COV-2 S1, мы продуцировали растворимый S1 или RBD, как описано выше. Два рекомбинантных белка ресуспендировали в буфере для покрытия (50 мМ Na 2 CO 3 [pH 9,6]) в концентрации 0,5 мкг / мл S1 или 2 мкг / мл RBD, а затем помещали в 96-луночный ELISA. Планшеты MaxiSorp (Nunc) по 100 мкл в каждой лунке.После инкубации в течение ночи при 4 ° C планшеты трижды промывали 1 × PBST (0,05% Твин 20 в 1 × PBS), после чего добавляли 250 мкл блокирующего буфера (5% сухого сухого молока в 1 × PBST). и инкубация при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Затем планшеты трижды промывали PBST и инкубировали в течение ночи при 4 ° C с серийными разведениями сывороток (в трех экземплярах) в 1 × PBST, содержащем 0,5% BSA. Планшеты промывали три раза на следующий день с последующим добавлением козьих антител против мышиного IgG-Fc HRP (Southern Biotech, № по каталогу 1033-05, 1: 8000 в PBST) или козьих антител против мышиного IgG1-Fc HRP. антитело (Jackson ImmunoResearch, № по каталогу 115-035-205, 1: 8000 в PBST) или козье антитело против HRP-IgG2a-Fc мыши (Jackson ImmunoResearch, № по каталогу 115-035-206, 1: 8000 в PBST) для 2 ч при RT.После инкубации планшеты трижды промывали PBST и в каждую лунку добавляли 200 мкл субстрата o -фенилендиамин дигидрохлорид (OPD) (Sigma). Реакцию останавливали добавлением 50 мкл 3 М h3SO4 на лунку. Оптическую плотность определяли при 490 нм (OD , 490 ) и 630 нм (OD 630 ) с использованием планшет-ридера ELX800 (Biotek Instruments, Inc., Winooski, VT). Планшеты инкубировали в течение 15 минут (IgG-Fc) или 10 минут (IgG2a или IgG1) с субстратом OPD до остановки реакции с помощью 3 М h3SO4.Данные были проанализированы с помощью GraphPad Prism (версия 8.0 g) с использованием 4-параметрической нелинейной регрессии для определения титра, при котором кривые достигают 50% значения верхнего плато (50% эффективная концентрация [EC50]).
Анализы нейтрализации SARS-COV-2
Титры нейтрализующего вируса были измерены в образцах сыворотки, которые были инактивированы нагреванием при 56 ° C в течение 30 минут. Дубликаты каждого разведения сыворотки готовили в 96-луночных круглодонных планшетах, начиная с разведения 1:50 для сыворотки мыши и разведения 1: 5 для сыворотки человека в общем объеме 40 мкл Optimem (1% пенициллин-стрептомицин).Клетки Vero CCL81 высевали в 96-луночные планшеты (100 мкл / лунку) при плотности 25000 клеток на лунку. На следующий день 100 БОЕ SARS-CoV-2 разводили в 30 мкл DMEM и добавляли к каждому разведению образцов сыворотки. Сыворотку и вирус инкубировали вместе при комнатной температуре в течение 1 ч и переносили в супернатант клеток Vero CCL81. Клетки инкубировали в стандартных условиях культивирования клеток при 37 ° C и 5% CO 2 в течение 48 часов. Клетки фиксировали в 4% формальдегиде / PBS в течение 15 мин при комнатной температуре, а затем трижды промывали PBST.Клетки блокировали (2% BSA / PBST) в течение 60 мин и инкубировали с первичным антителом (анти-dsRNA J2) в течение ночи при 4 ° C. Клетки промывали 3 × PBS и инкубировали во вторичной среде (козьи антимышиные антитела Alexa 488-ThermoFisher, № по каталогу A32723 и hoescht 33342-ThermoFisher, № по каталогу h4570) в течение 2 ч при комнатной температуре. Клетки промывали 3 × PBST и отображали с помощью ImagXpress Micro с использованием объектива 10 ×. Были захвачены четыре участка на лунку, и лунки были оценены на предмет вирусной инфекции. Анализ повторяли дважды ( N = 2).
Нейтрализация RABV с помощью быстрого теста ингибирования флюоресцентного фокуса.
Нейтрализацию RABV вируса проводили на клетках BSR с использованием штамма CVS-11 с тремя повторностями каждого образца стандартными методами. Вкратце: сыворотку инактивировали нагреванием при 56 ° C в течение 30 минут. Клетки BSR (25000 клеток на лунку) предварительно высевали в 96-луночный планшет с плоским дном за 24 ч до анализа. Образцы сыворотки последовательно разводили в трех экземплярах в 96-луночном круглодонном планшете, начиная с разведения 1:30 для сыворотки мышей и 1: 5 для сыворотки человека.Стандартный иммуноглобулин против бешенства США использовался в начальном разведении 2 МЕ / мл. Рабочее разведение штамма RABV CVS-11 (для инфицирования 90%) готовили в 1X Optimem, и 10 мкл рабочего разведения добавляли в каждую лунку, содержащую разбавленную сыворотку. Планшеты инкубировали 1 ч при 34 ° C. Среду аспирировали из 96-луночного планшета, предварительно засеянного клетками BSR, и смесь разбавленной сыворотки + вируса переносили в клетки. Планшеты инкубировали 24 ч при 34 ° C. После 24-часовой инкубации планшеты фиксировали 80% ацетоном и окрашивали FITC-конъюгированными антителами против RABV N.Конечные титры 50% были рассчитаны с использованием метода Рида-Муенча и переведены в международную единицу (МЕ) на миллилитр путем сравнения со стандартным иммуноглобулином против бешенства США.
Статистический анализ
Для ELISA логарифмически трансформированные титры 50% эффективной концентрации (EC50) наносили на график в зависимости от значения дельта OD (OD 490-630 нм). Односторонний дисперсионный анализ ANOVA с апостериорным тестом Tukey HSD выполняли для данных, преобразованных в журнал для каждой временной точки.
Сводка отчетов
Дополнительная информация о дизайне исследования доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.